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    ε-聚賴氨酸和臭氧處理對石榴果實貯藏品質影響的多變量分析

    2017-09-22 05:43:33姚昕秦文
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2017年8期
    關鍵詞:聚賴氨酸總酸果皮

    姚昕,秦文

    1(四川農(nóng)業(yè)大學 食品學院,四川 雅安,610000) 2(西昌學院 輕化工程學院,四川 西昌,615013)

    ε-聚賴氨酸和臭氧處理對石榴果實貯藏品質影響的多變量分析

    姚昕1,2,秦文1*

    1(四川農(nóng)業(yè)大學 食品學院,四川 雅安,610000) 2(西昌學院 輕化工程學院,四川 西昌,615013)

    運用多變量分析方法探討了ε-聚賴氨酸和臭氧處理對石榴貯藏期品質的影響。單因素方差分析和主成分分析結果表明,ε-聚賴氨酸和臭氧處理均能一定程度上抑制石榴的腐爛、蒸騰失水和品質劣變。偏最小二乘回歸分析結果表明,果皮褐變指數(shù)與腐爛率和失重率呈高度正相關關系,與果皮L*值、a*值、b*值和硬度存在較強的負相關關系,而籽粒感官評分與其a*值、b*值及總酸含量呈高度正相關,與腐爛率和失重率呈較高的負相關關系。此外,果皮褐變指數(shù)和籽粒感官評分呈負相關關系。由通徑分析可知,失重率對果皮褐變指數(shù)具有較大的直接作用,而果皮L*值通過腐爛率和失重率對果皮褐變指數(shù)產(chǎn)生較高的負間接作用;腐爛率對籽粒感官評分具有最大的負直接作用,而果皮a*值和籽粒b*值主要是通過籽粒總酸含量和腐爛率間接影響籽粒感官品質。4 種多變量分析方法的綜合結果表明,ε-聚賴氨酸和臭氧處理與對照相比,可以較好地保持石榴果實的品質,主要通過抑制其腐爛失水而進一步延緩了果實硬度、籽??偹岷俊⑸珴傻戎笜说牧幼?,且以二者復合處理效果最佳。

    石榴;ε-聚賴氨酸;臭氧;品質;多變量分析

    石榴(PunicagranatumL.),為石榴科石榴屬植物,屬落葉灌木或小喬木,原產(chǎn)于伊朗、阿富汗等地區(qū),2000多年前經(jīng)由西域傳入我國,其果實外形美觀,籽粒晶瑩,甘美多汁,酸甜可口,營養(yǎng)豐富,深受消費者的喜愛。貯藏期間,石榴果皮易發(fā)生褐變、失水干縮、病害等問題,嚴重影響果實的外觀品質,后期更易發(fā)生軟腐,由果皮進一步擴展至籽粒,致使籽粒變色、變味甚至腐爛而無法食用,極大地影響了石榴果實的商品價值,其中尤以多種病原菌協(xié)同作用所導致的腐爛變質更為嚴重,即使采用適宜的低溫貯藏其腐爛率仍可達到20%~30%[1-4]。因此,研究石榴果實貯藏期易出現(xiàn)的問題并有針對性篩選出適宜的保鮮方法對延長石榴的貯藏期、使其保持較好的品質具有十分重要的意義。

    ε-聚賴氨酸(ε-polylysine,簡稱ε-PL),是一種具有抑菌功效的多肽,由20~30個賴氨酸殘基聚合而成,可從鏈霉菌屬的代謝產(chǎn)物中分離提取,具有安全性高、抑菌譜廣等特點,目前已被應用于米飯[5]、南美白對蝦[6]、冷鮮豬肉[7]、果汁飲料[8]等食品的防腐上,但其對新鮮果蔬保鮮效果方面的報道相對較少。劉璐等[9]研究發(fā)現(xiàn),ε-PL處理可以有效降低櫻桃腐爛率,保持較高果梗新鮮率和櫻桃表面原有亮度,還能有效抑制可溶性固形物含量下降和丙二醛含量的增加,提高櫻桃過氧化氫酶和過氧化物酶的活性。此外,臭氧作為一種強氧化劑,具有良好的防腐殺菌作用,且無有害殘留,在食品行業(yè)已得到了廣泛的應用。在對草莓[10]、甜瓜[11]、葡萄[12]等果實的研究發(fā)現(xiàn),臭氧處理除了具有較好的殺菌作用外,還能在一定程度上抑制果實的呼吸作用和氧化去除乙烯,延緩果蔬的衰老,有利于其品質的保持。目前,鮮見ε-PL和臭氧用于石榴保鮮的相關研究報道。

