脂氧素和烏司他丁對(duì)膿毒癥內(nèi)皮細(xì)胞Ang表達(dá)的影響對(duì)比觀察及作用機(jī)制研究

李良　　蔣永潑　　楊英姿

[摘要] 目的 探討脂氧素和烏司他丁對(duì)膿毒癥內(nèi)皮細(xì)胞Ang表達(dá)的影響對(duì)比觀察及作用機(jī)制。 方法 選取2016年1～12月我院收治的膿毒癥患者60例，隨機(jī)分為兩組，對(duì)照組應(yīng)用烏司他丁治療，研究組應(yīng)用脂氧素和烏司他丁治療，對(duì)比兩組患者的內(nèi)皮細(xì)胞Ang表達(dá)情況。 結(jié)果 治療前兩組患者的Ang表達(dá)無(wú)明顯差異（P>0.05），治療后研究組Ang-1表達(dá)顯著高于對(duì)照組，Ang-2表達(dá)顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；治療前兩組患者的腎功能指標(biāo)無(wú)明顯差異（P>0.05），治療后研究組患者顯著優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05）；治療前兩組患者的凝血功能指標(biāo)無(wú)明顯差異（P>0.05），治療后研究組患者顯著優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05）。 結(jié)論 膿毒癥患者應(yīng)用脂氧素和烏司他丁治療，能夠降低內(nèi)皮細(xì)胞Ang表達(dá)水平，改善患者的腎功能以及凝血功能相關(guān)指標(biāo)，有利于改善患者預(yù)后及生活質(zhì)量，臨床上值得推廣應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞] 脂氧素；烏司他?。荒摱景Y；內(nèi)皮細(xì)胞Ang；作用機(jī)制

[中圖分類號(hào)] R969 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2017）27-0019-04

Effects of lipoxin and ulinastatin on Ang expression in endothelial cells of sepsis and its mechanism

LI Liang JIANG Yongpo YANG Yingzi

Department of Emergency Medicine，Taizhou Hospital of Zhejiang Province，Linhai 317000，China

[Abstract] Objective To investigate the effects of lipoxin and ulinastatin on Ang expression in endothelial cells of sepsis and its mechanism. Methods 60 patients with sepsis treated in our hospital from January to December 2016 were randomly divided into two groups. The control group was treated with ulinastatin. The study group was treated with lipoxin and ulinastatin. The Ang expression in endothelial cell between the two groups of patients was compared. Results There was no significant difference in Ang expression between the two groups before treatment（P>0.05）. The expression of Ang-1 in the study group was significantly higher than that in the control group after treatment. And the expression of Ang-2 in the study group was significantly lower than that in the control group after treatment（P>0.05）. There was no significant difference in renal function between the two groups before treatment（P>0.05）. After treatment， the renal function of the study group was significantly better than that in the control group（P<0.05）. There was no significant difference in the coagulation function between the two groups before treatment（P>0.05）. After treatment， the coagulation function of the study group was significantly better than that in the control group（P<0.05）. Conclusion The application of lipoxin and ulinastatin in patients with sepsis can reduce the expression of angiotensin in endothelial cells， and can improve the renal function and coagulation function of patients. It is helpful to improve the prognosis and quality of life of patients and worthy of appling in clinical practice.

[Key words] Lipoxin；Ulinastatin；Sepsis；Endothelial cell Ang；Mechanism

膿毒癥指的是感染誘發(fā)的全身炎癥反應(yīng)，嚴(yán)重情況下會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)多器官功能衰竭。膿毒癥是人體感染之后出現(xiàn)的抗炎反應(yīng)及炎癥反應(yīng)嚴(yán)重失衡的危重癥，其中老年人群的膿毒癥（MODS）發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著上升，如何避免膿毒癥惡化成為多器官功能障礙是臨床上危重癥治療的重要課題。Ang-1及Ang-2表達(dá)是膿毒癥患者的重要生物標(biāo)志物。有研究在動(dòng)物模型中發(fā)現(xiàn)，Ang-1能夠保護(hù)器官維持功能，而Ang-2與膿毒癥的程度存在密切的聯(lián)系[1]。烏司他丁對(duì)維持血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能有重要影響，是蛋白酶活性的常用抑制劑，而脂氧素有著理想的抗炎治療效果。我院在膿毒癥患者治療過(guò)程中聯(lián)合應(yīng)用脂氧素和烏司他丁，現(xiàn)報(bào)道如下。endprint

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年1～12月我院收治的膿毒癥患者60例，納入標(biāo)準(zhǔn)：患者的體溫超過(guò)38℃或者低于36℃；患者額度心率超過(guò) 90 次/min；患者PaCO2（二氧化碳分壓）低于4.0 kPa；患者的白細(xì)胞數(shù)超過(guò)11.0×109/L或低于3.0×109/L[2]。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并HIV患者；長(zhǎng)期應(yīng)用強(qiáng)的松患者；妊娠哺乳期女性[3]。將患者隨機(jī)分為兩組，對(duì)照組30例，男18例，女12例，年齡19～76歲，平均（41.2±2.6）歲；研究組30例，男20例，女10例，年齡18～75歲，平均（40.3±1.9）歲。兩組患者的一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。具有可比性。受試者均知情同意，且本研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法

