• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    柑橘黃龍病對贛南臍橙果園土壤生物學性質(zhì)的影響

    2017-11-30 09:55:50管冠何天養(yǎng)朱婧姚鋒先袁水秀
    江蘇農(nóng)業(yè)科學 2017年20期
    關(guān)鍵詞:酶活性土壤

    管冠+何天養(yǎng)+朱婧+姚鋒先+袁水秀

    摘要:通過平板計數(shù)法、比色法、Biolog Eco微平板分析法測定柑橘黃龍?。╟itrus huanglongbing,HLB)不同染病級別臍橙的土壤微生物種群數(shù)量、土壤酶活性及土壤微生物功能多樣性。結(jié)果表明,與健康的晚棱臍橙相比,在感染黃龍病前期其土壤生物學性質(zhì)的變化不大;在感染的中后期,由于根系在營養(yǎng)缺乏和病害的雙重影響下逐漸壞死,根系生態(tài)系統(tǒng)遭到破壞,晚棱臍橙土壤的微生物數(shù)量、土壤酶活性及土壤微生物功能多樣性均明顯下降。

    關(guān)鍵詞:柑橘黃龍?。悔M南臍橙;土壤;酶活性;微生物數(shù)量;微生物功能多樣性

    中圖分類號: S436.661.1+9 文獻標志碼: A 文章編號:1002-1302(2017)20-0162-03

    柑橘黃龍病是柑橘生產(chǎn)具有毀滅性的一種病害,堪稱柑橘的癌癥,一旦發(fā)病大多采用根除果樹的辦法防治,對產(chǎn)業(yè)發(fā)展發(fā)展危害極大[1]。由于黃龍病病原(韌皮部桿菌)的不可培養(yǎng)性,目前對于柑橘黃龍病的防治尚無特效藥劑,也沒有抗(耐)病品種可供應用[2]。黃龍病由木虱傳播侵染,病樹主要表現(xiàn)為葉片斑駁型黃化、均勻型黃化、缺素型黃化和“紅鼻子”果等癥狀[3-4]。一般認為,黃龍病病害癥狀的產(chǎn)生往往是其細胞、組織或器官受到某種破壞而變質(zhì)所致,同時也是葉片內(nèi)部礦質(zhì)營養(yǎng)元素供給失衡的外顯[5]。有研究表明,在黃龍病的典型癥狀——葉片斑駁黃化之前,根系就已經(jīng)被病菌入侵,從而導致根系養(yǎng)分吸收與輸送功能受損并逐步喪失正常功能,使得根際土壤微生物的生存環(huán)境發(fā)生變化,威脅柑橘植株根系土壤的生態(tài)穩(wěn)定,不利于土壤微生物的活動與土壤生物活性的維持[6-7]。

    土壤生物學的研究表明,作為土壤生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分,土壤微生物直接參與土壤營養(yǎng)物質(zhì)的礦化過程,在維持整個土壤生態(tài)系統(tǒng)能量流動和物質(zhì)循環(huán)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[8]。而土壤微生物多樣性則是指土壤微生物及其與環(huán)境形成的生態(tài)復合體以及與此相關(guān)的各種生態(tài)過程的總和,是果園土壤生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分,它代表著土壤微生物群落的穩(wěn)定性[9]。與土壤理化性質(zhì)相比,土壤微生物對于果樹根系環(huán)境的變化更為敏感,同時在其利用碳源的代謝過程中所產(chǎn)生的各種代謝產(chǎn)物與果樹根系分泌物一起參與果樹對土壤養(yǎng)分的吸收利用[10]?;钴S的土壤微生物活動是自然狀態(tài)下培肥土壤的重要途徑,并對土壤酶活性的增加具有積極影響,有助于維持果園土壤生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定以及果樹對土壤營養(yǎng)元素的吸收利用,同時也可以評估植物根系病害的狀況。

    本研究以感染柑橘黃龍病的晚熟臍橙品種晚棱為研究對象,以健康植株為對照,研究黃龍病侵染對晚熟臍橙果園土壤微生物數(shù)量、土壤酶活性及土壤微生物功能多樣性的影響,以探究贛南臍橙果園土壤生物學性質(zhì)對黃龍病的響應。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    材料為5年生晚棱臍橙葉片及果園土壤,試驗地位于江西省贛州市信豐縣嘉定鎮(zhèn),地理坐標為25°22′26 N,115°2′48 E,屬中亞熱帶季風濕潤氣候,日照充足,降雨較多,年均日氣溫19.2 ℃,年均降水量1 500 mm。于2016年12月,在果園中隨機選取各病情級別的病樹3株,從不同方向采集有癥狀的葉片帶回實驗室待測。土壤帶回實驗室后在自然狀況下風干,過2 mm篩保存待測。

