血清人附睪蛋白4與慢性腎臟病疾病嚴(yán)重程度之間關(guān)系

童天夫 李美 陳橙

（東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院江北院區(qū)/南京市大廠醫(yī)院 檢驗(yàn)科，南京 210044）

血清人附睪蛋白4與慢性腎臟病疾病嚴(yán)重程度之間關(guān)系

童天夫 李美 陳橙

（東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院江北院區(qū)/南京市大廠醫(yī)院 檢驗(yàn)科，南京 210044）

目的：分析血清人附睪蛋白4（human epididymis protein 4，HE4）與慢性腎臟?。–hronic kidney disease，CKD）疾病嚴(yán)重程度之間關(guān)系，探討HE4的臨床參考價(jià)值。方法：192例患者符合入組標(biāo)準(zhǔn)的CKD患者為患者組，80名健康體檢者為對照組。比較兩組受試者血清HE4濃度，并比較不同分期CKD患者HE4、肌酐（SCr）、胱抑素C（CysC）、腎小球?yàn)V過率（eGFR）的差異，計(jì)算HE4與SCr、CysC、eGFR的相關(guān)性。結(jié)果：患者組血清HE4濃度為（82.39±24.27）pmol/L，高于對照組的（29.36±6.81）pmol/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。隨著患者CKD分期的上升，其eGFR逐漸下降，HE4、SCr、CysC逐漸上升，各分期間相互比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。相關(guān)性分析示，血清HE4濃度與SCr（r=0.713）、CysC（r=0.659）均呈正相關(guān)，與eGFR（r=-0.705）呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論：隨著CKD疾病嚴(yán)重程度的進(jìn)展，患者血清HE4濃度逐漸上升，進(jìn)一步明確腎功能受損不同階段的HE4診斷界值，有望為CKD進(jìn)展及預(yù)后預(yù)測提供新的血清生物學(xué)標(biāo)記物。

人附睪蛋白4；慢性腎臟??；疾病嚴(yán)重程度；相關(guān)性

慢性腎臟病（Chronic kidney disease，CKD）是由原發(fā)性或繼發(fā)性腎小球腎炎、腎血管病或腎小管損傷等多種原因引發(fā)的慢性腎臟結(jié)構(gòu)和功能障礙，也是危害人類健康和生存質(zhì)量的常見病[1]。全球范圍內(nèi)CKD發(fā)病率并未下降，隨著病情的惡化，患者可逐漸進(jìn)展至慢性腎功能不全、腎衰竭，危及生命[2]。因此，早期評估CKD患者疾病嚴(yán)重程度，可指導(dǎo)臨床診療。然而，作為當(dāng)前臨床常用的腎小球?yàn)V過率（eGFR）估算指標(biāo)，肌酐（SCr）水平易受飲食、性別、年齡等多種因素影響，無法準(zhǔn)確反映早期腎功能損傷，臨床評估價(jià)值受限[3]。本研究在總結(jié)過往文獻(xiàn)經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取人附睪蛋白4（human epididymis protein 4，HE4），就其與CKD嚴(yán)重程度的關(guān)系進(jìn)行了前瞻性分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取標(biāo)準(zhǔn)：1）參照美國腎臟病基金會K/DOQI指南[4]確診；2）入組前無透析治療史、多巴酚丁胺使用史；3）未合并卵巢癌、急性腎衰竭、肌肉萎縮者。2015年8月—2017年2月192例患者符合上述標(biāo)準(zhǔn)（患者組）。同期80名身體狀態(tài)良好者為對照組。兩組受試者年齡、性別等一般臨床資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究已征得我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，受試者均自愿參與并簽署知情同意書。

