華敦洪,莫曉云,黃錦坤,孔春英,胡榮興,謝萬招,賴新連
(福建省上杭縣醫(yī)院,福建 龍巖 364200)
上杭縣居民MCV、MCH與地貧基因檢測(cè)結(jié)果之分析與研究
華敦洪,莫曉云,黃錦坤,孔春英,胡榮興,謝萬招,賴新連
(福建省上杭縣醫(yī)院,福建 龍巖 364200)
目的 調(diào)查本縣居民MCV、MCH同時(shí)降低的陽性率與地中海貧血的基因分型情況,并對(duì)不同年齡、性別對(duì)MCV、MCH在地中海貧血篩查中的影響進(jìn)行研究。方法 通過對(duì)二年來在本院住院、門診、健康體檢者108 722例血液分析結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析,比較不同人群小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率;對(duì)其中1 054例進(jìn)行地中海貧血基因檢測(cè),并將此結(jié)果作為參考標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算并觀察MCV和MCH聯(lián)合檢測(cè)對(duì)地中海貧血篩查的準(zhǔn)確度、特異度、靈敏度、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值。計(jì)算出本縣居民地中海貧血各基因型的構(gòu)成比。結(jié)果 小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率,在不同的年齡段有較大的差別,嬰幼兒最高,其次是青少年,老年人最低。在15歲前男性高于女性,15歲以后至50歲女性高于男性。MCV和MCH系列聯(lián)合檢測(cè)對(duì)地貧篩查的靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值在不同的人群中都高達(dá)95%以上,特異性和陽性預(yù)測(cè)值卻相對(duì)較差,而且在不同的人群具有較大的差別。結(jié)論 小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率,在不同的年齡段有較大的差別,MCV、MCH正常者幾乎可以排除地中海貧血的診斷。但作為診斷指標(biāo)特異性和陽性預(yù)測(cè)值卻相對(duì)較差,而且在不同的人群具有較大的差別。本縣居民地中海貧血總發(fā)病率約為10.19%;α-地中海貧血基因攜帶率為6.59%;β地中海貧血基因攜帶率為3.60%。子女和其父母的MCV、MCH檢測(cè)結(jié)果綜合分析是地中海貧血篩查經(jīng)濟(jì)而有效的方法。
地中海貧血;MCV;MCH;臨床篩查;基因檢測(cè)
地中海貧血,是由于基因缺陷導(dǎo)致血紅蛋白中至少一種珠蛋白合成缺乏或不足,引起貧血或病理狀態(tài),是一組常染色體不完全顯性遺傳性疾病[1]。地中海貧血的防治最有效的措施就是全面進(jìn)行產(chǎn)前篩查,防止中重型患者的出生?;驒z測(cè)是地中海貧血診斷的金標(biāo)準(zhǔn),但技術(shù)要求較高,在近期內(nèi)無法普及至基層,且因費(fèi)用較高,難以被推廣。近年來隨著先進(jìn)的血液分析儀的普及,平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均血紅蛋白含量(MCH)測(cè)定已成為各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目。MCV、MCH降低(又稱小細(xì)胞、低色素性貧血)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用得到普遍重視。本文在對(duì)不同年齡、性別人群小細(xì)胞、低色素性貧血發(fā)病率進(jìn)行調(diào)查分析的基礎(chǔ)上,結(jié)合基因檢測(cè)結(jié)果,對(duì)MCV、MCH在不同年齡、性別人群中篩查地中海貧血的應(yīng)用價(jià)值等方面進(jìn)行分析與研究,現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 臨床資料 MCV、MCH檢測(cè)對(duì)象為2015年1月~2016年12月到本院住院、門診、健康體檢者108 722例。其中男46 636例,女62 086例。年齡1 d~102歲。地貧基因檢測(cè)者來自同期、同類人員1 054例,其中男461例,女593例。年齡3 d~82歲。
