COX-2、PHH3與Her-2陽性型乳腺癌新輔助化療療效及預(yù)后的關(guān)系

樊新詠 溫燕芳

(韶關(guān)市第三人民醫(yī)院普外科，廣東 韶關(guān) 512123)

COX-2、PHH3與Her-2陽性型乳腺癌新輔助化療療效及預(yù)后的關(guān)系

樊新詠 溫燕芳

(韶關(guān)市第三人民醫(yī)院普外科，廣東 韶關(guān) 512123)

目的 研究COX-2及PHH3的表達(dá)狀態(tài)與Her-2陽性型乳腺癌新輔助化療療效及預(yù)后的關(guān)系。方法 對(duì)48例Her-2陽性型乳腺癌患者資料進(jìn)行回顧性分析，研究各例患者腫瘤組織COX-2、PHH3的表達(dá)狀態(tài)，并找出其與療效及預(yù)后的內(nèi)在聯(lián)系。結(jié)果 COX-2高表達(dá)組有8例達(dá)到CR，13例達(dá)到PR，低表達(dá)者有5例達(dá)到CR，9例達(dá)到PR，兩組相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，PHH3高表達(dá)組有7例達(dá)到CR，12例達(dá)到PR，低表達(dá)者有6例達(dá)到CR，10例達(dá)到PR，兩組相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。術(shù)后隨訪期間，COX-2及PHH3高表達(dá)組的無病生存率均低于低表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 COX-2及PHH3的表達(dá)狀態(tài)能預(yù)測(cè)Her-2陽性型乳腺癌的新輔助化療療效及預(yù)后，高表達(dá)者療效較低表達(dá)者好，但其預(yù)后較差。

乳腺癌；新輔助化療；環(huán)氧化酶2；磷酸化組蛋白H3

新輔助化療(neoadjuvant chemotherapy,NAC)及乳腺癌綜合治療的重要手段之一，能消除局部晚期患者機(jī)體的微轉(zhuǎn)移灶，降低腫瘤的臨床分期，使一些難以手術(shù)的病例轉(zhuǎn)變?yōu)榭墒中g(shù)切除，也為保乳手術(shù)創(chuàng)造了條件，同時(shí)可評(píng)估乳腺腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感性。因些NAC應(yīng)用于局部晚期乳腺癌已經(jīng)被廣泛接受。如能發(fā)現(xiàn)預(yù)測(cè)乳腺癌NAC療效的標(biāo)志物對(duì)乳腺癌患者的治療將有重要的意義。有學(xué)者認(rèn)為環(huán)氧化酶2(cyclooxygenase,COX-2)、磷酸化組蛋白H3(phospho-histone H3,PHH3)的表達(dá)與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展、病理學(xué)特征、惡性程度及預(yù)后有一定的關(guān)系。本研究將就COX-2、PHH3的表達(dá)程度與乳腺癌NAC療效及預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行探討。

1 資料和方法

1.1臨床資料

回顧性分析我院2009年1月至2016年6月收治的Her-2陽性型局部晚期乳腺癌患者48例，均為原發(fā)、單側(cè)、初治、無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，入院前均未接受過手術(shù)、放療、化療。平均年齡(50.80±6.20)歲，絕經(jīng)前35例，絕經(jīng)后13例，入院時(shí)腫瘤直徑2 cm5 cm患者共16例，超聲或觸診發(fā)現(xiàn)腋窩淋巴結(jié)腫大41例，病理檢查結(jié)果均為浸潤性導(dǎo)管癌，TNM分期Ⅱ期12例，Ⅲa期25例，Ⅲb期11例，全身無重要器官功能不全。

1.2治療方法

48例患者入院后均在超聲引導(dǎo)下行空芯針穿刺活檢，標(biāo)本送病理檢查證實(shí)為乳腺癌，并行COX-2、PHH3檢測(cè)，同時(shí)行ER、PR、Her-2、Ki-67的檢測(cè)以利于確定腫瘤的分子分型?；煼桨妇鶠镋C序貫T，術(shù)前化療用藥為EC(表阿霉素90 mg/m2d1,環(huán)鱗酰胺600 mg/m2d1)，每21 d為一療程，所有患者均完成2～4周期化療，每隔2個(gè)療程評(píng)估療效，化療結(jié)束后2～3周后轉(zhuǎn)至乳腺外科行手術(shù)治療，其中根治術(shù)12例，改良根治術(shù)36例。術(shù)后標(biāo)本再次行ER、PR、Her-2、Ki-67、COX-2、PHH3檢測(cè)。術(shù)后完成剩余化療療程，并結(jié)合具體病例給予規(guī)范的內(nèi)分泌、放療、靶向治療等輔助治療。

