超抗原葡萄球菌腸毒素B誘導(dǎo)IgA 腎病小鼠模型的建立

史麗強(qiáng)，萬(wàn) 強(qiáng)，吳燕升，劉偉偉，高建東

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院腎病科，上海中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)腎病研究所，肝腎疾病病證教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 上海市中醫(yī)臨床重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 201203)

超抗原葡萄球菌腸毒素B誘導(dǎo)IgA 腎病小鼠模型的建立

史麗強(qiáng)，萬(wàn) 強(qiáng)，吳燕升，劉偉偉，高建東

(上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院腎病科，上海中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)腎病研究所，肝腎疾病病證教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 上海市中醫(yī)臨床重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 201203)

研究報(bào)告

目的建立IgA腎病小鼠模型，并觀察模型的生化及病理指標(biāo)特點(diǎn)。方法12只BALB/c小鼠隨機(jī)分為正常組(6只)和模型組(6只)，模型組單次尾靜脈注射葡萄球菌腸毒素B(SEB) 0.8 mg/kg，第二周開(kāi)始，連續(xù)注射三周，第四周結(jié)束后檢測(cè)小鼠24 h尿蛋白定量，尿微量白蛋白，腎功能BUN、Scr、UA；蛋白指標(biāo)TP、ALB；肝功能ALT、AST、ALP；血脂TC、TG、LDL的情況，腎臟免疫熒光IgA的沉積，腎臟病理HE、PAS、PASM、Masson染色以及透射電鏡的觀察腎臟超微結(jié)構(gòu)，以及肝臟與小腸HE染色、免疫熒光IgA的沉積變化。結(jié)果與正常組比較，模型組小鼠24 h尿蛋白定量與尿微量白蛋白均升高(P< 0.01)；模型組小鼠腎功能指標(biāo)CREA，UA均高于正常組(P< 0.05)，BUN差異無(wú)顯著性；模型組小鼠蛋白指標(biāo)TP、ALB差異無(wú)顯著性；模型組小鼠肝功能指標(biāo)AST水平高于正常組(P< 0.05)，ALT、ALP差異無(wú)顯著性；模型組小鼠血脂TG水平低于正常組(P< 0.05)，LDL水平高于正常組(P< 0.01)，TC差異無(wú)顯著性。腎臟免疫熒光檢查可見(jiàn)模型組小鼠腎小球系膜區(qū)呈顆粒狀、團(tuán)塊狀的IgA沉積；模型組小鼠腎臟病理輕中度損傷，系膜區(qū)免疫復(fù)合物增多；模型組小鼠肝臟HE染色可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)伴有部分肝細(xì)胞壞死，小腸絨毛缺損，腸絨毛變短變細(xì)、間距明顯增寬，有部分分上皮脫落，中央央乳糜管擴(kuò)張顯著，淋巴細(xì)胞增多，明顯可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。結(jié)論使用超抗原SEB尾靜脈注射小鼠可以成功復(fù)制IgA腎病動(dòng)物模型。

IgA腎?。粍?dòng)物模型；SEB；小鼠

IgA腎病 (IgA nephropathy, IgAN) 是目前全球最常見(jiàn)的原發(fā)性腎小球疾病之一。是導(dǎo)致終末期腎功能衰竭的一個(gè)很重要的原因。在國(guó)內(nèi)，IgA腎病占原發(fā)性腎小球疾病的35%～55%，IgA腎病多呈慢性進(jìn)行性發(fā)展，進(jìn)入終末期腎病的患者，每10年大約有5%～25%[1]。因此采用合適的動(dòng)物模型來(lái)研究其發(fā)病機(jī)制與疾病的特點(diǎn)是很有必要的。本文主要介紹復(fù)制葡萄球菌腸毒素B誘導(dǎo)的IgA腎病動(dòng)物小鼠模型，該模型最早為劉志紅[2]院士在1989年報(bào)道，主要采用大鼠進(jìn)行制作。目前尚未看到有報(bào)道采用此方法在小鼠身上復(fù)制的報(bào)道，因此本研究在BALB/c小鼠上復(fù)制此種動(dòng)物模型。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)別BALB/c雄性小鼠12只，體重16～18 g，6周齡，由上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供[SCXK(滬)：2013-0016],飼養(yǎng)在上海中醫(yī)藥大學(xué)科技實(shí)驗(yàn)中心/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[SYXK(滬)：2014-0008]，自由飲食進(jìn)水，動(dòng)物倫理登記編號(hào)：SZY201607002。

