茉莉酸甲酯對(duì)高溫脅迫、生物蠶食無(wú)花果幼苗的影響

郭正兵+韓柏明+郭強(qiáng)

摘要：以波姬紅無(wú)花果為試材，40 ℃高溫脅迫經(jīng)茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗，分析與抗逆相關(guān)的超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、茉莉酸合成路徑中脂氧合酶（LOX）活性變化及丙二醛、脯氨酸、多酚含量，同時(shí)，采用黑絨金龜蠶食傷害經(jīng)茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗，分析與生物脅迫相關(guān)的多酚氧化酶（PPO）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性變化及單寧、胰蛋白酶抑制素含量。結(jié)果表明，高溫脅迫經(jīng)50 μmol/L茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗，其SOD、POD、CAT活性與未用茉莉酸甲酯處理（對(duì)照）相比有顯著增加，脯氨酸、多酚含量提高，丙二醛含量降低；生物蠶食經(jīng)50 μmol/L茉莉酸甲酯處理的幼苗葉片，其PPO、PAL活性增加，單寧、胰蛋白酶抑制素含量提高。經(jīng)茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗，高溫脅迫、生物蠶食能通過(guò)增加SOD、POD、CAT活性抵御非生物逆境的脅迫，通過(guò)提高PPO、PAL活性增強(qiáng)對(duì)生物脅迫的抗性。

關(guān)鍵詞：無(wú)花果；抗逆；茉莉酸甲酯；超氧化物歧化酶；過(guò)氧化物酶；多酚氧化酶；高溫脅迫；生物蠶食

中圖分類號(hào)： S663.301 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2017）20-0138-06

無(wú)花果（Ficus carica L.）為?？崎艑俣嗄晟淙~灌木或小喬木，原產(chǎn)于亞洲西部，目前我國(guó)各地均有栽培，尤以新疆維吾爾自治區(qū)南部、廣東、福建沿海地區(qū)、江浙一帶及膠東半島栽培較多，北京以南的內(nèi)陸地區(qū)近些年無(wú)花果栽培面積也迅速增加，北京以北地區(qū)因天氣寒冷，若栽培無(wú)花果須采用溫室大棚等設(shè)施進(jìn)行越冬。無(wú)花果栽培面積的不斷擴(kuò)大導(dǎo)致需苗量越來(lái)越大，而植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑研究應(yīng)用可為無(wú)花果的廣泛栽培提供理論指導(dǎo)[1]。

茉莉酸甲酯（MeJA）是通過(guò)硬脂酸途徑產(chǎn)生的脂肪酸衍生物，廣泛存在于各類植物中[2]。當(dāng)植物受到創(chuàng)傷、昆蟲(chóng)咬食或病原菌侵染等引發(fā)局部及系統(tǒng)性的傷害信號(hào)時(shí)，會(huì)產(chǎn)生茉莉酸甲酯等茉莉酸類物質(zhì)，進(jìn)而提高植物本身的抗性[3]。茉莉酸甲酯對(duì)植物的調(diào)節(jié)作用主要體現(xiàn)在2個(gè)方面：一是調(diào)節(jié)植物種子萌發(fā)、花粉發(fā)育、衰老等生長(zhǎng)發(fā)育，二是調(diào)節(jié)植物傷害應(yīng)答、抵抗病原菌侵襲等防御系統(tǒng)，并在轉(zhuǎn)錄水平上影響植物次生代謝[4]。茉莉酸類物質(zhì)誘導(dǎo)植物次生代謝物含量的增加，主要是以信號(hào)分子的形式參與到植物次生代謝過(guò)程中，調(diào)控相關(guān)關(guān)鍵酶基因的表達(dá)，影響關(guān)鍵酶活性，從而對(duì)次生代謝物的產(chǎn)生進(jìn)行調(diào)控[5]，茉莉酸類物質(zhì)在植物抵御逆境脅迫上起著關(guān)鍵作用。本研究利用茉莉酸甲酯處理經(jīng)高溫脅迫、生物蠶食的無(wú)花果幼苗葉片，進(jìn)行抗逆酶活性分析，為茉莉酸甲酯在無(wú)花果中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用外植體為波姬紅無(wú)花果幼嫩枝條，2014年3月采自江蘇省句容市江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院。試驗(yàn)用試劑為 6-芐基腺嘌呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）、赤霉素（GA）、2% NaClO、0.1% HgCl2、75%乙醇、蔗糖、瓊脂、MS培養(yǎng)基等。茉莉酸甲酯用適量的無(wú)水乙醇溶解，加入Tween-80乳化，并用蒸餾水定容，使Tween-80終濃度為1%。