    1.2 黃龍病的分級

    根據(jù)文獻報道及經(jīng)驗將存活的黃龍病侵染的病樹依病情分為5級[11-12]。0級:全樹無??;1級:樹上有1~2個梢有斑駁黃化葉出現(xiàn);2級:樹上部分側(cè)枝或主枝有斑駁黃化癥狀,癥狀枝占全樹的1/3及以下;3級:癥狀側(cè)枝或主枝占全樹的1/3以上和2/3以下;4級:癥狀枝在2/3及以上。

    1.3 分析方法

    黃龍病的檢測通過聚合酶鏈式反應(PCR)進行[3];土壤微生物數(shù)量測定:細菌數(shù)量采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板混菌法培養(yǎng)測定;真菌數(shù)量采用孟加拉紅培養(yǎng)基平板混菌法培養(yǎng)測定;放線菌數(shù)量采用高氏l號培養(yǎng)基平板混菌法培養(yǎng)測定[13]。土壤酶活性的測定:磷酸酶活性采用PNPP法測定[14],脲酶活性采用苯酚鈉比色法測定[14],蔗糖酶活性采用水楊酸比色法測定[15-16]。

    土壤微生物群落功能多樣性采用Biolog Eco微平板分析法測定,取10 g新鮮土壤加入100 mL滅菌的0.9% NaCl水溶液中,200 r/min振蕩10 min,將其稀釋至1 000倍后接種(150 μL),25 ℃下恒溫培養(yǎng)7 d,每隔24 h用多功能酶標儀在590 nm波長下讀數(shù),計算獲得平均顏色變化率(average well colourdevelopment,AWCD)[17]。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

    試驗測定數(shù)據(jù)采用Excel 2007進行整理,SigmaPlot 100作圖,采用SAS 8.0統(tǒng)計分析軟件進行方差分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 黃龍病的分子檢測

    從晚棱臍橙葉片黃龍病病原菌PCR檢測結(jié)果可以看出,未染病的0級健康樹體葉片上沒有擴增到目的條帶,而1~4級存活的黃龍病晚棱臍橙樹上所采集的斑駁黃化葉片均擴增得到 1 167 bp 的目的條帶(圖1)。結(jié)果表明,在試驗果園中,所采的黃龍病樹體從分子水平上可判定為已感染黃龍病病原菌,而所采無癥狀果樹則尚未感染黃龍病病原菌。

    2.2 黃龍病對晚棱臍橙果園土壤微生物種群數(shù)量的影響

    在本試驗中,與健康的晚棱臍橙土壤的細菌數(shù)量相比,黃龍病侵染中后期的晚棱臍橙土壤細菌數(shù)量均出現(xiàn)不同程度的減少(表1)。如3級和4級病害的晚棱臍橙土壤的細菌數(shù)量與健康植株(0級病害)土壤相比,均顯著減少;而1級病害的晚棱臍橙土壤細菌數(shù)量與健康植株則沒有顯著差別。晚棱臍橙果園土壤中的真菌數(shù)量在黃龍病感染后期下降明顯,即在3級和4級染病果樹土壤中真菌數(shù)量下降幅度明顯;而在黃龍病感染前期(1級,2級),與健康植株土壤相比,其土壤真菌數(shù)量變化不大。土壤放線菌數(shù)量在黃龍病感染的整個過程中雖然有小幅減少,但從統(tǒng)計分析上看差異未達到顯著水平。endprint