1.2 MCV、MCH檢測(cè) 采用SYSMEX XN-1000血液分析儀及其試劑。隨機(jī)采集靜脈血2 mL,EDTA-K2抗凝。30分鐘內(nèi)完成檢測(cè)。
1.3 基因分析 在本院采集EDTA-K2抗凝全血2 mL,由福州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所員工到本院檢驗(yàn)科收集后送到其實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。采用深圳益生堂生產(chǎn)的試劑、PTC-200基因擴(kuò)增儀,PCR+反向點(diǎn)雜交法檢測(cè)。
1.4 收集、保存所有基因檢測(cè)者的相關(guān)信息,包括基因檢測(cè)和MCV、MCH檢測(cè)結(jié)果,以及受檢者的年齡、性別。對(duì)15歲以下小孩則盡可能地收集其父母MCV、MCH的檢測(cè)結(jié)果。
MCV、MCH對(duì)地中海貧血診斷的真實(shí)性評(píng)價(jià)以基因檢測(cè)結(jié)果為參比標(biāo)準(zhǔn),以同時(shí)出現(xiàn)MCH<27 pg、MCV<82 fL者為篩查陽性。采用兒童及其父母MCV、MCH聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果篩查地中海貧血時(shí)則以兒童MCH<27 pg、MCV<82 fL加上父母中有一人或二人MCH<27 pg、MCV<82 fL為篩查陽性。按四格表法計(jì)算靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值。1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件,進(jìn)行二樣本率差別的顯著性檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率,在不同的年齡段有較大的差別,嬰幼兒最高,其次是青少年,老年人最低。在15歲前男性高于女性,15歲以后至50歲女性高于男性。經(jīng)二樣本間率的顯著性檢驗(yàn)上述三種數(shù)據(jù)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。50歲以上男女間的陽性率的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各年齡段小細(xì)胞、低色素性貧血的陽性率見圖1;二樣本間率的顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見表1。20歲以上的男性小細(xì)胞低色素性貧血的總陽性率為11.31%(3 887/34 372)。
2.2 基因檢測(cè)結(jié)果 648例地中海貧血患者的基因檢測(cè)結(jié)果見表2。
2.3 不同年齡、性別人群用MCV、MCH聯(lián)合檢測(cè)地中海貧血的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值及準(zhǔn)確性比較。見表3。
圖1 不同年齡人群小細(xì)胞、低色素性貧血的陽性率
表1 不同人群間小細(xì)胞、低色素性貧血的陽性率比較
表2 648例地中海貧血患者的基因分型
表3 不同人群用MCV、MCH聯(lián)合檢測(cè)地貧的真實(shí)性比較
2.4 62例同時(shí)出現(xiàn)MCH<27 pg、MCV<82f,年齡小于15歲的兒童,其父母雙方MCV、MCH正常者27例,只1例基因檢測(cè)異常,陽性率為3.70%;父母中有一人或二人同時(shí)出現(xiàn)MCH<27 pg、MCV<82 fL者35例,地貧基因異常者29例,陽性率達(dá)82.86%。;經(jīng)兩樣本率差別的顯著性檢驗(yàn)顯示兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(u=6.18,P<0.01)。
3.1 MCH、MCV同時(shí)降低,又稱小細(xì)胞、低色素性貧血,主要見于缺鐵性貧血、慢性失血性貧血、地中海貧血等。該指標(biāo)用于地中海貧血篩查的研究已有眾多報(bào)告[2-5]。但是,不同性別、年齡的人群小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率比較卻尚未見報(bào)道,本文通過對(duì)108 722例檢測(cè)結(jié)果的分析研究,發(fā)現(xiàn)男性與女性人群不僅小細(xì)胞、低色素性貧血的發(fā)病率不同,而且隨著年齡的增長呈現(xiàn)的變化趨勢(shì)也不同。