1.2 主要試劑與儀器

葡萄球菌腸毒素B (staphylococcal enterotoxin B，SEB)(北京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院)；Goat anti-Mouse IgA Secondary Antibody [FITC](Novus Biologicals，貨號(hào)：NB7503)；2%戊巴比妥鈉(德國(guó)Merck，批號(hào)：20140820)；一次性使用無(wú)菌注射針(上?？档萌R集團(tuán)，0.3×13RWLB)；小鼠固定器(北京冀諾泰科技發(fā)展有限公司，貨號(hào)：JNT-CXQ)；切片石蠟(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，貨號(hào)：69019361)；二甲苯(江蘇彤晟化學(xué)試劑有限公司，貨號(hào)：1330-20-7)；無(wú)水乙醇(江蘇彤晟化學(xué)試劑有限公司，貨號(hào)：64-17-5)；蘇木素-伊紅染液(賽維爾生物科技有限公司貨號(hào)：G1005)；PAS染色試劑盒(賽維爾生物科技有限公司貨號(hào)：G1008)；六銨銀染液試劑盒(賽維爾生物科技有限公司貨號(hào)：G1059)；Masson染色試劑盒(賽維爾生物科技有限公司貨號(hào)：G1006)；粘附載玻片(江蘇世泰實(shí)驗(yàn)器材有限公司，貨號(hào)：188105)；甘油明膠封片劑(賽維爾生物科技有限公司貨號(hào)：G1402)；甲醛溶液(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，貨號(hào)：10010018)。

自動(dòng)組織脫水機(jī)(浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司，KD-TS3A)；生物組織冷凍包埋機(jī)(浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司，KD-BM)；攤片機(jī)(浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司，KD-P)；烘片機(jī)(浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司，KD-H)；低溫冷凍切片機(jī)(德國(guó)Leica，CM3050S)；熒光光學(xué)顯微鏡(尼康，Nikon Eclips E80i)；全自動(dòng)生化分析儀美國(guó)(Beckman Coulter, Inc, AV5800)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 造模方法

動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后按體重分為兩組，A為正常組，B為模型組。模型組第二周開(kāi)始注射SEB，SEB使用無(wú)菌PBS稀釋，劑量為0.8 mg/kg，每只小鼠尾靜脈注射0.2 mL，每周一次，連續(xù)三周；第四周結(jié)束后留取尿液；小鼠處死前禁食12 h， 2%戊巴比妥鈉50 mg/kg腹腔注射麻醉小鼠后摘眼球處死取血清做腎功能、、蛋白、血脂的檢測(cè)；取小鼠腎臟、肝臟及小腸做免疫熒光和病理染色檢測(cè)。

1.3.2 腎臟透射電鏡標(biāo)本的留取

取材全程在冰塊上低溫進(jìn)行，左腎下部分用鋒利剪刀剪下一小塊組織，迅速放到滴有預(yù)冷固定液的硬紙片或蠟片上，在固定液中用刀片棄去剪過(guò)的切面，把組織切成薄片，再改切成體積約1×1×1 mm 5小塊(用牙簽將5～6小塊組織轉(zhuǎn)移至含有2～3 mL預(yù)冷固定液的干凈青霉素小瓶?jī)?nèi)，瓶上應(yīng)貼上標(biāo)簽，用鉛筆書寫)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后標(biāo)本立即送上海中醫(yī)藥大學(xué)電鏡室檢測(cè)。

1.3.3 小鼠生化指標(biāo)的檢測(cè)

小鼠血尿指標(biāo)的檢測(cè)由上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院檢驗(yàn)科使用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)。