    2.3 黃龍病對晚棱臍橙果園土壤酶活性的影響

    在本試驗中所采土壤為掛果期果園果樹樹冠滴水線內(nèi) 0~20 cm表層土樣。黃龍病對晚棱臍橙果園土壤酶活性的影響如圖2所示。在本試驗中,與健康晚棱臍橙(0級病害)相比,在黃龍病感染的后期,3級和4級染病果樹的土壤蔗糖酶活性下降顯著,而在黃龍病感染果樹的前中期(1級、2級病害),土壤蔗糖酶活性并未發(fā)生顯著變化(圖2-a)。與土壤蔗糖酶活性類似,晚棱臍橙在黃龍病感染后,與健康植株相比,其土壤脲酶活性均發(fā)生了不同程度的下降。特別是在黃龍病感染后期,4級染病果樹的土壤脲酶活性相比健康植株(0級病害)土壤顯著下降(圖2-b)。在黃龍病侵染晚棱臍橙后,土壤酸性磷酸酶活性發(fā)生了不同程度的下降,表現(xiàn)出與前2種酶類似的變化趨勢(圖2-c)。在黃龍病感染前期(1級病害)土壤酸性磷酸酶活性沒有發(fā)生顯著下降,而在黃龍病感染中后期,土壤酸性磷酸酶活性的下降幅度明顯,其中4級病害晚棱臍橙的土壤酸性磷酸酶活性相比健康植株(0級病害)顯著下降。

    2.4 黃龍病對晚棱臍橙果園土壤微生物功能多樣性的影響

    平均顏色變化率(AWCD)反映了土壤微生物群落利用碳源的整體能力,能夠表征土壤微生物群落的整體代謝活性[18]。黃龍病對晚棱臍橙果園土壤微生物功能多樣性的影響如圖3所示,隨著培養(yǎng)時間的延續(xù),各處理的AWCD值均呈“S”形逐漸增加,符合微生物的生長規(guī)律。在培養(yǎng)的0~24 h,不同染病級別的土壤AWCD值較低,土壤微生物對于碳源的利用較少,代謝活性低。在培養(yǎng)24 h之后,不同染病級別的土壤AWCD值呈指數(shù)增長,一方面反映了微生物數(shù)量的增加,另外一方面表明土壤微生物在24 h后的代謝活性顯著提高。在培養(yǎng)后期(144~168 h),不同染病級別的土壤AWCD不再增加,表明土壤微生物活性趨于穩(wěn)定。AWCD與土壤酶活性的表現(xiàn)類似,在本試驗中,與健康晚棱臍橙(0級病害)相比,在黃龍病感染的后期(3級、4級染病果樹)土壤的AWCD值下降明顯,其中4級病害果樹土壤的AWCD值最低。而黃龍病感染前期(1級、2級病害)的晚棱臍橙土壤的AWCD值則沒有明顯差異。

    3 討論

    土壤微生物的生長需要利用土壤碳源,其代謝過程中釋放的多種次生代謝產(chǎn)物與臍橙根系分泌物互作,會在土壤根系附近形成復雜且穩(wěn)定的生態(tài)系統(tǒng),而土壤生物學性質(zhì)能夠有效地反映根系土壤生態(tài)環(huán)境的變化[19]。雖然黃龍病病原菌本身并不會直接污染臍橙土壤,但由于黃龍病危害,臍橙植株營養(yǎng)元素的離子流會發(fā)生變化,以致植株根系營養(yǎng)的供給失衡[20]。大量報道表明,在黃龍病侵染臍橙后,葉片和莖中會出現(xiàn)淀粉累積,根部淀粉被耗盡,以致根系表皮逐漸脫落、腐爛,繼而喪失其正常的生理功能[21-22]。同時,黃龍病病原菌的入侵導致根系功能逐步減弱,使得植物-土壤-微生物原有健康的根際生態(tài)遭到破壞。

    有研究表明,黃龍病病原菌在根部的定殖早于葉、莖,但在染病前期葉、莖部分可檢出的病原菌相對含量遠大于根[23-24]。在本試驗中,與健康臍橙相比,黃龍病感染初期土壤微生物數(shù)量沒有顯著變化,土壤細菌、真菌數(shù)量的顯著下降表現(xiàn)在黃龍病感染后期,而土壤酶活性及土壤微生物功能多樣性也呈現(xiàn)類似的特征。研究結(jié)果表明,在黃龍病感染臍橙初期,根系土壤生態(tài)環(huán)境并未立即遭到破壞。這可能是因為黃龍病病原菌主要寄生在韌皮部,早期被侵染的植物會自主地激活相應的防御體系如營養(yǎng)免疫等多種方式以抵抗病原菌的入侵,以保證根對土壤礦質(zhì)離子的吸收過程照常進行[25]。而在黃龍病感染后期,胼胝質(zhì)的積累堵塞了篩管運輸系統(tǒng)導致礦質(zhì)營養(yǎng)元素不能有效地運輸?shù)礁?,同時根系黃龍病病原菌的含量增加,導致根系在營養(yǎng)缺乏和病害的雙重影響下逐漸壞死,破壞原有的根系土壤生態(tài)環(huán)境。由于賴以生存的基礎(chǔ)環(huán)境發(fā)生變化和破壞,原有生存在根系土壤周圍的微生物數(shù)量開始減少,土壤微生物功能多樣性也隨之下降[26]。而幾種參與營養(yǎng)元素循環(huán)的土壤酶(蔗糖酶、脲酶、酸性磷酸酶)本身與土壤微生物代謝關(guān)系密切[27],在本試驗中呈現(xiàn)出與土壤微生物類似的變化特征也符合理論預期。

