紅細(xì)胞保存液混懸洗滌紅細(xì)胞的質(zhì)量觀察

楊 梅

（遼寧省血液中心，遼寧 沈陽(yáng) 110044）

紅細(xì)胞保存液混懸洗滌紅細(xì)胞的質(zhì)量觀察

楊 梅

（遼寧省血液中心，遼寧 沈陽(yáng) 110044）

目的探究紅細(xì)胞保存液（MAP）混懸洗滌紅細(xì)胞的質(zhì)量控制。方法將制備的紅細(xì)胞溶液放置在4 ℃冰箱中保存，在14 d、21 d、35 d選取樣本，檢測(cè)其溶血率，35 d檢測(cè)溶液中的血紅蛋白含量、上清蛋白含量。結(jié)果21 d與14 d溶血率相比、35 d與21 d溶血率相比均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；血紅蛋白含量、上清蛋白含量符合國(guó)家規(guī)定的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)論隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，樣品的溶血率不斷升高，35 d以內(nèi)均符合國(guó)家制定的標(biāo)準(zhǔn)，但洗滌紅細(xì)胞在21 d的保存期內(nèi)應(yīng)用效果最佳。

紅細(xì)胞保存液；洗滌紅細(xì)胞；質(zhì)量

洗滌紅細(xì)胞主要是利用機(jī)械設(shè)備除去健康血液中的血漿、血液中的血小板和90%以上的白細(xì)胞而制作成的臨床輸血用品。在臨床醫(yī)學(xué)上，洗滌紅細(xì)胞主要是應(yīng)用到器官移植的患者，目的是較少其對(duì)異體的排斥反應(yīng)，或者是應(yīng)用到對(duì)白細(xì)胞產(chǎn)生抗體的貧血患者，保證其身體對(duì)血液的需求。傳統(tǒng)的運(yùn)用生理鹽水混懸的洗滌紅細(xì)胞制備不僅工藝較為復(fù)雜，并且保存期僅為24 h，無(wú)法滿足臨床應(yīng)用的需求。采用MAP所制備的混懸紅細(xì)胞的保存期為35 d。保質(zhì)期的延長(zhǎng)，庫(kù)存量適當(dāng)提高，進(jìn)而滿足臨臨床應(yīng)用的需求。

1 材料與方法

1.1 材料及儀器設(shè)備：選取本血站所采集的400 mL全血制備的紅細(xì)胞10袋。本站現(xiàn)有如下血液制備的設(shè)備裝置：邁瑞B(yǎng)S－420全自動(dòng)生化分析儀、邁瑞B(yǎng)C－300全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、SYSMEXKX－21N血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、費(fèi)森尤斯卡比COMPOD-CK無(wú)菌接合機(jī)、日立CR7低溫離心機(jī)以及四聯(lián)洗滌袋250 mL等設(shè)備及相關(guān)的配套設(shè)施。

1.2 方法：在血液采集的第2天，將檢驗(yàn)合格的紅細(xì)胞懸液作為本次實(shí)驗(yàn)的起始血液，并且保證紅細(xì)胞懸液的外觀正常，包裝無(wú)破損和滲漏。技術(shù)操作人員選取待洗滌的懸浮紅細(xì)胞血袋，運(yùn)用無(wú)菌結(jié)合機(jī)將紅細(xì)胞懸液與洗滌溶液進(jìn)行連接，確定紅細(xì)胞血液無(wú)滲漏點(diǎn)之后，將兩種溶液按照一個(gè)單位紅細(xì)胞配比100 mL溶液的方式將其融合，均勻攪拌混合的溶液。溶液混合完畢之后，在設(shè)備溫度為4 ℃的條件下，以3900 r/min的速度運(yùn)行10 min對(duì)溶液做離心處理。離心工作完成之后取出血袋，并借助設(shè)備將上清液轉(zhuǎn)移到空袋中。按照上述操作步驟連續(xù)操作3次，獲得經(jīng)過(guò)洗滌的或紅細(xì)胞溶液。

