激光針灸治療大鼠慢性萎縮性胃炎實(shí)驗(yàn)研究

王 凱，沈 陽(yáng)，邵雪輝,張曉麗

(1.河北北方學(xué)院中西醫(yī)臨床系，河北 張家口 075000；2.河北北方學(xué)院醫(yī)學(xué)物理教研室，河北 張家口 075000；3.河北北方學(xué)院生命科學(xué)中心，河北 張家口 075000)

來(lái)稿日期：2016-09-06

王凱(1995-)，男，河北保定人，河北北方學(xué)院2013級(jí)本科生，研究方向：中醫(yī)針炙。

激光針灸治療大鼠慢性萎縮性胃炎實(shí)驗(yàn)研究

王 凱1，沈 陽(yáng)1，邵雪輝2,張曉麗3

(1.河北北方學(xué)院中西醫(yī)臨床系，河北 張家口 075000；2.河北北方學(xué)院醫(yī)學(xué)物理教研室，河北 張家口 075000；3.河北北方學(xué)院生命科學(xué)中心，河北 張家口 075000)

目的觀察激光針灸對(duì)大鼠慢性萎縮性胃炎的治療作用,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法60只Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、給藥組、針刺組和激光針灸組5組,采用復(fù)合法復(fù)制大鼠慢性萎縮性胃炎模型,分別給予藥物灌胃、針刺和激光針灸治療14 d，觀察各組大鼠外觀、胃黏膜狀態(tài)及病理組織學(xué)變化。結(jié)果模型對(duì)照組大鼠體質(zhì)量較正常對(duì)照組顯著降低(P<0.01)，胃擴(kuò)張,胃黏膜變薄(P<0.05)，腺體萎縮或消失，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；治療后各組大鼠狀態(tài)均有好轉(zhuǎn)，激光針灸組療效尤為顯著，未見胃擴(kuò)張，胃黏膜厚度較模型對(duì)照組明顯增加(P<0.05)，細(xì)胞結(jié)構(gòu)、形態(tài)正常，腺體排列規(guī)整，無(wú)腺體萎縮現(xiàn)象。結(jié)論激光針灸可明顯改善慢性萎縮性胃炎大鼠外觀、胃黏膜狀態(tài)及病理形態(tài)學(xué)表現(xiàn),療效優(yōu)于給藥和針刺。

激光針灸；Wistar大鼠；慢性萎縮性胃炎；胃黏膜

(1.Clinical Department of Traditional Chinese Medicine and Western Medicine,Hebei North University,Zhangjiakou，Hebei 075000，China；2.The Teaching and Research Section of Medical Physics，Hebei North University,Zhangjiakou，Hebei 075000，China；3.Life Science Center,Hebei North University,Zhangjiakou，Hebei 075000，China)

慢性萎縮性胃炎(chronic atrophic gastritis，CAG)是一種以胃黏膜上皮和腺體萎縮、胃黏膜變薄、黏膜基底層增厚或伴腸腺化生、不典型增生為特征的慢性消化系統(tǒng)疾病。臨床上常表現(xiàn)為上腹部隱痛、脹滿、噯氣、食欲不振、消瘦、貧血等，目前尚無(wú)完善、有效的治療方案[1]。有研究表明中醫(yī)針刺治療CAG有較好療效[2]，氦氖激光針灸治療炎癥性疾病有很好的效果[3]。我們應(yīng)用激光針灸治療大鼠CAG，探究其治療效果。

1 材料與方法

1.1 材料與動(dòng)物

1.1.1 主要試劑與器材

延參健胃膠囊(天圣制藥集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字：Z20120004)，康復(fù)新液(四川好醫(yī)生攀西藥業(yè)有限責(zé)任公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：Z51021834)；水楊酸鈉AR分析純(上海國(guó)藥集團(tuán)，批號(hào):20140612)；氦氖激光治療機(jī)(吉林省科英激光技術(shù)有限責(zé)任公司，型號(hào)：ZYS)，華佗牌無(wú)菌針灸針(蘇州醫(yī)療用品廠，規(guī)格：0.30 mm×25 mm)，光學(xué)顯微鏡(Olympus，BX40)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組

