丹梔逍遙散對(duì)肝郁血熱型子宮內(nèi)膜異位患者ER、PR、C-erbB-2表達(dá)的影響

田 穎，高曉俐，楊東艷，叢 萍 （陜西省中醫(yī)醫(yī)院婦科，陜西西安710003）

丹梔逍遙散對(duì)肝郁血熱型子宮內(nèi)膜異位患者ER、PR、C-erbB-2表達(dá)的影響

田 穎，高曉俐，楊東艷，叢 萍 （陜西省中醫(yī)醫(yī)院婦科，陜西西安710003）

目的：探討丹梔逍遙散治療肝郁血熱型子宮內(nèi)膜異位患者，對(duì)其雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）及與 C-erbB-2基因表達(dá)的相關(guān)性研究．方法：選取2015-02／2016-09陜西省中醫(yī)醫(yī)院收治的63例子宮內(nèi)膜異位患者作為研究對(duì)象，根據(jù)中醫(yī)辨證診斷歸屬為肝郁血熱型，將其隨機(jī)分為對(duì)照組（n＝31）和觀察組（n＝32），對(duì)照組患者采取常規(guī)西醫(yī)達(dá)那唑膠囊治療，觀察組患者則在對(duì)照組常規(guī)西醫(yī)治療的基礎(chǔ)上加用丹梔逍遙散進(jìn)行治療，兩組患者均以治療4個(gè)月為觀察期．觀察兩組患者以免疫組化法檢測(cè)子宮組織中ER、PR、C-erbB-2基因的表達(dá)．結(jié)果：經(jīng)過4個(gè)月的治療，觀察組患者的 ER、PR 陽性表達(dá)率為 87．50%、81．25%、均高于對(duì)照組的77．42%、70．97%；而觀察組的 C-erbB-2 陽性表達(dá)率（43．75%）則低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；兩組患者的ER、PR、C-erbB-2陽性表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）；其中觀察組患者①ER的陽性表達(dá)與患者年齡≤40、月經(jīng)量少、疾?、衿谟嘘P(guān)；②PR陽性表達(dá)與月經(jīng)量少、異位囊腫包塊有關(guān)；③C-erbB-2陽性表達(dá)與月經(jīng)量少、疾?、蟆羝凇愇荒夷[包塊有關(guān)．結(jié)論：丹梔逍遙散治療肝郁血熱型子宮內(nèi)膜異位患者，能夠影響ER、PR及C-erbB-2的表達(dá)變化，對(duì)治療起到積極的臨床指導(dǎo)作用．

丹梔逍遙散；肝郁血熱；子宮內(nèi)膜異位；ER；PR；C-erbB-2

0 引言

子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis，EMT）在婦科疾病中較為常見［1］，其是由于子宮內(nèi)膜組織在宮腔以外的位置生長(zhǎng)而引起的疾病．有病理實(shí)驗(yàn)研究［2］表明，這種內(nèi)膜組織不但存在內(nèi)膜腺體，并且包含內(nèi)膜間質(zhì)，所以當(dāng)激素水平變化時(shí)其組織功能也發(fā)生改變，例如引起月經(jīng)量較少、尿頻、尿急等臨床表現(xiàn)．子宮內(nèi)膜異位具有一定的蔓延性，其細(xì)胞組織可擴(kuò)展到子宮肌地、盆腔，甚至更遠(yuǎn)的器官進(jìn)行浸潤(rùn)和植入．根據(jù)近年來的相關(guān)報(bào)道［3］，EMT的發(fā)病率約為10%，且以30～40歲的女性居多．患者臨床癥狀主要表現(xiàn)為疼痛不適、月經(jīng)失調(diào)及不孕癥，對(duì)于女性患者尤其是年輕女性的生活影響十分嚴(yán)重．在我國(guó)，每年有超過10萬女性被診斷為子宮內(nèi)膜癌，由于對(duì)相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)的有效篩查，有近70%的患者在診斷時(shí)就已經(jīng)屬于癌癥晚期，死亡率極高．國(guó)內(nèi)外調(diào)查研究［4］顯示，子宮內(nèi)膜異位是子宮內(nèi)膜癌的高風(fēng)險(xiǎn)因素，并與ER、PR、C-erbB-2在子宮內(nèi)膜的表達(dá)水平密切相關(guān)．臨床治療常用以促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑為代表的西藥進(jìn)行治療，通過使異位的內(nèi)膜組織萎縮而達(dá)到治療目的，但是對(duì)患者的肝臟器官會(huì)造成嚴(yán)重的慢性損傷，并不利于患者長(zhǎng)期應(yīng)用．祖國(guó)醫(yī)學(xué)則認(rèn)為該癥屬于“痛經(jīng)”和“不孕”的病證，應(yīng)以補(bǔ)肝益腎、活血化瘀為治療原則，辨明本證、分證論治．所以，在治療子宮內(nèi)膜異位癥的研究中，探討新的治療方案并聯(lián)合檢測(cè)相關(guān)的激素受體與基因表達(dá)對(duì)于診治EMT極其必要．