    果蔬成分種類繁多、結構復雜,是其品質變化的物質基礎,單一分析方法對果蔬各品質指標的內(nèi)在關系及整體評價存在局限性,而多元統(tǒng)計分析采用多指標對果蔬品質進行綜合評價則更為全面,運用單因素方差分析、主成分分析、相關性分析、偏最小二乘法回歸分析、通徑分析等多變量分析方法,區(qū)分主效因子、確定指標間相關性、辨別直接效應與間接效應,可進一步揭示果蔬品質與內(nèi)部成分之間的聯(lián)系[13-15]。目前,已有研究者將多元統(tǒng)計分析應用于解析果蔬品質與特性[16-18]。王友升等[19]利用多變量分析方法探討了1-甲基環(huán)丙烯和二氧化氯對藍莓低溫貯藏期間品質的影響。張璇等[20]運用多變量分析方法研究了氣調(diào)處理對杏鮑菇貨架期品質的影響。GUSTAVO等[21]采用多變量分析解析了不同溫度下楊桃貯藏過程中品質的變化。

    鑒于以上原因,本研究采用ε-PL對石榴果實進行處理,并結合臭氧熏蒸,利用多變量分析的基本思維,將可能影響石榴果實品質的感官特性、理化成分和生理指標相結合進行系統(tǒng)分析,探討了影響石榴果實品質劣變的關鍵因子以及ε-PL和臭氧的保鮮效果,以期為石榴采后的貯藏保鮮技術提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1材料與處理

    供試材料為青皮軟籽石榴(PunicagranatumL),于 2015 年 8月 30日采摘于涼山州會理縣彰冠鄉(xiāng)。挑選個體大小均一、無病蟲害和機械傷的果實,當天運至實驗室。

    前期試驗對ε-PL和臭氧處理濃度進行篩選得出適宜的處理條件,將石榴果實分別采用以下3種方法進行處理:(1)A組:用500 mg/L ε-PL溶液浸泡5 min,取出后自然晾干;(2)B組:采用臭氧發(fā)生器使密閉的貯藏箱中臭氧濃度達到5 mg/L,熏蒸果實1h,處理后打開箱口自然通風排除臭氧,每隔7 d熏蒸一次;(3)C組:ε-PL和臭氧熏蒸復合處理,處理條件同A組和B組。石榴果實處理后裝箱,箱內(nèi)襯0.015 mm厚度的PE薄膜,分別放置于(20±1)℃和(6±1)℃、相對濕度80%~90%的條件下貯藏,分別間隔15 d和30 d隨機取6個果實進行相關指標的測定。每箱30個果實,每組設置 3個平行處理。

    1.2主要儀器設備

    T18 basic型高速分散機,德國IKA公司;NH310型色差計,深圳三恩時科技有限公司; TA.XT Plus 型質構儀,英國 SMS 公司;WYT型手持折光儀,成都豪創(chuàng)光電儀器有限公司;GXH-3010E型便攜式紅外線CO2分析儀,北京市華云分析儀器研究有限公司;GSK-Ⅲ型臭氧發(fā)生器,廣州寶昱電子科技有限公司;BH-188B型食品保質期試驗箱,東莞塘廈百航儀器廠;低溫冷藏柜,青島海爾公司。

    1.3測定指標與方法

    果皮和籽粒的L*、a*、b*和h°:采用NH310型色差計測量,果皮測定時選取果實赤道上間隔相同距離的3點,籽粒測定時取石榴籽粒平鋪于潔凈培養(yǎng)皿中,測定5點;果實硬度:采用TA.XT Plus 型質構儀測定,取樣點同色澤測定,用P/5 探頭(直徑 5 mm)進行測定,設置測前、測中、測后上行速度均為3 mm/s,深度10 mm;可溶性固形物含量:采用WYT型手持折光儀測定;總酸含量:采用酸堿中和滴定法測定;呼吸強度:采用GXH-3010E型便攜式紅外線CO2分析儀;失重率:采用稱重法;腐爛率:腐爛果數(shù)在總果數(shù)中所占百分數(shù)。