1.3.4 石蠟切片的制作

取材：新鮮組織放置于10倍體積的4%多聚甲醛內(nèi)一天左右。在通風(fēng)櫥內(nèi)將組織從固定液取出用刀片將小鼠腎臟組織修平整，將修好的組織放置于包埋框內(nèi)，用鉛筆做好標(biāo)記。

脫水：將包埋框整齊的放進(jìn)自動(dòng)脫水機(jī)的吊籃里，核對(duì)程序的順序與時(shí)間，點(diǎn)擊編好的程序，梯度酒精進(jìn)行脫水。(75%酒精4 h，85%酒精2 h，90%酒精2 h，95%酒精1 h，無(wú)水乙醇I 30 min，無(wú)水乙醇II 30 min，醇苯5～10 min，二甲苯I 5～10 min，二甲苯II 5～10 min，蠟I 1 h，蠟II 1 h，蠟III 1 h。)

包埋：將脫好水的組織放置于于生物組織包埋機(jī)內(nèi)進(jìn)行包埋。

切片：將修整好的蠟塊置于輪轉(zhuǎn)切片機(jī)上切片，切片厚度為3 μm。 用毛筆刷將切片漂浮于攤片機(jī)37℃ 溫水中將組織展平，用防脫載玻片將組織撈起，并平放于KD-H烤片機(jī)上烤片2 h左右。待切片蠟烤化后，常溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.5 病理染色

腎臟病理做HE、PAS、PASM、Masson染色，肝臟與小腸HE染色步驟均按照賽維爾生物科技有限公司染色試劑說(shuō)明書制作。

1.3.6 冰凍切片免疫熒光直接法染色

冰凍切片固定：冰凍切片從冰箱拿出來(lái)復(fù)溫半個(gè)小時(shí)，使用預(yù)冷的丙酮固定10 min，用pH 7.4的PBS輕柔的洗滌3次，每次5 min。

加熒光標(biāo)記的一抗：在切片上滴加稀釋好的熒光一抗，切片平放于加水的濕盒內(nèi)4℃避光孵育過(guò)夜。

封片：玻片使用pH 7.4的PBS輕柔的洗滌3次，每次5 min。切片稍甩干然后迅速用預(yù)熱好的明膠抗熒光淬滅封片劑避光封片。

鏡檢拍照：切片在黑暗房間內(nèi)使用尼康倒置熒光顯微鏡觀察并拍取合適像素的照片放置于專門的文件夾內(nèi)做好標(biāo)記。(FITC綠光激發(fā)波長(zhǎng)465～495 nm，發(fā)射波長(zhǎng)515～555 nm)

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 一般情況

實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，模型組小鼠造模后小鼠精神萎靡不振，倦臥聚集于一起，毛色晦暗，飲食減少；正常小鼠活潑易動(dòng)，毛色純白有光澤，飲食如常。

2.2 生化指標(biāo)

與正常組比較，模型組小鼠24小時(shí)蛋白定量升高(P< 0.01)，尿白蛋白高于正常組(P< 0.01)(見(jiàn)表1)；與正常組比較，模型組小鼠Scr，UA均高于正常組(P< 0.05)，BUN無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(見(jiàn)表2)；與正常組比較，模型組小鼠TP，ALB差異無(wú)顯著性；與正常組比較，模型組小鼠AST水平高于正常組(P< 0.05)，ALT、ALP差異無(wú)顯著性；與正常組比較，模型組小鼠TG低于正常組(P< 0.05)，與正常組比較，模型組小鼠LDL高于正常組(P< 0.01)，與正常組比較TC差異無(wú)顯著性。

2.3 小鼠腎臟病理

2.3.1 小鼠腎臟免疫熒光

通過(guò)免疫熒光直接法免疫熒光間接法檢測(cè)小鼠腎組織冰凍切片IgA在腎小球的沉積，免疫熒光間接法檢測(cè)小鼠腎組織石蠟切片IgA在腎小球的沉積，兩種染色方法均看到模型組小鼠腎小球系膜區(qū)呈顆粒狀、團(tuán)塊狀I(lǐng)gA沉積，正常組未見(jiàn)IgA免疫復(fù)合物沉積。(見(jiàn)圖1)

表1 小鼠尿蛋白的比較Tab.1 Comparison of the mouse urine proteins

注：與正常組比較，#P< 0.01。

Note.Compared with the control group,#P< 0.01.