1 資料和方法

1．1 一般資料 選取2015-02／2016-09陜西省中醫(yī)醫(yī)院收治的子宮內(nèi)膜異位患者63例，根據(jù)使用的藥物不同，將其隨機(jī)分為對(duì)照組（n＝31）和觀察組（n＝32），對(duì)照組選擇西藥達(dá)那唑治療，患者年齡28～57（平均37．21±4．23）歲，其中疾病分級(jí)Ⅰ期10 例，Ⅱ期9例，Ⅲ～Ⅳ期12例，月經(jīng)量少者23例，月經(jīng)量多者8例，異位囊腫包塊17例；觀察組患者則在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上服用丹梔逍遙散，患者年齡31～58（平均41．74±6．52）歲，其中疾病分級(jí)Ⅰ期 14 例，Ⅱ期 8 例，Ⅲ～Ⅳ期10例，月經(jīng)量少者17例，月經(jīng)量多者15例，異位囊腫包塊19例．兩組患者的年齡、疾病分級(jí)、月經(jīng)情況等基本臨床資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），具有可比性．

1．2 納入標(biāo)準(zhǔn) ①患者有月經(jīng)不調(diào)、不孕病史，主訴痛經(jīng)、性交時(shí)疼痛等；②婦科內(nèi)診檢查壓痛感明顯，宮內(nèi)可觸球狀物增多；③陰式超聲可見子宮壁增厚，肌壁間回聲異常，或腹腔鏡檢查病變部位有血管增生組織、白色突起褶皺明顯；④中醫(yī)診斷：舌色紅伴瘀點(diǎn)，苔薄黃白，脈弦數(shù)；⑤入選病例研究經(jīng)過陜西省中醫(yī)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)［5］．

1．3 排除標(biāo)準(zhǔn) ①近1個(gè)月內(nèi)使用過激素類藥物患者；②患者合并嚴(yán)重肝腎功能不全、精神疾病；③患者曾有陰道不規(guī)則出血及乳腺疾病．

1．4 方法

1．4．1 治療方法 對(duì)照組采用達(dá)那唑膠囊（杭州民生藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)；批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H33022461；生產(chǎn)批號(hào)：141123、150108；規(guī)格：0．1 g／粒）進(jìn)行治療，4～8粒／d，分三次服用，連續(xù)使用3～6個(gè)月．觀察組加用丹梔逍遙散，主要成分為白術(shù)、柴胡、當(dāng)歸、茯苓、甘草、牡丹皮、丹皮、山梔、芍藥，1劑／d，分三次餐前服用，癥狀消失改每月經(jīng)期將至?xí)r服用4劑，至少連服3個(gè)周期．

1．4．2 檢測(cè)方法 采用免疫組化法進(jìn)行檢測(cè)，其中ER／PR／C-erbB-2檢驗(yàn)試劑盒（鼠單抗）（LOP1010）、熒光素酶底物顯色劑（LOP1102）試劑盒均采購于艾伯森北京生物科技有限公司．待測(cè)標(biāo)本以10%的福爾馬林試液浸泡后，用石蠟固定，以厚切片脫蠟?zāi)ぃM(jìn)行免疫組化和熒光染色，并記錄分析結(jié)果．

