高效液相色譜法測定不同甜瓜品種的糖含量

鄭賀云+張銀歡+張翠環(huán)+耿新麗+廖新福

摘要 以春秋蜜17號(hào)、西州密25號(hào)、西州密1號(hào)、新蜜25號(hào)為試材，利用高效液相色譜法測定果實(shí)中葡萄糖、果糖、蔗糖含量并對(duì)不同品種糖含量進(jìn)行差異分析。結(jié)果表明，不同甜瓜品種糖組分含量差異顯著，果實(shí)甜度高低依次為西州密25號(hào)、春秋蜜17號(hào)、新蜜25號(hào)、西州密1號(hào)。

關(guān)鍵詞 高效液相色譜法；甜瓜；品種；糖含量；測定

中圖分類號(hào) S652 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）17-0065-02

Determination of Sugar Content in Different Melon Varieties by HPLC

ZHENG He-yun ZHANG Yin-huan ZHANG Cui-huan GENG Xin-li LIAO Xin-fu *

（Research Institute of Grape and Melon of Xinjiang Uygur Autonomous Region，Shanshan Xinjiang 838200）

Abstract The contents of sugars of 4 melon cultivars（Chunqiumi17、Xizhoumi25、Xizhoumi1、Xinmi25） were determined by high performance liquid chromatography（HPLC） and the difference of sugar content in different varieties was analyzed.The results showed that the content of sugar components significantly differences between species，the sweetness degree of fruit is in turn Xizhoumi25、Chunqiumi17、Xinmi25、Xizhoumi1.

Key words HPLC；melon；sugar；varieties；content of sugar；determination

甜瓜屬葫蘆科（Cucurbitaceae）香瓜屬（Cucumis）植物，栽培歷史悠久，風(fēng)味獨(dú)特，含有人體內(nèi)必需的各種營養(yǎng)物質(zhì)，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值，近年來備受廣大消費(fèi)者的青睞。糖不僅是果實(shí)品質(zhì)、風(fēng)味的重要組成成分，也是氨基酸、VC等營養(yǎng)物質(zhì)合成的基礎(chǔ)原料[1]。甜瓜中主要的可溶性糖組分為葡萄糖、果糖和蔗糖，其含量和組成是構(gòu)成甜瓜品質(zhì)的關(guān)鍵[2]。

由于市場的需要，甜瓜品種急劇增加，甜瓜類型越來越豐富。目前，我國種植較為普遍的有西州密系列、白蘭瓜、伊麗莎白、玉金香等眾多品種，這些品種的厚皮甜瓜風(fēng)味差異較大，其品質(zhì)營養(yǎng)也有較大差異。本試驗(yàn)對(duì)4個(gè)甜瓜品種的含糖量進(jìn)行測定，以期為甜瓜品質(zhì)評(píng)價(jià)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試甜瓜材料：于2016年8月購買于新疆哈密市淖毛湖鎮(zhèn)。甜瓜品種分別為西州密25號(hào)、春秋蜜17號(hào)、西州密1號(hào)、新蜜25號(hào)4個(gè)品種。栽培管理?xiàng)l件一致，每個(gè)品種隨機(jī)挑選5個(gè)成熟果實(shí)，去皮去瓤，用打孔器分別在果實(shí)的臍部、中部、蒂部取樣后混合，樣品置于-40 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

供試試劑：葡萄糖、果糖、蔗糖標(biāo)樣；乙腈（色譜級(jí)）；超純水。

1.2 儀器與設(shè)備

高效液相色譜儀（美國安捷倫1260）、示差遮光檢測器（G1362A RID）、高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)Sigma3K-15、純水機(jī)、電子天平等。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)液的配制

準(zhǔn)確稱取葡萄糖、果糖、蔗糖25 mg，溶解后雙蒸水定容至1 mL容量瓶中，得到濃度為25 mg/L的葡萄糖、果糖、蔗糖混標(biāo)溶液；用同上方法配制25 mg/L的葡萄糖、果糖、蔗糖的單標(biāo)溶液，蔗糖逐級(jí)稀釋至5.00、2.00、1.00、0.50、0.10、0.05 mg/L。

1.4 色譜分析條件

色譜柱：氨基柱（Platisil NH2 5u 250 mm×4.6 mm）；流動(dòng)相為乙腈∶水=75∶25，流動(dòng)相經(jīng)0.45 μm濾膜過濾后超聲波脫氣30 min，流速為1.00 mL/min，進(jìn)樣體積為20 μL，柱溫為35 ℃[3]。

