干細(xì)胞標(biāo)志物CD133基因表達(dá)指數(shù)、增殖細(xì)胞核抗原標(biāo)記指數(shù)與腦膠質(zhì)瘤患者惡性程度的相關(guān)性分析

宋艷芳

（河南省周口市中心醫(yī)院病理科 周口466000）

干細(xì)胞標(biāo)志物CD133基因表達(dá)指數(shù)、增殖細(xì)胞核抗原標(biāo)記指數(shù)與腦膠質(zhì)瘤患者惡性程度的相關(guān)性分析

宋艷芳

（河南省周口市中心醫(yī)院病理科 周口466000）

目的：分析干細(xì)胞標(biāo)志物CD133基因表達(dá)指數(shù)、增殖細(xì)胞核抗原標(biāo)記指數(shù)（PCNA-LI）與腦膠質(zhì)瘤患者惡性程度的相關(guān)性。方法：選取2015年6月～2017年1月我院收治的71例腦膠質(zhì)瘤患者為研究對(duì)象，根據(jù)神經(jīng)腫瘤分類分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分為低級(jí)別組39例和高級(jí)別組32例，均行CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI檢測(cè)。比較不同惡性程度腦膠質(zhì)瘤患者CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI，以Spearman檢驗(yàn)來分析CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI與腦膠質(zhì)瘤惡性程度的相關(guān)性。結(jié)果：高級(jí)別組CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI均高于低級(jí)別組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI與腦膠質(zhì)瘤惡性程度呈正相關(guān)（r1=0.767，P1=0.008，r2=0.712，P2=0.013）。結(jié)論：CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況隨腫瘤惡性程度的增高而增強(qiáng)。

腦膠質(zhì)瘤；CD133基因表達(dá)指數(shù)；PCNA-LI；惡性程度

腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見及多發(fā)惡性腫瘤之一，受多種因素影響，近年來其發(fā)生率呈逐年上升趨勢(shì)。相關(guān)研究統(tǒng)計(jì)[1]，腦膠質(zhì)瘤患者約占所有顱內(nèi)原發(fā)腫瘤的一半，防治形勢(shì)十分嚴(yán)峻。尤其是腫瘤惡性程度較高患者本身存在高侵襲性、高復(fù)發(fā)率等臨床特點(diǎn)，預(yù)后較差，早期鑒別腦膠質(zhì)瘤惡性程度，對(duì)臨床治療方案的制定具有指導(dǎo)性意義。以往臨床多通過組織形態(tài)學(xué)病理分類進(jìn)行鑒別，但無法準(zhǔn)確辨別某些膠質(zhì)瘤生物學(xué)特征，效果不甚理想。近年來，分子生物學(xué)技術(shù)日益發(fā)展及完善，腦膠質(zhì)瘤患者惡性程度臨床鑒別獲得較大突破。CD133基因表達(dá)指數(shù)是腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞最可靠增值細(xì)胞標(biāo)記物之一[2]。PCNA-LI被認(rèn)為是反映細(xì)胞增殖活性最重要指標(biāo)之一，可準(zhǔn)確評(píng)價(jià)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖情況[3]。本研究探討CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA LI與腦膠質(zhì)瘤患者惡性程度的相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年6月～2017年1月我院收治的71例腦膠質(zhì)瘤患者為研究對(duì)象，均經(jīng)病理檢查確診，根據(jù)神經(jīng)腫瘤分類分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分為低級(jí)別組39例和高級(jí)別組32例，其中女27例，男44例；年齡 21～78 歲，平均年齡（44.89±10.64）歲；低級(jí)別組惡性程度：Ⅰ級(jí)13例、Ⅱ級(jí)26例，高級(jí)別組惡性程度：Ⅲ級(jí)18例、Ⅳ級(jí)14例。本研究經(jīng)我院倫理會(huì)審批通過，所有患者均自愿簽署知情同意書。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法 （1）測(cè)定CD133基因表達(dá)指數(shù)：儀器選用FTC2000型熒光定量PCR儀，以熔解曲線監(jiān)測(cè)基因擴(kuò)增情況，采用相對(duì)定量法，將β-actin基因表達(dá)水平作為內(nèi)參，獲取CD133基因表達(dá)指數(shù)；（2）測(cè)定PCNA-LI：選用Nikon E400顯微鏡觀察胞漿顏色，以棕褐色、棕色、淺黃色顆粒為陽性細(xì)胞，以陽性細(xì)胞所占比例作為PCNA LI判定標(biāo)準(zhǔn)。陽性細(xì)胞數(shù)＞75%為5分；50%＜陽性細(xì)胞數(shù)≤75%為4分；25%＜陽性細(xì)胞數(shù)≤50%為3分；5%＜陽性細(xì)胞數(shù)≤25%為2分；陽性細(xì)胞數(shù)≤5%為1分。