按照上述操作方式，本次實(shí)驗(yàn)研究中共獲得10袋MAP混懸洗滌紅細(xì)胞。按照無(wú)菌操作的相關(guān)要求將紅細(xì)胞進(jìn)行收集，并均勻地放置在3個(gè)一次性收集袋中。將3個(gè)收集袋放在4 ℃的冰箱中，在第14天、21天和35天分別取出樣本，測(cè)定其溶血率。同時(shí)在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的第35天，測(cè)定樣本血紅蛋白含量、上清蛋白含量。

1.3 評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：按照《全血及成分血質(zhì)量要求（GB18469-2012）》中洗滌紅細(xì)胞的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)定：血紅蛋白含量≥18.0 g；上清蛋白含量≤0.5 g；溶血率＜0.8%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：本次研究中獲取的所有資料數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS19.0軟件處理，以數(shù)（±s）表示計(jì)量資料，（P＜0.05）則表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

表1中的數(shù)據(jù)是14 d、21 d和35 d所測(cè)定的溶血率，其中21 d與14 d的溶血率比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；35 d與21 d的溶血率相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1和表2。

表1 3個(gè)存儲(chǔ)時(shí)間溶血率測(cè)定值（n=10）

3 討 論

洗滌紅細(xì)胞是對(duì)健康的血液進(jìn)行處理，除去血液中的血漿、抗凝劑、血小板等成分，進(jìn)而降低患者輸血后所產(chǎn)生的不適應(yīng)，是提高部分疾病救治率和提高患者生存質(zhì)量的重要方式。在臨床上適應(yīng)證主要表現(xiàn)在如下情況：一是對(duì)血漿和全血過(guò)敏的蕁麻疹、過(guò)敏性休克的患者；二是患者患有高鉀血癥、肝腎功能存在障礙；三是因多次輸血而對(duì)血小板產(chǎn)生抗體的患者；患者免疫系統(tǒng)紊亂，患有免疫性溶血性貧血。采用懸混方式獲得的MAP，不僅符合國(guó)家規(guī)定的質(zhì)量要求，并且其保存期為35d，利于洗滌紅細(xì)胞儲(chǔ)備庫(kù)的建立，為臨床應(yīng)用提供重組的資源，進(jìn)而滿足患者治療的需求[1]。

在本次實(shí)驗(yàn)研究中，測(cè)得血紅蛋白含量的范圍為0.15～0.76 g，上清蛋白含量為36.0～58.6 g，溶血率為0.04%～0.55%，均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，并且保證為無(wú)菌制成品。在采集血液的第2天制備洗滌紅細(xì)胞，其合格率較高，為45%左右，主要是由于血液采集之后，在4 ℃的溫度下保存，其成分會(huì)自然分離。通過(guò)外包裝來(lái)看，第一層為血漿，第二層為血小板和白細(xì)胞，第三層為紅細(xì)胞。在自然方式24 h之后，血液中第二層血小板、白細(xì)胞的功能逐漸降低，甚至完全喪失，在機(jī)械設(shè)備離心的作用下，極易將其分離[2]。同時(shí)采集的全血中紅細(xì)胞具有較高的黏稠度，位于最底層，無(wú)法懸浮，所以要清除白細(xì)胞和血小板，并且讓紅細(xì)胞懸浮需要對(duì)全血進(jìn)行洗滌處理[3]。在機(jī)械操作的過(guò)程中要按照操作流程，對(duì)每一個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行控制，有效減少了對(duì)紅細(xì)胞的破壞程度，進(jìn)而避免溶血現(xiàn)象的發(fā)生，提高制備的成功率。通過(guò)多次制備實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)全血在自然沉降之后在對(duì)其進(jìn)行處理，其效果高于通過(guò)機(jī)器離心的分離效果，所以在采集后的第二天來(lái)完成制備工作[4]。通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，溫度對(duì)紅細(xì)胞的滲透性產(chǎn)生較大的影響，其成分隨著溫度的變化而相應(yīng)地發(fā)生變化，其紅細(xì)胞的脆弱性較高，相應(yīng)地導(dǎo)致了其溶血率較高，所以在洗滌制備的過(guò)程中要選在的低溫的環(huán)境下。選擇在4 ℃的溫度條件下進(jìn)行保存和制備是經(jīng)過(guò)大量的臨床實(shí)驗(yàn)而得出的結(jié)論，主要是由于在低溫的環(huán)境下，紅細(xì)胞流失的速度較慢，其在低溫下保存的時(shí)間越短，其損失率越小，進(jìn)而有效地保證了全血中紅細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量[5]。