1.2 檢測指標(biāo)及分析

抽取受試者入組次日空腹肘靜脈血5 mL，以3500 r/min離心5 min，分離血清樣本，2-8℃保存待檢。在羅氏e601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上對受試者血清HE4進(jìn)行檢測，SCr、胱抑素C（CysC）檢測分別在貝克曼AU5811全自動生化分析儀上使用苦味酸法、免疫比濁法[5-7]；使用CKDEPI公式計(jì)算 eGFR[8]：eGFR=a×（SCr/b）c×（0.993）年齡，其中，a、b、c取值根據(jù)性別確定：男性：a=141，b=0.9；SCr≤ 80 μmol/L者，c=-0.411，SCr＞ 80 μmol/L者，c=-1.209。女性：a=144，b=0.7；SCr≤80 μmol/L者，c=-0.329，SCr＞ 80 μmol/L 者，c=-1.209。

CKD分期標(biāo)準(zhǔn)[9]：1期：eGFR≥90 mL/min/1.73 m2；2期：60 mL/min/1.73 m2≤eGFR＜90 mL/min/1.73 m2；3期：30 mL/min/1.73 m2≤eGFR＜60 mL/min/1.73 m2；4期：15 mL/min/1.73 m2≤eGFR＜30 mL/min/1.73 m2；5期：eGFR＜15 mL/min/1.73 m2。比較不同CKD分期患者血清HE4、SCr、CysC、eGFR差異，并計(jì)算HE4與SCr、CysC、eGFR的相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS18.0進(jìn)行分析，性別以（n）表示，并采用χ2檢驗(yàn)，血清HE4、SCr、CysC、eGFR等計(jì)量資料以（）表示，并采用t檢驗(yàn)或F檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；相關(guān)性分析采用Pearson法。

2 結(jié)果

患者組血清HE4濃度為（82.39±24.27）pmol/L，高于對照組的（29.36±6.81）pmol/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05）。

隨著患者CKD分期的上升，其eGFR逐漸下降，HE4、SCr、CysC逐漸上升，各分期間相互比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 不同分期CKD患者血清指標(biāo)及eGFR比較（）

表1 不同分期CKD患者血清指標(biāo)及eGFR比較（）

分期 例數(shù) HE4（pmol/L） SCr（μmol/L）CKD 1期 42 81.30±13.35 62.18±15.40 CKD 2期 38 142.26±18.93 99.26±18.85 CKD 3期 31 212.59±26.10 158.42±31.40 CKD 4期 37 426.38±57.60 271.04±52.48 CKD 5期 44 755.13±108.42 591.58±123.64 P值 -- ＜0.05 ＜0.05分期 例數(shù) CysC（mg/L） eGFR（mL/min/1.73 m2）CKD 1期 42 1.09±0.27 112.68±25.01 CKD 2期 38 1.50±0.38 70.33±13.62 CKD 3期 31 2.11±0.59 46.19±10.18 CKD 4期 37 3.09±0.81 18.36±5.52 CKD 5期 44 4.26±1.15 8.15±2.03 P值 -- ＜0.05 ＜0.05

相關(guān)性分析示，血清HE4濃度與SCr（r=0.713）、CysC（r=0.659）均呈正相關(guān)，與eGFR（r=-0.705）呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。見圖1～3。