    褐變指數(shù) = [∑(各褐變級別果數(shù)×褐變級別)]/(總果數(shù)×最高褐變級別)

    (1)

    式中褐變級別劃分為:0級,果皮未褐變,光潔如初;1級,果皮輕微褐變,表面光滑,褐變面積小于總面積的1/4;2級,果皮明顯褐變,表面粗糙,褐變面積大于總面積的1/4且小于總面積的1/2;3級,果皮嚴重褐變,表面凹陷,褐變面積大于總面積的1/2小于總面積的3/4;4級,果皮基本上完全變黑,呈硬殼狀[22-23]。

    籽粒感官評價:將各組石榴籽粒放置于隨機編號的白盤中,由10位經(jīng)過培訓的評價員從口感、顏色、氣味3個方面進行綜合評定,計算得分,感官鑒評評分標準見表1[24-25]。

    1.3數(shù)據(jù)處理

    試驗數(shù)據(jù)使用 SPSS 20.0進行鄧肯氏單因素方差分析和主成分分析,使用Unscrambler 9.8進行偏最小二乘回歸分析,使用DPS 7.5進行通徑分析,數(shù)據(jù)分析前均先做標準化處理,采用Origin 9.0軟件進行繪圖。

    2 結果與分析

    2.1不同處理對石榴果實品質及生理指標的影響

    不同處理的石榴果實主要指標測定結果如表2和表3所示。在20 ℃和6 ℃下,各處理組石榴果實的腐爛率和失重率在貯藏中期和后期均低于CK組,貯藏后期B組和C組與CK組差異顯著(p<0.05),可見ε-PL和臭氧均能一定程度上抑制石榴果實腐爛失重,臭氧效果好于ε-PL,且兩者復合效果更佳。石榴果實屬于非呼吸躍變型果實,在貯藏期間其呼吸強度一直呈下降的趨勢,后期變化緩慢,CK組貯藏后期由于腐爛率較高而導致呼吸強度有所回升。6 ℃下果實的呼吸強度明顯低于20 ℃,同溫度下各處理組均低于CK組,且B組和C組在貯藏后期與CK組呈顯著差異(p<0.05),說明溫度是影響呼吸作用的主要因素,臭氧處理也能一定程度上抑制呼吸作用。

    由表3可知,石榴果皮L*值和h°總體呈下降趨勢,h°后期略有回升,而a*值和b*值前期略有升高而后一直降低。A組果實的果皮在貯藏后期h°與其它組差異顯著(p<0.05),說明ε-PL處理可使果皮色度比其它組更偏向于紅橙色。此外,果皮的褐變指數(shù)在貯藏期間呈上升的趨勢,硬度始終遞減,且在20 ℃下變化的幅度大于6 ℃。6 ℃下,貯藏后期A組果皮的褐變指數(shù)顯著低于其它組(p<0.05),說明ε-PL能一定程度上抑制果皮的褐變,而B組和C組的褐變指數(shù)與CK組接近,果皮的L*值顯著低于CK組,可能頻繁的臭氧處理會一定程度上促進了褐變的發(fā)生,導致亮度降低。

    貯藏過程中,石榴籽粒色度各值總體均呈遞減變化,h°后期略有回升,同一溫度下在貯藏后期各處理組籽粒的L*值和h°均好于CK組,表明其籽粒更有光澤,色度比CK組更偏向紅色。石榴籽粒的可溶性固形物含量、總酸含量和感官評分在貯藏期間總體呈下降趨勢,B組和C組在貯藏后期由于果實腐爛率較低,各值均高于CK組,且總酸含量和感官評分與CK組差異顯著(p<0.05),可見臭氧處理和ε-PL復合臭氧處理在貯藏后期能更好地保持籽粒的品質。