表2 小鼠腎功能的比較Tab.2 Comparison of the mouse renal function

注：與正常組比較，*P< 0.05。

Note.Compared with the control group,*P< 0.05.

表3 小鼠血清蛋白的比較Tab.3 Comparison of the mouse serum proteins

表4 小鼠肝功能的比較Tab.4 Comparison of the mouse liver functions

注：與正常組比較，*P< 0.05。

Note.Compared with the control group,*P< 0.05.

表5 小鼠血脂的比較Tab.5 Comparison of the mouse blood lipid

注：與正常組比較，*P< 0.05，#P< 0.01。

Note.Compared with the control group,*P< 0.05，#P< 0.01.

圖1 小鼠腎臟免疫熒光Fig.1 Immunofluorescence in the mouse kidney tissues

2.3.2 小鼠腎臟病理染色

正常對(duì)照組小鼠腎臟形態(tài)結(jié)構(gòu)未見(jiàn)異常，模型組小鼠腎組織可以看到腎小球毛細(xì)血管襻的擴(kuò)張以及毛細(xì)血管腔有部分閉鎖，系膜區(qū)系膜細(xì)胞及基質(zhì)明顯增生，Masson染色可見(jiàn)系膜區(qū)有嗜紅物沉積說(shuō)明系膜區(qū)免疫復(fù)合物增多，部分小管可以看到擴(kuò)張，部分伴間質(zhì)小管病變及小血管病變。(見(jiàn)圖2)

圖2 小鼠腎臟病理染色Fig.2 Pathological changes of the mouse kidney tissues with different staining.

2.3.3 腎臟超微結(jié)構(gòu)

正常組腎臟結(jié)構(gòu)未見(jiàn)異常，模型組可見(jiàn)到系膜區(qū)系膜細(xì)胞與基質(zhì)輕度增生，系膜少量細(xì)顆粒狀電子致密物的沉積，足突有間斷融合，箭頭所指為凋亡的系膜細(xì)胞。(見(jiàn)圖3)

注：右圖黑色箭頭示為凋亡的系膜細(xì)胞。圖3 腎臟透射電鏡結(jié)果(×6000)Note.The black arrow on the right picture indicates an apoptotic mesangial cell.Fig.3 Ultrastructural changes of the kidney tissues

2.4 小鼠肝臟與小腸的病理及免疫熒光

光鏡下正常對(duì)照組小鼠肝臟結(jié)構(gòu)完整，肝內(nèi)內(nèi)細(xì)胞形態(tài)正常，未看到炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；模型組小鼠肝臟HE染色可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)甚至肝細(xì)胞壞死，見(jiàn)輕度肝細(xì)胞脂肪變性，管區(qū)可見(jiàn)少量纖維增生，光鏡下正常對(duì)照組大鼠小腸腸絨毛形態(tài)正常、未見(jiàn)缺損，上皮細(xì)胞排列整齊，見(jiàn)明顯炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，模型組小鼠小腸絨毛不完整，腸絨毛變短變細(xì)、間距明顯增寬，有部分分上皮脫落，中央央乳糜管擴(kuò)張顯著，淋巴細(xì)胞增多，明顯可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。正常組肝臟與小腸免疫熒光可見(jiàn)微量IgA沉積，模型組小鼠肝臟免疫熒光可見(jiàn)大量顆粒狀I(lǐng)gA沉積，主要沉積在匯管及血竇區(qū)，模型組小鼠小腸IgA沉積較正常組明顯。(見(jiàn)圖4)

圖4 肝臟與小腸病理及免疫熒光染色Fig.4 Pathological changes of the mouse liver and small intestine tissues. immunofluorescence staining.

