血站內(nèi)、外獻(xiàn)血者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)結(jié)果比對(duì)及影響因素分析

趙建鵬　楊曉芽　楊秀萍

[摘要] 目的 比較站內(nèi)和站外獻(xiàn)血者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）檢測(cè)結(jié)果，制訂相應(yīng)的措施以保證不同儀器設(shè)備檢測(cè)結(jié)果的一致性。 方法 采用全自動(dòng)生化儀日立7100和半自動(dòng)生化儀Photometer 4040對(duì)同一獻(xiàn)血者進(jìn)行ALT測(cè)定；以全自動(dòng)生化儀日立7100的檢查結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果X，半自動(dòng)生化儀Photometer 4040的檢測(cè)結(jié)果為待評(píng)價(jià)結(jié)果Y（采血車上Photometer 4040為Y1，站內(nèi)Photometer 4040為Y2）計(jì)算Yn減去X的差值dn，比較d1和d2的差異，并做折線圖直觀反映站內(nèi)、站外ALT檢測(cè)結(jié)果的差異，對(duì)造成差異的影響因素進(jìn)行分析。 結(jié)果 日立7100和血站外4040檢測(cè)結(jié)果差值d1為（5.07±4.33），日立7100和血站內(nèi)4040檢測(cè)結(jié)果差值d2為（2.40±1.39），兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=7.513，P < 0.05）。d1的折線圖波動(dòng)幅度明顯大于d2。 結(jié)論 站外半自動(dòng)生化儀ALT檢測(cè)結(jié)果的不穩(wěn)定性明顯高于站內(nèi)檢測(cè)結(jié)果，造成這一結(jié)果的原因可能為實(shí)驗(yàn)操作的環(huán)境因素，儀器的電流、電壓的穩(wěn)定性，末梢血采集過程中出現(xiàn)溶血等血樣的問題等。

[關(guān)鍵詞] 獻(xiàn)血者；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶；生化分析儀；影響因素

[中圖分類號(hào)] R446.111 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2017）08（a）-0121-04

[Abstract] Objective To compare the detection results of alanine aminotransferase （ALT） test of blood donors inside and outside the station， in order to develop corresponding measures to ensure the consistency of the results of different instruments and equipments. Methods The same donors′ blood ALT were measured by automatic biochemical analyzer Hitachi 7100 and semi-automatic biochemical analyzer Photometer 4040 respectively. The results obtained by the Hitachi 7100 were taken as standard results X， and the results of Photometer 4040 were takend as unevaluated results Y （the results of Photometer 4040 on the donation car were Y1； the results of Photometer 4040 in the station were Y2）. The dn was calculated by Yn subtracting X， the differences between d1 and d2 were compared， and line charts of dn were made to directly reflect differences in ALT testing results outside and inside the station. The factors leading to different results were analyzed. Results Difference value d1 of Hitachi 7100 and outside blood station 4040 test results was （5.07±4.33）， difference value d2 of Hitachi 7100 and inside blood station 4040 test results was （2.40±1.39）， the difference was significant （t=7.513， P < 0.05）. The fluctuation range of the d1 line chart was obviously higher than that of d2 line chart. Conclusion The instability of the ALT results obtained by semiautomatic biochemical analyzer outside the station is significantly higher than that inside the station. There are many reasons for this result， such as environmental factors of experimental operation， the stability of electric current and voltage of instrument and hemolysis as well as other blood problems in blood collection process.

