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    富鋅益生菌對蛋雞抗氧化機(jī)能及抗病能力的影響

    2017-12-20 00:53:55王金和韓廣浩雷連成
    河南農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年11期
    關(guān)鍵詞:白痢沙門氏菌益生菌

    王金和,韓廣浩,雷連成

    (1.吉林大學(xué) 動物醫(yī)學(xué)學(xué)院,吉林 長春 130062; 2.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院 動物醫(yī)學(xué)院,河南 鄭州 450046)

    富鋅益生菌對蛋雞抗氧化機(jī)能及抗病能力的影響

    王金和1,2,韓廣浩2,雷連成1*

    (1.吉林大學(xué) 動物醫(yī)學(xué)學(xué)院,吉林 長春 130062; 2.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院 動物醫(yī)學(xué)院,河南 鄭州 450046)

    為研究有益菌轉(zhuǎn)化無機(jī)鋅制備的富鋅益生菌在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用效果,選取120只19周齡海蘭褐蛋雞,分為對照組和3個(gè)試驗(yàn)組,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.10%、0.15%、0.20%的富鋅益生菌,試驗(yàn)期55 d,試驗(yàn)結(jié)束時(shí)分離血清,測定血清中總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、總抗氧化能力(T-AOC活性)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)的含量;選取500 只1 日齡健康海蘭褐雛雞,分為空白對照組(飼喂基礎(chǔ)日糧)、3個(gè)富鋅益生菌組(分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.10%、0.15%、0.20%的富鋅益生菌)、抗生素對照組(在基礎(chǔ)日糧中添加0.15 %的金霉素)、攻毒對照組,除空白對照組外,其他組均分別下設(shè)大腸桿菌攻毒組、雞白痢沙門氏菌攻毒組、雞葡萄球菌攻毒組,試驗(yàn)期49 d,研究富鋅益生菌對大腸桿菌、雞白痢沙門氏菌、雞葡萄球菌的抗感染能力。結(jié)果表明,與對照組相比,0.15%、0.20%富鋅益生菌組T-SOD活性分別顯著提高了10.16%、13.01%,MDA含量分別顯著降低了17.99%、30.67%;0.10%、0.15%、0.20%富鋅益生菌組T-AOC活性分別顯著提高14.54%、22.85%、27.01%,GSH-Px活性提高,但差異均不顯著。攻毒試驗(yàn)結(jié)果表明,0.10%、0.15%、0.20%富鋅益生菌組大腸桿菌發(fā)病率分別降低了20.00%、46.67%、53.33%,死亡率分別降低了30.44%、65.21%、73.91%;雞白痢沙門氏菌發(fā)病率分別降低了32.14%、42.86%、53.57%,死亡率分別降低了31.58%、52.63%、73.68%;雞葡萄球菌發(fā)病率分別降低了36.00%、48.00%、55.99%,死亡率分別降低了55.56%、66.67%、77.77%。綜上,富鋅益生菌能夠提高蛋雞的抗氧化機(jī)能和抵抗病原微生物感染的能力。

    富鋅益生菌; 蛋雞; 抗氧化機(jī)能; 抗病能力

    在所有微量元素中,鋅對動物機(jī)體免疫功能的影響最明顯。鋅通過參與垂體-甲狀腺、垂體-腎上腺及垂體-性腺調(diào)節(jié)動物機(jī)體的內(nèi)分泌功能,其中抗氧化是鋅的重要功能之一。鋅能夠增強(qiáng)蛋雞體內(nèi)金屬硫蛋白(MT)的生成與形成,抑制動物機(jī)體的脂質(zhì)過氧化反應(yīng);清除動物體內(nèi)的自由基;同時(shí),鋅能提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,是銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)的組成部分,能清除超氧陰離子、羥自由基等;可與氧化還原活躍的過渡金屬如鐵、銅等發(fā)生拮抗作用;抑制H2O2和氧等形成自由基,延緩體內(nèi)的氧化過程[1]。益生菌具有營養(yǎng)、免疫、拮抗病原菌的作用。用微生物作為載體富集動物所必需微量元素是新型飼料添加劑研發(fā)方向之一,如以微生物為載體,可以富集鐵、鋅、硒、鍺、鉻等微量元素,使其具備益生菌和微量元素雙重功效。研究表明,乳酸菌、酵母菌和芽孢桿菌均具有一定的微量元素富集轉(zhuǎn)化能力[2-5]。

