不同濃度黃秋葵提取液對(duì)小鼠胃腸動(dòng)力的影響

陳椿+李舒婷+黃景珠+盧棉+梁尋杰+方曉燕+黃麗娟

【摘要】目的探究黃秋葵提取液對(duì)小鼠胃排空和小腸推進(jìn)作用的影響。方法將80只小鼠隨機(jī)分為黃秋葵低劑量組（1.5 g/kg）、黃秋葵中劑量組（3.0 g/kg）、黃秋葵高劑量組（6.0 g/kg）、阿托品組（5.0 mg/kg）、阿托品+黃秋葵低劑量組、阿托品+黃秋葵中劑量組、阿托品+黃秋葵高劑量組和正常對(duì)照組，每組10只小鼠。黃秋葵采用灌胃，阿托品采用肌內(nèi)注射，正常對(duì)照組灌胃蒸餾水，各組按相應(yīng)藥液和給藥方法給予相應(yīng)的藥物一次，采用灌碳末懸液實(shí)驗(yàn)方法，測(cè)量并計(jì)算小鼠胃殘留率和小腸推進(jìn)率。結(jié)果與正常對(duì)照組比較，黃秋葵中劑量組、高劑量組可明顯促進(jìn)小腸推進(jìn)（P<0.05或0.01），且高劑量組小腸推進(jìn)率高于低劑量組（P<0.05）；與阿托品組比較，阿托品+黃秋葵中劑量組、阿托品+黃秋葵高劑量組小腸推進(jìn)率均顯著升高（P<0.01），且高劑量組高于低劑量組（P<0.05），而阿托品+黃秋葵高劑量組胃殘留率低于阿托品組（P<0.05）。結(jié)論黃秋葵能促進(jìn)小腸運(yùn)動(dòng)，其機(jī)制可能與擬膽堿樣作用有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】黃秋葵；小鼠；胃排空；小腸推進(jìn)；阿托品

中圖分類號(hào)：R573；R965文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2017.04.017

【Abstract】ObjectiveTo explore the effect of okra extract on gastric emptying and intestinal propulsion in mice.Methods80 mice were randomly divided into eight groups：low dose okra group（1.5 g/kg），middle dose okra group（3 g/kg），high dose okra group（6 g/kg），atropine group（5 mg/kg），atropine+low dose okra group，atropine+middle dose okra group，atropine+high dose okra group and normal control group with 10 mice in each group.Okra was used by gastric perfusion.Atropine was used by intramuscular injection.And normal control group was given distilled water by gastric perfusion.And then each group were given corresponding medicine according to the corresponding medicine and the method of administration.By using experimental method with perfusion of carbon suspension，and gastric residual rate and intestinal propulsive rate were measured and calculated.ResultsCompared with the normal control group，the middle dose okra group and high dose okra group could obviously promote small intestine propulsion（P<0.05 or 0.01），and intestinal propulsive rate of the high dose group was significantly higher than that of the low dose group （P<0.05）.Compared with the atropine group，the intestinal propulsive rate of the atropine+middle dose okra group and the atropine+high dose okra group increased significantly（P<0.01），and that of the high dose group was significantly higher than that of the low dose group（P<0.05），while the rates of gastric remainder of atropine+high dose okra group was obviously lower than that of the atropine group （P<0.05）.ConclusionOkra can promote the intestinal movement，its mechanism may be related to the effect of choline analogues.

【Key words】okra；mice；gastric emptying；intestinal propulsion；atropine

功能性消化不良是臨床常見(jiàn)病，越來(lái)越受到人們重視，而胃腸動(dòng)力異常是其病理生理機(jī)制之一[1]，我國(guó)中藥在調(diào)理改善胃腸功能活動(dòng)方面有諸多優(yōu)勢(shì)。黃秋葵[Abelmoschus esculentus（L.）Moench]為一年生的草本植物，別名秋葵、羊角豆等，發(fā)源于非洲，現(xiàn)世界各地均有栽培。其嫩果供食用，果實(shí)含有豐富的蛋白質(zhì)、粗纖維、多糖、黃酮、脂肪及其他等[2]，含有豐富的常量元素，其中K+含量最高，其次是P和Ca[2～3]。其果實(shí)也含有豐富的黏液，主要由果膠和多糖等組成，能促進(jìn)人體胃腸蠕動(dòng)，有效防止便秘。但目前尚未發(fā)現(xiàn)有黃秋葵對(duì)胃腸動(dòng)力影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。本研究通過(guò)觀察黃秋葵水提取液以及在阿托品干預(yù)作用下對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)及胃排空的影響，為黃秋葵進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。endprint

1材料與方法

1.1動(dòng)物昆明小鼠80只，雌雄不拘，體重（25±3）g，由右江民族醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK桂2012-0003。

1.2藥材、試劑黃秋葵干品出自于江蘇南京市溧水縣永陽(yáng)鎮(zhèn)，粉碎備用。硫酸阿托品注射液（天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司，批號(hào)：202012）；活性碳末（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20140916）；羧甲基纖維素鈉（成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)：20110219）。