    4 結(jié)論

    晚棱臍橙感染黃龍病前期的土壤生物學性質(zhì)未發(fā)生顯著變化,而在感染的中后期,由于根系在營養(yǎng)缺乏和病害的雙重影響下逐漸壞死,根系生態(tài)系統(tǒng)遭到破壞,土壤的微生物數(shù)量、土壤酶活性及土壤微生物功能多樣性均明顯下降。研究結(jié)果表明,當晚棱臍橙黃龍病癥狀側(cè)枝或主枝占全樹的1/3以上時,其土壤生物學性質(zhì)顯著下降。

    參考文獻:

    [1]胡文召. 中國柑橘黃龍病病原及分化研究[D]. 重慶:西南大學,2010.

    [2]Tyler H L,Roesch L F,Gowda S,et al. Confirmation of the sequence of ‘Candidatus Liberibacter asiaticus and assessment of microbial diversity in Huanglongbing-infected citrus phloem using a metagenomic approach[J]. Molecular Plant-Microbe Interactions,2009,22(12):1624-1634.

    [3]蘇華楠. 中國柑橘黃龍病病原調(diào)查、種群遺傳分化及其原噬菌體溶菌酶蛋白原核表達[D]. 重慶:西南大學,2013.

    [4]許美容,陳燕玲,鄧曉玲. 柑橘黃龍病癥狀與“Candidatus Liberibacter asiaticus”PCR檢測結(jié)果的相關(guān)性分析[J]. 植物病理學報,2016,46(3):367-373.

    [5]曹繼容. 柑橘葉片離子組及其對黃龍病病原菌侵染的響應[D]. 重慶:西南大學,2014.

    [6]Johnson E G,Wu J,Bright D B,et al. Association of‘Candidatus Liberibacter asiaticusroot infection,but not phloem plugging with root loss on huanglongbing-affected trees prior to appearance of foliar symptoms[J]. Plant Pathology,2014,63(2):290-298.endprint

    [7]馬曉芳. 柑橘木虱轉(zhuǎn)錄組分析及與柑橘黃龍病病原菌互作的初步研究[D]. 杭州:浙江大學,2014.

    [8]賀紀正,王軍濤. 土壤微生物群落構(gòu)建理論與時空演變特征[J]. 生態(tài)學報,2015,35(20):6575-6583.

    [9]林先貴,胡君利. 土壤微生物多樣性的科學內(nèi)涵及其生態(tài)服務(wù)功能[J]. 土壤學報,2008,45(5):892-900.

    [10]管 冠,姚鋒先,劉桂東,等. 不同施肥年限對贛南臍橙果園土壤酶活性及微生物種群的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學,2016,44(2):382-385.

    [11]胡文召. 中國柑橘黃龍病病原及分化研究[D]. 重慶:西南大學,2010.

    [12]袁亦文,戈麗清,王德善,等. 柑橘黃龍病對柑橘產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學,2007(1):87-88.

    [13]Xu G H,Zheng H Y. Analytical handbook of Soil microbes[M]. Beijing:China Agriculture Press,1986.

    [14]邱現(xiàn)奎,董元杰,萬勇善,等. 不同施肥處理對土壤養(yǎng)分含量及土壤酶活性的影響[J]. 土壤,2010,42(2):249-255.

    [15]Tabatabai M A. Soil enzymes[M]//Wearer R W,Augle J S,Bottomley P S. Methods of soil analysis. Part2. Microbiological and biochemical properties properties. Madison,Wis.:SSSA,1994:775-883.

    [16]關(guān)松蔭. 土壤酶及其研究方法[M]. 北京:農(nóng)業(yè)出版社,1986.