    表2 不同處理對貯藏期石榴各指標的影響

    注:用Duncan 法進行多重比較,同列中標有不同小寫字母者表示組間差異顯著(p<0.05),標有相同小寫字母者表示組間差異不顯著(p>0.05)。

    表3 不同處理對貯藏期石榴果皮和籽粒色度的影響

    注:用Duncan 法進行多重比較,同列中標有不同小寫字母者表示組間差異顯著(p<0.05),標有相同小寫字母者表示組間差異不顯著(p>0.05)。

    2.2石榴果實品質主成分分析及綜合評價

    2.2.1 主成分的選取

    將表2和表3中各組數(shù)據(jù)標準化后進行主成分分析,分析結果如表4所示。由表4可知,有4個主成分的特征值大于1,共提取4個主成分,其累計方差貢獻率為88.793 8%,可用這4個主成分較好地代替上述16個品質特性來評價與判斷石榴果實的品質。

    由表5中各特征向量值可以看出,第一主成分以果實硬度X9、失重率X12、腐爛率X13和果皮褐變指數(shù)X15為主,主要體現(xiàn)了石榴果實貯藏因子和果皮品質因子;第二主成分以籽??扇苄怨绦挝锖縓10和果實呼吸強度X14為主,體現(xiàn)了籽粒甜味因子和呼吸生理因子;第三主成分以果皮a*值X2、b*值X3、h°X4和籽粒b*值X7為主,體現(xiàn)了果皮色度因子和籽粒的黃度因子;第四主成分以籽粒h°X8為主,體現(xiàn)了籽粒色度因子。

    2.2.2 綜合評價模型的構建及評價

    由上述可知,第1、2、3和4主成分已經(jīng)基本保留了所有指標的原有信息,累積貢獻率為88.793 8%,且特征值均大于1,可以用4個變量Y1、Y2、Y3和Y4代替原來的16個指標,則得出線性組合(其中X1至X16均為標準化后的變量)分別為:

    Y1=0.279 1X1+0.266 2X2+0.265 2X3-0.098 3X4+0.246 6X5+0.241 2X6+0.257 8X7+0.184 4X8+0.304 7X9+0.118 1X10+0.259 5X11-0.314 2X12-0.304 1X13+0.103 4X14-0.311 6X15+0.278 8X16

    (2)

    Y2=-0.154 7X1-0.107 8X2-0.145 3X3-0.365 1X4-0.233 5X5-0.116 1X6-0.078 7X7-0.033 1X8-0.069 3X9+0.535 4X10+0.331 6X11-0.178 5X12+0.219 1X13+0.485 7X14+0.048 8X15+0.123 1X16

    (3)

    Y3=-0.176 9X1-0.415 2X2-0.390 0X3+0.406 3X4+0.183 3X5+0.351 0X6+0.407 6X7+0.312 7X8+0.022 6X9+0.173 6X10+0.071 1X11+0.034 1X12-0.000 6X13+0.053 0X14+0.131 6X15+0.037 8X16

    (4)

    Y4=0.313 2X1+0.056 5X2+0.058 6X3-0.043 0X4-0.332 5X5-0.171 7X6+0.275 7X7+0.577 9X8-0.095 9X9-0.160 1X10-0.233 5X11-0.002 2X12+0.118 0X13+0.343 5X14-0.086 8X15-0.338 6X16

    (5)

    表5 4個主成分的特征向量

    以各主成分的貢獻率為權重,利用主成分值與對應的權重相乘求和,構建樣本綜合評價模型:

    F= 0.553 1Y1+0.156 0Y2+0.103 4Y3+ 0.075 4Y4

    (6)

    式中:Y1、Y2、Y3和Y4為第1、2、3和4主成分得分,F(xiàn)為綜合評價得分,其分值越高,表明品質越好。分別對20 ℃和6 ℃下、不同貯藏時間及處理的石榴果實品質進行綜合評分,其結果如圖1和圖2所示。

    圖1 20 ℃下石榴果實貯藏品質綜合評價Fig.1 Comprehensive evaluation of fruit quality of pomegranate during storage periods at 20 ℃

    圖2 6 ℃下石榴果實貯藏品質綜合評價Fig.2 Comprehensive evaluation of fruit quality of pomegranate during storage periods at 6 ℃