圖1 血清HE4濃度與SCr濃度的相關(guān)性分析（r=0.713）

圖2 血清HE4濃度與CysC濃度的相關(guān)性分析（r=0.659）

圖3 血清HE4濃度與eGFR的相關(guān)性分析（r=-0.705）

3 討論

隨著病程的進(jìn)展，CKD患者膠原蛋白和細(xì)胞外基質(zhì)大量積聚，是引發(fā)腎臟尤其是腎間質(zhì)纖維化的主要原因[10]。SCr、eGFR及蛋白尿等疾病嚴(yán)重程度評估指標(biāo)均存在一定局限性[11-12]。HE4是具有免疫保護(hù)作用的蛋白酶抑制劑家族成員，廣泛分布于正常生殖系統(tǒng)、上呼吸道、乳腺上皮、腎臟遠(yuǎn)曲小管、結(jié)腸粘膜上皮組織等，在卵巢惡性腫瘤中呈高表達(dá)，是卵巢癌的重要診斷標(biāo)志物之一[13]。研究表明，HE4對卵巢癌的診斷特異性超過70%，靈敏度高達(dá)90%，在卵巢癌的早期診斷中具有重要意義[14]。最新研究發(fā)現(xiàn)，CKD患者血清HE4濃度亦呈上升趨勢，且尿毒癥患者血清HE4升高最為顯著[15]。本研究就CKD患者、正常體檢者血清HE4濃度進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，CKD患者血清HE4濃度明顯升高，且隨著患者疾病嚴(yán)重程度的進(jìn)展，其血清HE4濃度進(jìn)一步上升，表明血清HE4水平與腎功能具有密切關(guān)聯(lián)，其機(jī)制可能與腎臟功能受損時β2微球蛋白等效分子物質(zhì)含量上升一致，即腎臟功能受損后，小分子物質(zhì)的濾過和重吸收均受到明顯影響，而HE4相對分子質(zhì)量僅為20k～25k，故在CKD患者中，腎小球?yàn)V過后HE4無法被有效清除，從而體現(xiàn)在血清濃度的大幅上升[16]。此外，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，HE4與腎纖維化過程密切相關(guān)，一方面，HE4能夠抑制多種蛋白酶活性，發(fā)揮抑制膠原蛋白降解的作用，另一方面，HE4可促進(jìn)膠原蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)大量積聚，促進(jìn)腎纖維化的發(fā)生與發(fā)展[17]。

血液循環(huán)內(nèi)CysC主要經(jīng)腎臟代謝清除，故在反映腎小球?yàn)V過功能改變方面的敏感性高于SCr，且既往研究已證實(shí)CysC與eGFR的良好相關(guān)性，有學(xué)者將CysC用于CKD疾病嚴(yán)重程度的評估[18]。本研究相關(guān)性分析示，血清HE4濃度不僅與SCr、eGFR呈明顯相關(guān)性，也與CysC存在高度正相關(guān)，其原因?yàn)椋弘S著CKD的進(jìn)展，腎臟正常組織結(jié)構(gòu)逐漸被Ⅰ型膠原蛋白和其他細(xì)胞外基質(zhì)蛋白取代，從而造成腎實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的改變、CysC清除能力下降，并表現(xiàn)為血清CysC濃度上升；作為α平滑肌動蛋白的下游靶點(diǎn)之一，HE4是腎臟纖維化的下游信號通路，其分泌水平增加與腎間質(zhì)纖維化比例呈高度正相關(guān)，因此，血清CysC水平的上升往往伴隨著HE4濃度的增加。需要注意的是，由于HE4也是卵巢癌診斷和治療效果評估的重要指標(biāo)，故合并卵巢癌可能為CKD患者的HE4監(jiān)測帶來陽性結(jié)果，影響臨床診斷和治療的準(zhǔn)確性，因此，這一指標(biāo)暫不適用于合并卵巢癌的CKD患者的病情評估。

綜上所述，HE4與CKD患者SCr、CysC均呈正相關(guān)性，隨著血清HE4濃度的上升，患者疾病嚴(yán)重程度明顯加劇，在今后的臨床研究中，進(jìn)一步明確腎功能受損不同階段的HE4診斷界值，有望為CKD的診斷與治療提供更為可靠的輔助參考。

[1] LV Y W, YANG L, ZHANG M, et al. Increased human epididymis protein 4 in benign gynecological diseases complicated with chronic renal insufficiency patients[J]. Genet Mol Res, 2015, 14(1): 2156-2161.

[2] CHAWLA L S, EGGERS P W, STAR R A, et al. Acute kidney injury and chronic kidney disease as interconnected syndromes[J]. N Engl J Med, 2014, 371(1): 58-66.

[3] HALTIA U M, HALLAMAA M, TAPPER J, et al. Roles of human epididymis protein 4, carbohydrate antigen 125, inhibin B and anti-Müllerian hormone in the differential diagnosis and follow-up of ovarian granulosa cell tumors[J]. Gynecol Oncol,2017, 144(1): 83-89.