    [17]Xue D,Yao H Y,Ge D Y,et al. Soil microbial community structure in diverse land use systems:a comparative study using biolog,DGGE,and PLFA analyses[J]. PEDOSPHERE,2008,18(5):653-663.

    [18]夏 昕,石 坤,黃欠如,等. 長期不同施肥條件下紅壤性水稻土微生物群落結(jié)構(gòu)的變化[J]. 土壤學報,2015(3):697-705.

    [19]Guan G,Tu S X,Li H L,et al. Phosphorus fertilization modes affect crop yield,nutrient uptake,and soil biological properties in the rice-wheat cropping system[J]. Soil Science Society of America Journal,2013,77(1):166-172.

    [20]高玉霞,盧占軍,劉志芳,等. 柑橘黃龍病診斷方法的研究進展[J]. 贛南師范學院學報,2013,34(3):37-40.

    [21]郭 恒. 基于碘-淀粉反應的柑橘黃龍病鑒定技術(shù)的研究[D]. 廣州:華南農(nóng)業(yè)大學,2009.

    [22]陳國慶,鹿連明,杜丹超,等. 柑橘黃龍病防控技術(shù)研究進展[J]. 浙江柑桔,2012(3):20-27.

    [23]黃愛軍. 韌皮部桿菌亞洲種簡單重復序列(SSR)多態(tài)性及其侵染甜橙后轉(zhuǎn)錄組學研究[D]. 重慶:西南大學,2014.

    [24]孫麗琴. 攜帶黃龍病菌的柑桔木虱內(nèi)生細菌菌群多樣性分析及功能驗證[D]. 重慶:重慶大學,2014.

    [25]樊 晶. 柑橘宿主對黃龍病病原菌侵染的應答機制[D]. 重慶:重慶大學,2010.

    [26]戴澤翰,許美容,鄧曉玲. 感染黃龍病菌的柑橘葉片解剖學研究[C]//中國植物病理學會. 中國植物病理學會2015年學術(shù)年會論文集.北京:中囯農(nóng)業(yè)出版社,2015.

    [27]李南潔,曾清蘋,何丙輝,等. 縉云山柑橘林土壤微生物磷脂脂肪酸(PLFAs)及酶活性的季節(jié)變化特征[J]. 環(huán)境科學,2017(1):309-317.endprint