1.2 無(wú)花果幼苗的擴(kuò)繁

將無(wú)花果幼嫩枝條莖段接種培養(yǎng)30 d，將初始培養(yǎng)基上分化、生長(zhǎng)健壯的芽切下，接種于MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+瓊脂8.0 g/L（pH值5.8）的壯苗培養(yǎng)基上培養(yǎng)30 d，再將生長(zhǎng)健壯的無(wú)花果組培苗接入生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為溫度25 ℃、光照度2 000 lx、光照時(shí)間14 h/d。

1.3 無(wú)花果幼苗的移植與試驗(yàn)處理

將無(wú)菌的波姬紅無(wú)花果組培苗移栽到裝有營(yíng)養(yǎng)土 ∶ 蛭石為1 ∶ 1的營(yíng)養(yǎng)缽中，選取4葉株齡的高度、長(zhǎng)勢(shì)、葉色基本一致的幼苗置于培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)1周，溫度為25 ℃、光照度為 2 000 lx、光照時(shí)間為14 h/d、相對(duì)濕度為70%～80%，其間正常澆水；采用50 μmol/L茉莉酸甲酯溶液均勻噴施無(wú)花果幼苗的葉表面和葉背，至藥液欲滴為度，以噴施相同濃度乙醇和Tween-80、不含茉莉酸甲酯的水溶液為對(duì)照，光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)1 d。一部分幼苗于40 ℃高溫脅迫1 d，取出，置于適宜環(huán)境中自然生長(zhǎng)，并在脅迫前（0 d）及脅迫后、1、2、3、4 d 采集葉樣；另一部分幼苗用黑絨金龜蠶食葉片進(jìn)行生物脅迫，分別于處理后0、1、2、3、4 d采集葉樣，重復(fù)4次，每重復(fù)12株苗。葉片洗凈，用蒸餾水沖洗，吸水紙吸干，去除粗大的主葉脈，待測(cè)。

1.4 生理指標(biāo)的測(cè)定

1.4.1 丙二醛 參照孔祥生等的方法[6]采用硫代巴比妥酸（TBA）法測(cè)定丙二醛含量：吸取離心的上清液2 mL（對(duì)照為 2 mL 蒸餾水）于試管中，加入2 mL 0.6% TBA溶液，搖勻；沸水浴煮沸，自試管內(nèi)溶液出現(xiàn)小氣泡開(kāi)始計(jì)時(shí)，約10 min；取出試管，冷卻，3 000 r/min離心15 min；取上清液并測(cè)量體積，以0.6% TBA溶液為空白，分別測(cè)定波長(zhǎng)為450、532、600 nm處的吸光度。

1.4.2 脯氨酸 參照李合生的方法[7]采用茚三酮法測(cè)定脯氨酸含量：準(zhǔn)確吸取葉片提取液移入試管中，加水補(bǔ)足體積到1 mL；分別加入0.25 mL甲酸、1.0 mL茚三酮-乙二醇甲醚溶液，沸水中加熱15 min；取出，移入70 ℃恒溫水浴鍋中繼續(xù)發(fā)色10 min，加入5 mL異丙醇溶液，靜置5 min；測(cè)定波長(zhǎng) 510 nm 處吸光度，利用脯氨酸濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算脯氨酸含量。