    通過益生菌將無機(jī)鋅轉(zhuǎn)化為有機(jī)鋅,有利于動物對鋅的消化吸收,能夠發(fā)揮微量元素和益生菌的雙重功效[6]。鑒于此,通過制備富鋅益生菌,研究其對蛋雞抗氧化能力與抗病能力的影響,以期為富鋅益生菌制劑在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 菌種

    1.1.1 生產(chǎn)菌種 產(chǎn)朊假絲酵母(Candidautilis)由河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室保存;嗜酸乳桿菌(Lactobacillusacidophilus),菌株編號為BNCC338074,凝結(jié)芽孢桿菌(Bacilluscoagulans),菌株編號為BNCC168437,均購自蘇州北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)有限公司。

    1.1.2 攻毒菌種 大腸桿菌、雞白痢沙門氏菌、雞葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株均購于中國獸藥監(jiān)察所,含菌量均為109~1010cfu/mL。標(biāo)準(zhǔn)菌株在使用前先接種于固體培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h,挑選出典型菌落接種于肉湯培養(yǎng)基,37 ℃增菌培養(yǎng)24 h。肉湯培養(yǎng)物按照1 mL/只劑量胸肌注射接種于20 日齡健康雞。將7~30 h內(nèi)死亡的雞只進(jìn)行剖檢,從死亡雞的臟器分離鑒定菌種并保存,作為攻毒菌種。

    1.2 培養(yǎng)基

    1.2.1 活化培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基 產(chǎn)朊假絲酵母活化培養(yǎng)基:蛋白胨 5.0 g、葡萄糖 10.0 g、酵母膏3.0 g、麥芽浸膏 3.0 g、瓊脂 20.0 g、蒸餾水 1 000 mL,自然pH值;產(chǎn)朊假絲酵母種子培養(yǎng)基:蛋白胨10.0 g、葡萄糖40.0 g、KH2PO42.0 g、MgSO4·7H2O 0.3 g、蒸餾水1 000 mL。嗜酸乳桿菌活化培養(yǎng)基:10%脫脂乳培養(yǎng)基,自然pH值,用于菌種活化;嗜酸乳桿菌種子培養(yǎng)基:MRS肉湯培養(yǎng)基,購自上海易利生物科技有限公司。凝結(jié)芽孢桿菌活化培養(yǎng)基:普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,購自青島海博生物技術(shù)有限公司;凝結(jié)芽孢桿菌種子培養(yǎng)基[7]:葡萄糖60.0 g、蛋白胨10.0 g、酵母膏5.0 g、純化水1 000 mL,pH 值為7.5。

    1.2.2 復(fù)合菌發(fā)酵培養(yǎng)基 參照文獻(xiàn)[8]確定復(fù)合菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基組成:麥麩18.00 g、玉米皮粉7.50 g、豆粕 4.50 g、麥芽糖0.45 g、紅糖0.74 g、NH4Cl 0.30 g、(NH4)2SO40.30 g、CaCO30.15 g、KH2PO40.29 g、MnSO40.08 g、MgSO40.15 g,自然pH值,含水量即干物料質(zhì)量與水的體積之比為1∶0.8。流通蒸氣滅菌。

    1.2.3 計(jì)數(shù)培養(yǎng)基 嗜酸乳桿菌計(jì)數(shù)采用GYP白亞瓊脂培養(yǎng)基,產(chǎn)朊假絲酵母計(jì)數(shù)采用YPD固體培養(yǎng)基,凝結(jié)芽孢桿菌計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。計(jì)數(shù)培養(yǎng)基均購自青島海博生物技術(shù)有限公司。