3 討論

目前診斷IgA腎病，只能通過(guò)腎活檢來(lái)確診[3]，腎臟免疫熒光診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，IgAN的特征是以IgA為主的免疫球蛋白分子在腎小球系膜區(qū)沉積。我們采用冰凍與石蠟切片兩種方法做免疫熒光證實(shí)使用SEB誘導(dǎo)的造?？梢栽谛∈笊铣晒?fù)制IgA腎病模型，這種模型的特點(diǎn)是成功率高，周期短，模型較為穩(wěn)定，不失為一種較為理想的IgA腎病模型，其發(fā)病機(jī)制可能是由于超抗原導(dǎo)致高水平細(xì)胞因子和IgG和IgA的多克隆活化引起[4]，超級(jí)抗原(SAgs)是一類導(dǎo)致非特異性免疫的蛋白質(zhì)；1989年, Choi等[5]首次提出超抗原的概念,并且提出絲裂原是通過(guò)大量激活具有相同的T細(xì)胞受體復(fù)合物(TCR)的β鏈V區(qū)結(jié)構(gòu)域的T淋巴細(xì)胞來(lái)發(fā)揮作用。1989年，瑞典科學(xué)家White等[6]指出，SE與MHCⅡ類分子結(jié)合后，并不能激活所有的T細(xì)胞，只有那些受體上有Vβ成分的T細(xì)胞才能被激活，SE對(duì)T細(xì)胞的激活能力是普通抗原的2000～50 000倍，細(xì)菌、病毒、寄生蟲等均可能產(chǎn)生這類特殊的蛋白質(zhì)。

有研究發(fā)現(xiàn)超抗原性對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的直接毒性作用，將會(huì)導(dǎo)致于內(nèi)皮細(xì)胞愈合延遲[7]。SEB可以增加炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生，導(dǎo)致細(xì)胞和組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死，而腎臟本身作為排毒器官器官，所以毒素會(huì)導(dǎo)致腎功能損傷，可能也是導(dǎo)致IgA在腎臟沉積的原因之一。但這種損害對(duì)小鼠來(lái)說(shuō)并不是致命性的，Krakauer[8]做了暴露于不同劑量葡萄球菌腸毒素B(SEB)或脂多糖(LPS)及其組合的小鼠的細(xì)胞因子反應(yīng)和致死率發(fā)現(xiàn)，使用高劑量的SEB(100微克/小鼠)，所有小鼠都存活。SEB單獨(dú)誘導(dǎo)中等水平的IL-2和MCP-1；LPS(80微克/小鼠)造成48%的致死率并誘導(dǎo)高水平的IL-6和MCP-1。我們實(shí)驗(yàn)做的結(jié)果于文獻(xiàn)報(bào)道一致，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后小鼠未發(fā)現(xiàn)有死亡。

而SEB作為超級(jí)抗原，在尾靜脈注射后會(huì)損傷小腸毛細(xì)血管內(nèi)皮，破環(huán)腸道的屏障，我們?cè)谛∧c的病理HE染色中也看到模型組小鼠腸絨毛形態(tài)的異常，腸絨毛變短變細(xì)、間距明顯增寬，有部分分上皮脫落，中央央乳糜管擴(kuò)張顯著，淋巴細(xì)胞增多，明顯可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。在實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)肝臟小泡性(脂肪變性)形式主要見(jiàn)于小葉中央?yún)^(qū)，小泡性脂肪變性由線粒體功能受損導(dǎo)致，線粒體功能障礙通常由一種遺傳性代謝錯(cuò)誤或一種藥物或毒素的作用所致，在這種情況下，脂肪酸β氧化減少導(dǎo)致三酰甘油(triacylglycerol)和游離脂肪酸的蓄積。肝臟內(nèi)的所產(chǎn)生的抗體主要以IgA為主，肝內(nèi)的樹(shù)突狀細(xì)胞表面MHC-Ⅱ類分子表達(dá)比枯否細(xì)胞的表達(dá)更強(qiáng)。其主要分布在小鼠與肝臟的門靜脈周圍，肝小葉實(shí)質(zhì)內(nèi)，近年來(lái)有研究表明肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的具有活性的細(xì)胞表面分子，MHC-Ⅱ類HLA-DR 抗原、CD44抗原、CDW60抗原等會(huì)啟動(dòng)或調(diào)節(jié)多種免疫反應(yīng)。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)是在T細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子控制下完成的，因此當(dāng)超抗原SEB進(jìn)入體內(nèi)后會(huì)激活肝臟表達(dá)MHC-Ⅱ類的細(xì)胞釋放前炎癥細(xì)胞因子如TNF-a、IL-1、IFN-γ等引起肝臟的損傷，有研究證實(shí)在門靜脈區(qū)以輔助性T細(xì)胞為主，這也可以解釋模型組肝臟病變主要集中在門靜脈周圍。