1.4.3 多酚 參照卜彥花等的方法[8]測(cè)定無(wú)花果葉片多酚含量。

1.4.4 單寧 采用香草醛法[9]測(cè)定單寧含量：稱取葉片 0.2 g，剪碎，浸入25 mL甲醇中提取2 h；取上清液，添加4%香草醛、甲醇溶液各2.0 mL，鹽酸1.0 mL，混合，30 ℃水浴 20 min；室溫下用分光光度計(jì)測(cè)定波長(zhǎng)為510 nm處的吸光度，并以不同濃度單寧酸為標(biāo)樣繪制單寧濃度與吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算單寧含量，單位為mg/g。endprint

1.4.5 胰蛋白酶抑制素[10] 準(zhǔn)確稱取葉片0.2 g，加入4 mL含7%聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、1.67 mmol/L苯硫脲、0.3 mol/L KCl、0.4 mmol/L維生素C（抗壞血酸）的Tris-HCl緩沖液（50 mmol/L，pH值7.8），研磨成勻漿；13 000 r/min 4 ℃離心10 min；取上清液，測(cè)定胰凝乳蛋白酶含量，測(cè)定時(shí)，先在含有0. 001 5 mg胰凝乳蛋白酶的 1.0 mmol/L HCl溶液中加入等量提取液混合反應(yīng)10 min，再取100 μL混合液與2.9 mL含有0.5 mmol /L N-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯（BTEE）的甲醇-磷酸緩沖液（pH值8.0）混勻，以BTEE和胰凝乳蛋白酶作對(duì)照，于波長(zhǎng)256 nm處測(cè)定10 min內(nèi)吸光度的變化值，單位時(shí)間內(nèi)吸光度變化0.01代表生成1個(gè)單位胰蛋白酶抑制素，用U/g表示。

1.5 抗氧化酶活性的測(cè)定

稱取0.5 g無(wú)花果葉片置于研缽內(nèi)，加入少量經(jīng)預(yù)冷的50 mmol/L含1% PVP、pH值為7.8的磷酸緩沖液，冰浴研磨；勻漿移入離心管，并用相應(yīng)的磷酸緩沖液分2次沖洗研缽，并移入離心管，使提取液的終體積為5 mL；提取液于冷凍離心機(jī)內(nèi)11 000 r/min 4 ℃離心20 min；取上清液，測(cè)定酶的活性，測(cè)定溫度為25 ℃。

1.5.1 苯丙氨酸解氨酶（PAL） 參照鄒志燕等的方法[11]測(cè)定PAL活性：在2.80 mL含20 mmol/L L-苯丙氨酸的硼酸緩沖液（0.2 mol/L，pH值8.8）中加入20 μL酶提取液，混勻，于波長(zhǎng)290 nm處測(cè)定2 min內(nèi)吸光度的變化，以1 min吸光度變化0.01表示1個(gè)酶活力單位，用U/（g·min）表示。

1.5.2 多酚氧化酶（PPO） 以鄰苯二酚為底物，參照宮玉艷等的方法[12]測(cè)定PPO活性：在2.9 mL含0.02 mol/L鄰苯二酚的磷酸緩沖液（0.2 mol/L，pH值7.4）中加入100 μL酶提取液，混勻，于波長(zhǎng)420 nm處測(cè)定2 min內(nèi)吸光度的變化，以1 min吸光度變化0.01表示1個(gè)酶活力單位，用U/（g·min）表示。

1.5.3 過(guò)氧化物酶（POD） 以愈創(chuàng)木酚為底物，參照鄭炳松的方法[13]測(cè)定POD活性：在2.99 mL含0.2%愈創(chuàng)木酚和0.3% H2O2的磷酸緩沖液（0.05 mol/L，pH值7.4）中加入 10 μL 酶提取液，混勻，于波長(zhǎng)470 nm處測(cè)定3 min內(nèi)吸光度的變化，以1 min吸光度變化0.1表示1個(gè)酶活力單位，用 U/（g·min） 表示。