Wistar大鼠60只，購(gòu)自首都醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物部，清潔級(jí)，健康雄性，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(京)2010-0006，鼠齡3～4個(gè)月，體質(zhì)量180～220 g。實(shí)驗(yàn)室溫度22～26 ℃，濕度44%～50%，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后開始實(shí)驗(yàn)。隨機(jī)分成正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、給藥組、針刺組和激光針灸組5組，其中正常對(duì)照組9只，標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水。排除外界因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響，各組大鼠一般情況比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 造模方法

模型對(duì)照組、給藥組、針刺組和激光針灸組共51只造模，制成CAG動(dòng)物模型。造模方法參見文獻(xiàn)[4]，采用2%水楊酸鈉和30%酒精制成混合溶液，每天定點(diǎn)實(shí)施灌胃刺激，每日1次，每次2 mL，并輔以勞累(在轉(zhuǎn)輪中跑動(dòng)，每日1次，每次持續(xù)10 min)、饑飽失常(單日禁食，雙日足量喂食)等多因素干預(yù)8周。造模過(guò)程中因灌胃操作不當(dāng)，7只大鼠死亡。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法

正常對(duì)照組采取同樣的灌胃刺激方法，灌胃溶液為生理鹽水2 mL。每周固定時(shí)間對(duì)大鼠稱重，記錄數(shù)據(jù)。觀察大鼠毛色、活動(dòng)程度、糞便狀況。從第10周開始進(jìn)行治療干預(yù)。給藥組采用0.7 g·kg-1延參健胃膠囊和0.6 mL·kg-1康復(fù)新液灌服。針刺組、激光針灸組大鼠置于大鼠固定器內(nèi)，穴位定位按中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)“經(jīng)穴部位Location of point”(GB12346—90國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局1990-06-07發(fā)布，1991-01-01實(shí)施取穴)，針刺組采用華佗牌一次性無(wú)菌針灸針，針刺大鼠兩側(cè)足三里，針刺深度約2～3 mm，每側(cè)1 min，并在針刺期間對(duì)針刺部位進(jìn)行捻針彈針等刺激，增加針刺效果；激光針灸組采用經(jīng)耦合光纖輸出的氦氖激光,波長(zhǎng)632.8 nm，輸出功率30 mW，光斑直徑2 cm，將光斑中心對(duì)準(zhǔn)穴位點(diǎn)，照射距離10 cm，直接照射左、右足三里穴各3 min。以上干預(yù)均為每日1次，連續(xù)14 d。末次干預(yù)后禁食不禁水24 h，測(cè)定體質(zhì)量后，應(yīng)用3.5 mL·kg-1的10%水合氯醛腹腔注射，待麻醉后直接斷頭處死動(dòng)物，迅速剖腹，取胃，沿胃小彎取胃竇及部分胃體黏膜組織，10%中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟切片，蘇木精—伊紅染色，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 治療前后各組大鼠體質(zhì)量、毛色及活動(dòng)度比較

造模前造模組(模型對(duì)照組、給藥組、針刺組和激光針灸組)各組大鼠體質(zhì)量與正常組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，毛色順滑，光亮；造模后期造模組大鼠體質(zhì)量與正常組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)，大鼠毛色灰暗、乍毛、出現(xiàn)扎堆現(xiàn)象，個(gè)別大鼠糞便呈稀溏狀態(tài)，正常對(duì)照組大鼠毛順滑、糞便正常、活動(dòng)度較好。

治療后與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組、給藥組和針刺組體質(zhì)量減少，差異有顯著性(P<0.01)；治療后期激光針灸組與正常組比較體質(zhì)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表2)。