[4] YANG Z, ZHANG Z, QIN B, et al. Human epididymis protein 4:a novel biomarker for lupus nephritis and chronic kidney disease in systemic lupus erythematosus[J]. J Clin Lab Anal, 2016,30(6): 897-904.

[5] DRAPKIN R, VON HORSTEN H H, LIN Y, et al. Human epididymis protein 4 (HE4) is a secreted glycoprotein that is overexpressed by serous and endometrioid ovarian carcinomas.[J]. Cancer Res, 2005, 65(6):2162.

[6] LOVISA S, ZEISBERG M, KALLURI R. Partial epithelial-tomesenchymal transition and other new mechanisms of kidney fibrosis[J]. Trends Endocrinol Metab, 2016, 27(10): 681-695.

[7] NAGY B, BHATTOA H P, STEIBER Z, et al. Serum human epididymis protein 4 (HE4) as a tumor marker in men with lung cancer[J]. Clin Chem Lab Med, 2014, 52(11): 1639-1648.

[8] STIEKEMA A, LOK C A R, KENTER G G, et al. A predictive model combining human epididymal protein 4 and radiologic features for the diagnosis of ovarian cancer[J]. Gynecol Oncol,2014, 132(3): 573-577.

[9] A L, K E, Y T, et al. Definition and classification of chronic kidney disease: A position statement from Kidney Disease:Improving Global Outcomes (KDIGO)[J]. Kidney Int, 2005,67(6):2089-2100.

[10] NAGY B, FILA L, CLARKE L A, et al. Human Epididymis Protein 4: A Novel Serum Inflammatory Biomarker in Cystic Fibrosis[J]. Chest, 2016, 150(3): 661-672.

[11] LOVISA S, LEBLEU V S, TAMPE B, et al. Epithelialto-mesenchymal transition induces cell cycle arrest and parenchymal damage in renal fibrosis[J]. Nat Med, 2015, 21(9):998-1009.

[12] WANG R N, GREEN J, WANG Z, et al. Bone Morphogenetic Protein (BMP) signaling in development and human diseases[J].Gene Dis, 2014, 1(1): 87-105.

[13] ESCUDERO J M, AUGE J M, FILELLA X, et al. Comparison of serum human epididymis protein 4 with cancer antigen 125 as a tumor marker in patients with malignant and nonmalignant diseases[J]. Clil Chem, 2011, 57(11):1534.

[14] HU L, DU S, GUO W, et al. Comparison of serum human epididymis protein 4 and carbohydrate antigen 125 as markers in endometrial cancer: a meta-analysis[J]. Int J Gynecol Cancer,2016, 26(2): 331-340.

[15] QIN L, MOHAN C. Non-invasive biomarkers for systemic lupus erythematosus: A lookback at 2016[J]. Int J Rheum Dis,2016, 19(12): 1209-1215.

[16] 盧美紅, 楊春蘭, 景蓉蓉, 等. 血清人附睪蛋白4表達(dá)與慢性腎臟病的相關(guān)性研究[J]. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2017, 32(2): 75-77.

[17] 楊曉霞, 柏明, 劉麗敏, 等. 慢性腎臟病患者血清人附睪蛋白4與疾病進(jìn)展的關(guān)系[J]. 腎臟病與透析腎移植雜志, 2016, 25(2):128-133.

[18] PIEK A, MEIJERS W C, SCHROTEN N F, et al. HE4 Serum Levels Are Associated with Heart Failure Severity in Patients With Chronic Heart Failure[J]. J Card Fail, 2017, 23(1): 12-19.

R446.1

A

2095-5200(2017)06-059-03

10.11876/mimt201706024

童天夫，本科，初級檢驗(yàn)技師，研究方向：臨床化學(xué)檢驗(yàn)，Email：56489081@qq.com。