1.5.4 過(guò)氧化氫酶（CAT） 參照孔祥生等的方法[6]測(cè)定CAT活性：在含0.3% H2O2的磷酸緩沖液（0.05 mol/L，pH值7.0）中加入20 μL酶提取液，混勻，于波長(zhǎng)240 nm處測(cè)定2 min內(nèi)吸光度的變化，以1 min吸光度變化0.1表示1個(gè)酶活力單位，用U/（g·min）表示。

1.5.5 超氧化物歧化酶（SOD） 采用鄰苯三酚自氧化法[7]測(cè)定SOD活性：將待測(cè)酶提取液加入到緩沖液中，混勻；加入鄰苯三酚，迅速混勻，快速倒入石英比色杯中，25 ℃恒溫池中于波長(zhǎng)325 nm處連續(xù)測(cè)定2 min內(nèi)吸光度變化，以1 mL反應(yīng)液中1 min抑制鄰苯三酚自氧化速率達(dá)50%的酶量定義為1個(gè)酶活力單位。

1.5.6 脂氧合酶（LOX）[14] 在含25 μL油酸鈉母液、2 900 μL 磷酸緩沖液的溶液中加入75 μL粗酶液，以磷酸緩沖液為空白對(duì)照，25 ℃恒溫池中于波長(zhǎng)234 nm處測(cè)定吸光度，加酶液后30 s開(kāi)始計(jì)時(shí)，每隔15 s測(cè)1次吸光度，共測(cè)量6次，以1 g樣品1 min吸光度增加0.01為1個(gè)LOX酶活力單位。重復(fù)3次。

1.5.7 DPPH自由基清除率和總還原力測(cè)定 （1）DPPH自由基清除率的測(cè)定。在10 mL比色管中依次加入4.0 mL DPPH溶液和黃酮提取液，再加入無(wú)水乙醇至刻度，混勻立即用1 cm比色皿在517 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度，記為Di；再在溫室避光保存30 min后測(cè)吸光度，記為Dj；對(duì)照試驗(yàn)為只加DPPH的乙醇溶液，其吸光度記為Dc。按下式計(jì)算自由基清除率（K）：K=[1-（Di-Dj）/Dc]×100%。（2）總還原力的測(cè)定。在10 mL離心管中分別加入0.2 mol/L的pH值為6.6的磷酸緩沖液2.5 mL和樣品溶液1 mL，加入2.5 mL 1%鐵氰化鉀，混合均勻后于50℃反應(yīng)20 min。取出后加入2.5 mL 10%三氯乙酸終止反應(yīng)，5 000 r/min離心10 min。取上清液2.5 mL，加入2.5 mL蒸餾水和0.5 mL FeCl3，混勻后靜置 10 min，在700 nm處檢測(cè)吸光度。以維生素C作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.6 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Spsspasw Statistics 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，采用Duncans法進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 茉莉酸甲酯處理對(duì)高溫脅迫無(wú)花果幼苗植株的影響

50 μmol/L茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)40 ℃高溫脅迫1 d，并在適宜環(huán)境中自然生長(zhǎng)3個(gè)月，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，所有的植株都受到不同程度的高溫脅迫影響，傷害輕微的植株的葉片出現(xiàn)零星褐色斑點(diǎn)或局部小面積壞死斑塊，傷害嚴(yán)重的植株的葉片慢慢枯萎脫落，生長(zhǎng)點(diǎn)壞死，但植株未見(jiàn)死亡，仍可從莖基部萌發(fā)側(cè)芽，恢復(fù)生長(zhǎng)；茉莉酸甲酯處理的植株恢復(fù)生長(zhǎng)相對(duì)較快，葉片相對(duì)較大。由表1可見(jiàn)，未噴施茉莉酸甲酯（對(duì)照）處理的植株傷害相對(duì)較重，嚴(yán)重受害植株占比、葉片死亡率分別為60%、20%，而茉莉酸甲酯處理的嚴(yán)重受害植株占比、葉片死亡率分別僅為25%、5%。

