胸腺肽α1對乙型肝炎肝硬化失代償期患者淋巴細胞亞群的影響

仝 靜， 孫長宇， 楊黎冰， 梁亞林， 康艷楠

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 感染科，鄭州 450052)

論著/肝纖維化及肝硬化

胸腺肽α1對乙型肝炎肝硬化失代償期患者淋巴細胞亞群的影響

仝 靜， 孫長宇， 楊黎冰， 梁亞林， 康艷楠

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 感染科，鄭州 450052)

目的觀察乙型肝炎肝硬化失代償期患者應(yīng)用胸腺肽α1后外周血淋巴細胞亞群的變化，分析胸腺肽α1對患者免疫功能的影響。方法選取2015年10月-2016年12月鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的乙型肝炎肝硬化失代償期患者106例，隨機分為對照組和治療組各53例，另選同期20例體檢者作為健康組。對照組給予內(nèi)科綜合治療，治療組在綜合治療的基礎(chǔ)上加用胸腺肽α1，分別于治療前、治療12周后使用流式細胞儀器檢測患者外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)、CD4+/CD8+比值、CD19百分比、NK細胞百分比。觀察臨床癥狀和并發(fā)癥，以及不良反應(yīng)發(fā)生情況。計量資料多組間比較采用方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗；兩組間比較采用成組t檢驗或配對t檢驗。計數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗。結(jié)果治療前，與健康組相比，治療組和對照組患者外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)、CD4+/CD8+比值、CD19百分比、NK細胞百分比均明顯降低(P值均<0.05)；治療12周后，與對照組相比，治療組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)明顯升高(t值分別為5.051、5.379、2.066，P值均<0.05)，CD4+/CD8+比值、CD19細胞百分比、NK細胞百分比有升高趨勢(P值均>0.05)。治療組治療12周與治療前相比，CD3+細胞數(shù)、CD4+細胞數(shù)、CD4+/CD8+比值明顯升高(t值分別為7.647、7.851、4.384，P值均<0.001)。治療過程中，出現(xiàn)的不良反應(yīng)為頭暈、頭痛，對照組和治療組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.039，Ρ=0.308)。所有病例未發(fā)生嚴重不良反應(yīng)。結(jié)論胸腺肽α1可明顯改善乙型肝炎肝硬化失代償患者淋巴細胞亞群比例失衡問題，提高患者免疫功能。

肝硬化； 肝炎， 乙型； 淋巴細胞亞群； 胸腺素

據(jù)2006年全國乙型肝炎流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國HBV感染人數(shù)約9300萬人，其中約1/4將發(fā)展為慢性肝病，部分可發(fā)展為肝硬化。代償期肝硬化進展為肝功能失代償?shù)哪臧l(fā)生率為3%～5%，失代償期肝硬化5年生存率為14%～35%[1]。失代償期肝硬化患者多存在免疫功能低下，淋巴細胞亞群失調(diào)[2-3]，容易出現(xiàn)嚴重感染、腫瘤等。而胸腺肽α1作為免疫調(diào)節(jié)劑已廣泛用于多種疾病的治療，如重癥感染、變態(tài)反應(yīng)、神經(jīng)內(nèi)分泌疾病、各類腫瘤治療及化療后的免疫功能恢復(fù)等[4-5]。目前胸腺肽α1對治療乙型肝炎肝硬化失代償期患者免疫功能低下的療效尚缺乏臨床研究。本研究采用前瞻性分析，在乙型肝炎肝硬化失代償期患者綜合治療基礎(chǔ)上加用胸腺肽α1，并在治療12周后復(fù)查相關(guān)指標，分析胸腺肽α1對于乙型肝炎肝硬化失代償期患者淋巴細胞亞群的影響，進而了解患者免疫功能的變化。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2015年10月-2016年12月本院收治的乙型肝炎肝硬化失代償期患者，診斷均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)》[1]中乙型肝炎肝硬化失代償期診斷標準，通過病史及檢查排除其他病因?qū)е碌母斡不Т鷥敚鏗CV感染、自身免疫性肝炎、酒精、藥物等，同時排除各種腫瘤、血液病及風濕免疫系統(tǒng)疾病、腦血管病急性期及嚴重肝腎功能障礙和合并各種感染的患者。采用隨機數(shù)字表分法分為治療組和對照組。同時選擇本院門診健康體檢者做為健康組。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準，所有治療均獲得患者及家屬知情同意。

1.2 治療方法 兩組給予相同藥物進行抗病毒、保護胃黏膜、護肝、補充人血白蛋白、引流腹水、維持水電解質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)腸道菌群、預(yù)防抗感染等內(nèi)科綜合治療；治療組在綜合治療的基礎(chǔ)上加用1.6 mg 胸腺肽α1(和日，海南中和藥業(yè)有限公司)皮下注射，2次/周，每次使用間隔3～4 d，治療12周。

