海水輪蟲高密度培養(yǎng)技術(shù)

■ 廣東省海洋漁業(yè)試驗中心 楊宇晴 劉蘇 張海發(fā) 吳錦輝 黃培衛(wèi)/文圖

海水輪蟲高密度培養(yǎng)技術(shù)

■ 廣東省海洋漁業(yè)試驗中心 楊宇晴 劉蘇 張海發(fā) 吳錦輝 黃培衛(wèi)/文圖

輪蟲是水產(chǎn)養(yǎng)殖動物苗種階段優(yōu)良的開口餌料，其作為活餌料的應(yīng)用大大促進(jìn)了水產(chǎn)動物種苗生產(chǎn)的發(fā)展。近幾年來隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展壯大，水產(chǎn)動物種苗的培育量大大提高，作為優(yōu)質(zhì)活餌料的輪蟲的需求量也日益增加。目前國內(nèi)輪蟲的來源，主要是通過室外土池人工養(yǎng)殖或室內(nèi)水泥池培育，一般的培養(yǎng)密度只有200個/mL左右，產(chǎn)量低、周期長?，F(xiàn)有傳統(tǒng)的輪蟲培養(yǎng)方法已經(jīng)不能滿足生產(chǎn)的需要，亟需研究一種新型的快速、高效的輪蟲培養(yǎng)方法。本文研究如何在小水體提高輪蟲培育密度，以獲得生產(chǎn)性的技術(shù)要求和運(yùn)用。

一、培養(yǎng)條件

2017年在廣東省海洋漁業(yè)試驗中心開展了輪蟲高密度培養(yǎng)；所用容器為塑料圓桶，墊高一側(cè)使桶面與水平面呈5度傾斜狀，培養(yǎng)水體為每桶200L；培養(yǎng)用水為過濾的自然海水，水溫23～26℃，鹽度32‰，pH值8.0，培養(yǎng)開始前用強(qiáng)氯精進(jìn)行消毒，待余氯檢測合格后施加40mL濃縮藻；每個桶放氣石4個，其中1個采用納米氣石連接制氧機(jī)進(jìn)行純氧充氣，其余3個采用普通氣石進(jìn)行自然充氣；每個桶中懸掛吸污濾布，并每天清洗2～3次。實(shí)驗所用輪蟲種為廣東省海洋漁業(yè)試驗中心培養(yǎng)的SS型褶皺臂尾輪蟲；輪蟲培養(yǎng)所用餌料為濃縮的海水小球藻，藻細(xì)胞含量為250億/mL，投餌量為每百萬輪蟲1天投喂6mL，采用微量泵進(jìn)行連續(xù)投喂；培養(yǎng)周期為5天。在培養(yǎng)過程中，我們探討了純氧充氣、初始接種密度（密度比例約1∶2∶4）、投餌量等不同條件對輪蟲數(shù)量增長的影響，總結(jié)出海水輪蟲高密度培養(yǎng)技術(shù)的適宜條件。

二、培養(yǎng)結(jié)果

1．純氧充氣進(jìn)行輪蟲培養(yǎng)

充氣是保證水體溶解氧的主要途徑，是高密度培養(yǎng)的基礎(chǔ)條件。我們通過自然充氣和增加純氧充氣進(jìn)行了輪蟲培養(yǎng)，經(jīng)過5天的培養(yǎng)，輪蟲密度從200個/ml增長到約1500個/mL。但是隨著培養(yǎng)的進(jìn)行（圖1），自然充氣組溶解氧會下降，從最初的13.7mg/L到實(shí)驗結(jié)束時下降為4.07mg/L；而純氧充氣組溶解氧能一直維持在12mg/L左右。增加純氧充氣對高密度培養(yǎng)輪蟲有更好的溶解氧保證。

2．合適的投餌量

合適的投餌量是成功培養(yǎng)的關(guān)鍵。投餌太少，輪蟲吃不飽影響增殖速度；投餌太多，多余的餌料敗壞水質(zhì)從而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。我們設(shè)置3個投餌量組（圖2），經(jīng)過5天的培養(yǎng)，每百萬輪蟲1天投喂?jié)饪s藻6mL和9mL組，輪蟲密度從大約70個/mL增長到約590個/mL；而3mL組的只增長到241個/mL。同時，輪蟲密度越高，培養(yǎng)水體的氨氮含量也越高，6mL組和9mL組最終都為30mg/L左右，3mL組為11.4mg/L。從圖3培養(yǎng)水體的溶解氧來看，3mL組和6ml組都能保持在10mg/L以上；9mL組溶解氧則有明顯的下降，培養(yǎng)結(jié)束時溶解氧只有6.27mg/L。綜合來看，每百萬輪蟲1天投喂?jié)饪s藻6mL是最佳的選擇，不但能保證輪蟲數(shù)量的大量增長，同時能保持水體溶解氧在一個較高的水平。隨著輪蟲數(shù)量的增長，應(yīng)注意控制水體的氨氮含量。