    1.3 供試動物

    供試雞品種為海蘭褐蛋雞,試驗(yàn)地點(diǎn)位于駐馬店西平伊光蛋雞場。

    1.4 主要試劑和儀器

    總超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性、總抗氧化能力(T-AOC活性)及丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒均購自南京建成生物工程有限公司。

    超凈工作臺(SW-CJ-2D),購自蘇州凈化有限公司;二氧化碳培養(yǎng)箱(INC153med),德國美墨爾特產(chǎn)品;臺式高速冷凍離心機(jī)(3-k30),德國西格瑪公司產(chǎn)品;立式壓力蒸汽滅菌器(LDZM-60KCS),購自上海申安醫(yī)療器械廠。

    1.5 富鋅益生菌制劑的制備

    選擇產(chǎn)朊假絲酵母、嗜酸乳桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌3種益生菌為生產(chǎn)菌種,將產(chǎn)朊假絲酵母菌種接種于斜面活化培養(yǎng)基上,30 ℃培養(yǎng)40 h;連續(xù)活化2~3 次,按3%的接種量接種于種子培養(yǎng)基中,30 ℃、160 r/min搖床培養(yǎng)13 h,獲得產(chǎn)朊假絲酵母的液體種子液。將嗜酸乳桿菌菌種接種于斜面活化培養(yǎng)基上,37 ℃培養(yǎng)24 h;連續(xù)活化2~3 次,按3%的接種量接種于種子培養(yǎng)基中,37 ℃、160 r/min搖床培養(yǎng)24 h,獲得嗜酸乳桿菌種子液。將凝結(jié)芽孢桿菌菌種接種于斜面活化培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng)24 h;連續(xù)活化2~3 次,按3%的接種量接種于種子培養(yǎng)基中,37 ℃、200 r/min搖床培養(yǎng)24 h,獲得凝結(jié)芽孢桿菌種子液。

    配制鋅質(zhì)量濃度為50 mg/mL的硫酸鋅溶液,121 ℃高壓滅菌30 min后備用。將硫酸鋅溶液加入復(fù)合菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基中(硫酸鋅溶液與固體發(fā)酵培養(yǎng)基比例為1∶200),將產(chǎn)朊假絲酵母、嗜酸乳桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌種子液按1∶1∶1比例接種于復(fù)合菌固體發(fā)酵培養(yǎng)基中,攪拌均勻后裝入淺盤,35 ℃培養(yǎng)36 h。待淺盤表面及內(nèi)層長滿菌體后溫度提高至60 ℃時(shí),加大風(fēng)量,干燥后得到含富鋅益生菌的飼料添加劑,檢測活菌數(shù)及有機(jī)鋅轉(zhuǎn)化率[9]。

    1.6 抗氧化機(jī)能試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    選取120 只19 周齡海蘭褐蛋雞,分為對照組(Ⅰ)和試驗(yàn)組(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10 只,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.10%、0.15%、0.20%的富鋅益生菌,試驗(yàn)期55 d,其中預(yù)試驗(yàn)5 d。試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每組每個(gè)重復(fù)抽取4只蛋雞,每只采集5 mL血液,不加抗凝劑分離出血清。采血前禁食12 h,自由飲水。日常管理按該雞場常規(guī)管理進(jìn)行,每天定時(shí)飼喂2次,自由采食、飲水,試驗(yàn)雞采用3層階梯式籠養(yǎng)。用試劑盒按說明書檢測血清中T-SOD、GSH-Px、T-AOC活性及MDA含量。