1.3 觀察指標 應(yīng)用本院感染科實驗室流式細胞儀(FACS Calibur流式細胞儀，美國BD公司)監(jiān)測所有患者治療前、治療12周外周血淋巴細胞亞群，觀察患者外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)、CD4+/CD8+比值、CD19百分比、自然殺傷細胞(NK細胞)百分比變化，同時監(jiān)測所有患者的不良反應(yīng)。

2 結(jié)果

2.1 一般資料 共收集乙型肝炎肝硬化失代償期患者106例，其中男89例，女17例；年齡27～83歲，平均(53.2±11.1)歲。治療組和對照組各53例。治療前，2組患者在性別，年齡，CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞數(shù)，CD4+/CD8+比值，CD19百分比，NK細胞百分比之間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均>0.05)，具有可比性。健康組20例，其中男13例，女7例，年齡35～79歲，平均(58.0±12.9)歲，健康組與對照組、治療組相比，性別、年齡差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均>0.05)。

2.2 3組治療前、治療12周外周血淋巴細胞亞群變化情況 治療前，3組間各指標比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值均<0.05)，進一步兩兩間比較顯示，健康組患者外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)，CD4+/CD8+比值，CD19百分比，NK細胞百分比明顯高于對照組和治療組(P值均<0.05)，治療組和對照組兩組間各指標比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均>0.05)。

治療12周后，與對照組相比，治療組CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)明顯升高(P值均<0.05)，CD4+/CD8+比值、CD19細胞百分比、NK細胞百分比有升高趨勢(P值均>0.05)。

治療組治療12周與治療前相比，CD3+細胞數(shù)、CD4+細胞數(shù)、CD4+/CD8+比值明顯升高(t值分別為7.647、7.851、4.384，P值均<0.001)，CD8+細胞數(shù)、CD19細胞百分比、NK細胞百分比有升高趨勢(P值均>0.05)(表1)。

2.3 臨床癥狀及并發(fā)癥發(fā)生情況 106例患者治療12周后，治療組53例患者中49例乏力納差等癥狀明顯好轉(zhuǎn)，出現(xiàn)感染3例；對照組53例患者中31例乏力納差等癥狀減輕，出現(xiàn)感染16例，給予抗感染治療后感染均得到控制。治療期間2組患者均未出現(xiàn)出血及危及生命的并發(fā)癥。

2.4 不良反應(yīng)發(fā)生情況 106例患者治療過程中，治療組出現(xiàn)1例頭暈；對照組出現(xiàn)2例頭暈，1例頭痛。2組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.039,P=0.308)。所有病例未發(fā)生嚴重不良反應(yīng)。

3 討論

乙型肝炎肝硬化患者由于HBV感染，機體的細胞免疫和體液免疫均降低，其中T淋巴細胞功能降低為免疫衰老的重要特征。而免疫調(diào)節(jié)治療可通過促進淋巴細胞增殖，調(diào)整淋巴細胞亞群比例，提高患者免疫功能。本研究通過研究患者應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)劑(胸腺肽α1)前后淋巴細胞亞群的變化，為乙型肝炎肝硬化患者提供治療建議，提高患者免疫功能，降低感染率，利于患者病情恢復(fù)。

外周血淋巴細胞亞群可直接反應(yīng)出機體免疫功能狀況，人外周血T淋巴細胞可分為3種不同亞群, 實驗室通常檢查CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞亞群。其中CD3+T淋巴細胞反映外周血T淋巴細胞總數(shù)，CD4+T淋巴細胞為輔助性T淋巴細胞，可促進B淋巴細胞、細胞毒性T淋巴細胞和其他免疫細胞的增殖及分化，調(diào)節(jié)體液和細胞免疫。CD8+T淋巴細胞由細胞毒性T淋巴細胞和抑制性T淋巴細胞組成，CD8+T淋巴細胞是決定HBV清除狀態(tài)的關(guān)鍵細胞亞群，細胞溶解或非溶解機制是CD8+T淋巴細胞清除機體感染HBV的主要方式。CD4+/CD8+比值的變化可直接反應(yīng)機體的細胞免疫功能狀態(tài)，正常情況下，在不同機體內(nèi)CD4+/CD8+比值不同，但在正常范圍內(nèi)。B淋巴細胞經(jīng)過抗原刺激產(chǎn)生抗體，在體液免疫中發(fā)揮重要作用，可以清除病毒抗原，在長期病毒抗原刺激下，機體的體液免疫相對于細胞免疫占主導(dǎo)地位。NK細胞是重要的天然免疫細胞，可通過殺傷和分泌細胞因子的方式對腫瘤細胞及病毒感染的細胞產(chǎn)生快速應(yīng)答[6]。