1．5 結(jié)果判定 切片組織可見細(xì)胞核內(nèi)有棕黃色顆粒視為ER、PR陽性表達(dá)結(jié)果；細(xì)胞漿與細(xì)胞膜顯棕黃色為C-erbB-2陽性表達(dá)．其中陽性細(xì)胞表達(dá)數(shù)＜5%為陰性，處于6%～50%屬于陽性表達(dá)．

1．6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS20．0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，其中計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn)，臨床資料與陽性表達(dá)率關(guān)系以Fisher精準(zhǔn)概率分析，P＜0．05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義．

2 結(jié)果

2．1 兩組患者治療前后ER、PR、C-erbB-2的陽性表達(dá)情況比較 經(jīng)過4個(gè)月的治療后，兩組患者ER、PR、C-erbB-2陽性表達(dá)率均有所升高，其中觀察組較對(duì)照度升高程度更為明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05，表 1）．

表1 兩組患者治療前后ER、PR、C-erbB-2水平的陽性表達(dá)情況比較 ［n（%）］

2．2 兩組患者的臨床資料在ER、PR、C-erbB-2中的陽性表達(dá)情況比較 ER、PR、C-erbB-2在兩組患者的相關(guān)臨床資料中的陽性表達(dá)情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）；ER 的陽性表達(dá)與患者年齡≤40、月經(jīng)量少、疾病Ⅰ期有關(guān)；PR陽性表達(dá)與月經(jīng)量少、異位囊腫包塊有關(guān)；C-erbB-2陽性表達(dá)與月經(jīng)量少、疾病Ⅲ～Ⅳ期、異位囊腫包塊有關(guān)（表2～4）．

表2 ER在患者臨床資料中的陽性表達(dá)情況比較［n（%）］

表3 C-erbB-2在患者臨床資料的陽性表達(dá)情況比較［n（%）］

表4 PR在患者臨床資料的陽性表達(dá)情況研究 ［n（%）］

3 討論

EMT在育齡女性中的發(fā)病情況較為普遍，尤其是多次人工流產(chǎn)、剖宮產(chǎn)的女性發(fā)病率較高［6-7］．其屬于一種易反復(fù)發(fā)作且激素依賴性的婦科疾?。鶕?jù)相關(guān)文獻(xiàn)［7］記載，子宮內(nèi)膜異位癥在治療后2年內(nèi)復(fù)發(fā)率＞21%，5年內(nèi)的復(fù)發(fā)率則達(dá)到50%，其中不孕癥女性的發(fā)病率＞35%，這對(duì)女性患者的生活、健康影響頗為嚴(yán)重．臨床研究［8-9］發(fā)現(xiàn)，引起子宮內(nèi)膜異位的因素與經(jīng)期疾病、多次妊娠、生殖器官異常有關(guān)，另有報(bào)道稱，社會(huì)壓力過大、自身免疫力低下也是導(dǎo)致該病的誘因．針對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的治療，不僅可以治愈女性患者身體，而且也可以降低女性患不孕癥的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)女性的心理健康及其家庭都有積極的意義．經(jīng)過近幾年醫(yī)學(xué)專家們的不斷努力，發(fā)現(xiàn)雌、孕激素受體在EMT中有重要的地位［10-11］．本研究中，患者在治療后ER、PR水平均有提高，其中觀察組陽性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組（P＜0．05）．作為生長(zhǎng)因子受體家族基因的C-erbB-2在正位的子宮內(nèi)膜中一般沒有表達(dá)或者表達(dá)率低［12-13］，如果 C-erbB-2表達(dá)率超過陽性則提示患病有癌變的風(fēng)險(xiǎn)．西藥在治療子宮內(nèi)膜異位時(shí)通常使用促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑，長(zhǎng)期應(yīng)用此類藥物可導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥等嚴(yán)重不良反應(yīng)，而在中醫(yī)治療領(lǐng)域可以通過辯證治療，減少副反應(yīng)的傷害，采用對(duì)癥治療的中藥不失為一種有效的嘗試．本研究選用的丹梔逍遙散是歷經(jīng)百年的經(jīng)典方劑，特別針對(duì)肝郁血熱型患者已經(jīng)證實(shí)有明確的治療效果，對(duì)患者因肝氣郁結(jié)、邪熱入血所致的子宮內(nèi)膜癥，通過疏肝理氣、行氣活血緩解疼痛等不適癥狀，改善月經(jīng)異常情況，使異位的內(nèi)膜逐漸回歸本位，從而使激素水平恢復(fù)正常［14-15］．本研究也對(duì)患者的臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行了相關(guān)陽性表達(dá)的分析，結(jié)果顯示患者的年齡、月經(jīng)情況、疾病分期、異位囊腫包塊等與ER、PR、C-erbB-2中的陽性表達(dá)相關(guān)．