    猜你喜歡
    酶活性土壤
    土壤
    土壤里種下“萬有引力”
    當代陜西(2021年10期)2021-07-16 07:04:26
    靈感的土壤
    學生天地(2020年34期)2020-06-09 05:50:36
    識破那些優(yōu)美“擺拍”——鏟除“四風”的土壤
    當代陜西(2019年11期)2019-06-24 03:40:26
    百香果總糖含量及抗氧化酶活性的測定研究
    靈感的土壤
    利用實驗教學培養(yǎng)學生的科學素養(yǎng)
    中學生物學(2016年6期)2016-07-04 10:48:21
    利用初榨草莓汁探究pH對果膠酶活性的影響
    中學生物學(2016年5期)2016-05-26 11:01:46
    木質(zhì)素降解酶系在畢赤酵母中的表達及降解木質(zhì)素的活性
    氮磷鉀配施比例對曬紅煙碳氮代謝關(guān)鍵酶活性及化學成分的影響
    在线观看免费高清a一片| 亚洲国产精品999| 一区福利在线观看| 久热爱精品视频在线9| 欧美成人午夜精品| 高清欧美精品videossex| 亚洲熟女毛片儿| 一级毛片精品| 国产日韩欧美视频二区| 国产日韩欧美亚洲二区| av线在线观看网站| h视频一区二区三区| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产精品.久久久| 国产成人精品无人区| tocl精华| 亚洲国产欧美在线一区| 丝袜美足系列| 亚洲中文字幕日韩| 新久久久久国产一级毛片| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国产欧美日韩一区二区三 | 国产色视频综合| 欧美精品一区二区大全| 操美女的视频在线观看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 午夜激情av网站| 亚洲熟女毛片儿| av天堂在线播放| 极品少妇高潮喷水抽搐| 成人影院久久| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 久久人妻福利社区极品人妻图片| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产精品1区2区在线观看. | 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 岛国毛片在线播放| 久久狼人影院| 国产在线视频一区二区| 色94色欧美一区二区| 高清黄色对白视频在线免费看| a级毛片在线看网站| 人人妻人人澡人人看| 多毛熟女@视频| 久久99热这里只频精品6学生| 色婷婷久久久亚洲欧美| 久久久精品区二区三区| 日韩电影二区| 日韩欧美免费精品| 国产欧美日韩一区二区精品| 男女高潮啪啪啪动态图| 无限看片的www在线观看| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲伊人色综图| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| tube8黄色片| 丰满少妇做爰视频| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲色图综合在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 国产精品九九99| 91大片在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产高清videossex| 美女高潮到喷水免费观看| 精品国产乱子伦一区二区三区 | 国产男女内射视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 成人国语在线视频| av片东京热男人的天堂| 夫妻午夜视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 丁香六月欧美| 一区二区三区乱码不卡18| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 美女午夜性视频免费| 成年动漫av网址| 免费高清在线观看日韩| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 午夜91福利影院| 亚洲伊人色综图| 国产免费现黄频在线看| 桃花免费在线播放| 精品福利观看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产av又大| 青青草视频在线视频观看| 亚洲精品在线美女| 亚洲中文av在线| 后天国语完整版免费观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产片内射在线| 秋霞在线观看毛片| 十八禁网站网址无遮挡| 99久久精品国产亚洲精品| 9191精品国产免费久久| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| cao死你这个sao货| 成年女人毛片免费观看观看9 | 操美女的视频在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 国产欧美亚洲国产| 亚洲av日韩在线播放| 免费观看a级毛片全部| 老司机午夜福利在线观看视频 | 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产伦理片在线播放av一区| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲av国产av综合av卡| 欧美黄色淫秽网站| 一区二区三区四区激情视频| 欧美性长视频在线观看| 欧美午夜高清在线| 一进一出抽搐动态| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲第一av免费看| a在线观看视频网站| 一级毛片女人18水好多| 亚洲少妇的诱惑av| 丝袜人妻中文字幕| 99国产精品99久久久久| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲色图综合在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 日韩人妻精品一区2区三区| 黑人猛操日本美女一级片| 另类精品久久| 亚洲九九香蕉| av一本久久久久| 动漫黄色视频在线观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 精品一区在线观看国产| 91字幕亚洲| 精品国产乱码久久久久久男人| 午夜激情久久久久久久| 不卡一级毛片| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 久热爱精品视频在线9| 十八禁网站免费在线| 精品国产一区二区久久| 久久久久国产精品人妻一区二区| 女人久久www免费人成看片| 亚洲精品乱久久久久久| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产精品.久久久| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产在线观看jvid| videosex国产| 老司机福利观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 在线天堂中文资源库| 日本vs欧美在线观看视频| 不卡av一区二区三区| 午夜免费观看性视频| 国产精品偷伦视频观看了| 丁香六月欧美| 国产精品久久久人人做人人爽| 欧美精品一区二区免费开放| 一本大道久久a久久精品| 在线永久观看黄色视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 9热在线视频观看99| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产成人欧美在线观看 | 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产一卡二卡三卡精品| 桃花免费在线播放| 国产精品一二三区在线看| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 在线 av 中文字幕| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 成年女人毛片免费观看观看9 | 黄色怎么调成土黄色| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 最黄视频免费看| 成在线人永久免费视频| 亚洲精品第二区| 在线永久观看黄色视频| 