胸腺肽α1是由28個氨基酸組成的多肽，其在免疫調(diào)節(jié)方面具有重要作用，已被廣泛應(yīng)用于臨床，在疾病治療過程中幫助患者恢復(fù)免疫功能[7-8]。在誘導(dǎo)和促進胸腺細胞的分化和成熟方面，胸腺肽α1可促進胸腺內(nèi)的骨髓干細胞轉(zhuǎn)化為T淋巴細胞，并進一步分化為不同功能亞群，這是其最基本的調(diào)節(jié)作用。另外胸腺肽α1還可刺激干細胞增殖并增加NK細胞、CD4+、CD8+T淋巴細胞的產(chǎn)生，同時還增加IFN、IL-2等多種活性物質(zhì)，刺激并促進T淋巴細胞分化、成熟，使紊亂的免疫功能逐漸恢復(fù)，發(fā)揮免疫保護作用[9-11]。本研究2組患者治療前外周血CD3+、CD4+、CD8+細胞數(shù)、CD4+/CD8+比值、CD19百分比、NK細胞百分比明顯降低。在使用胸腺肽α1治療后，與對照組相比，治療組淋巴細胞亞群中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞數(shù)升高較為明顯，CD4+/CD8+比值、CD19細胞百分比、NK細胞有所升高，表明胸腺肽α1可有效改善乙型肝炎肝硬化失代償期患者的免疫功能。

表1 3組治療前和治療12周外周血淋巴細胞亞群變化情況比較

注：1)與健康組比較，P<0.05;2)與治療前治療組比較，P<0.05

總之，乙型肝炎肝硬化失代償期患者易出現(xiàn)外周血淋巴細胞亞群失衡，治療過程中加用胸腺肽α1可明顯改善T淋巴細胞亞群比例失衡問題，提高患者免疫功能，利于患者病情恢復(fù)。但本研究樣本量較少，研究時間短，資料收集不完整(比如失代償期分級未進一步研究等)，分析過程中難免有誤差，胸腺肽α1對改善乙型肝炎肝硬化失代償期患者免疫功能的長期療效還有待進一步研究。

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引證本文：TONG J, SUN CY, YANG LB, et al. Effect of thymosin α1 on lymphocyte subsets in patients with decompensated hepatitis B cirrhosis[J]. J Clin Hepatol, 2017, 33(11): 2132-2135. (in Chinese)

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(本文編輯：朱 晶)

Effectofthymosinα1onlymphocytesubsetsinpatientswithdecompensatedhepatitisBcirrhosis

TONGJing,SUNChangyu,YANGLibing,etal.

(DepartmentofInfectiousDiseases,TheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China)

ObjectiveTo investigate the change in peripheral blood lymphocyte subsets after the application of thymosin α1 in patients with decompensated hepatitis B cirrhosis, as well as the effect of thymosin α1 on immune function.MethodsA total of 106 patients with decompensated hepatitis B cirrhosis who were admitted to The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University from October 2015 to December 2016 were enrolled and randomly divided into control group and treatment group, with 53 patients in each group, and 20 healthy subjects who underwent physical examination were enrolled as healthy group. The patients in the control group were given comprehensive medical treatment, and those in the treatment group were given thymosin α1 in addition to the comprehensive medical treatment. Flow cytometry was used to measure peripheral blood CD3+, CD4+, and CD8+cells, CD4+/CD8+ratio, and percentages of CD19 cells and natural killer (NK) cells before treatment and after 12 weeks of treatment. Clinical symptoms, complications, and adverse events were observed. An analysis of variance was used for comparison of continuous data between multiple groups, and the least significant differencet-test was used for further comparison between any two groups; the independent-samplesttest or pairedt-test was used for comparison between two groups. The chi-square test was used for comparison of categorical data between groups.ResultsBefore treatment, the treatment group and the control group had significantly lower numbers of peripheral blood CD3+, CD4+, and CD8+cells, CD4+/CD8+ratio, and percentages of CD19 cells and NK cells than the healthy group (allP<0.05). After 12 weeks of treatment, the treatment group showed significant increases in the numbers of CD3+and CD4+cells and CD4+/CD8+ratio(t=7.647,7.851, and 4.384, allP<0.001); compared with the control group, the treatment group had significantly increased numbers of CD3+, CD4+, and CD8+cells (t=5.051, 5.379, and 2.066, allP<0.05) and slightly increaseed CD4+/CD8+ratio and percentages of CD19 cells and NK cells (allP>0.05). The adverse events during treatment included dizziness and headache, and there was no significant difference in the incidence rate of adverse events between the control group and the treatment group (χ2=1.039,P=0.308). No patient experienced serious adverse events.ConclusionIn patients with decompensated hepatitis B cirrhosis, thymosin α1 can significantly improve the imbalance of lymphocyte subsets and enhance their immune function.

liver cirrhosis； hepatitis B； lymphocyte subsets； thymosin

R512.62; R575.2

A

1001-5256(2017)11-2132-04

10.3969/j.issn.1001-5256.2017.11.016

2017-05-17；

2017-07-03。

河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)計劃項目(152102310045)

仝靜(1991-)，女，主要從事肝病及感染性發(fā)熱疾病的研究。

孫長宇，電子信箱: changyu8188@163.com。