1.3免疫組化方法及結(jié)果判讀

1.3.1實(shí)驗(yàn)方法

空芯穿刺活檢及術(shù)后標(biāo)本均以10%甲醛溶液固定并送檢，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，脫蠟、脫水后再以常規(guī)免疫組化SP檢測(cè)ER、PR、Her-2、Ki-67、COX-2。PHH3免疫組化試劑為兔抗人多克隆抗體即用型，免疫組化染色采用MaxVisin兩步法。各步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。同時(shí)由2名本院病理科醫(yī)生閱片，對(duì)表達(dá)狀態(tài)作出判定。

1.3.2結(jié)果判定

根據(jù)染色細(xì)胞的比例和染色強(qiáng)度進(jìn)行COX-2的半定量分析，以細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞判定標(biāo)準(zhǔn)。陽性細(xì)胞數(shù)以計(jì)數(shù)10個(gè)高倍鏡視野為準(zhǔn)，<5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分；染色強(qiáng)度：無色0分，淺黃色1分，棕黃色2分，棕褐色3分，強(qiáng)度與陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)相，0～1分為陰性(-)，2分為(+)，3～4分為(++)，5分以上為(+++)。0～4分為COX-2低表達(dá)，5以上分為高表達(dá)。PHH3的表達(dá)以細(xì)胞核出現(xiàn)黃色顆粒沉淀為陽性細(xì)胞，陽性細(xì)胞數(shù)以計(jì)數(shù)10個(gè)高倍鏡視野為準(zhǔn)，<10%為低表達(dá)，≥10為高表達(dá)。HER-2蛋白定位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)，陽性者顯示為棕黃色顆粒。腫瘤細(xì)胞無著色為(-)；任何比例的腫瘤細(xì)胞呈弱而不完整的胞膜著色或<10%呈弱且完整著色為(+)；≥10%呈現(xiàn)弱或不一致的、完整的胞膜著色；或≤30%呈現(xiàn)強(qiáng)且完整的胞膜著色為(++)；≥30呈現(xiàn)強(qiáng)且完整的胞膜著色為(+++)。(-)或(+)作為陰性，(+++)認(rèn)為陽性，(++)則行Fish檢測(cè)進(jìn)一步明確。

1.4療效評(píng)定

NAC前及每隔兩周期以彩超檢查測(cè)量腫瘤大小，并評(píng)估其體積變化。臨床效果按照Millier AB提出的國際實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估[1]：①臨床完全緩解(CR)：臨床檢查腫瘤完全消失；②臨床部分緩解(PR)：腫瘤體積縮小≥50%；③疾病穩(wěn)定(SD)：腫瘤體積縮小<50%或增大<25%；④疾病進(jìn)展(PD)：腫瘤體積增大≥25%?？傆行蕿镽R=CR+PR。手術(shù)切除標(biāo)本與化療前穿刺組織的病理相比較，按照Miller&Payne方法將其分為G1～G5五級(jí)[2]，G5：未見浸潤性癌殘留；G4：有零散分布的浸潤性腫瘤細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞減少90%以上；G3：腫瘤細(xì)胞顯著減少，下降比例為30%至90%；G2：腫瘤細(xì)胞減少比例不足30% ；G1：腫瘤細(xì)胞未見減少。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)包進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)有1≤理論頻數(shù)<5時(shí)，采用χ2檢驗(yàn)校正公式，無病生存率比較采用Kaplan-Meier分析，P≤0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

根據(jù)免疫組化及Fish檢測(cè)結(jié)果，最終LuminalB型20例，Her-2型28例，COX-2高表達(dá)25例，低表達(dá)23例，PHH3高表達(dá)21例，低表達(dá)27例。通過首次及末次彩超檢查，并對(duì)腫瘤病灶進(jìn)行對(duì)比，評(píng)估結(jié)果獲得CR13例，PR22例，SD13例，無疾病進(jìn)展病例。在病理檢查方面，G5級(jí)5例，G4級(jí)19例，G3級(jí)11例，G2級(jí)13例，無G1病例。

2.1COX-2、PHH3與乳腺癌NAC療效的關(guān)系

COX-2高表達(dá)者有8例達(dá)到CR，13例達(dá)到PR，4例為SD，有4例達(dá)到pCR，COX-2低表達(dá)者有9例達(dá)到CR，5例達(dá)到PR，9例為SD，有1例達(dá)到pCR。兩組RR相比較，COX-2高表達(dá)者優(yōu)于低表達(dá)者，其差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

PHH3高表達(dá)者有7例達(dá)到CR，12例達(dá)到PR，2例為SD，有3例達(dá)到pCR，PHH3低表達(dá)者有6例達(dá)到CR，10例達(dá)到PR，11例為SD，有2例達(dá)到pCR。兩組RR相比較，PHH3高表達(dá)者優(yōu)于低表達(dá)者，其差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 COX-2/PHH3表達(dá)狀態(tài)與NAC療效關(guān)系

