不同產(chǎn)地不同季節(jié)的千里光藥材中指標(biāo)成分的含量測定

丁盈 ，方磊 ，張梅

1.湖南食品藥品職業(yè)學(xué)院，湖南長沙 410000；2.湖南省藥品檢驗研究院，湖南長沙 410000

不同產(chǎn)地不同季節(jié)的千里光藥材中指標(biāo)成分的含量測定

丁盈1，方磊2，張梅1

1.湖南食品藥品職業(yè)學(xué)院，湖南長沙 410000；2.湖南省藥品檢驗研究院，湖南長沙 410000

目的比較不同產(chǎn)地及不同采收季節(jié)的千里光藥材中金絲桃苷和綠原酸的含量。方法反相高效液相色譜法。結(jié)果8個產(chǎn)地的千里光藥材金絲桃苷和綠原酸的含量差異較大，金絲桃苷含量以浙江衢州所產(chǎn)最高；綠原酸含量以廣東連州所產(chǎn)最高；不同采收季節(jié)的千里光藥材金絲桃苷和綠原酸含量均以10月份所產(chǎn)最高。結(jié)論市場上全年采收的千里光藥材給藥品質(zhì)量控制帶來了困難，本實驗數(shù)據(jù)顯示千里光藥材的最佳采收期為9~10月。

千里光；高效液相；含量測定；金絲桃苷；綠原酸

千里光為菊科植物千里光（Senecio scandens Buch.-Ham.）的干燥地上部分。該品始載于《本草拾遺》。味苦、辛，性寒。清熱解毒、明目利濕[1]。用于癰腫瘡毒，感冒發(fā)熱，目赤腫痛，泄瀉痢疾，皮膚濕疹。生于路旁及曠野間，分布浙江、江蘇、江西、四川、湖南、廣東、廣西等地，是我國應(yīng)用歷史悠久的常用中藥。目前對其質(zhì)量進(jìn)行控制的指標(biāo)成分多為金絲桃苷和綠原酸。在實際應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)，不同產(chǎn)地的千里光藥材其綠原酸含量有一定差異[2]，這樣，將其投料制成成方制劑的質(zhì)量不穩(wěn)定，易造成成方制劑中綠原酸含量測定結(jié)果為不合格，影響廠家投料生產(chǎn)。而且各工具書對其采收季節(jié)的描述也各有出入，《中國藥典》2015版對千里光采收的描述為 “全年均可采收”，《中藥大辭典》中對其采收的描述為“夏秋二季采收”，而《中華本草》中對其采收的描述為“9—10月收割全草”，市場上也確實存在著莖、葉共存，莖、葉、花共存及單獨(dú)以莖入藥的現(xiàn)象，正是因采收時間不同所致，而季節(jié)對指標(biāo)成分的影響并無報道，綜合考慮產(chǎn)地與采收時間的影響，該實驗以金絲桃苷和綠原酸為指標(biāo)成分，對不同產(chǎn)地和不同季節(jié)采收的千里光進(jìn)行了含量測定，擬為從源頭上提高千里光藥材及其制劑的質(zhì)量提供依據(jù)。

1 儀器、試劑與樣品

島津LC-20AT高效液相色譜儀；SPD-20A（VWD）檢測器；Welch Ultimax XB C18(250 mm×4.6 mm,5 μm）色譜柱；對照品：均為中國藥品生物制品檢定所提供，綠原酸（批號：110753-201506，純度：96.2%）；金絲桃苷（批號：111521-201507，純度：92.5%）試劑：甲醇（色譜純，霍尼韋爾）；水（純凈水，怡寶）。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品溶液 精密稱取綠原酸對照品①12.46 mg與②10.25 mg，加75%甲醇制成濃度各為239.730 4 μg/mL、197.21 μg/mL的對照品溶液。

精密稱取金絲桃苷對照品①10.45 mg與②10.82 mg，加75%甲醇制成濃度各為48.331 25 μg/mL、50.042 5μg/mL的對照品溶液。

2.1.2 供試品溶液 精密稱取過2號篩的千里光供試品粉末1.0 g，置具塞錐形瓶中，精密加入75%的甲醇25 mL，稱定重量，水浴回流1 h，放至室溫，再稱定重量，用75%甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2 色譜條件與系統(tǒng)適用性實驗

綠原酸：采用Welch Ultimax XB C18(250 mm×4.6 mm,5 μm）色譜柱,流動相：甲醇-1%冰醋酸(10∶90)，流速：0.8 mL/min,檢測波長：328nm；柱溫：35℃，進(jìn)樣體積：10 μL。色譜圖見圖1。

金絲桃苷：采用WelchUltimaxXBC18(250mm×4.6mm,5 μm）色譜柱,流動相：乙腈-0.4%醋酸(16∶84),流速：0.8 mL/min,檢測波長：360 nm；柱溫：35℃，進(jìn)樣體積：10 μL。色譜圖見圖2。