1.3 觀察指標(biāo) （1）比較不同惡性程度腦膠質(zhì)瘤患者 CD133 基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI；（2）以 Spearman分析CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI與腦膠質(zhì)瘤惡性程度的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)處理采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)量資料以（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，以Spearman檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)性分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI比較 高級(jí)別組CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI均高于低級(jí)別組，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1 兩組患者CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI比較（±s）

表1 兩組患者CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI比較（±s）

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2.3 CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA LI與腦膠質(zhì)瘤惡性程度的相關(guān)性分析 經(jīng)Spearman檢驗(yàn)可知，CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA LI與腦膠質(zhì)瘤惡性程度呈正相關(guān)（r1=0.767，P1=0.008，r2=0.712，P2=0.013）。

3 討論

腦膠質(zhì)瘤是原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤之一，多由大腦及脊髓膠質(zhì)細(xì)胞癌變所致，依據(jù)腫瘤惡性程度可將其分為Ⅰ～Ⅳ級(jí)，其中Ⅲ、Ⅳ級(jí)惡性程度較高。腦膠質(zhì)瘤多生長(zhǎng)于腦神經(jīng)組織內(nèi)，生長(zhǎng)迅速，治療難度較大[4]。早期鑒別腦膠質(zhì)瘤惡性程度，有助于臨床制定合理、有效治療方案，對(duì)患者疾病控制具有重要臨床意義。

干細(xì)胞屬腫瘤原始細(xì)胞之一，亦為病灶組織中分化率較高的一組細(xì)胞，具有強(qiáng)大多向分化、自我更新及增殖能力，能以對(duì)稱分裂形式進(jìn)行繁殖，且可通過不對(duì)稱分裂方式生成較成熟子代癌細(xì)胞，進(jìn)而分化出更多更成熟細(xì)胞表型，最終形成腫瘤細(xì)胞。干細(xì)胞通過上述分裂方式可促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、繁殖，與腫瘤浸潤(rùn)性生長(zhǎng)、分化程度、增殖速度及瘤體大小均存在較大關(guān)聯(lián)。CD133屬跨膜蛋白之一，其相對(duì)分子量為120 000，是腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞增值標(biāo)記物之一，可有效判斷腫瘤惡性程度[5]。PCNA-LI屬酸性蛋白之一，亦屬細(xì)胞核抗原之一，其相對(duì)分子量為36 KD，常作為S期特異性標(biāo)記，可準(zhǔn)確評(píng)價(jià)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖活性[6]。

本研究結(jié)果顯示，高級(jí)別組CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI均高于低級(jí)別組，差異有意義（P＜0.05）；CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI與腦膠質(zhì)瘤惡性程度呈正相關(guān)（r1=0.767，P1=0.008，r2=0.712，P2=0.013）。說明CD133基因表達(dá)指數(shù)、PCNA-LI在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況隨腫瘤惡性程度的增高而增強(qiáng)。

[1]劉海鵬,王冀偉,鄭克彬.FABP-5基因沉默對(duì)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖、侵襲、凋亡及腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44～+CD133～+表達(dá)的影響[J].中國(guó)組織工程研究,2016,20(28):4142-4148

[2]花瑋,岳琪,全凱,等.CD133陽性人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞增殖特點(diǎn)分析[J].中國(guó)臨床神經(jīng)科學(xué),2015,23(6):609-614

[3]肖文峰,李俊,霍鋼,等.高強(qiáng)度聚焦超聲治療對(duì)裸鼠皮下膠質(zhì)瘤VEGF、PCNA表達(dá)以及細(xì)胞凋亡的影響[J].中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志,2015,41(7):416-421

[4]黃琦丹,陳家康,劉全,等.SENP1蛋白在老年腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與預(yù)后的相關(guān)性[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2017,37(11):2741-2742

[5]劉波,楊學(xué)軍,張辰,等.ADAM12基因表達(dá)沉默對(duì)CD133陽性膠質(zhì)瘤細(xì)胞自我更新能力的影響[J].中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志,2016,42(1):45-49

[6]張海峰,劉文慶,王文斐,等.E-cadherin和PCNA在不同級(jí)別神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2016,38(4):365-367

R739.41

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2017.10.073

2017-09-01）