本研究結(jié)果表明，中藥制劑丹梔逍遙散對(duì)治療肝郁血熱型子宮內(nèi)膜異位患者有確切的療效，同時(shí)也證實(shí)了ER、PR與C-erbB-2的表達(dá)在該病中有重要的提示作用，因此我們建議在診治EMT時(shí)，同時(shí)檢測(cè)ER、PR與C-erbB-2水平，經(jīng)過辨證確診后可以采用中藥制劑共同治療，是具有臨床應(yīng)用價(jià)值的治療方案．

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Effect of Danzhi Xiaoyao powder on the expression ofER，PR and C-erbB-2in patients with endometriosis of liver depression and blood heat type

TIAN Ying， GAO Xiao-Li， YANG Dong-Yan， CONG Ping
Department of Gynecology，Shaanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine， Xi'an 710003， China

AIM： To investigate the effects of Danzhi Xiaoyao powder on the expression of estrogen receptor（ER），progesterone receptor（PR） and C-erbB-2 gene in patients with endometriosis of liver depression and blood heat type．METHODS： A total of 63 patients with endometriosis admitted into Shaanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine from February 2015 to September 2016 were chosen as the research object．They were randomly divided into control group（n＝31） and observation group（n＝32） according to the syndrome differentiation of liver depression and blood heat type．The control group was treated with conventional western medicine（danazol capsules）， while patients in the observation group were treated with Danzhi Xiaoyao power on the basis of conventional Western medicine of the control group．The two groups of patients were treated and observed for 4 months．The expression of ER， PR， C-erbB-2 in the uterus were detected by immunohistochemistry．RESULTS： After 4 months of treatment，the positive rate of ER and PR in the observation group was 87．50%and 81．25%respectively， which were higher than those of the control group （77．42%and 70．97%） ．The positive expression rate of C-erbB-2 in the observation group （43．75%）was lower than that of the control group，with a statistically significant difference （P＜0．05）．There were no statistically significant difference on the positive expression of ER， PR， C-erbB-2 between the two groups of patients（P＞0．05）．In the observation group，① the positive expression of ER were related to the age of patients（under 40 years old）， menstruation quantity（little） and the stage of disease（stageⅠ）．② The PR positive expression were related with menstrustion quantity （little） and ectopic cyst mass．③The positive expression of C-erbB-2 were related with menstrustion quantity（little），the stage of disease（stageⅢ～Ⅳ） and ectopic cyst mass．CONCLUSION： Danzhi Xiaoyao powder can affect the expression of ER，PR and C-erbB-2 in patients with endometriosis of liver depression and blood heat type，and play an active clinical role in treatment．

Danzhi Xiaoyao powder； liver depression and blood heat type；endometriosis；ER；PR；C-erbB-2

R711．71

A

2095-6894（2017）11-35-04

2017-01-10；接受日期：2017-02-03

陜西省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（2017SF-239）

田 穎．碩士，主治醫(yī)師．研究方向：中西醫(yī)結(jié)合婦科．E-mail：33160079＠ qq．com