雙虎清肝顆粒對(duì)慢性乙型肝炎患者IL-10和TGF-β的影響以及臨床療效研究

祝麗超，畢夏，陳曉楊

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院，遼寧 沈陽 110000)

雙虎清肝顆粒對(duì)慢性乙型肝炎患者IL-10和TGF-β的影響以及臨床療效研究

祝麗超，畢夏，陳曉楊

(遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院，遼寧 沈陽 110000)

目的：觀察雙虎清肝顆粒對(duì)慢性乙型肝炎患者臨床療效及白細(xì)胞介素-10(IL-10)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)表達(dá)的影響。方法：符合納入標(biāo)準(zhǔn)的慢性乙型肝炎患者134例，使用信封法隨機(jī)分為對(duì)照組(阿德福韋酯)和觀察組(雙虎清肝顆粒聯(lián)合阿德福韋酯)，每組67例。采用ELISA法檢測(cè)IL-10和TGF-β表達(dá)情況。結(jié)果：治療前兩組患者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(TBiL)、透明質(zhì)酸酶(HA)、層黏連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(Ⅲ-PC)、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)、IL-10和TGF-β無顯著性差異(P>0.05)。治療后觀察組對(duì)上訴指標(biāo)的減低幅度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。治療結(jié)束后觀察組轉(zhuǎn)陰率為68.6%(46/67)，顯著高于對(duì)照組的50.7%(34/67)(P<0.05)。觀察組不良反應(yīng)發(fā)生率為10.1%(7/67)，對(duì)照組不良反應(yīng)發(fā)生率為9.0%(6/67)，兩組不良反應(yīng)無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)論：雙虎清肝顆?？梢詼p低慢性乙型肝炎患者IL-10和TGF-β因子表達(dá)，有利于肝功能的恢復(fù)并發(fā)揮抗肝纖維化的作用，臨床使用安全、有效。

雙虎清肝顆粒；慢性乙型肝炎；白細(xì)胞介素-10；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β

乙型肝炎病毒感染是全世界范圍內(nèi)主要的健康問題，我國(guó)60歲以下人群的乙型肝炎病毒表面抗原攜帶率為7.2%，大約有20%～40%的攜帶者會(huì)發(fā)展為慢性乙型肝炎，成為我國(guó)肝硬化的主要原因[1]。雙虎清肝顆粒是金銀花、虎杖、黃連、白花蛇舌草、蒲公英、丹參、野菊花、紫花地丁、法半夏、甘草、瓜蔞、枳實(shí) 12味中藥組成的中成藥，具有清熱利濕，化痰寬中，理氣活血之功效，臨床上用于慢性乙型肝炎的治療[2]。阿德福韋酯屬單磷酸腺苷磷酸核苷酸類似物，可以發(fā)揮抗乙型肝炎病毒的功效，屬于臨床一線抗乙肝病毒類藥物[3]。本研究在阿德福韋酯治療的基礎(chǔ)上加用雙虎清肝顆粒，觀察患者外周血白細(xì)胞介素-10(IL-10)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)表達(dá)的變化，以及其相關(guān)的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2014年6月—2015年7月我院治療的慢性乙型肝炎患者134例，參照《病毒性肝炎防治方案》[4]診斷。排除酒精性肝病及自身免疫性肝病者，重疊感染甲、丙、丁型以及戊型肝炎者，發(fā)展到肝硬化、肝癌者，腎功能嚴(yán)重障礙者，不能堅(jiān)持長(zhǎng)期隨訪治療者，孕婦、哺乳期婦女?；颊呤褂眯欧夥S機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組67例。從表1可見，兩組性別、年齡、病程、HBV - DNA 病毒載量之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性(P>0.05)。所有治療均經(jīng)我院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)后實(shí)行，所有患者均知曉本研究并簽署知情同意書。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 治療方法

對(duì)照組：禁酒，清淡飲食，阿德福韋酯片(四川美大康華康藥業(yè)有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20100092，規(guī)格：10 mg/片)口服，10 mg，1次/d。觀察組：在對(duì)照組基礎(chǔ)上加用雙虎清肝顆粒(北京華神制藥有限公司，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字80Z119081，12 g/袋)口服，1袋/次，2次/d，12個(gè)月為1個(gè)療程。

1.3 觀察指標(biāo)