對(duì)照組應(yīng)用烏司他?。▏?guó)藥準(zhǔn)字H19990134，廣東天普生化公司生產(chǎn)，藥品規(guī)格：10萬(wàn)U）治療，20萬(wàn)U烏司他丁+30 mL生理鹽水，靜脈注射給藥，1次/d，持續(xù)治療7 d[4]。研究組在對(duì)照組患者基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用脂氧素（國(guó)藥準(zhǔn)H20040505，南京金益柏生物科技有限公司，藥品規(guī)格：48T/96T）治療，1 μg/kg的脂氧素+3 mL生理鹽水，靜脈注射給藥，1次/d，持續(xù)治療7 d[5]。

1.3觀察指標(biāo)

治療前后應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)Ang-1及Ang-2表達(dá)，同時(shí)檢測(cè)患者的腎功能指標(biāo)[6]。采集空腹靜脈血5 mL，分別檢測(cè)血肌酐（BUN）、尿素氮（SCr）以及胱抑素C（Cystatin C）[7]。治療前后檢測(cè)兩組患者的凝血功能，采集空腹靜脈血5 mL，應(yīng)用自動(dòng)生化儀檢測(cè)凝血酶原時(shí)間（PT）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）、D-二聚體（D-D）以及活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）[8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)應(yīng)用SPSS18.0軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后Ang表達(dá)比較

治療前兩組患者的Ang表達(dá)無(wú)明顯差異（P>0.05），治療后研究組Ang-1表達(dá)顯著高于對(duì)照組，Ang-2表達(dá)顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2兩組患者治療前后腎功能比較

治療前兩組患者的腎功能指標(biāo)無(wú)明顯差異（P>0.05），治療后研究組患者腎功能顯著優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3兩組患者治療前后凝血功能比較

治療前兩組患者的凝血功能指標(biāo)無(wú)明顯差異（P>0.05），治療后研究組患者凝血功能指標(biāo)顯著優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05）。見(jiàn)表3。

3討論

相關(guān)研究結(jié)果顯示，凝血活化及炎癥反應(yīng)在膿毒癥病情發(fā)展過(guò)程中有重要的影響[9]。炎癥細(xì)胞因子會(huì)損傷患者的血管內(nèi)皮細(xì)胞，誘發(fā)凝血途徑，導(dǎo)致患者處于高凝狀態(tài)，微血管中血栓不斷生成，加劇機(jī)體的炎癥反應(yīng)。在早期階段有效阻斷患者的炎癥反應(yīng)同時(shí)改善凝血功能，避免血管內(nèi)凝血及多器官功能障礙是提高膿毒癥治療效果的核心[10]。烏司他丁是健康人群尿液當(dāng)中提取的蛋白酶抑制劑，能夠抑制蛋白酶、纖溶酶及脂肪水解酶等。研究顯示烏司他丁能夠借助于內(nèi)源性凝血機(jī)制發(fā)揮效果，可以穩(wěn)定人體中的溶酶體膜，從而減少溶酶體酶生成及分泌，清除氧自由基并且控制炎癥介質(zhì)，發(fā)揮血小板及血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)功能，避免凝血功能障礙出現(xiàn)[11]。隨著膿毒癥患者的病情惡化，凝血功能指標(biāo)中的APTT、PT及D-D等都會(huì)出現(xiàn)顯著的改變。本研究結(jié)果提示，患者應(yīng)用烏司他丁治療之后，患者的凝血功能得到顯著改善（P<0.05），提示烏司他丁治療有利于維持患者凝血及抗凝血功能之間的平衡，從而降低MODS發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