采用SEB尾靜脈注射的造模方法成模時(shí)間短，成本低，重復(fù)性較好，不僅如此，它在發(fā)病機(jī)制上與人類IgA腎病粘膜免疫發(fā)病的途徑類似，能夠更好的對(duì)于IgA腎病的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行研究，不失為一種方便廉價(jià)的研究IgA腎病的動(dòng)物模型。

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EstablishmentofamousemodelofIgAnephropathyinducedbysuperantigenstaphylococcalenterotoxinB

SHI Li-qiang， WAN Qiang， WU Yan-sheng， LIU Wei-wei， GAO Jian-dong*

(Department of Nephrology, Shuguang Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine; TCM Institute of Kidney Diseases, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Liver and Kidney Diseases, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine; Ministry of Education, Shanghai Key Laboratory of Traditional Chinese Clinical Medicine， Shanghai 201203, China)

ObjectiveTo establish a mouse model of IgA nephropathy and to observe its biochemical and pathological characteristics.MethodsTwelve BALB/c mice were randomly divided into the normal group and model group, with 6 mice in each group. Mice in the model group

an intravenous injection of 0.8 mg/kg superantigen staphylococcal enterotoxin B (SEB) into the tail vein once a week for three weeks. At the end of the 4th week, the mice were sacrificed, and the 24 h-urinary protein, urinary microalbumin, the renal function indicators BUN, Scr and UA were measured, levels of liver function indicators ALT, AST, ALP, and the blood lipid levels of TC, TG, and LDL were determined, the renal morphological changes were examined by pathology using HE, PAS, PASM and Masson staining, and by electron microscopy, the IgA deposition in the renal tissue was observed with immunofluorescence, and the liver and small intestine were observed by pathology using HE staining.ResultsCompared with the normal group, the mice of model group showed increased 24-hour urinary protein and urinary microalbumin (P<0.01), increased CREA and UA (P<0.05), but not significantly changed BUN, TP and ALB. The liver function indicator AST was significantly increased (P<0.05), but ALT and ALP were not significantly changed. The blood lipid TG was significantly decreased (P<0.05) and LDL increased (P<0.01), while the TC was not significantly changed. The kidney tissues had moderate histological changes, and immunofluorescence observation showed granular or massive IgA deposition in the renal glomerular mesangium. The liver tissue had some inflammatory cell infiltration and hepatocyte necrosis. The small intestine showed slender and shortened villi with widened inter-villous space and sloughed off epithelial cells, dilated central lacteal, and lymphocyte infiltration.ConclusionsA mouse model of IgA nephropathy can be successfully established by tail vein injection of superantigen staphylococcal entrotoxin B.

IgA nephropathy; Animal model; Staphylococcal enterotoxin B, SEB; Mice

上海市中醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展三年行動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目(ZYSNXD-CC-YJXYY)；上海市中醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展三年行動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目(ZYSNXD-CC-MZY044)。

史麗強(qiáng)(1990-)男，碩士研究生，研究方向：腎臟疾病。E-mail: shiliqiang16@live.com

高建東(1967-)男，醫(yī)學(xué)博士，主任醫(yī)師，研究方向：中醫(yī)藥防治慢性腎臟病。E-mail: gaojiandong@hotmail.com

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1671-7856(2017) 12-0102-07

10.3969.j.issn.1671-7856. 2017.12.018

2017-05-19