表1 造模過(guò)程中大鼠體質(zhì)量變化

注：造模第1周造模組大鼠存活51只，第4周存活47只，第8周存活44只。與正常對(duì)照組比較*P<0.05。

表2 治療中各組大鼠體質(zhì)量變化

注：與正常對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01。

2.2 治療前后各組大鼠胃黏膜病理學(xué)變化

正常對(duì)照組大鼠胃較小，胃壁富有彈性，胃黏膜呈粉紅色，表面光滑，皺襞隆起、清晰、規(guī)整，有較多黏液，無(wú)出血點(diǎn)，顯微鏡下可見胃黏膜較厚度，上皮完整，細(xì)胞排列整齊，無(wú)脫落或缺損，固有膜腺體形狀規(guī)則，未見或偶見炎性細(xì)胞，黏膜下層無(wú)水腫(圖1-①)；模型組大鼠胃擴(kuò)張明顯,胃壁變薄,彈性差，胃內(nèi)容物增多,皺襞低平，走向紊亂，黏膜色澤灰白，可見不同程度的陳舊性出血點(diǎn)，鏡下觀察發(fā)現(xiàn)胃黏膜層變薄，可見不同程度變性或壞死的脫落細(xì)胞，腺腔擴(kuò)張，腺體萎縮或消失，結(jié)構(gòu)不規(guī)則，排列紊亂，細(xì)胞輕度水腫，間質(zhì)有多種炎性細(xì)胞(主要為淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞)浸潤(rùn)(圖1-②)；給藥組大鼠胃略擴(kuò)張，彈性較差，偶見散在出血點(diǎn)，其胃黏膜較模型對(duì)照組增厚，但差異不顯著，鏡下見胃黏膜細(xì)胞排列較整齊，間質(zhì)有部分炎性細(xì)胞(圖1-③)；針刺組大鼠多有胃擴(kuò)張，胃壁薄，皺襞不清，有不同程度的出血點(diǎn)，其胃黏膜較正常對(duì)照組明顯變薄(P<0.05)，與模型對(duì)照組差異不顯著，偶見部分腺體成囊性擴(kuò)張，腺腔內(nèi)有少量出血點(diǎn)，炎細(xì)胞浸潤(rùn)有所減少，但腺體仍有萎縮(圖1-④)；激光針灸組大鼠未見胃擴(kuò)張，胃壁彈性較好，胃黏膜表面光滑，皺襞清晰，胃黏膜厚度較模型對(duì)照組明顯增厚(P<0.05)，與正常對(duì)照組差異無(wú)顯著性，顯微鏡下觀察可見上皮細(xì)胞相對(duì)完整，細(xì)胞形態(tài)正常，腺體排列規(guī)整，間質(zhì)中有少量炎細(xì)胞，無(wú)腺體萎縮現(xiàn)象(圖1-⑤、表3)。

表3 治療后各組大鼠的胃黏膜厚度比較

注：與正常組比較﹡P<0.05;與模型組比較#P<0.05；與針刺組比較△P<0.05。

3 討 論

CAG作為一種常見脾胃系統(tǒng)疾病，在中醫(yī)辯證上屬于胃痞。單純西醫(yī)治療不能有效去除病根，相比西醫(yī)，中醫(yī)在治療CAG等脾胃系統(tǒng)疾病時(shí)有較好療效。中醫(yī)治療CAG的原則是行氣除痞、健脾和胃，可采用針刺方法治療[5]，因足三里為胃之下合穴，是足陽(yáng)明胃經(jīng)上主要的穴位，有健脾和胃、安神補(bǔ)虛之功效[6]，故本研究穴位選取足三里穴。傳統(tǒng)針刺在治療過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)許多問(wèn)題(如針的保存與消毒、針刺過(guò)程中可能損傷人體臟腑、治療時(shí)斷針等問(wèn)題),臨床上常會(huì)出現(xiàn)暈針、彎針、折針、刺傷、刺禁等,且有可能造成血液傳染。我們采用激光針灸替代傳統(tǒng)針刺治療CAG，激光針灸是以低強(qiáng)度激光束直接、聚焦或擴(kuò)束后照射穴位區(qū)表面或深部,對(duì)穴位進(jìn)行刺激,達(dá)到疏通經(jīng)絡(luò)、行氣活血、平衡陰陽(yáng)等作用[7]。與傳統(tǒng)針刺相比，激光針灸具有無(wú)痛、無(wú)菌、安全、易控、可調(diào)等特點(diǎn),患者更易接受。