在嬰幼兒期男性的發(fā)病率明顯高于女性,而在青春期開始至50歲這一年齡雖然二者發(fā)病率都有下降,但女性發(fā)病率卻高于男性。50歲以后兩性的發(fā)病率開始趨于一致。男女兩性小細(xì)胞、低色素性貧血發(fā)病率的變化曲線在15歲時(shí)出現(xiàn)一個(gè)明顯的交叉。15~50歲的女性小細(xì)胞、低色素性發(fā)病率較高應(yīng)該是月經(jīng)所致,15歲前的小孩發(fā)病率高于成人也可能是因其鐵攝入量難以滿足生長發(fā)育的需要而導(dǎo)致缺鐵性貧血發(fā)病率高于成人。但男孩為何明顯高于女孩,以及除地中海貧血和缺鐵性貧血外是否還有其他原因?qū)е滦『⑿〖?xì)胞、低色素性貧血陽性率高達(dá)50%以上,卻有待進(jìn)一步研究。
3.2 近年來,隨著對(duì)地中海貧血防治工作的開展,MCV、MCH檢測(cè)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用研究也日益增加。普遍認(rèn)為MCV、MCH對(duì)地中海貧血的篩查具有很高的靈敏度(90%~96%)[2-3],但特異度卻相對(duì)較差,MCV和MCH系列聯(lián)合檢測(cè)相對(duì)單項(xiàng)檢測(cè)和平行聯(lián)合檢測(cè)具有較高的特異性。本文采用系列聯(lián)合檢測(cè)(兩項(xiàng)指標(biāo)均出現(xiàn)陽性結(jié)果時(shí)才判斷為陽性)比較不同人群的差異。
從表3可看出,MCV和MCH系列聯(lián)合檢測(cè)對(duì)地貧篩查的靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值在不同的人群中都高達(dá)95%以上,說明該指標(biāo)用于地貧篩查具有極高的靈敏度。MCV、和MCH正常者幾乎可以排除地中海貧血的診斷。但作為診斷指標(biāo)特異性和陽性預(yù)測(cè)值卻相對(duì)較差,而且在不同的人群具有較大的差別。在15歲前的小孩低于成年人,其中男孩比女孩更低;15歲以后女性卻低于男性。總體結(jié)果與各類人群的小細(xì)胞低色性性貧血的陽性率密切相關(guān),陽性率越高用于地中海貧血篩查的特異度和陽性預(yù)測(cè)值就越低,反之亦然。在所有人群中20歲以上的男性特異性、陽性預(yù)測(cè)值和準(zhǔn)確度最高,分別為88.89%,90.10%,93.44%;而且其靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值分別高達(dá)97.84%,97.56%。也就是說對(duì)于這一人群采用該指標(biāo)篩查地中海貧血具有靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。
地中海貧血是一組常染色體遺傳性疾病,死亡率極低,在同一族群中,如果沒有進(jìn)行醫(yī)學(xué)干預(yù)措施,在不同的性別、年齡的人群中發(fā)病率幾乎是相同的。20歲以上的男性發(fā)病率與其同一族群的總發(fā)病率是基本相同的。因此,可用20歲以上男性MCV和MCH系列聯(lián)合檢測(cè)的陽性率及其對(duì)地中海貧血診斷的陽性預(yù)測(cè)值粗略推算出其所在族群地中海貧血的發(fā)病率。據(jù)此,采用本文資料可以推算出上杭縣居民地中海貧血的發(fā)病率約為11.31%×90.10%=10.19%。
3.3 從表2可見,本縣居民地中海貧血α型較多,占64.66%;其中又以α-地貧1基因雜合子(--/2α)最多,占總數(shù)的51.39%;β型地中海貧血占35.34%,其中以Ivs-Ⅱ-654位點(diǎn)突變基因雜合子最多,占總數(shù)的19.75%。結(jié)合前文推算出的地中海貧血發(fā)病率可計(jì)算出上杭縣居民α-地中海貧血基因攜帶率為64.66×10.19%=6.59%;β地中海貧血基因攜帶率為35.34%×10.19%=3.60%。徐兩蒲[6]根據(jù)949例樣本調(diào)查得出的福建省龍巖市地中海貧血的發(fā)病率、α-地中海貧血基因攜帶率、β地中海貧血基因攜帶率分別為9.38%、7.06%、2.32%。與本文結(jié)果略有差別,可能是抽樣誤差所致。也可能本縣居民都是客家人,而所在的龍巖市還有其他民系居民,兩者的地中海貧血發(fā)病率確實(shí)存在差異。3.3 MCV和MCH系列聯(lián)合檢測(cè)陽性兒童,如果其父母雙方均為正常者27例,只1例基因檢測(cè)異常。陽性率為3.70%;父母中有一人或二人同時(shí)出現(xiàn)陽性者M(jìn)CH<27 pg、MCV<82 fL者35例,地貧基因異常者29例,陽性率達(dá)82.85%。