[Key words] Blood donors； ALT； Biochemical analyzer； Influential factors

無償獻(xiàn)血者所獻(xiàn)的血液必須經(jīng)過丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎抗體（Anti-HCV）、梅毒螺旋體（TP）和艾滋病毒抗體（Anti-HIV）等項(xiàng)目的檢測(cè)以確保血液安全。其中，ALT是世界衛(wèi)生組織推薦用于檢測(cè)肝功能損害的敏感檢測(cè)指標(biāo)，由于我國(guó)是肝炎高發(fā)地區(qū)，故ALT也是無償獻(xiàn)血者血液檢測(cè)的主要項(xiàng)目之一[1]。ALT分布廣泛，于全身各組織中均能檢測(cè)到，尤其在肝臟中的含量最豐富。正常情況下ALT在血清中含量很低，當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，血清ALT的濃度會(huì)升高，其中，1%肝細(xì)胞壞死，血清中酶活性增高1倍。此外，當(dāng)肝細(xì)胞通透性增加時(shí)，轉(zhuǎn)氨酶也可從肝細(xì)胞中釋出，使血清中酶含量增高。因此，當(dāng)輕、中度肝損傷時(shí)，由于肝細(xì)胞的壞死和肝細(xì)胞膜通透性增高等因素，肝細(xì)胞胞漿內(nèi)ALT釋放入血，導(dǎo)致血液中ALT升高。ALT在血清中的濃度水平對(duì)于臨床各型肝炎、肝癌、肝硬化的診斷及治療具有重要意義[2-6]。endprint

采供血機(jī)構(gòu)在日常進(jìn)行的血液檢測(cè)過程中常常發(fā)現(xiàn)流動(dòng)獻(xiàn)血車或獻(xiàn)血屋與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的不一致性，表現(xiàn)在本應(yīng)初篩淘汰的獻(xiàn)血者被放行采血，而實(shí)驗(yàn)室復(fù)試檢測(cè)結(jié)果不合格，直接導(dǎo)致獻(xiàn)血者淘汰或血液報(bào)廢，且ALT不合格血液報(bào)廢率有上升趨勢(shì)[7]。獻(xiàn)血者由于ALT檢測(cè)偏差淘汰或采集的血液?jiǎn)雾?xiàng)ALT不合格報(bào)廢，其主要原因是ALT所使用的檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果不一致造成的[8]。加強(qiáng)街頭初篩和站內(nèi)兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的比對(duì)，縮小差異，是進(jìn)一步降低由于ALT不合格導(dǎo)致血液報(bào)廢的關(guān)鍵[9]。目前，我國(guó)多個(gè)地區(qū)的血站已對(duì)站內(nèi)和站外ALT檢測(cè)系統(tǒng)的結(jié)果差異做了研究[8，10-11]，并根據(jù)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整了采血車上的ALT臨界值[12]，控制了報(bào)廢血的數(shù)量，減少血液資源不必要的浪費(fèi)。本研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)旨在探討站內(nèi)、站外的ALT檢測(cè)結(jié)果是否具有一致性，如果結(jié)果不一致，分析造成誤差的原因并制訂相應(yīng)的措施以保證不同儀器設(shè)備檢測(cè)結(jié)果的一致性。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本

ALT室內(nèi)質(zhì)控物（中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)140522），靶值67.5 U/L。站外標(biāo)本采用獻(xiàn)血者指尖毛細(xì)血管血血漿，站內(nèi)標(biāo)本采用獻(xiàn)血者肘靜脈血血漿，樣本總量200人次。

1.2 檢測(cè)系統(tǒng)

以日立7100全自動(dòng)生化分析儀、四川邁克原裝試劑（JSCC標(biāo)準(zhǔn)化對(duì)應(yīng)）、校準(zhǔn)品和質(zhì)控物組成的檢測(cè)系統(tǒng)（可溯源至國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)單位，參加衛(wèi)計(jì)委臨床檢測(cè)中心ALT項(xiàng)目室間質(zhì)評(píng)全部合格）為目標(biāo)檢測(cè)系統(tǒng)比較方法（X），站外（市內(nèi)廣場(chǎng)）采血車使用德國(guó)Photometer 4040半自動(dòng)生化分析儀及配套試劑為待評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)試驗(yàn)方法（Y1），站內(nèi)實(shí)驗(yàn)室德國(guó)Photometer 4040半自動(dòng)生化分析儀及配套試劑為待評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)試驗(yàn)方法（Y2）。

1.3 方法

采集的血液樣品按照《血站技術(shù)操作規(guī)程》（2015版）規(guī)定，獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前血液可根據(jù)實(shí)際情況增加ALT檢測(cè)項(xiàng)目[13]。張家口市中心血站為了避免因ALT升高造成的血液報(bào)廢，對(duì)獻(xiàn)血者ALT采用兩種儀器（德國(guó)Photometer 4040半自動(dòng)生化分析儀和日立7100全自動(dòng)生化分析儀）進(jìn)行檢測(cè)，分別在采血前和采血后進(jìn)行，比對(duì)站外和站內(nèi)不同檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)獻(xiàn)血者ALT的檢驗(yàn)結(jié)果。