記錄治療前、治療后患者肝功能指標(biāo)：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(TBiL)；血清肝纖維四項(xiàng)：透明質(zhì)酸酶(HA)、層黏連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原(Ⅲ-PC)和Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)；HBV-DNA。

使用ELISA法檢測(cè)IL-10和TGF-β表達(dá)，檢測(cè)試劑盒購(gòu)自美國(guó)eBioscience公司，取患者治療前、療程結(jié)束后清晨空腹外周靜脈血2 ml，1 500 g離心10 min，取上層血清，交由檢驗(yàn)科按照試劑盒說明書使用配套試劑操作，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，日立7170全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)吸光度值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線得出IL-10和TGF-β表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS16.0處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組均數(shù)比較使用方差分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后肝功能的變化情況比較

由表2可見，治療前兩組患者ALT、AST和TBiL無顯著性差異(P>0.05)，治療后觀察組對(duì)ALT、AST和TbiL減低的幅度均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表2 兩組患者治療前后肝功能的比較

注：與同組治療前比較，**P<0.01；與對(duì)照組治療后比較，▲P<0.05。

2.2 兩組患者治療前后肝纖維化指標(biāo)的變化情況比較

由表3可見，治療前兩組HA、LN、Ⅲ-PC和Ⅳ-C肝纖維化4項(xiàng)指標(biāo)無顯著性差異(P>0.05)，治療后觀察組對(duì)HA、LN、Ⅲ-PC和Ⅳ-C減低的幅度均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表3 兩組患者治療前后肝纖維化指標(biāo)變化情況比較

注：與同組治療前比較，*P<0.05，**P<0.01；與對(duì)照組治療后比較，▲P<0.05。

2.3 兩組患者治療前后 IL-10和TGF-β表達(dá)情況比較

從表4可見，治療前兩組患者IL-10和TGF-β表達(dá)無顯著性差異(P>0.05)，治療后觀察組對(duì)IL-10和TGF-β減低的幅度均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表4 兩組治療前后IL-10和TGF-β表達(dá)的比較

注：與同組治療前比較，*P<0.05，**P<0.01；與對(duì)照組治療后比較，▲P<0.01。

2.4 兩組患者治療前后HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率比較

治療結(jié)束后觀察組HBV-DNA轉(zhuǎn)陰46例，轉(zhuǎn)陰率為68.6%(46/67)，顯著高于對(duì)照組的50.7%(34/67)(P<0.05)。

2.5 安全性評(píng)估

觀察組腹瀉2例、頭痛1例、惡心2例、腹脹2例，不良反應(yīng)發(fā)生率為10.1%(7/67)，對(duì)照組腹瀉1例、咽痛1例、惡心1例、乏力1例、腹痛1例、腹脹1例，不良反應(yīng)發(fā)生率為9.0%(6/67)，兩組不良反應(yīng)發(fā)生率無顯著性差異(P>0.05)。上述不良反應(yīng)均自行緩解，患者可以堅(jiān)持治療，未停藥。