久久精品亚洲av国产电影网| 欧美一级毛片孕妇| 丰满少妇做爰视频| 亚洲全国av大片| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 伦理电影免费视频| 在线 av 中文字幕| 热99久久久久精品小说推荐| 嫁个100分男人电影在线观看| 久久这里只有精品19| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 精品少妇久久久久久888优播| 日本av手机在线免费观看| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 久久99热这里只频精品6学生| 成人av一区二区三区在线看 | 窝窝影院91人妻| 精品亚洲乱码少妇综合久久| www.av在线官网国产| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产精品免费大片| 一区二区三区乱码不卡18| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲国产精品一区三区| 搡老熟女国产l中国老女人| av线在线观看网站| 美女高潮到喷水免费观看| tocl精华| 黑人欧美特级aaaaaa片| 午夜激情av网站| av欧美777| 黄色视频不卡| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 成人影院久久| 热re99久久精品国产66热6| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日韩电影二区| 中亚洲国语对白在线视频| 欧美精品av麻豆av| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产三级黄色录像| 日韩有码中文字幕| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 久久亚洲国产成人精品v| 香蕉国产在线看| 69av精品久久久久久 | 成人av一区二区三区在线看 | 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产精品一区二区免费欧美 | videosex国产| 这个男人来自地球电影免费观看| 中文欧美无线码| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产激情久久老熟女| 久久精品国产综合久久久| 手机成人av网站| 一区二区三区激情视频| 他把我摸到了高潮在线观看 | 老司机靠b影院| 婷婷色av中文字幕| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 老熟女久久久| 日韩三级视频一区二区三区| 国产精品av久久久久免费| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 高潮久久久久久久久久久不卡| 99久久人妻综合| 电影成人av| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 精品久久蜜臀av无| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 日韩 亚洲 欧美在线| 激情视频va一区二区三区| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 亚洲天堂av无毛| 一本色道久久久久久精品综合| 91精品国产国语对白视频| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 成在线人永久免费视频| 国产国语露脸激情在线看| 精品国内亚洲2022精品成人 | 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产极品粉嫩免费观看在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产免费一区二区三区四区乱码| 少妇 在线观看| 99久久人妻综合| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 满18在线观看网站| 久久久国产成人免费| 成年女人毛片免费观看观看9 | 妹子高潮喷水视频| 99国产精品免费福利视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 一级毛片电影观看| 老熟女久久久| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 正在播放国产对白刺激| 动漫黄色视频在线观看| 天天添夜夜摸| 亚洲国产中文字幕在线视频| 婷婷色av中文字幕| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲欧美一区二区三区久久| a级毛片黄视频| 国产伦理片在线播放av一区| 国产一区二区在线观看av| www日本在线高清视频| 欧美黄色片欧美黄色片| 女警被强在线播放| 亚洲国产精品成人久久小说| 人妻一区二区av| 少妇人妻久久综合中文| 国产精品久久久久久精品电影小说| 亚洲,欧美精品.| 日本wwww免费看| a 毛片基地| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 日本vs欧美在线观看视频| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 亚洲国产精品999| 一区二区av电影网| 精品福利观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 欧美黄色片欧美黄色片| 日本vs欧美在线观看视频| 国产视频一区二区在线看| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产高清国产精品国产三级| 丁香六月天网| 免费高清在线观看视频在线观看| 丁香六月欧美| 国产不卡av网站在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 我要看黄色一级片免费的| 欧美在线黄色| 视频区欧美日本亚洲| 少妇人妻久久综合中文| 性色av一级| 日韩视频在线欧美| 亚洲黑人精品在线| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 99久久99久久久精品蜜桃| 一个人免费看片子| 中亚洲国语对白在线视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产成人欧美| 欧美精品一区二区大全| 国产1区2区3区精品| 久久亚洲精品不卡| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美日韩黄片免| 亚洲av欧美aⅴ国产| 正在播放国产对白刺激| 丝瓜视频免费看黄片| 1024视频免费在线观看| 亚洲精品国产av成人精品| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产男人的电影天堂91| 黄色怎么调成土黄色| 99国产极品粉嫩在线观看| 这个男人来自地球电影免费观看| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 亚洲第一青青草原| 亚洲免费av在线视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产成人免费无遮挡视频| 国产免费av片在线观看野外av| 午夜精品久久久久久毛片777| av电影中文网址| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产男女内射视频| 老熟女久久久| 久9热在线精品视频| 久久久久网色| 老司机影院毛片| 免费在线观看日本一区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久精品成人免费网站| 亚洲中文日韩欧美视频| 久久久久精品人妻al黑| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 视频区图区小说| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 19禁男女啪啪无遮挡网站| √禁漫天堂资源中文www| 99九九在线精品视频| 久久久欧美国产精品| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 国产亚洲欧美精品永久| 午夜91福利影院| 高清视频免费观看一区二区| 777米奇影视久久| av不卡在线播放| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 