1.3.1 儀器校準(zhǔn) 按照EP9-A2文件及文獻(xiàn)[14]，實(shí)驗(yàn)前所有儀器由廠家進(jìn)行校準(zhǔn)，在試驗(yàn)過程中嚴(yán)格執(zhí)行試劑和儀器說明書。

1.3.2 操作過程 采用靜態(tài)比較法和動(dòng)態(tài)比較法，運(yùn)用全自動(dòng)生化儀日立7100和半自動(dòng)生化儀4040對(duì)同一獻(xiàn)血者血液進(jìn)行ALT測(cè)定。每天在測(cè)定標(biāo)本前測(cè)定靶值為67.5 U/L的室內(nèi)質(zhì)控物各1次。站外采血車（市區(qū)廣場(chǎng)）上，使用半自動(dòng)生化儀Photometer 4040對(duì)獻(xiàn)血者末梢全血進(jìn)行ALT檢測(cè)，并記錄連續(xù)10名獻(xiàn)血者的測(cè)定結(jié)果（Y1）。在站內(nèi)實(shí)驗(yàn)室，分別使用全自動(dòng)生化儀日立7100和半自動(dòng)生化儀Photometer 4040對(duì)與站外對(duì)應(yīng)的10名獻(xiàn)血者的抗凝靜脈血按照1→10和10→1的順序進(jìn)行正反兩次ALT測(cè)定，并分別記錄結(jié)果（X）和（Y2）。按以上操作，每天記錄10名獻(xiàn)血者ALT測(cè)定值，連續(xù)記錄20 d。動(dòng)態(tài)比較：Y1和X比較，環(huán)境等客觀因素相對(duì)不穩(wěn)定；靜態(tài)比較：Y2和X比較，環(huán)境等客觀因素相對(duì)穩(wěn)定。

1.4 離群值檢查

按EP9-A2文件進(jìn)行離群值檢查，檢查每一系統(tǒng)內(nèi)雙份測(cè)定值有無離群表現(xiàn)。以4倍的各系統(tǒng)差值的均值（包括相對(duì)差值的均值）為限值，各系統(tǒng)內(nèi)的成對(duì)差值都應(yīng)在限值內(nèi)，說明雙份測(cè)定結(jié)果符合檢測(cè)要求。超過限值的即為離群點(diǎn)，如有離群點(diǎn)刪除該值，并擴(kuò)大檢測(cè)標(biāo)本量補(bǔ)充數(shù)據(jù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。使用柱狀圖將連續(xù)5 d 50個(gè)樣本經(jīng)三臺(tái)儀器ALT的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，并利用Y1、Y2分別與X的差值d做折線圖直觀反映站外、站內(nèi)ALT檢測(cè)結(jié)果的差異。

2 結(jié)果

2.1 血站內(nèi)、外3臺(tái)儀器對(duì)同一獻(xiàn)血者血液ALT檢測(cè)結(jié)果比較

本研究共檢測(cè)獻(xiàn)血者血液樣本200份，其中，全自動(dòng)生化儀日立7100測(cè)定結(jié)果為（23.26±8.96）U/L，站外流動(dòng)采血車半自動(dòng)生化儀4040測(cè)定結(jié)果為（28.77±8.67）U/L，站內(nèi)半自動(dòng)生化儀4040測(cè)定結(jié)果為（25.37±9.08）U/L。三者間檢測(cè)結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。站內(nèi)、外半自動(dòng)生化儀4040的檢測(cè)結(jié)果均高于站內(nèi)全自動(dòng)生化儀日立7100檢測(cè)結(jié)果，且站外半自動(dòng)生化儀4040檢測(cè)結(jié)果高于站內(nèi)半自動(dòng)生化儀4040的檢測(cè)結(jié)果。