本研究采用水楊酸鈉和酒精混合溶液灌胃造模，刺激大鼠胃黏膜，導(dǎo)致大鼠胃黏膜細(xì)胞損傷、腺體萎縮、炎細(xì)胞浸潤(rùn)、腸上皮化生等CAG癥狀。我們比較了給藥、針刺、激光針灸等不同干預(yù)方式治療CAG的療效，發(fā)現(xiàn)給藥組和針刺組大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)不明顯，大鼠活動(dòng)度較弱，仍有扎堆現(xiàn)象，胃黏膜較模型對(duì)照組增厚，胃黏膜細(xì)胞排列較整齊，但胃壁彈性較差，炎細(xì)胞浸潤(rùn)有所減少，但腺體仍有萎縮；激光針灸組大鼠毛色光亮、順滑，體質(zhì)量增加，活動(dòng)度強(qiáng)，無(wú)扎堆現(xiàn)象，未見胃擴(kuò)張，胃壁彈性較好，胃黏膜厚度較模型對(duì)照組明顯增厚(P<0.05)，胃黏膜表面光滑，皺襞清晰，顯微鏡下可見胃黏膜細(xì)胞形態(tài)正常，腺體排列規(guī)整，無(wú)腺體萎縮現(xiàn)象，激光針灸治療CAG的療效優(yōu)于給藥和針刺，可作為治療CAG的有效方法。激光方向性好、強(qiáng)度大，含有能量的激光照射在患者相應(yīng)穴位上，直接穿透至相應(yīng)穴位，并將能量釋放至相應(yīng)部位，引起相應(yīng)部位神經(jīng)、肌肉一系列的變化，激光具有熱效應(yīng)，激光針灸照射穴位，不僅起到針的作用，還起到了灸的作用，可以達(dá)到事半功倍的效果。

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StudyontheTherapeuticEffectofLaserAcupunctureonChronicAtrophicGastritis

WANGKai1,SHENYang1,SHAOXue-hui2,ZHANGXiao-li3

ObjectiveTo observe the therapeutic effect of laser acupuncture on chronic atrophic gastritis in rats,and to provide experimental evidence for clinical application.Method60 Wistar rats were randomly divided into 5 groups:normal control group,model control group,drug group,acupuncture group and laser acupuncture group.The model of chronic atrophic gastritis was made by compound method.The groups except normal control group and model control group were respectively treated with medicine,acupuncture and laser acupuncture for 14 d,then the appearance,the status of gastric mucosa and histopathological changes of rats in each group were observed.ResultsCompared with normal control group,the weight of rats in model control group was significantly lower(P<0.01),and the thickness of gastric mucosa of rats in model control group was thinner as well(P<0.05).There were some phenomenon appearing in model control group,such as,gastric dilatation,the gland atrophy or disappearing and inflammatory cell infiltration.After treatment,the condition of rats in each group improved,especially laser acupuncture group,there was no gastric dilatation or glandular atrophy,the thickness of gastric mucosa of laser acupuncture group was significantly thicker than that of model control group(P<0.05),while the structure and morphology of the cell as well as the gland of laser acupuncture group were normal.ConclusionLaser acupuncture has a significant effect on the appearance,gastric mucosal morphology and pathological changes of rats with chronic atrophic gastritis,and its therapeutic effect is better than those of medicine and acupuncture.

laser acupuncture；Wistar rat;chronic atrophic gastritis；gastric mucosa

R 246.1

A

10.3969/j.issn.1673-1492.2017.10.002

[責(zé)任編輯：李薊龍英文編輯：劉彥哲]