    1.7 抗病能力試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    選擇500 只1 日齡健康海蘭褐雛雞,常規(guī)條件下飼養(yǎng)10 d。在10 日齡前不添加抗微生物藥劑及促生長添加劑,每天觀察并記錄其健康狀況。分為空白對照組(1組)、富鋅益生菌添加組(2、3、4組)(分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.10%、0.15%、0.20%富鋅益生菌)、抗生素對照組(5組)(基礎(chǔ)日糧中添加0.15 %預(yù)防量的金霉素)、攻毒對照組(6組)(只注射細(xì)菌,不添加益生菌),2、3、4、5、6組均分別下設(shè)大腸桿菌攻毒組、沙門氏菌攻毒組、雞葡萄球菌攻毒組,每組各30 只。將富鋅益生菌和抗生素分別均勻攪拌于各試驗(yàn)組雞基礎(chǔ)日糧中。益生菌添加組、抗生素添加組提前1 周添加,對益生菌添加組、抗生素添加組、攻毒對照組分別以肌肉注射方式接種大腸桿菌液、雞白痢沙門氏菌液、雞葡萄球菌液0.5 mL/羽,觀察7 d并記錄發(fā)病情況和死亡情況。發(fā)病判斷標(biāo)準(zhǔn)為羽毛凌亂、精神沉郁、不飲水、不吃食;死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)為蛋雞發(fā)病死亡,之后立即剖檢,采集病料分離鑒定出病原菌。按照《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊》第8版的表型特征鑒定大腸桿菌、雞白痢沙門氏菌、雞葡萄球菌。死亡率=死亡數(shù)/試驗(yàn)數(shù)×100%;保護(hù)率=(試驗(yàn)數(shù)-死亡數(shù))/試驗(yàn)數(shù)×100%。試驗(yàn)期49 d,預(yù)試期5 d。

    1.8 數(shù)據(jù)處理

    數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2010 整理后,用SPSS 16.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,單因子方差分析(One-way ANOVA)后進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn),結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 富鋅益生菌活菌數(shù)及鋅轉(zhuǎn)化率

    富鋅益生菌活菌及有機(jī)鋅轉(zhuǎn)化率檢測結(jié)果表明,含產(chǎn)朊假絲酵母的活菌數(shù)為5.20×108cfu/g,嗜酸乳桿菌的活菌數(shù)為6.40×108cfu/g,凝結(jié)芽孢桿菌的活菌數(shù)為7.91×109cfu/g。得到的富鋅益生菌總活菌數(shù)為9.07×109cfu/g,有機(jī)鋅轉(zhuǎn)化率為76.82%。

    2.2 富鋅益生菌對蛋雞血清抗氧化機(jī)能的影響

    由表1可知,與對照組相比,Ⅲ組、Ⅳ組T-SOD的活性分別顯著提高了10.16%、13.01%,MDA含量分別顯著降低了17.99%、30.67%;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組T-AOC的活性分別顯著提高14.54%、22.85%、27.01%,GSH-Px的活性分別提高0.34%、2.53%、3.97%,但差異均不顯著。

    表1 富鋅益生菌對蛋雞血清抗氧化機(jī)能的影響

    注:同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

    2.3 富鋅益生菌對蛋雞抗病能力的影響

    2.3.1 大腸桿菌攻毒試驗(yàn) 由表2可知,2、3、4組接種大腸桿菌的發(fā)病率分別比6組降低了20.00%、46.67%、53.33%,死亡率分別降低了30.44%、65.21%、73.91%。4組接種大腸桿菌的發(fā)病率和死亡率分別較5組降低了12.49%和33.33%。2、3、4組對大腸桿菌感染的保護(hù)率分別達(dá)到46.67%、73.33%、80.00%。4組對大腸桿菌感染的保護(hù)率較5組提高了14.29%。

    表2 接種大腸桿菌蛋雞發(fā)病和死亡情況

    2.3.2 沙門氏菌攻毒試驗(yàn) 由表3可知,2、3、4組接種雞白痢沙門氏菌的發(fā)病率分別比6組降低了32.14%、42.86%、53.57%,死亡率分別降低了31.58%、52.63%、73.68%。4組接種雞白痢沙門氏菌的發(fā)病率和死亡率分別較5組降低了13.34%、16.67%。2、3、4組對雞白痢沙門氏菌感染的保護(hù)率分別達(dá)到了56.67%、70.00%、83.33%。4組對雞白痢沙門氏菌感染的保護(hù)率較5組提高了4.16%。