2.2 血站內(nèi)、外3臺(tái)儀器ALT檢測(cè)結(jié)果比較

利用血站內(nèi)、外3臺(tái)儀器連續(xù)5 d對(duì)50個(gè)樣本ALT進(jìn)行檢測(cè)，血站內(nèi)、外半自動(dòng)生化儀4040對(duì)于實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化儀7100的檢測(cè)結(jié)果均有一定程度的偏差，而且站外設(shè)備的檢測(cè)結(jié)果偏差較大。見圖1。

2.3 血站內(nèi)、外半自動(dòng)生化儀與實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化儀檢測(cè)結(jié)果差值分析

全自動(dòng)生化儀日立7100和站外半自動(dòng)生化儀4040檢測(cè)結(jié)果差值d1為（5.07±4.33），日立7100和站內(nèi)4040檢測(cè)結(jié)果差值d2為（2.40±1.39），兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=7.513，P < 0.05）。

2.4 血站內(nèi)、外半自動(dòng)生化儀ALT檢測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化儀檢測(cè)結(jié)果差值的波動(dòng)比較

將連續(xù)5 d 50個(gè)樣本ALT檢測(cè)結(jié)果計(jì)算Y1、Y2與X的差值分別做折線圖直觀反映站外、站內(nèi)ALT檢測(cè)結(jié)果的差異。如圖2所示，站外半自動(dòng)生化儀對(duì)樣本ALT檢測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化儀檢測(cè)結(jié)果差值（d1）在-15～20之間波動(dòng)，波動(dòng)區(qū)間較大。如圖3所示，站內(nèi)半自動(dòng)生化儀對(duì)樣本ALT檢測(cè)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化儀檢測(cè)結(jié)果差值（d2）在-6～6之間波動(dòng)，波動(dòng)區(qū)間較小。endprint

3 討論

ALT廣泛存在于人體的肝臟和各個(gè)器官組織中，肝臟的含量最高，是肝細(xì)胞損傷的靈敏指標(biāo)，ALT的檢測(cè)有助于預(yù)防輸血引起的相關(guān)病毒性肝炎的傳播[15]。ALT是血液檢測(cè)的必檢項(xiàng)目之一，在采血之前對(duì)ALT的檢測(cè)可以有效降低采血后成品血液報(bào)廢率[16-17]。本研究將流動(dòng)采血車和站內(nèi)同型號(hào)半自動(dòng)生化設(shè)備的ALT檢測(cè)結(jié)果與檢驗(yàn)科全自動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)生化儀的ALT檢測(cè)結(jié)果做對(duì)比。結(jié)果顯示，三者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，站外流動(dòng)采血車生化儀的ALT檢測(cè)結(jié)果偏高。此外，根據(jù)美國(guó)CLIA′88文件，ALT試驗(yàn)允許誤差為±20%，偏離度要小于允許誤差的1/2，即10%，但對(duì)于采供血機(jī)構(gòu)來說站內(nèi)、外半自動(dòng)生化設(shè)備對(duì)ALT質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果相對(duì)于實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)生化儀的檢測(cè)結(jié)果仍在允許的偏差范圍內(nèi)波動(dòng)，否則必須重新校準(zhǔn)儀器或?qū)φ麄€(gè)檢測(cè)過程進(jìn)行重新確認(rèn)。

日立7100和站外4040檢測(cè)結(jié)果差值d1為（5.07±4.33），日立7100和站內(nèi)4040檢測(cè)結(jié)果差值d2為（2.4±1.39），兩者比較差異顯著（P < 0.05）。同時(shí)，從d1和d2的折線圖可以看出，d1在-15～20之間波動(dòng)，d2在-6～6之間波動(dòng)，d1的波動(dòng)幅度要比d2偏大，說明站外半自動(dòng)生化儀因受環(huán)境等多方面影響，其ALT檢測(cè)結(jié)果的不穩(wěn)定性要明顯高于站內(nèi)檢測(cè)結(jié)果。經(jīng)分析，造成誤差的原因可能與血液的采集、運(yùn)送、采血車的環(huán)境、人員的培訓(xùn)、嚴(yán)格的質(zhì)量控制及規(guī)范的操作等相關(guān)。因此，有必要采取相應(yīng)的措施以降低血液報(bào)廢率[18]。