MAP混懸洗滌紅細(xì)胞制備，制作過(guò)程全部運(yùn)用機(jī)械設(shè)備操作，人員直接操作的項(xiàng)目為收集、整理等，對(duì)其干涉較少，進(jìn)而是其在無(wú)菌的狀態(tài)下制備。在選取樣本，進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定的同時(shí)對(duì)其進(jìn)行無(wú)菌實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)14 d、21 d和35 d所選取的樣本均無(wú)菌，滿足應(yīng)用的需求。從制備效果上來(lái)看，MAP混懸洗滌紅細(xì)胞制備不僅具有制作工藝簡(jiǎn)單、保存時(shí)間長(zhǎng)、無(wú)菌等特點(diǎn)，同時(shí)也克服了傳統(tǒng)的運(yùn)用生理鹽水的方式制備洗滌紅細(xì)胞所存在的需要工作人員多、工作量大、資源浪費(fèi)多、保存時(shí)間短等問(wèn)題，大大地提高了工作效率和制備品的質(zhì)量，為臨床應(yīng)用提供了充足的用品，進(jìn)而滿足輸血患者的特殊需求。

綜上所述，隨著醫(yī)療衛(wèi)生體系的發(fā)展，輸血醫(yī)療技術(shù)也在不斷進(jìn)步，新的設(shè)備和制作工藝的引入，為臨床醫(yī)學(xué)上提供了大量的保存時(shí)間長(zhǎng)、質(zhì)量滿足應(yīng)用需求的混懸洗滌紅細(xì)胞。新工藝的引入不僅降低了全血資源的浪費(fèi)率，同時(shí)也保證了庫(kù)存量，為搶救工作的開(kāi)展提供了寶貴的時(shí)間。同時(shí)混懸洗滌紅細(xì)胞的應(yīng)用也降低了患者在輸血之后所產(chǎn)生的不良反應(yīng)，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[1] 段志倩,石潔,鄭建勇,等.MAP保存洗滌紅細(xì)胞質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].臨床血液學(xué)雜志(輸血與檢驗(yàn)),2016,29(1):144-145.

[2] 莊運(yùn)芳.紅細(xì)胞保存液混懸洗滌紅細(xì)胞的制備及質(zhì)量控制[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2016,16(8):1183-1185.

[3] 高春芳,劉亞欣,金花,等.紅細(xì)胞保存液(MAP)混懸洗滌紅細(xì)胞的制備及其質(zhì)量控制[J].中國(guó)民康醫(yī)學(xué),2015,27(4):3-4+7.

[4] 王惟,譚菲,柴婷婷.洗滌紅細(xì)胞保存期延長(zhǎng)效果研究[J].臨床輸血與檢驗(yàn),2015,17(1):70-71.

[5] 何亞琴,吳敏,馬天虹,等.紅細(xì)胞保存液懸浮洗滌紅細(xì)胞的動(dòng)態(tài)質(zhì)量觀察[J].臨床血液學(xué)雜志(輸血與檢驗(yàn)),2015,28(5):841-843.

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1671-8194（2017）32-0013-02