    表3 接種雞白痢沙門氏菌蛋雞發(fā)病和死亡情況

    2.3.3 雞葡萄球菌攻毒試驗(yàn) 由表4可知,2、3、4組接種雞葡萄球菌的發(fā)病率分別比6組降低了36.00%、48.00%、55.99%,死亡率分別降低了55.56%、66.67%、77.77%。4組接種雞葡萄球菌的發(fā)病率和死亡率分別比抗生素對照5組降低了15.38%、33.33%。2、3、4組對雞葡萄球菌感染的保護(hù)率分別達(dá)到了86.67%、90.00%、93.33%。4組對雞葡萄球菌感染的保護(hù)率比抗生素對照5組提高了3.70%。

    表4 接種雞葡萄球菌蛋雞發(fā)病和死亡情況

    3 結(jié)論與討論

    抗氧化能力的大小與機(jī)體的健康程度有著密切的關(guān)系。機(jī)體中MDA含量及T-AOC、T-SOD、GSH-Px的活性是反映機(jī)體抗氧化能力及健康程度的重要指標(biāo)[10]。MDA是細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物,其含量顯示了動物機(jī)體脂質(zhì)受到活性氧自由基攻擊后的損害程度,能夠間接地反映細(xì)胞的損傷程度[11]。GSH-Px和T-SOD是生物體主要的酶類抗氧化劑,通常情況下,動物的自由基形成及利用處于動態(tài)平衡狀態(tài),機(jī)體過多的自由基不能夠被及時(shí)清除時(shí),會攻擊生物大分子,引起動物機(jī)體氧化損傷,機(jī)體抗氧化活性與清除自由基的能力成正比[12]。陳家祥等[13]在麻羽肉雞飼料中添加50 mg/kg的地衣芽孢桿菌發(fā)現(xiàn),地衣芽孢桿菌能顯著提高肉雞血清GSH-Px及SOD的活性,顯著降低肉雞血清中MDA的含量。成廷水等[14]研究了添加氨基酸鋅對育成蛋雞抗氧化機(jī)能的影響,發(fā)現(xiàn)氨基酸鋅可顯著提高脾臟的Cu/Zn-SOD和T-SOD的活性,顯著降低脾臟MDA的含量,從而提高肝臟和脾臟的抗氧化能力。從本試驗(yàn)結(jié)果來看,蛋雞飼糧添加富鋅益生菌顯著提高了T-SOD、T-AOC活性,顯著降低了MDA含量,這可能是由于鋅提高了血漿T-AOC、T-SOD的活性,有利于抗氧化功能的發(fā)揮[15]。鋅對維持SOD的穩(wěn)態(tài)具有一定調(diào)節(jié)作用,也是Cu/Zn-SOD重要組成部分,Cu/Zn-SOD在機(jī)體抗氧化系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用,補(bǔ)鋅能夠減少組織中MDA的含量[16]。

    益生菌能夠通過增強(qiáng)非特異性免疫功能抵御病原微生物的感染,也可通過占位競爭,抑制病原菌的粘附,分泌多種抑菌物質(zhì)拮抗病原菌,占位競爭和分泌抑菌物質(zhì)是益生菌的主要作用機(jī)制[17-26]。戴兆來等[27]從健康仔豬腸道分離的乳酸菌,能夠很好地控制斷奶應(yīng)激引起的仔豬腹瀉。于卓騰等[28]研究表明,混合乳酸菌顯著降低肉雞盲腸的pH值,且可抑制大腸桿菌和沙門氏菌等病原菌的增殖。郭延軍[29]在雛雞飼糧中添加乳桿菌類微生態(tài)制劑,對雛雞進(jìn)行了雞白痢的預(yù)防試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)乳桿菌對雛雞的保護(hù)率達(dá)到96.97%。從本試驗(yàn)結(jié)果來看,與攻毒組對照相比,富鋅益生菌試驗(yàn)組蛋仔雞大腸桿菌、雞白痢沙門氏菌、雞葡萄球菌的發(fā)病率和死亡率顯著降低;與抗生素對照組比較,0.20%富鋅益生菌對大腸桿菌、雞白痢沙門氏菌、雞葡萄球菌感染的防治效果較好。

