乳腺癌組織甲狀腺激素受體β1表達(dá)及其臨床意義

李英，李宗龍

(青海紅十字醫(yī)院，西寧810000)

乳腺癌組織甲狀腺激素受體β1表達(dá)及其臨床意義

李英，李宗龍

(青海紅十字醫(yī)院，西寧810000)

目的探討乳腺癌組織中甲狀腺激素受體β1(TRβ1)蛋白表達(dá)變化及其臨床意義。方法擇取120例乳腺癌患者手術(shù)切除的乳腺癌組織標(biāo)本及其癌旁組織標(biāo)本。采用免疫組化SP法檢測(cè)TRβ1蛋白表達(dá)。分析癌組織TRβ1蛋白表達(dá)與患者年齡、腫瘤直徑、病理分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人類表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER-2)表達(dá)的關(guān)系。結(jié)果癌組織及癌旁組織TRβ1蛋白陽性表達(dá)率分別為38.33%(46/120)、99.17%(119/120)，二者比較P<0.05。癌組織TRβ1表達(dá)與患者臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)，與患者年齡、腫瘤直徑、病理分級(jí)及ER、PR、HER-2表達(dá)情況無關(guān)(P均>0.05)。結(jié)論乳腺癌組織中TRβ1蛋白表達(dá)上調(diào)，檢測(cè)乳腺癌組織中TRβ1蛋白表達(dá)有助于判斷患者臨床分期及預(yù)測(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

乳腺癌；甲狀腺激素受體β1；臨床分期；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

甲狀腺激素受體(TR)在人類正常乳腺組織內(nèi)廣泛表達(dá)，并與細(xì)胞的分化有一定聯(lián)系。TR有TRα1、TRα2、TRβ1三種較為常見的亞型。研究發(fā)現(xiàn)，TRβ1由人體3號(hào)染色體中的THRB基因編碼，與乳腺癌的形成及進(jìn)展關(guān)系密切[1，2]，但乳腺癌組織TRβ1蛋白表達(dá)與患者臨床病理因素之間的關(guān)系尚不明確[2，3]。本研究觀察了乳腺癌組織TRβ1蛋白表達(dá)變化，現(xiàn)分析結(jié)果并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2015年9月～2017年3月于我院行手術(shù)治療的乳腺癌患者120例，均為女性，年齡26～72(49.74±2.11)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：①符合WHO乳腺癌的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②有手術(shù)指征，均接受乳腺癌根治術(shù)治療；③術(shù)前并未接受放化療或內(nèi)分泌治療等措施；④術(shù)前KPS評(píng)分>85分。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他種類腫瘤；②病歷資料缺失；③合并甲狀腺疾病者。腫瘤直徑≤2 cm者42例，>2 cm者78例。病理分級(jí)Ⅰ級(jí)24例，Ⅱ級(jí)57例，Ⅲ級(jí)39例。臨床分期Ⅰ～Ⅱ期71例，Ⅲ～Ⅳ期49例。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移55例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移65例。腫瘤組織雌激素受體(ER)表達(dá)陽性89例，陰性31例；孕激素受體(PR)表達(dá)陽性58例，陰性62例；人類表皮生長(zhǎng)因子受體2(HER-2)表達(dá)陽性54例，陰性66例。本研究通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，入選者均簽署知情同意書。

1.2 癌組織及癌旁組織TRβ1表達(dá)檢測(cè) 取120例患者手術(shù)切除癌組織標(biāo)本及其癌旁組織標(biāo)本(距腫瘤距離>5 cm，且經(jīng)病理檢查確定為正常組織)。采用免疫組化SP法檢測(cè)TRβ1表達(dá)。鼠抗人TRβ1抗體(一抗)購(gòu)自Santa Cruz 公司，工作濃度1∶70，免疫組化SP試劑盒購(gòu)自深圳晶美公司，操作按試劑盒說明書進(jìn)行。以已知陽性切片為陽性對(duì)照，PBS代替一抗為陰性對(duì)照。染色后光鏡下觀察，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒為TRβ1陽性。每張切片隨機(jī)提取10個(gè)高倍鏡視野(×400)，計(jì)數(shù)400個(gè)細(xì)胞。切片染色強(qiáng)度評(píng)分[4]：無色計(jì)0分，淺黃色計(jì)1分，棕黃色計(jì)2分，棕褐色計(jì)3分。TRβ1陽性細(xì)胞百分比(TRβ1陽性細(xì)胞數(shù)/400×100%)評(píng)分：TRβ1陽性細(xì)胞百分比為0計(jì)0分，>0～10%計(jì)1分，>10%～50%計(jì)2分，>50%～75%計(jì)3分，>75%計(jì)4分。兩項(xiàng)評(píng)分相乘，結(jié)果≥2為TRβ1表達(dá)陽性，否則為陰性。

1.3 癌組織TRβ1表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)關(guān)系的分析 收集患者年齡、腫瘤直徑、病理分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及ER、PR、HER-2表達(dá)等臨床病理資料，分析TRβ1陽性表達(dá)與上述指標(biāo)的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