    如圖1和圖2所示,各組石榴果實品質的綜合評價得分F值均隨貯藏時間的延長而降低,且6 ℃貯藏效果好于20 ℃。20 ℃下貯藏15 d時,各組果實品質綜合得分均為正值,組間評分差異不大;貯藏中期,CK組果實的F值開始快速下降為負值,在30 d時已明顯低于其他組;在貯藏末期,至45 d時,各處理組果實F值也均降為負值,對照組此時已為-2.50,可見此時果實品質已劣變嚴重,不適于繼續(xù)貯藏,各處理組均高于對照組,且ε-PL復合臭氧處理組綜合評分最高。6℃下各處理組果實品質綜合評分的變化規(guī)律與20℃基本一致,由此可見,ε-PL和臭氧處理均能一定程度上抑制石榴果實的腐爛變質,有利于其品質的保持,且ε-PL復合臭氧處理的效果最好。

    2.3偏最小二乘法回歸分析

    為了分析石榴果實各指標對果皮褐變指數(shù)和籽粒感官評分的影響,以果皮褐變指數(shù)和籽粒感官評分為因變量(Y),其他指標為自變量(X),建立偏最小二乘回歸分析模型。由圖3可知,因子1和因子2解釋了X變量的88% 以及Y變量的67%。果皮褐變指數(shù)與腐爛率和失重率分別位于因子1的相同方向,表現(xiàn)為高度正相關性,而與果皮L*值、a*值、b*值和硬度位于因子1的相反方向,存在較強的負相關關系,說明果皮的褐變指數(shù)主要受果實的腐爛失重、果皮色度和質地的影響。籽粒感官評分與其a*值、b*值及總酸含量呈高度正相關,與腐爛率和失重率負相關關系較強,說明籽粒的色度、總酸含量及果實的腐爛失重對籽粒的感官品質具有較大的影響。

    圖3 基于主成分1與2的PLSR回歸模型的相關載荷圖Fig.3 Correlation loading plot from a PLSR model on PC1 and PC2注:內(nèi)圈解釋變量的 50%;外圈解釋變量的100%。

    2.4通徑分析

    以果皮褐變指數(shù)和籽粒感官評分為因變量、其他指標為自變量,經(jīng)逐步引入剔除法,進行顯著性檢驗,剔除未達到顯著水平的性狀(p>0.05),分析保留的指標對果皮褐變指數(shù)和籽粒感官評分的直接作用和間接作用,建立多元回歸方程,分析結果見表6和表7。

    表6 以果皮褐變指數(shù)為因變量的通徑分析結果

    使用各指標對果皮褐變指數(shù)作逐步線性回歸,得到回歸方程

    Y= 0.565 9-0.007 9X1+0.036 6X12+0.004 3X13

    (8)

    式中,X1、X12和X13分別為果皮L*值、失重率和腐爛率,并進行顯著性檢驗,F(xiàn)=69.008 0,p= 0.000 1,說明該方程具有極顯著意義。由表6可以看出,直接作用中較為突出的為失重率,說明其對果皮褐變指數(shù)具有最大的正直接作用,而果皮L*值通過腐爛率和失重率對果皮褐變指數(shù)產(chǎn)生較高的負間接作用。

    表7 以籽粒感官評分為因變量的通徑分析結果

    將各指標對籽粒感官評分作逐步線性回歸,得到回歸方程

    Y=9.748 6-0.072 3X2-0.118 5X7+6.981 6X11-0.057 4X13

    (7)

    式中:X2、X7、X11和X13分別為果皮a*值、籽粒b*值、籽粒總酸含量和腐爛率,并進行顯著性檢驗,F(xiàn)=40.308 0,p=0.000 1,該方程具有極顯著意義。如表7所示,腐爛率和籽粒總酸含量對籽粒感官評分具有較大的直接作用,而果皮a*值和籽粒b*值的間接作用較大,且主要是通過籽粒總酸含量和腐爛率間接影響籽粒的感官品質。

    3 討論

    本研究表明,6 ℃和20 ℃下貯藏,各處理組果實腐爛率均低于對照組,且果實綜合評價F值也高于對照組,其中ε-PL復合臭氧處理F值最高,腐爛率最低,可見ε-PL和臭氧處理均可以一定程度上抑制石榴的腐爛,有利于果實品質的保持,且二者復合使用效果更佳。于繼男等[26]用ε-PL處理藍莓,對延緩藍莓的腐爛、抑制Vc和花色苷的減少、保護藍莓果霜均有明顯效果,且抑制了藍莓的呼吸強度和乙烯生成速率,對過氧化氫酶活力也有很明顯的抑制效果。李珍等[27]研究了臭氧對銷地紅提葡萄保鮮效果,與對照相比,臭氧組降低了葡萄的腐爛率、落粒率,延緩了可溶性固形物和可滴定酸含量的下降。此外,ε-PL單獨使用時,在貯藏后期還可以有效延緩果皮h°的變化,從而使果皮色度比CK組更偏向橙紅色轉變。秦蕓樺等[28]將ε-PL應用于鮮切竹筍,除了對鮮切竹筍中微生物有很好的抑制作用外,還可減輕水分的損失,鮮切竹筍L*值和a*值均高于對照組,有利于保持其色澤。