本研究中，研究組患者聯(lián)合應(yīng)用脂氧素治療膿毒癥患者，患者的腎功能指標(biāo)及凝血功能指標(biāo)均顯著優(yōu)于對(duì)照組（P<0.05）。脂氧素是花生四烯酸的一種代謝產(chǎn)物，是臨床上比較常用的一種內(nèi)源性抗炎緩解因子，在纖維化以及腎臟炎性疾病等患者的治療過(guò)程中受到醫(yī)務(wù)人員的高度重視[12]。脂氧素作為重要的一種內(nèi)源性抗炎遞質(zhì)，在人體中發(fā)揮著不容忽視的重要影響，幾乎參與到同炎癥以及免疫相關(guān)的各種疾病。在炎癥性疾病當(dāng)中，脂氧素借助于抑制患者的中性粒細(xì)胞，能夠降低促炎因子的表達(dá)，加速巨噬細(xì)胞吞噬中性粒細(xì)胞[13]。除此之外，脂氧素治療過(guò)程中，患者不會(huì)出現(xiàn)抗炎藥物常見(jiàn)的各種不良反應(yīng)，全身應(yīng)用也不會(huì)降低患者的血壓，同時(shí)不會(huì)影響患者的免疫功能、腎功能以及骨髓造血功能[14]。脂氧素在病理過(guò)程中發(fā)揮影響，并不是直接參與生理功能維持，但是人工合成得到的脂氧素能夠顯著抑制免疫功能。研究發(fā)現(xiàn)，脂氧素在腎臟疾病治療過(guò)程中，能夠發(fā)揮抗炎效果以及保護(hù)腎臟的效果，隨著醫(yī)務(wù)人員對(duì)脂氧素作用機(jī)制的認(rèn)識(shí)，特別是開(kāi)發(fā)結(jié)構(gòu)類似物，生物學(xué)活性還有具體的作用機(jī)制日益明確，在腎臟炎癥以及纖維化治療過(guò)程當(dāng)中應(yīng)用潛力巨大[15]。當(dāng)前情況下，在脂氧素的研究方面仍然處于實(shí)驗(yàn)的環(huán)節(jié)，大部分的研究為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，不過(guò)在治療疾病方面的潛力已經(jīng)得到醫(yī)務(wù)人員的認(rèn)可[16]。研究發(fā)現(xiàn)膿毒癥患者在血清當(dāng)中的Ang-1水平顯著下降，同時(shí)Ang-2水平顯著上升。Ang-1及Ang-2是評(píng)估膿毒癥患者風(fēng)險(xiǎn)以及預(yù)后質(zhì)量當(dāng)中的重要生物標(biāo)記物。Ang-1能夠預(yù)防毛細(xì)血管出現(xiàn)滲漏問(wèn)題，與之相對(duì)應(yīng)的是，Ang-2能夠提高動(dòng)脈血管的通透性[17]。Ang-1及Ang-2在人體的血管當(dāng)中體現(xiàn)出拮抗效果，二者之間的比值越高，提示患者的血管破壞越為嚴(yán)重。Ang-1通過(guò)刺激內(nèi)皮細(xì)胞的遷移、存活、增殖、調(diào)節(jié)以及分化，來(lái)實(shí)現(xiàn)內(nèi)皮屏障的穩(wěn)定性。相關(guān)研究的結(jié)果提示，Ang-1水平下降及Ang-2水平的顯著上升，意味著膿毒癥患者的風(fēng)險(xiǎn)加大以及預(yù)后質(zhì)量較差[18]。Ang-1水平及Ang-2水平的相對(duì)變化方面，Ang-1的水平下降及Ang-2水平的上升，能夠體現(xiàn)出膿毒癥患者當(dāng)中血管內(nèi)皮的損傷狀況，毛細(xì)血管損傷嚴(yán)重會(huì)顯著加大膿毒癥患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)[19]。所以通過(guò)分析這兩種截然不同的血管因子水平，可以有效確定血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)局，是預(yù)測(cè)膿毒癥患者死亡風(fēng)險(xiǎn)的重要生物標(biāo)記物之一。除此之外，研究人員在體內(nèi)外研究的結(jié)果當(dāng)中，脂多糖會(huì)降低人體的Ang-1的表達(dá)水平，抑制Ang-1通路，破壞內(nèi)皮屏障的穩(wěn)定性以及完整性，導(dǎo)致器官功能逐漸喪失，這也能夠解釋Ang-1預(yù)測(cè)患者預(yù)后的作用機(jī)制[20]。從更加全面整體的角度而言，Ang-1水平及Ang-2水平能夠體現(xiàn)出膿毒癥患者自身病理情況及血管損傷的嚴(yán)重程度，體現(xiàn)膿毒癥患者的血管病理機(jī)制及死亡風(fēng)險(xiǎn)。本研究結(jié)果中，治療前兩組患者的Ang表達(dá)無(wú)明顯差異（P>0.05），治療后研究組Ang-1表達(dá)顯著高于對(duì)照組，Ang-2表達(dá)顯著低于對(duì)照組（P<0.05），提示患者治療之后Ang-1及Ang-2表達(dá)得到改善，其中研究組患者聯(lián)合應(yīng)用脂氧素強(qiáng)化抗炎效果，改善水平優(yōu)于對(duì)照組。需要注意的是，本研究仍然存在一定不足。第一，隨機(jī)抽樣進(jìn)行臨床判斷容易導(dǎo)致樣本出現(xiàn)偏差，需要在后續(xù)的研究當(dāng)中進(jìn)一步增加樣本量從而降低誤差。第二，部分患者治療前的Ang-1水平及Ang-2水平不是在急診科測(cè)量，難以確保樣本數(shù)據(jù)的客觀精確，且患者的潛在疾病同樣會(huì)影響到二者的表達(dá)水平，需要在后續(xù)研究當(dāng)中探索相應(yīng)的處理措施。簡(jiǎn)而言之，Ang-1水平及Ang-2水平提供了一種簡(jiǎn)單有效的方法，可評(píng)估膿毒癥患者的預(yù)后質(zhì)量及死亡風(fēng)險(xiǎn)，能夠?yàn)榕R床治療提供新模式。endprint

綜上所述，膿毒癥患者應(yīng)用脂氧素和烏司他丁治療，能夠降低內(nèi)皮細(xì)胞Ang表達(dá)水平，改善患者的腎功能以及凝血功能相關(guān)指標(biāo)，有利于改善患者預(yù)后以及生活質(zhì)量，臨床上值得推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2017-06-25）endprint