2.2COX-2、PHH3與乳腺癌預(yù)后的關(guān)系

所有患者均在最后一次術(shù)后輔助化療后進(jìn)行門診隨訪，中位隨訪時(shí)間為40(10～88)個(gè)月，無失訪病例。至隨訪結(jié)束，29例患者出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，其中4例死亡，27例仍存活。另有2例因其它疾病而死亡。通過Kaplan-Meier分析患者無病生存率，COX-2高表達(dá)者的無病生存率低于低表達(dá)者，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.07，P=0.04)(見圖1)，PHH3高表達(dá)者無病生存率低于低表達(dá)者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.89，P=0.00)(見圖2)。

圖1 COX-2表達(dá)狀態(tài)與DFS的Kaplan-Meier分析

圖2 PHH3表達(dá)狀態(tài)與DFS的Kaplan-Meier分析

3 討 論

惡性腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展涉及多種因素及基因的突變，其腫瘤細(xì)胞多數(shù)進(jìn)行著無限制的分裂和增殖，檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的增殖狀態(tài)對(duì)評(píng)估預(yù)后及指導(dǎo)治療有重要的作用。隨著生物學(xué)研究的深入，腫瘤的基因表達(dá)與化療敏感性的關(guān)系也正在引起人們的關(guān)注。COX-2是催化花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素的重要限速酶，能夠通過多種機(jī)制參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，在多種惡性腫瘤組織中高表達(dá)[2]。同時(shí)其在促進(jìn)腫瘤新生血管生成、腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移方面也起著重要作用[3]。陳鵬等[4]認(rèn)為COX-2的表達(dá)與乳腺癌TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，TNM分期越晚，COX-2陽性率越高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組患者COX-2陽性率明顯高于無轉(zhuǎn)移組。本研究認(rèn)為COX-2的表達(dá)狀態(tài)與Her-2型乳腺癌NAC療效關(guān)系密切，COX-2高表達(dá)狀態(tài)預(yù)示著腫瘤對(duì)化療藥物越敏感，但高表達(dá)者總體無病生存率較差。

PPH3是新近剛發(fā)現(xiàn)的5個(gè)核心蛋白之一，在真核細(xì)胞中與其它組蛋白共同構(gòu)成染色質(zhì)中的主要蛋白組分[5]，其表達(dá)常在核分裂期間達(dá)到最大值，是一種核分裂特異性標(biāo)志物。有學(xué)者研究指出PHH3可用于預(yù)測(cè)星形細(xì)胞癌患者的生存期，也可協(xié)助子宮內(nèi)膜癌的病理分級(jí)[6-7]。劉西林等[8]認(rèn)為，PHH3在乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中的高表達(dá)率較正常乳腺組織顯明顯增高，與乳腺乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，其表達(dá)與乳腺癌組織學(xué)分級(jí)呈正相關(guān)，組織學(xué)分級(jí)越高PHH3陽性率越高。本研究認(rèn)為PHH3的表達(dá)狀態(tài)與Her-2型乳腺癌NAC療效關(guān)系密切，PHH3高表達(dá)狀態(tài)預(yù)示著腫瘤對(duì)化療藥物越敏感，其總有效率更高。隨訪發(fā)現(xiàn)PHH3高表達(dá)者無病生存率較低表達(dá)差。

尋找能夠較準(zhǔn)確預(yù)測(cè)乳腺癌NAC療效的標(biāo)志物對(duì)指導(dǎo)臨床工作中的決策有重要的意義，可以增加患者的療效，并提高患者的生存期和生存質(zhì)量。雖然本研究認(rèn)為PHH3、COX-2能夠預(yù)測(cè)乳腺NAC療效及預(yù)后，但受制于病例數(shù)及實(shí)驗(yàn)條件，故仍存在著一定的局限性，其更深入的相關(guān)機(jī)制也有待進(jìn)一步研究了解。

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The relationship of COX-2 and PHH3 in response and prognosis for Her-2 positive breast cancer patients with neoadjuvant chemotherapy

FANXin-yongWENYan-fang

(Dept.of General Surgery,3th People’s Hospital of Shaoguan,Shaoguan 512123,China)

Objective:To study the relationship of COX-2 and PHH3 in response and prognosis for Her-2 positive breast cancer patients with neoadjuvant chemotherapy. Methods:48 patients of breast cancer who treated with NAC were included in this retrospective study. Investigated the relationship of COX-2 and PHH3 to response and prognosis.Results:The response rate of high expression of COX-2 is 55%(21/25), it is batter than low expression gruop(14/23)(P<0.05).The response rate of high expression of PHH3 is 55%(19/21), it is batter than low expression gruop(16/27)(P<0.05).The disease-free survival of low expression on COX-2 and PHH3 was longer than high experssion(P<0.05).Conclusion:COX-2 and PHH3 had an effect on response and prognosis of NAC. Low expression of them was batter on prognosis, but worse on response.

breast cancer;neoadjuvant chemotherapy；cyclooxygenase；phospho-histone H3

樊新詠(1983—)，男，湖北黃岡人，主治醫(yī)師，本科，主要從事普外科臨床工作。

R737.9

A

1004-7115(2017)12-1377-03

10.3969/j.issn.1004-7115.2017.12.018

2017-10-18)