    結合偏最小二乘回歸分析和通徑分析,探討了石榴各貯藏指標對果皮褐變和籽粒感官品質的直接和間接的影響,衡量所涉及因素的相對重要性。偏最小二乘回歸分析結果表明,果皮褐變指數(shù)與腐爛率和失重率呈高度正相關關系,與果皮L*值、a*值、b*值和硬度存在較強的負相關關系,而籽粒感官評分與其a*值、b*值及總酸含量呈高度正相關,與腐爛率和失重率呈較高的負相關關系。此外,果皮褐變指數(shù)和籽粒感官評分呈負相關關系。由通徑分析可知,失重率對果皮褐變指數(shù)具有較大的正直接作用,而果皮L*值通過腐爛率和失重率對果皮褐變指數(shù)產(chǎn)生較高的負間接作用;腐爛率對籽粒感官評分具有最大的負直接作用,而果皮a*值和籽粒b*值主要是通過籽??偹岷亢透癄€率間接影響籽粒感官品質。

    4 結論

    4 種多變量分析方法的綜合結果表明,與對照相比,ε-PL和臭氧處理可以較好地保持石榴果實的品質,主要對腐爛率、失重率、硬度和籽??偹岷坑绊戯@著,且以二者復合處理效果最佳。其中,失重率的直接作用和果皮L*值的間接作用對果皮褐變指數(shù)產(chǎn)生較高的影響,而腐爛率與籽??偹岷康闹苯幼饔?、果皮a*值與籽粒b*值的間接作用對籽粒感官品質造成顯著的影響。

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    Multivariateanalysisoftheinfluenceofε-polylysineandozonetreatmentonthequalityofpomegranateduringstorage

    YAO Xin1,2,QIN Wen1*

    1(College of Food Science,Sichuan Agricultural University,Ya’an 625014,China) 2 (School of light and chemical engineering,Xichang College,Xichang 615013,China)

    By conducting the multivariate analysis,this paper explores the influence of ε-polylysine and ozone treatment on the quality of pomegranate during the storage.The results of single-factor variance analysis and principal component analysis show that ε-polylysine and ozone treatment could inhibit the pomegranate’s decay,transpiration,and quality deterioration to a certain extent.As indicated by the analysis results of partial least squares regression,the peel browning index has a high positive correlation with the decay rate as well as the weight loss rate,and a negative correlation with the peelL*value,a*value,b*value and firmness.However,the seed sensory score has a high positive correlation with the seeda*value,b*value and total acid content,and a high negative correlation with the decay rate and weight loss rate.Also,the peel browning index is negatively correlated with the seed sensory score.According to the path coefficient analysis,it demonstrates that the weight loss rate can directly affect the peel browning index to a great extent.Nonetheless,the peelL*value exerts a greater indirect negative effect on it mainly through the decay rate and weight loss rate.It is worth mentioning that the decay rate has the greatest direct impact on the seed sensory score,while the peela*value and the seedb*value indirectly influence it mainly through the decay rate and total acid content.The results of four multivariable analyses show that ε-PL treatment and ozone treatment could maintain the quality of pomegranate fruit better than the control group,further delay the deterioration of the indicators including firmness,total acid content of seed and color by controlling the decay and water loss of the pomegranate fruit.Moreover,it turns out that the combination of the two treatments has the best effect.

    pomegranate; ε-polylysine; ozone; quality; multivariate analysis

    10.13995/j.cnki.11-1802/ts.013725

    碩士研究生(秦文教授為通訊作者,E-mail:qinwen ̄1967@ ̄yahoo.com.cn)。

    四川省教育廳科研計劃項目(13ZB0170)

    2017-01-02,改回日期:2017-02-27

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