精品国产一区二区久久| 婷婷成人精品国产| 最近最新免费中文字幕在线| 无限看片的www在线观看| 国产91精品成人一区二区三区 | 久久精品国产a三级三级三级| 日本五十路高清| 丝袜美腿诱惑在线| 国产97色在线日韩免费| 欧美日韩av久久| 91成年电影在线观看| 成人三级做爰电影| 亚洲全国av大片| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 成人国产一区最新在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久亚洲精品不卡| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲中文av在线| av网站在线播放免费| 亚洲国产精品成人久久小说| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久精品国产亚洲av高清一级| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 老汉色∧v一级毛片| 最近最新免费中文字幕在线| 高清av免费在线| 国产成人免费无遮挡视频| 国产av一区二区精品久久| 男女边摸边吃奶| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久久久久久精品精品| 妹子高潮喷水视频| 男女之事视频高清在线观看| 久久 成人 亚洲| 亚洲 国产 在线| 中亚洲国语对白在线视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲人成电影免费在线| 国产视频一区二区在线看| 国产精品av久久久久免费| 桃花免费在线播放| 激情视频va一区二区三区| cao死你这个sao货| 精品国内亚洲2022精品成人 | 亚洲精品中文字幕一二三四区 | a级毛片黄视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产免费一区二区三区四区乱码| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲avbb在线观看| 少妇精品久久久久久久| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 黄色怎么调成土黄色| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 首页视频小说图片口味搜索| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 免费在线观看完整版高清| 日本vs欧美在线观看视频| 久久久久久人人人人人| 久久九九热精品免费| 国产精品一区二区精品视频观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产又爽黄色视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 国产99久久九九免费精品| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产男女内射视频| avwww免费| av一本久久久久| 两个人免费观看高清视频| 国产男女内射视频| 一个人免费看片子| 老司机午夜十八禁免费视频| 午夜精品国产一区二区电影| 国产色视频综合| 久久国产精品影院| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产成人啪精品午夜网站| 麻豆乱淫一区二区| a在线观看视频网站| 热re99久久精品国产66热6| 成人手机av| 一区二区三区激情视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产亚洲一区二区精品| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 国产主播在线观看一区二区| 美女午夜性视频免费| tocl精华| 久久久久久免费高清国产稀缺| 亚洲一区二区三区欧美精品| 又紧又爽又黄一区二区| av网站免费在线观看视频| 超碰成人久久| 午夜福利在线免费观看网站| av在线播放精品| 国产免费现黄频在线看| 大片免费播放器 马上看| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 人妻一区二区av| 国产高清国产精品国产三级| 一区二区日韩欧美中文字幕| 久久久久国产一级毛片高清牌| 美女视频免费永久观看网站| 精品一品国产午夜福利视频| 国产一区二区在线观看av| videos熟女内射| 午夜激情久久久久久久| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产精品一区二区免费欧美 | 777米奇影视久久| 考比视频在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 久久国产精品大桥未久av| 一区二区三区乱码不卡18| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美激情久久久久久爽电影 | 日本欧美视频一区| 多毛熟女@视频| 国产91精品成人一区二区三区 | 欧美人与性动交α欧美软件| 欧美在线一区亚洲| 秋霞在线观看毛片| 国产欧美日韩一区二区精品| 乱人伦中国视频| 欧美一级毛片孕妇| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产高清videossex| 国产精品二区激情视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 老熟妇仑乱视频hdxx| 最新在线观看一区二区三区| 美女午夜性视频免费| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 大香蕉久久成人网| 欧美亚洲日本最大视频资源| 视频区图区小说| 在线观看人妻少妇| 亚洲综合色网址| 久热这里只有精品99| 久久热在线av| 91精品三级在线观看| 男男h啪啪无遮挡| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 不卡av一区二区三区| 久久免费观看电影| 在线观看www视频免费| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲国产av新网站| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲成国产人片在线观看| 国产又色又爽无遮挡免| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 女性生殖器流出的白浆| 99国产精品一区二区三区| 一级,二级,三级黄色视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 午夜精品久久久久久毛片777| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲免费av在线视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲国产av新网站| 午夜免费成人在线视频| 亚洲精品乱久久久久久| 日韩欧美一区视频在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频 | 亚洲成人免费电影在线观看| 一区在线观看完整版| 日本五十路高清| 国产亚洲欧美精品永久| 日韩电影二区| 国产高清国产精品国产三级| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 久久久久精品国产欧美久久久 | 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲三区欧美一区| 久久久国产成人免费| 国产精品免费大片| 欧美日韩av久久| 亚洲av国产av综合av卡| 老汉色∧v一级毛片| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美97在线视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产欧美亚洲国产| 亚洲av成人一区二区三| 啪啪无遮挡十八禁网站| 999久久久国产精品视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 精品乱码久久久久久99久播| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲人成电影观看| 国产在线一区二区三区精|