3 討論

乙型肝炎病毒引起的肝臟細(xì)胞損傷是一種免疫病理反應(yīng)，機(jī)體免疫細(xì)胞對(duì)病毒清除的同時(shí)會(huì)伴隨肝細(xì)胞的破壞，因此在抗病毒治療的同時(shí)也要兼顧患者免疫紊亂的調(diào)節(jié)[5]。中醫(yī)藥治療對(duì)慢性乙型肝炎的免疫調(diào)節(jié)作用報(bào)道逐漸增多[6]。雙虎清肝顆粒方中金銀花和虎杖為君藥，清熱解毒、散瘀定痛、利濕退黃;黃連和白花蛇舌草為臣藥，清熱利濕;紫花地丁、丹參和枳實(shí)為佐藥，活血止痛、化痰散結(jié);余藥整體調(diào)和，共奏清熱利濕，化痰寬中，理氣活血之功[7]?，F(xiàn)代藥理研究認(rèn)為,方中的黃連可調(diào)整患者免疫功能，丹參活血化瘀的功效可以改善肝臟微循環(huán)，甘草能夠有效抑制肝臟炎性反應(yīng)，都可以起到促進(jìn)損傷肝細(xì)胞的修復(fù)作用[8]。本研究觀察到療程結(jié)束后觀察組肝功能指標(biāo)顯著低于對(duì)照組，說明了雙虎清肝顆粒有利于損傷肝細(xì)胞的修復(fù)。近年來慢性肝炎的抗肝纖維化治療越來越受到重視，HA、LN、Ⅲ-PC和Ⅳ-C是臨床上常用的評(píng)價(jià)肝纖維化程度的指標(biāo)，本研究觀察到療程結(jié)束后觀察組肝纖維化4項(xiàng)指標(biāo)顯著低于對(duì)照組，說明了雙虎清肝顆?？梢宰柚孤愿窝椎睦w維化進(jìn)展，有利于肝硬化的預(yù)防。調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(regulatory B cells，Breg)是IL-10和TGF-β來源的主要分泌細(xì)胞[9]，IL-10起到負(fù)面調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的作用，例如：減少M(fèi)HCⅡ分子和腫瘤壞死因子的表達(dá)，阻止調(diào)節(jié)DC細(xì)胞、T細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的活化[10]，蘇然等[11]的研究也觀察到慢性HBV感染者Breg細(xì)胞和IL-10因子均表達(dá)升高，并且慢性HBV感染者體內(nèi)的IL-10因子主要是由Breg細(xì)胞分泌。本研究顯示,觀察組治療后IL-10顯著低于對(duì)照組，說明了雙虎清肝顆?？梢园l(fā)揮免疫調(diào)節(jié)，臨床分析也顯示雙虎清肝顆粒顯著增加了阿德福韋酯治療的轉(zhuǎn)陰率。TGF-β在慢性肝炎患者體內(nèi)高表達(dá)，高表達(dá)的TGF-β可以激活肝臟間質(zhì)枯否氏細(xì)胞參與到肝臟的肝纖維化進(jìn)程中[12]。本研究顯示觀察組治療后TGF-β顯著低于對(duì)照組，提示雙虎清肝顆?？垢卫w維化的作用可能與此相關(guān)。

阿德福韋酯屬于臨床一線抗乙肝病毒類藥物，本研究在聯(lián)合應(yīng)用雙虎清肝顆粒治療慢性乙型肝炎病毒肝炎的過程中，未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的臨床不良反應(yīng)，說明了兩藥合用的安全性，兩藥治療期間都未觀察到腎臟損害的發(fā)生，所發(fā)現(xiàn)的臨床不良反應(yīng)均可自行緩解，不影響繼續(xù)用藥治療。

綜上所述，本研究顯示雙虎清肝顆?？梢詼p低慢性乙型肝炎病毒肝炎患者IL-10和TGF-β因子表達(dá)，有利于肝功能的恢復(fù)并發(fā)揮抗肝纖維化的作用，臨床使用安全、有效。

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InfluenceandEfficacyofShuanghuQingganGranulesonIL-10andTGF-βinPatientswithChronicHepatitisB

ZHU Li-chao, BI Xia, CHEN Xiao-yang

(TheThirdAffiliatedHospitalofLiaoningUniversityofTCM,Shenyang110000,China)

Objective: To observe the effects of Shuanghu Qinggan granules on IL-10 and TGF-β in patients with chronic hepatitis B and its curative efficacy. Methods: 134 patients were randomly divided into the control group(n=67) and the observation group(n=67); the control group was treated with Adefovir Dipivoxil tablets, on which basis, the observation group was also given Shuanghu Qinggan granules. The levels of IL-10 and TGF-β were detected by ELISA method. Results: There was no significant difference in terms of ALT, AST, TBiL, HA, LN, Ⅲ-PC, Ⅳ-C, IL-10, and TGF-β between the two groups before treatment(P>0.05). After treatment, they all became significantly lower in the observation group than those in the control group(P<0.05); the negative conversion rate in the observation group was 68.6%(46/67), which was significantly higher than 50.7%(34/67) in the control group(P<0.05); the incidence of adverse reactions was 10.1%(7/67) in the observation group and 9%(6/67) in the control group, but there was no significant difference between the two groups(P>0.05). Conclusion: The therapy of Shuanghu Qinggan granules can reduce the expressions of IL-10 and TGF-β in patients with chronic hepatitis B, which was conducive to the recovery of liver function and it plays a role in anti-fibrosis, with its safety and effectiveness in clinic.

Shuanghu Qinggan granules; Chronic hepatitis B; IL-10; TGF-β

R285.6

A

1002-2406(2017)06-0074-03

祝麗超(1978-)，女，主管中藥師,主要研究方向：臨床藥學(xué)。

2016-11-14

修回日期：2016-12-10