癌組織及其癌旁組織TRβ1蛋白陽性表達(dá)率分別為38.33%(46/120)、99.17%(119/120)，二者比較P<0.05。乳腺癌組織TRβ1表達(dá)與患者臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)，與患者年齡、腫瘤直徑、病理分級(jí)及ER、PR、HER-2表達(dá)情況無關(guān)(P均>0.05)。見表1。

表1 乳腺癌組織TRβ1表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討論

近年來隨著分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)的迅猛發(fā)展，乳腺癌的臨床診斷以及治療均取得了較大的突破，然而依舊存在較多尚未完全解決的難題[6，7]。乳腺癌具有較強(qiáng)的異質(zhì)性，尋找與乳腺癌臨床病理參數(shù)有密切關(guān)系的腫瘤標(biāo)志物對(duì)乳腺癌的早期診斷及治療有重要意義。

臨床工作中經(jīng)常能遇到乳腺和甲狀腺同時(shí)或者先后罹患腫瘤，或者乳腺癌合并甲狀腺功能障礙的病例。查閱文獻(xiàn)我們發(fā)現(xiàn)，甲狀腺功能異常與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展有明顯的相關(guān)性。乳腺和甲狀腺都是內(nèi)分泌器官，其功能都受到垂體分泌的激素的調(diào)控。乳腺癌患者常伴有內(nèi)分泌系統(tǒng)的紊亂，這會(huì)對(duì)患者垂體功能進(jìn)行影響，繼而影響患者甲狀腺功能。甲狀腺功能主要是通過甲狀腺素來體現(xiàn)。甲狀腺素在全身與TR結(jié)合，通過調(diào)節(jié)下游通路調(diào)節(jié)相應(yīng)功能細(xì)胞的增殖和功能水平。TR包括17號(hào)染色體上的THRA基因編碼的TRα1和TRα2以及3號(hào)染色體上的THRB基因編碼的TRβ1三種亞型。TRβ1在乳腺組織中廣泛表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組織內(nèi)TRβ1蛋白陽性表達(dá)率明顯低于癌旁組織，與賁勇等[10，11]的報(bào)道相符，提示TRβ1蛋白在乳腺癌組織內(nèi)的表達(dá)明顯下調(diào)。有研究對(duì)70例乳腺癌患者腫瘤及相應(yīng)正常組織標(biāo)本進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)大部分乳腺癌標(biāo)本伴有TRα1、TRβ1在 DNA、RNA及蛋白質(zhì)水平的表達(dá)下降，且<50歲的年輕乳腺癌患者更易伴有TRβ1基因的表達(dá)下降[12]。有研究[13]發(fā)現(xiàn)，TRβ基因正常表達(dá)的小鼠乳腺增生發(fā)生率約為33%，TRβ一個(gè)等位基因變異的小鼠乳腺增生發(fā)生率可達(dá)60%，TRβ兩個(gè)等位基因變異的小鼠乳腺增生率可達(dá) 77%。乳腺增生被認(rèn)為是乳腺癌的高危因素之一，因此提示TRβ表達(dá)缺失可能促進(jìn)乳腺癌發(fā)生。轉(zhuǎn)染TRβ1可以抑制腫瘤組織CX-CR4、c-Met和 MMP等高侵襲性腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞MAPK和PI3K/AKT等通路的活化。上述說明TR表達(dá)缺失會(huì)促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生發(fā)展，但具體作用機(jī)制還有待更加深入的研究。

TRβ1屬配體依賴型轉(zhuǎn)錄因子，廣泛存在于機(jī)體各組織內(nèi)，在機(jī)體代謝、組織分化及生長(zhǎng)發(fā)育等方面具有重要作用。在受到外因或者內(nèi)因的作用后TRβ1基因可發(fā)生突變，致使原有活性消失，并使基因的某一個(gè)區(qū)域構(gòu)象發(fā)生改變，進(jìn)而影響細(xì)胞有關(guān)信號(hào)通路的正常傳導(dǎo)，促進(jìn)乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展[14]。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組織TRβ1蛋白陽性率低于癌旁組織， TRβ1蛋白陽性表達(dá)與乳腺癌臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情有關(guān)；提示檢測(cè)乳腺癌組織TRβ1表達(dá)有助于判斷乳腺癌患者病情以及預(yù)測(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況。令亞琴等[15，16]報(bào)道證實(shí)，TRβ1基因在乳腺癌中有可能發(fā)揮的是抑癌基因作用，能夠在較大程度上抑制乳腺癌細(xì)胞向四周脈管不斷侵襲與轉(zhuǎn)移。吳萬敏等[17，18]認(rèn)為，TRβ1對(duì)于乳腺癌細(xì)胞產(chǎn)生的抑制作用可能與JAK-STAT-cyclinD通路有關(guān)，但具體機(jī)制尚不明確。

本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組織TRβ1蛋白陽性表達(dá)情況與乳腺癌患者年齡、腫瘤直徑、病理分級(jí)及ER、PR、HER-2表達(dá)情況無關(guān)，與文獻(xiàn)[12，14，15，17]報(bào)道不符，可能與本研究和上述研究樣本量均較小有關(guān)，后續(xù)研究需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，進(jìn)行多中心的隨機(jī)對(duì)照研究，進(jìn)一步明確乳腺癌組織中TRβ1蛋白陽性表達(dá)情況的臨床意義。

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李宗龍(E-mail: 736723100@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.40.028

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