2.3 線性關(guān)系的考察

精密吸取綠原酸對照品10.22 mg，置25 mL量瓶中，加75%甲醇制成對照品溶液①（393.265 6 μg/mL）；精密量?、? mL，置25 mL量瓶中，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液②（78.653 12μg/mL）；精密量?、? mL，置50 mL量瓶中，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液③（7.865 312 μg/mL）。精密吸取對照品溶液③5 μL、10 μL，②5 μL、10 μL，①5 μL、10 μL，在液相色譜儀中測定，以進(jìn)樣量（ng）為橫坐標(biāo)，以平均峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其回歸方程為：Y=3 449.2X＋16 563，R2=0.999 9。結(jié)果表明：綠原酸對照品在39.326 56～3 932.656 ng范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

圖1 綠原酸對照品及供試品色譜圖

圖2 金絲桃苷對照品及供試品色譜圖

精密稱取金絲桃苷對照品10.52 mg，置20 mL量瓶中，加 75%甲醇制成對照品溶液（493.914 μg/mL）；精密量?、? mL，置25 mL量瓶中，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液②（98.782 8 μg/mL）；精密量取②5 mL，置50 mL量瓶中，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液③（9.878 28 μg/mL）；精密量?、? mL，置50 mL量瓶中，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液④（0.987 828 μg/mL）。精密吸取對照品溶液④20 μL，③10 μL、20 μL，②5 μL、10 μL、20 μL，①10 μL，在液相色譜儀中測定，進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，以平均峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其回歸方程為：Y=1 694.7X＋255 15，R2=0.999 8。

結(jié)果顯示：金絲桃苷對照品在19.756 56～4 939.14 ng范圍內(nèi)線性關(guān)系較好。

2.4 精密度實驗

精密吸取金絲桃苷對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次10 μL，記錄峰面積值，RSD 為 0.3%。

2.5 穩(wěn)定性實驗

取13號浙江衢州產(chǎn)千里光供試品溶液，于0、2、4、8、12、24 h分別進(jìn)樣 10 μL，記錄峰面積值。 其 RSD 為0.6%（綠原酸）、0.4%（金絲桃苷）。表明供試品溶液中的綠原酸及金絲桃苷在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 重復(fù)性實驗

取13號浙江衢州產(chǎn)千里光供試品溶液6份，精密稱定，在上述色譜條件下進(jìn)行測定，計算綠原酸與金絲桃苷的含量。RSD為0.9%（綠原酸）、0.6%（金絲桃苷），結(jié)果表明重復(fù)性良好。

表1 不同產(chǎn)地及不同采收季節(jié)千里光藥材中綠原酸和金絲桃苷含量（按干燥品計）測定結(jié)果（n=2）

2.7 加樣回收率實驗

取浙江衢州產(chǎn)千里光供試品溶液6份,約0.5 g，精密稱定，分別加入已知含量一半的綠原酸對照品溶液和金絲桃苷對照品溶液適量，并用75%的甲醇溶液補(bǔ)至25 mL。自 “稱定重量”起，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液,在上述色譜條件下進(jìn)樣測定，結(jié)果表明回收率良好,綠原酸平均回收率為98.2%（RSD=0.9%）；金絲桃苷平均回收率為 97.5%（RSD=1.8%）。

2.8 樣品含量測定

精密吸取按“2.1”項下方法配置的對照品溶液與供試品溶液各10 μL，在高效液相色譜儀中測定樣品中綠原酸與金絲桃苷的含量，見表1。

3 討論

千里光藥材具有清熱解毒、明目退翳、殺蟲等功效，目前作為其質(zhì)量評價的指標(biāo)成分為金絲桃苷和綠原酸（中成藥中檢測），表1中的數(shù)據(jù)顯示，在同一時間段收集的不同產(chǎn)地的千里光藥材中，金絲桃苷和綠原酸的含量具有差異性，金絲桃苷以浙江衢州產(chǎn)的含量最高，綠原酸以廣東連州產(chǎn)的含量最高；而選取的湖南望城、浙江衢州這兩個產(chǎn)地不同采收季節(jié)采收的千里光藥材含量測定數(shù)據(jù)顯示，10月均為金絲桃苷和綠原酸含量的高值，其次為12月份，而3月、6月的金絲桃苷和綠原酸的含量均處于低值，這提示《中華本草》中對其采收“9—10月收割全草”的描述最為準(zhǔn)確，而《中國藥典》中描述的“全年均可采收”可能欠妥。由于各產(chǎn)地氣候條件差異較大，從藥材性狀觀察可顯示綠原酸和金絲桃苷含量均以開花期后較高，提示選購千里光藥材時以葉、花較多者為佳，莖較多者為次。

[1]國家藥典委員會.2015版中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：33-34.

[2]朱立華，李躍輝，胥新元，等.不同產(chǎn)地千里光藥材中金絲桃苷和綠原酸含量的比較研究[J].湖南中醫(yī)雜志，2013,29(10):126-128.

R282

A

1672-5654（2017）10（b）-0049-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.29.049

丁盈（1982-），女，江西豐城人，碩士，講師，研究方向：中藥中活性成分的提取分離。

2017-07-19）