2.2 茉莉酸甲酯處理對(duì)高溫脅迫無(wú)花果葉片丙二醛、脯氨酸、多酚含量的影響endprint

2.2.1 丙二醛 由圖1可見(jiàn)，與對(duì)照相比，噴施50 μmol/L茉莉酸甲酯的無(wú)花果，其葉片丙二醛含量有顯著降低（P<0.05）；脅迫處理第1 d采樣，無(wú)花果葉片丙二醛含量較脅迫當(dāng)天采樣（0 d）有所上升，后呈緩慢下降態(tài)勢(shì)。

2.2.2 脯氨酸 由圖2可見(jiàn)，與丙二醛相反，噴施50 μmol/L茉莉酸甲酯的無(wú)花果，其葉片脯氨酸含量顯著高于對(duì)照（P<0.05）；脯氨酸含量變化趨勢(shì)與丙二醛也有所不同，對(duì)照與噴施茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果，其葉片脯氨酸含量在第1～3 d采樣時(shí)呈上升態(tài)勢(shì)，第4 d略有下降。

2.2.3 多酚 由表2可見(jiàn)，茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)高溫脅迫，其葉片總酚含量迅速升高，顯著高于對(duì)照（P<0.05），其中沒(méi)食子酸、咖啡酸、原兒茶酸、龍膽酸、丁香酸、p-香豆酸的含量在第3 d采樣時(shí)相對(duì)最高，均顯著高于對(duì)照（P<0.05），無(wú)花果幼苗通過(guò)促進(jìn)葉片多酚的合成以抵御逆境脅迫；對(duì)照植株經(jīng)高溫脅迫處理，沒(méi)食子酸、咖啡酸、原兒茶酸、龍膽酸、丁香酸、p-香豆酸、總酚含量低于同期茉莉酸甲酯處理的植株。

2.3 茉莉酸甲酯處理對(duì)高溫脅迫無(wú)花果葉片抗氧化酶活性的影響

2.3.1 LOX 茉莉酸是植物進(jìn)行抗逆的一種重要激素，LOX是茉莉酸合成路徑中的第一個(gè)關(guān)鍵酶，且茉莉酸具有自我激活合成路徑的作用，外源茉莉酸的噴施能促進(jìn)內(nèi)源茉莉酸的合成，而LOX活性的高低可反映內(nèi)源茉莉酸的含量大小。由圖3可見(jiàn)，茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)高溫脅迫，其葉片LOX活性在1～3 d采樣時(shí)呈上升態(tài)勢(shì)，4 d時(shí)略有下降，其中，第2～3 d采樣的葉片LOX活性顯著高于對(duì)照處理（P<0.05）；對(duì)照葉片的LOX活性呈緩慢上升趨勢(shì)，變化相對(duì)較小。

2.3.2 SOD 由圖4可見(jiàn)，茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)高溫脅迫，其葉片SOD活性在1～3 d采樣時(shí)呈上升態(tài)勢(shì)，4 d時(shí)略有下降，其中，2～4 d采樣的葉片SOD活性顯著高于對(duì)照處理（P<0.05）；對(duì)照處理的無(wú)花果葉片其SOD活性在 1 d 采樣時(shí)含量上升，后逐漸下降。

2.3.3 CAT 由圖5可見(jiàn)，茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)高溫脅迫，其葉片CAT活性在1～2 d采樣時(shí)上升，3～4 d 呈下降態(tài)勢(shì)，其中，1～4 d采樣的葉片CAT活性顯著高于對(duì)照處理（P<0.05）；對(duì)照處理的葉片CAT活性變化趨勢(shì)與茉莉酸甲酯處理一致，呈先升后降態(tài)勢(shì)。