采血前的ALT檢測(cè)多采用末梢靜脈穿刺采血，雖然有調(diào)查顯示，末梢靜脈血與肘靜脈血對(duì)生化項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果不會(huì)有明顯的影響[19]。但是，操作中針刺過淺，用力擠壓指腹或者因環(huán)境影響獻(xiàn)血者末梢循環(huán)不暢仍會(huì)對(duì)ALT檢測(cè)結(jié)果造成一定影響。因此，針對(duì)這種情況，某些血站已經(jīng)改為肘靜脈采血做采血前化驗(yàn)，張家口市中心血站也應(yīng)進(jìn)一步改進(jìn)。

在質(zhì)量管理體系中，人、機(jī)、料、法、環(huán)五要素中，人作為第一要素尤為重要。采血車檢驗(yàn)人員的培訓(xùn)是否到位直接影響站外ALT檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，對(duì)工作人員不僅要求會(huì)做ALT檢測(cè)還要熟知檢測(cè)原理，牢記檢測(cè)注意事項(xiàng)，熟練掌握生化分析儀、加樣器、樣品采集等各項(xiàng)操作技術(shù)，嚴(yán)格技術(shù)考核，合格后上崗。上崗后還要不定期進(jìn)行技能考核，只有這樣才能保證檢測(cè)質(zhì)量。采血車環(huán)境不易控制是導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果隨機(jī)誤差大的重要原因。采血車空間小，人員流動(dòng)大，環(huán)境溫濕度不能很好控制。同時(shí)儀器使用時(shí)，電源穩(wěn)定性差，儀器來回運(yùn)輸過程中顛簸會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性。因此，必須做好檢測(cè)前準(zhǔn)備、樣品的采集、試劑的準(zhǔn)備、儀器的校準(zhǔn)、環(huán)境的控制等，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程執(zhí)行，這樣才能在提高檢測(cè)準(zhǔn)確度的同時(shí)，提高精密度。采血車要做好與檢驗(yàn)科的比對(duì)工作[18]。血站采集的血液為了避免因ALT升高造成的報(bào)廢，要進(jìn)行采血車上采血前篩查和采血后檢驗(yàn)科檢測(cè)。兩部門比對(duì)要有一致性，盡量降低CV值，最重要的是能夠根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究逐步建立起站內(nèi)、站外ALT檢測(cè)系統(tǒng)，并歸入室間質(zhì)評(píng)檢測(cè)行列，減少血液報(bào)廢率，使其下降至合理區(qū)間。

除此之外，站內(nèi)還采取了如下措施：①加強(qiáng)采血車環(huán)境質(zhì)量管理，為采血車內(nèi)提供充足的溫、濕度調(diào)節(jié)設(shè)施，保證檢測(cè)環(huán)境溫、濕度相對(duì)穩(wěn)定，做好溫、濕度記錄，對(duì)不合格車組進(jìn)行停車整頓。②嚴(yán)格篩選獻(xiàn)血者。由于ALT并非肝炎診斷的特異性指標(biāo)，所以其水平的升高除了與肝臟疾病、心血管疾病、骨骼疾病等病理因素有關(guān)外，還與酒類攝取、體重指數(shù)、運(yùn)動(dòng)、疲勞、藥物服用，乃至生活方式和飲食習(xí)慣等多種非病理性因素密切相關(guān)[20]。所以仔細(xì)詢問病史、近期身體狀況及生活、飲食習(xí)慣至關(guān)重要。③做好采血衛(wèi)生知識(shí)宣教工作。④加強(qiáng)血液初篩檢測(cè)人員的專業(yè)技能培訓(xùn)，避免因操作不當(dāng)造成檢測(cè)結(jié)果偏差。⑤加強(qiáng)檢測(cè)試劑核查，避免因試劑過期或變質(zhì)等因素導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果偏差。⑥規(guī)范留取血液標(biāo)本，避免血液復(fù)檢標(biāo)本出現(xiàn)溶血、凝塊、不足量等情況，影響最終血液檢測(cè)結(jié)果。通過上述采取的措施，降低了因ALT升高導(dǎo)致的血液報(bào)廢率，可以更有效地保留獻(xiàn)血者，為臨床用血安全保駕護(hù)航。

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（收稿日期：2017-04-19 本文編輯：程 銘）endprint