;說明對(duì)于MCV、MCH降低的兒童,只要再檢測(cè)其父母雙方的MCV、MCH就能對(duì)其是否患有地中海貧血作出較準(zhǔn)確的判斷。特別是對(duì)于父母雙方均為陰性者,幾乎可以排除地中海貧血的診斷。相對(duì)于基因檢測(cè)而言,MCV、MCH檢測(cè)費(fèi)用極其低廉,而且簡單快速。建義在對(duì)兒童進(jìn)行地中海貧血篩查時(shí)同時(shí)對(duì)其父母進(jìn)行MCV、MCH檢測(cè)。對(duì)于成年人如果能獲得其父母這二項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果,同樣也有助于是否患有地中海貧血的判斷[7-8]。
MCV、MCH同時(shí)降低的檢出率,在不同的年齡段有較大的差別,嬰幼兒最高,其次是青少年,老年人最低。在15歲前男性高于女性,15歲以后至50歲女性高于男性。50歲以后男女兩性的檢出率開始趨于一致。
MCV和MCH系列聯(lián)合檢測(cè)對(duì)地貧篩查的靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值在不同的人群中都高達(dá)95%以上,用于地貧篩查具有極高的靈敏度。MCV和MCH正常者幾乎可以排除地中海貧血的診斷。但作為診斷指標(biāo)特異性和陽性預(yù)測(cè)值卻相對(duì)較差,而且在不同的人群具有較大的差別。在15歲前的小孩低于成年人,其中男孩比女孩更低;15歲以后女性卻低于男性。在所有人群中20歲以上的男性特異性、陽性預(yù)測(cè)值和準(zhǔn)確度最高,分別為88.89%,90.10%,93.44%;而且其靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值分別高達(dá)97.84%,97.56%。
本縣居民地中海貧血總發(fā)病率約為10.19%;α-地中海貧血基因攜帶率為6.59%;β地中海貧血基因攜帶率為3.60%。
對(duì)于MCV、MCH降低的兒童,只要再檢測(cè)其父母雙方的MCV、MCH就可對(duì)其是否患有地中海貧血作出較準(zhǔn)確的判斷[9]。特別是對(duì)于父母雙方均為陰性者,幾乎可以排除地中海貧血的診斷。子女和其父母的MCV、MCH檢測(cè)結(jié)果綜合分析是地中海貧血篩查經(jīng)濟(jì)而有效的方法。
[1] 王惠民,王清濤.臨床實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)[M].北京:高等教育出版社,2012:289-290.
[2] 李光梅.MCV、MCH檢測(cè)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用研究[J].臨床醫(yī)學(xué)工程,2016,23(3):335-336.
[3] 梁棟偉,李榮川,何健,等.MCV、MCH檢測(cè)在地中海貧血篩查中的應(yīng)用研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2014,35(8):960-961.
[4] 羅景荷.MCV、MCH及血紅蛋白A2檢測(cè)在地中海貧血篩查中的價(jià)值[J].蛇志,2015,27(3):276-277.
[5] 黃英.平均紅細(xì)胞體積和血紅蛋白量在篩查地中海貧血中的價(jià)值[J].現(xiàn)代診斷與治療,2013,24(15):3371-3372.
[6] 徐兩蒲.福建省籍各地市人群地中海貧血的分子流行病學(xué)研究[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,2013,30(4):403-406.
[7] 駱明勇,胡聽聽,王繼成,等.干血斑標(biāo)本珠蛋白生成障礙性貧血基因檢測(cè)方法的建立[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2015(19):2784-2786.
[8] 李兵.廣東省地中海貧血流行及防控現(xiàn)狀評(píng)價(jià)[D].南方醫(yī)科大學(xué),2015.
[9] 何蓉,甘建玲,鄧思媛,等.聯(lián)合檢驗(yàn)對(duì)地中海貧血與缺鐵性貧血的診斷價(jià)值評(píng)價(jià)[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2014,20(33):143-144.
10.3969/j.issn.1009-4393.2017.30.053
莫曉云,E-mail:Moxiaoyun1965@163.com