    總體來看,蛋雞飼糧中添加富鋅益生菌,能夠提高蛋雞的抗氧化機(jī)能,具有防治雛雞病原菌感染的作用,具有一定的推廣和應(yīng)用價(jià)值。

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    Effects of Transformation of Inorganic Zinc with Beneficial Bacteria on Antioxidant Activity and Disease Resistance of Layers

    WANG Jinhe1,2,HAN Guanghao2,LEI Liancheng1*

    (1.College of Veterinary Medicine,Jilin University,Changchun 130062,China;2.College of Veterinary Medicine,Henan University of Animal Husbandry and Economy,Zhengzhou 450046,China)

    To study the effect of zinc-enriched probiotics in laying hens production,120 19-week-old Hailanhe layers were chosen and randomly divided into control group and 3 test groups.The control group was fed the basic ration,and the experimental groups were fed the basic ration with 0.10%,0.15% and 0.20% zinc-enriched probiotics.The test lasted for 55 days.Total superoxide dismutase(T-SOD) activity,total antioxidant capacity(T-AOC activity),glutathione peroxidase(GSH-Px) activity and malondialdehyde(MDA) content of serum were determined.500 1-day-old healthy Hailanhe layers were selected and divided into blank control group(feeding basic ration),3 zinc-rich probiotic groups(0.10%,0.15%,0.20% zinc-enriched probiotics in basic diets),antibiotic control group(0.15% chlortetracycline in basic diets) and infection control group.Except the blank control group,the other groups were infected withEscherichiacoli,SalmonellapullorumandStaphylococcusaureus.The test lasted for 49 days.The results showed that compared with the control group,T-SOD activity of 0.15% and 0.20% zinc enriched probiotics groups were increased by 10.16% and 13.01%,the contents of MDA were decreased by 17.99% and 30.67%.The activities of T-AOC in 0.10%,0.15%,0.20% zinc enriched probiotics groups was increased by 14.54%,22.85%,27.01%,and the GSH-Px activity was increased,but the difference was not significant.The results of infection test showed that the incidences ofEscherichiacoliin 0.10%,0.15% and 0.20% zinc-rich probiotics groups were decreased by 20.00%,46.67% and 53.33%,respectively,and the mortality rates were reduced by 30.44%,65.21% and 73.91%,respectively;the incidences ofSalmonellapullorumwere decreased by 32.14%,42.86%,53.57%,respectively,and the mortality rates were reduced by 31.58%,52.63%,73.68%,respectively;the incidences ofStaphylococcusaureuswere decreased by 36.00%,48.00%,55.99%,respectively,and the mortality rates were decreased by 55.56%,66.67%,77.77%,respectively.In summary,zinc-enriched probiotics could improve the antioxidant function and resistance to pathogens of layers.

    zinc-rich probiotics; laying hens; antioxidant function; disease resistance

    S816.7

    A

    1004-3268(2017)11-0133-06

    2017-06-10

    河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目(132102313102)

    王金和(1971-),男,河南南召人,副教授,在讀博士研究生,研究方向:預(yù)防獸醫(yī)。E-mail:wjh8866000@126.com

    *通訊作者:雷連成(1968-),男,內(nèi)蒙古包頭人,教授,博士,主要從事病原微生物與分子免疫學(xué)研究。

    E-mail:leiliancheng@163.com

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