流式細(xì)胞儀淋巴亞群在腫瘤化療后患者中的應(yīng)用

湯偉明+彭蘡

【摘要】 目的 對流式細(xì)胞儀淋巴亞群在腫瘤化療后患者中的應(yīng)用價值進(jìn)行分析研究。方法 60例腫瘤化療患者作為觀察組（化療后無緩解29例、化療后完全緩解31例）， 60例健康體檢者作為對照組。采用流式細(xì)胞技術(shù)分析觀察組患者化療前后的淋巴細(xì)胞亞群的變化特征， 并與對照組進(jìn)行對比。結(jié)果 觀察組化療前及化療后無緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+均明顯低于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；觀察組化療后無緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+與本組化療前比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 但從數(shù)據(jù)可看出免疫功能有進(jìn)一步惡化的趨勢；觀察組化療后完全緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+與本組化療前及化療后無緩解比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 腫瘤患者細(xì)胞免疫功能衰退， 化療完全緩解后可改善腫瘤患者機(jī)體的免疫功能。

【關(guān)鍵詞】 流式細(xì)胞技術(shù)；淋巴亞群；腫瘤化療后

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.31.029

流式細(xì)胞儀是一種新型高科技儀器， 其中包含了激光、計算機(jī)、單克隆抗體、光電測量、細(xì)胞熒光化學(xué)以及電子物理技術(shù)。流式細(xì)胞技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)當(dāng)中應(yīng)用非常廣泛， 被應(yīng)用于腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、微生物檢測、器官移植等等[1， 2]。本組研究以本院腫瘤化療患者為研究對象， 對流式細(xì)胞儀淋巴亞群在腫瘤化療后患者中的應(yīng)用價值進(jìn)行分析研究， 現(xiàn)做如下匯報。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 本研究事先獲得患者知情同意， 研究開展時間為2015年4月～2016年12月， 抽取本院60腫瘤患者作為觀察組， 所有患者均經(jīng)手術(shù)、內(nèi)窺鏡、病理學(xué)檢查證實， 其中胃癌15例， 原發(fā)性肝癌12例， 結(jié)腸癌9例， 乳腺癌11例， 肺癌6例， 食管癌5例， 淋巴瘤2例；排除并發(fā)免疫性疾病患者， 所有患者接受4個周期以上化療（化療后無緩解29例、化療后完全緩解31例）；其中男23例， 女37例；年齡35～72歲， 平均年齡（58.2±6.5）歲。抽取同期60例健康體檢者作為對照組， 排除腫瘤、肝腎及免疫系統(tǒng)疾病患者， 免疫指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)， 其中男25例， 女35例， 年齡25～65歲， 平均年齡（53.2±5.5）歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 采用BD FACSCalibur流式細(xì)胞分析儀（美國BD公司）， 試劑及耗材都為BD配套產(chǎn)品， 校準(zhǔn)品也有BD公司提供， 都按要求保存并在保質(zhì)期內(nèi)。抽取受檢者清晨靜脈血2 ml， 存于EDTA或肝素抗凝BD真空管， 并按規(guī)定儲存等待檢測， 向已編好號的2支BD實驗管中分別加入20 μl兩種單克隆抗體并每管加入50 μl混勻的抗凝血?；靹虮芄獗４?5 min， 經(jīng)過溶血10 min、洗滌、離心去上清再加生理鹽水混勻步驟后上機(jī)檢測。

1. 3 觀察指標(biāo) CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞、CD19+細(xì)胞、NK（CD3-CD16+CD56+）細(xì)胞占淋巴細(xì)胞百分比。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組化療前及化療后無緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+均明顯低于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；觀察組化療后無緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+與本組化療前比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 但從數(shù)據(jù)可看出免疫功能有進(jìn)一步惡化的趨勢；觀察組化療后完全緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+與本組化療前及化療后無緩解比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

淋巴細(xì)胞亞群可因患者患有免疫缺陷性疾病、自身免疫疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、惡性腫瘤與病毒感染等而產(chǎn)生異常改變[3]。所以對患者包括CD3+、CD4+與CD8+等外周血淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測可在一定程度上掌握患者機(jī)體的免疫狀態(tài)[4-7]。

流式細(xì)胞技術(shù)具有分析快速、檢驗客觀、結(jié)果精確、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)， 臨床常用來檢測淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞活性， 以此了解機(jī)體的免疫狀態(tài)[8-10]。本組研究中， 抽取60例腫瘤化療患者作為研究對象（觀察組）， 采用流式細(xì)胞技術(shù)分析患者化療前后的淋巴細(xì)胞亞群的變化特征， 抽取同期60例健康體檢者作對照（對照組）。通過表1可以看出， 觀察組化療前及化療后無緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+均明顯低于對照組， 差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）， 提示機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫免疫功能抑制并紊亂。觀察組化療后無緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+與本組化療前比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 但從數(shù)據(jù)可看出免疫功能有進(jìn)一步惡化的趨勢。腫瘤的發(fā)生很大程度上是由于免疫功能低下， 殺死腫瘤細(xì)胞能力下降導(dǎo)致?；煵粌H破壞腫瘤細(xì)胞， 也損傷免疫細(xì)胞， 所以無效化療加重了免疫功能的低下。觀察組化療后完全緩解CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3-CD16+CD56+與本組化療前及化療后無緩解比較差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）， 說明此化療方案在殺腫瘤細(xì)胞的同時對機(jī)體免疫活性細(xì)胞傷害小， 化療結(jié)束后能改善機(jī)體免疫功能， 提高了免疫活性細(xì)胞殺腫瘤細(xì)胞的能力。由此可見， 測定腫瘤患者淋巴亞群對臨床化療的療效觀察具有一定的意義。由于機(jī)體免疫系統(tǒng)十分復(fù)雜， 影響因素繁多， 此類問題還需不斷探索研究并改進(jìn)。

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