2.3.4 POD 由圖6可見(jiàn)，茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)高溫脅迫，其葉片POD活性變化趨勢(shì)與CAT一致，在1～2 d 采樣時(shí)上升，3～4 d下降，其中，1～4 d采樣的葉片POD活性顯著高于對(duì)照處理（P<0.05）；對(duì)照處理的葉片POD活性呈先升后降態(tài)勢(shì)。

2.3.5 DPPH自由基的清除和總還原力 由圖7、圖8可見(jiàn)，茉莉酸甲酯和對(duì)照處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)高溫脅迫，其植株DPPH自由基清除率、總還原力隨采樣時(shí)期的延長(zhǎng)呈先升后降趨勢(shì)，這可能與高溫脅迫后酚酸、沒(méi)食子酸、總酚含量的變化相關(guān)；50 μmol/L茉莉酸甲酯處理的植株DPPH自由基清除率和總還原力在2～4 d采樣時(shí)均顯著高于對(duì)照（P<0.05）。

2.4 茉莉酸甲酯處理對(duì)生物脅迫無(wú)花果葉片抗性物質(zhì)的影響

2.4.1 單寧 利用黑絨金龜蠶食經(jīng)茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果葉片，對(duì)其進(jìn)行生物脅迫，結(jié)果（表9）表明，葉片單寧含量在1～2 d采樣時(shí)上升，3～4 d下降，其中，1～4 d采樣的葉片POD活性顯著高于對(duì)照處理（P<0.05）；對(duì)照葉片單寧含量變化趨勢(shì)與茉莉酸甲酯處理的一致。

2.4.2 胰蛋白酶抑制素 由圖10可見(jiàn)，茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)生物脅迫，其葉片胰蛋白酶抑制素含量變化趨勢(shì)與單寧一致，在1～2 d采樣時(shí)上升，3～4 d下降，其中，1～3 d采樣的葉片胰蛋白酶抑制素含量顯著高于對(duì)照處理（P<0.05）；對(duì)照處理的葉片胰蛋白酶抑制素也呈先升后降態(tài)勢(shì)。

2.5 茉莉酸甲酯處理對(duì)生物脅迫無(wú)花果葉片抗性酶活性的影響

由圖11、圖12可見(jiàn)，茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果幼苗經(jīng)生物脅迫，其葉片苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）活性在1～3 d采樣時(shí)有明顯上升，且顯著高于對(duì)照（P<0.05），在4 d采樣時(shí)雖有明顯下降，但與對(duì)照相比差異顯著（P<0.05）。

2.6 茉莉酸甲酯處理對(duì)高溫、生物脅迫無(wú)花果葉片內(nèi)源茉莉酸含量的影響

茉莉酸在植物抗逆方面起著重要的作用。由圖13可見(jiàn)，無(wú)論是高溫處理（4 d）后還是生物蠶食（4 d）后，茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果葉片的茉莉酸含量明顯高于對(duì)照，這可能是因?yàn)橛密岳蛩峒柞ヌ幚砟艽碳ぶ参矬w內(nèi)茉莉酸的合成，進(jìn)而來(lái)應(yīng)答外界環(huán)境的脅迫。