1.5 糖分提取

準(zhǔn)確稱取經(jīng)榨汁機(jī)打碎的甜瓜肉1 g，加6 mL純乙腈（色譜級(jí)），60 ℃水浴10 min后8 000 r/min 離心20 min，將上清液轉(zhuǎn)至25 mL的容量瓶中；殘?jiān)偌尤? mL雙蒸水，繼續(xù)60 ℃水浴10 min，8 000 r/min離心20 min，合并上清液；再次重復(fù)上一步提取1次，合并上清液，最終定容到25 mL刻度，抽取1 mL上清液通過0.22 μm有機(jī)濾膜過濾，供高效液相色譜檢測用[4]。

1.6 數(shù)據(jù)分析

1.6.1 糖含量計(jì)算方法。計(jì)算公式：W=C0V/m，式中：W為糖含量（mg/g·FW）；C0為糖分質(zhì)量濃度（g/L）；V為樣品溶液體積（mL）；m為樣品質(zhì)量（g）。

1.6.2 甜度值計(jì)算方法。甜度值的計(jì)算參照姚改芳略有改動(dòng)[5]，以蔗糖的甜度值為基準(zhǔn)1.00，果糖為1.75，葡萄糖為0.7，甜度值=果糖×1.75+葡萄糖×0.7+蔗糖×1。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

利用Excel 2003和DPS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別取5.00、2.00、1.00、0.50、0.10、0.05 mg/L的葡萄糖、果糖、蔗糖的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣量為20 uL，以標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)，標(biāo)樣峰面積為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算回歸方程，結(jié)果見表1。葡萄糖、果糖、蔗糖的質(zhì)量濃度與其HPLC峰面積的相關(guān)參數(shù)分別為0.999 8、0.999 6、0.999 5?；鞓?biāo)色譜圖中出峰順序分別是溶劑峰、果糖、葡萄糖和蔗糖（圖1）。

2.2 不同甜瓜品種果實(shí)糖組分含量

由表2可知，4個(gè)甜瓜品種果實(shí)中的可溶性糖組分含量差異性顯著。果糖含量為17.220 4～35.747 7 mg/g FW，高低依次為春秋蜜17號(hào)、新蜜25號(hào)、西州密25號(hào)、西州密1號(hào)，春秋蜜17號(hào)與其他3個(gè)品種之間都達(dá)到了極顯著差異，西州密25號(hào)與西州密1號(hào)差異顯著，但與新蜜25號(hào)差異不顯著。4個(gè)品種間的葡萄糖含量差異都達(dá)到了極顯著水平，春秋蜜17號(hào)葡萄糖含量最高，達(dá)到70.585 3 mg/g FW，西州密1號(hào)葡萄糖含量最低，為22.855 3 mg/g FW。蔗糖含量為47.081 3～94.992 2 mg/g FW，含量最高的是西州密25號(hào)，極顯著高于春秋蜜17號(hào)和新蜜25號(hào)，但與西州密1號(hào)含量差異不顯著。

2.3 不同甜瓜品種甜度差異

甜味是糖的重要性質(zhì)，甜味的強(qiáng)弱用甜度來表示，通常以蔗糖作為基準(zhǔn)物。由圖2可知，4個(gè)甜瓜品種甜度值西州密25號(hào)>春秋蜜17號(hào)>新蜜25號(hào)>西州密1號(hào)，西州密1 號(hào)表現(xiàn)與其他品種差異顯著，其他3個(gè)品種之間沒有明顯差異。

3 結(jié)論與討論

果實(shí)中糖分的積累是衡量果實(shí)品質(zhì)和風(fēng)味的重要指標(biāo)，由于糖組分和含量的差異，在一定程度上對(duì)果實(shí)風(fēng)味的形成有一定的影響[6]。甜瓜果實(shí)積累的糖分主要以葡萄糖、蔗糖、果糖為主，甜瓜果實(shí)發(fā)育早期以積累己糖為主，在發(fā)育后期蔗糖開始上升，不同品種、不同產(chǎn)地的甜瓜果實(shí)中的糖組分有一定差異。本試驗(yàn)研究表明，春秋蜜17號(hào)以葡萄糖積累最多，西州密25號(hào)、西州密1號(hào)和新蜜25號(hào)蔗糖含量較多，由此說明，甜瓜果實(shí)可溶性糖含量積累類型因品種而異[7-8]。

果實(shí)中可溶性糖以果糖甜度最高，甜度約為蔗糖的1.8倍，葡萄糖的2.5倍。因此，果實(shí)甜度不僅與糖總量有關(guān)還取決于糖分組成[9]。由于春秋蜜17號(hào)、西州密25號(hào)、西州密1號(hào)和新蜜25號(hào)的糖組分存在顯著差異，其果實(shí)甜度也差異顯著，即西州密25號(hào)>春秋蜜17號(hào)>新蜜25號(hào)>西州密1號(hào)。

4 參考文獻(xiàn)

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