3．接種密度的比較

圖1 增加純氧充氣進(jìn)行輪蟲培養(yǎng)

在理想條件下，輪蟲的增殖是按2的倍數(shù)進(jìn)行的，接種密度對輪蟲的數(shù)量增殖將產(chǎn)生很大的影響。我們采用3種不同的接種密度進(jìn)行了輪蟲培養(yǎng)，經(jīng)過5天的培養(yǎng)，低密度組（接種密度116個/mL）最終輪蟲密度為1138個/mL，中密度組（接種密度208個/mL）最終輪蟲密度為1637個/mL，高密度組（接種密度413個/mL）最終輪蟲密度為3313個/mL。表明經(jīng)過同樣時間的培養(yǎng)，接種密度越高，輪蟲數(shù)量增加越多。但是，輪蟲密度越高，氨氮含量也隨之越高，應(yīng)注意控制。同時，輪蟲密度高對水體溶解氧消耗更大，中密度組和高密度組在培養(yǎng)結(jié)束時水體溶解氧較低，分別為5.66mg/L和5.58mg/L（圖5），因此高密度培養(yǎng)中應(yīng)注意增加純氧的供應(yīng)量以防止培養(yǎng)后期輪蟲密度增加后造成水體缺氧。

圖2 不同投餌量進(jìn)行的輪蟲培養(yǎng)

圖3 不同投餌量進(jìn)行輪蟲培養(yǎng)的水體溶解氧情況

三、培養(yǎng)的技術(shù)要點(diǎn)

圖4 不同初始接種密度進(jìn)行輪蟲培養(yǎng)

圖5 不同初始接種密度進(jìn)行輪蟲培養(yǎng)的水體溶解氧情況

通過對輪蟲培養(yǎng)過程中各條件的摸索，我們總結(jié)形成了一種簡易的小水體海水輪蟲高密度培養(yǎng)方法，其技術(shù)要點(diǎn)總結(jié)如下：

1．設(shè)置培養(yǎng)桶。培養(yǎng)用桶設(shè)置呈大約5度的傾斜，且桶內(nèi)懸掛吸污濾布。在輪蟲培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)桶里會產(chǎn)生大量泡沫，傾斜桶面能保證其被及時排出，清潔培養(yǎng)水體。高密度培養(yǎng)的空間里，輪蟲會產(chǎn)生很多排泄物，需要通過吸污濾布對其進(jìn)行吸附去除。吸污濾布每天應(yīng)進(jìn)行多次清洗，對清潔培養(yǎng)水體有很好的效果。

2．純氧充氣。桶內(nèi)要有純氧充氣以及自然充氣。高密度輪蟲培養(yǎng)，對氧氣消耗大，要求水體溶解氧達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)保證培養(yǎng)水體溶解氧大于6mg/L。自然充氣無法滿足水體溶解氧的要求，因此需要增加純氧充氣，同時應(yīng)采用納米氣石以延長純氧與海水彌散接觸時間，能有效保證水體溶解氧含量。自然充氣在輪蟲培養(yǎng)中也是不可或缺，采用普通氣石，開大充氣量，能使培養(yǎng)水體翻滾。自然充氣一是為了攪動水體使投喂的濃縮藻不沉底，同時使污物附著在吸污濾布上，二是使培養(yǎng)水體產(chǎn)生大量泡沫，泡沫排出能帶走部分污物以清潔水體，同時泡沫顏色也能反映餌料充足與否。如泡沫顏色呈綠色，表明投餌量過多；如泡沫顏色發(fā)白，表明投餌量過少；如泡沫顏色呈灰褐色，表明投餌量適宜。

3．水質(zhì)管理。培養(yǎng)用水要過濾消毒，防止原生動物在水體中成為優(yōu)勢種而導(dǎo)致的培養(yǎng)失敗。一般控制水體pH值在8.0、在水溫25～30℃以及保持穩(wěn)定的鹽度。

4．接種密度。輪蟲數(shù)量增長與接種密度呈正相關(guān)，我們在200L水體中按照413個/mL的密度進(jìn)行接種，經(jīng)過5天培養(yǎng)最終密度可高達(dá)3313個mL。另外，在培育初始時，要采用高接種密度。

5．餌料投喂。餌料投喂的量要合適，過少不利于輪蟲數(shù)量增長，過多則容易導(dǎo)致水質(zhì)敗壞。適宜的投喂量為每百萬輪蟲1天投喂?jié)饪s藻（濃度為250億/ml）6mL。投喂方式采用微量泵向培養(yǎng)桶中持續(xù)投喂?jié)饪s小球藻。

6．換水與收獲。在連續(xù)性的培養(yǎng)過程中，換水與收獲一般同時進(jìn)行。使用300～400目篩網(wǎng)，每次收獲水體的1/3，以利于輪蟲恢復(fù)密度。5～7天進(jìn)行一次徹底換水。