3 結(jié)論與討論

植物在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中必須不斷進(jìn)行生理代謝來(lái)應(yīng)對(duì)外界生物和非生物脅迫環(huán)境以維持生存，而防御因子是調(diào)控植物生長(zhǎng)及繁殖最重要的一個(gè)因子，可應(yīng)對(duì)外來(lái)的非生物和生物脅迫[15-16]。植物激素在調(diào)節(jié)植物代謝應(yīng)答逆境脅迫方面起著關(guān)鍵的作用，主要有茉莉酸（JA）、水楊酸、乙烯3種激素[17]。茉莉酸是一種重要的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，在調(diào)控植物種子萌發(fā)、根伸長(zhǎng)、胚胎發(fā)育、性別決定、幼苗發(fā)育、塊莖形成、果實(shí)成熟、葉片衰老等生長(zhǎng)發(fā)育方面起著重要的作用[18-20]，尤其在植物干旱、鹽脅迫、高溫等逆境脅迫應(yīng)答[21-23]中作用更為明顯，但在無(wú)花果上的相關(guān)研究相對(duì)較少。本試驗(yàn)研究表明，高溫脅迫或生物蠶食經(jīng)茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果，其葉片內(nèi)源茉莉酸含量急劇上升，這與Pedranzani等的研究結(jié)論[24-26]較為吻合，鹽脅迫、傷口、滲透脅迫、紫外輻射等不同脅迫都會(huì)導(dǎo)致內(nèi)源茉莉酸含量的增加，并啟動(dòng)一系列應(yīng)答逆境脅迫的途徑。

當(dāng)植物遭受脅迫時(shí)，體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生羥基自由基（·OH）、超氧陰離子自由基（O-2 · ）、過(guò)氧化氫（H2O2）等活性氧（ROS），過(guò)多的ROS能使脂類、蛋白質(zhì)、核酸氧化[27]，造成植物氧化損傷[28]，而植物會(huì)產(chǎn)生超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、過(guò)氧化物酶（POD）、谷胱甘肽還原酶（GR）、抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）、谷胱甘肽過(guò)氧化物（GPX）等一些抗氧化的酶來(lái)抵御傷害。茉莉酸能使植物產(chǎn)生抗氧化劑和次級(jí)代謝產(chǎn)物[29]，增強(qiáng)植物的抗氧化系統(tǒng)及其清除自由基的能力[30]，如利用茉莉酸甲酯處理蓖麻，能使其體內(nèi)APX活性升高；茉莉酸甲酯能減輕百草枯藥劑對(duì)玉米的氧化傷害[31]；懸鉤子經(jīng)過(guò)茉莉酸甲酯處理后抗氧化能力迅速升高[32]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，茉莉酸甲酯處理能使高溫脅迫處理的無(wú)花果葉片抗氧化酶SOD、POD、CAT活性增強(qiáng)，葉片內(nèi)源DPPH清除率、總還原力升高，使葉片的受傷害程度降低，與表型分析一致。endprint

除非生物脅迫響應(yīng)外，茉莉酸也參與無(wú)花果植株的生物脅迫響應(yīng)。茉莉酸甲酯處理能增強(qiáng)植物對(duì)害蟲(chóng)的抗性[33]；田間西紅柿經(jīng)茉莉酸甲酯處理，西花薊馬、蚜蟲(chóng)的數(shù)量銳減[34]，且甜菜夜蛾數(shù)量也減少很多[35]；桃噴施茉莉酸甲酯，蚜蟲(chóng)數(shù)量減少[36]；與對(duì)照植株比，茉莉酸甲酯處理的菠菜其真菌侵害數(shù)量減少，且茉莉酸甲酯能減少線蟲(chóng)對(duì)燕麥、菠菜等植物的傷害[37]。另外，茉莉酸甲酯熏蒸棉花還能誘導(dǎo)植株產(chǎn)生乙酸葉醇酯、羅勒烯、金合歡烯等揮發(fā)性物質(zhì)，通過(guò)間接誘導(dǎo)釋放揮發(fā)性物質(zhì)和直接防御蛋白以抵御昆蟲(chóng)的傷害[38]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，利用黑絨金龜蠶食經(jīng)茉莉酸甲酯處理的無(wú)花果葉片，其內(nèi)源茉莉酸含量增加，PAL、PPO氧化酶活性急劇上升，單寧、胰蛋白酶抑制素物質(zhì)含量增加，這些物質(zhì)含量的增加能抵御外界生物的進(jìn)一步侵害，使植物盡快恢復(fù)正常生長(zhǎng)狀態(tài)。

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