1.3儀器ARII40/C電子天平，奧毫斯（上海）公司生產(chǎn)。

1.4黃秋葵水提取液的制備采用水提方法提取黃秋葵，取黃秋葵果實(shí)干品，按水料比20∶1浸泡24 h，用文火煮1 h，過(guò)濾。濾渣按水料比20∶1再用文火煮1 h，過(guò)濾。合并2次濾液，濃縮，使每ml藥液含生藥1 g，即1.0 g/ml。冰箱冷藏，用時(shí)恢復(fù)室溫，分別稀釋為黃秋葵劑量0.15 g/ml，0.3 g/ml，0.6 g/ml。

1.5碳末懸液的制備 取2 g羧甲基纖維素鈉和10 g活性碳末溶于200 ml蒸餾水中，攪拌均勻制成碳末懸液。

1.6黃秋葵提取液對(duì)小鼠胃排空及小腸推進(jìn)的影響 取40只小鼠按體重隨機(jī)分為黃秋葵低劑量組、黃秋葵中劑量、黃秋葵高劑量組和正常對(duì)照組，每組10只小鼠。小鼠禁食12 h后，分別按黃秋葵水提取液劑量1.5 g/kg、3.0 g/kg、6.0 g/kg灌胃，對(duì)照組按0.1 ml/10 g給予蒸餾水。給藥30 min后，再按0.2 ml/10 g灌以5%碳末懸液，20 min后用頸椎脫臼法處死小鼠，迅速剪開(kāi)腹腔，取出胃，稱胃全重和胃凈重，根據(jù)公式：胃內(nèi)容物殘留率（%）=[（胃全重-胃凈重）/碳末懸液質(zhì)量]×100%，計(jì)算胃內(nèi)容物殘留率。同時(shí)取出小腸，測(cè)量小腸總長(zhǎng)度和碳末推進(jìn)距離。根據(jù)公式：小腸推進(jìn)率（%）=碳末推進(jìn)距離/小腸總長(zhǎng)度×100%，計(jì)算小腸推進(jìn)率。

1.7黃秋葵提取液對(duì)阿托品抑制小鼠胃排空及小腸推進(jìn)的影響 按體重將40只小鼠隨機(jī)分為阿托品+黃秋葵低劑量組、阿托品+黃秋葵中劑量組、阿托品+黃秋葵高劑量、阿托品組，共4組。正常對(duì)照組同“1.6”項(xiàng)。給藥前禁食12 h，正常對(duì)照組和阿托品組給予等體積蒸餾水灌胃，其余各組給黃秋葵藥劑量和方法同“1.6”項(xiàng)，灌胃給藥的同時(shí)除正常對(duì)照組外，各組肌注阿托品 5.0 mg/kg，30 min后，操作及計(jì)算方法按“1.6”項(xiàng)進(jìn)行。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1黃秋葵提取液對(duì)小鼠胃排空及小腸推進(jìn)的影響比較 黃秋葵中劑量組、黃秋葵高劑量組小腸推進(jìn)率明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或0.01），且小腸推進(jìn)率隨黃秋葵劑量的增加而升高，高劑量組明顯高于低劑量組（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2黃秋葵提取液對(duì)阿托品抑制小鼠胃排空及小腸推進(jìn)的影響比較阿托品組小腸推進(jìn)率明顯降低（P<0.01），胃殘留率明顯升高（P<0.05）；與阿托品組比較，阿托品+黃秋葵中劑量組、阿托品+黃秋葵高劑量組的小腸推進(jìn)率明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），且小腸推進(jìn)率隨黃秋葵劑量的增加而升高，阿托品+黃秋葵高劑量組明顯高于阿托品+黃秋葵低劑量組（P<0.05），阿托品+黃秋葵高劑量組胃殘留率明顯低于阿托品組（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3討論

胃腸運(yùn)動(dòng)功能主要受自主神經(jīng)系統(tǒng)和腸神經(jīng)系統(tǒng)（ENS）調(diào)節(jié)。在人體胃腸道上存在著如膽堿能受體、腎上腺素能受體、血管活性肽受體等多種神經(jīng)遞質(zhì)受體。膽堿能神經(jīng)元通過(guò)釋放乙酰膽堿（Ach）作用于膽堿能M受體，可刺激腸道平滑肌收縮和促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，起興奮腸道運(yùn)動(dòng)作用；腎上腺素能神經(jīng)元通過(guò)釋放去甲腎上腺素（NE）作用于腎上腺素β受體，使腸道平滑肌松弛，抑制腸道收縮和蠕動(dòng)。在正常情況下，通過(guò)胃腸神經(jīng)系統(tǒng)的正常調(diào)控，維持腸道功能正常[4～5]。一旦過(guò)度勞累、情緒緊張、生活和工作上的壓力等若長(zhǎng)期得不到合理的解決，均可干擾胃腸神經(jīng)系統(tǒng)功能，進(jìn)而引起胃腸道功能障礙，導(dǎo)致腹脹、腹痛、腹瀉等胃腸道功能紊亂癥候群。黃秋葵作為一種新型的具有高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值保健蔬菜，其藥用價(jià)值早在明代李時(shí)珍的《本草綱目》中就有記載“黃秋葵，其性味淡，種子、根、花均可入藥……種子補(bǔ)脾健胃，治消化不良、不思飲食”。現(xiàn)代研究表明，經(jīng)常食用黃秋葵有助于消化，增強(qiáng)體力，保護(hù)肝臟，健胃整腸，減少毒素在體內(nèi)積累，增強(qiáng)抗癌能力和預(yù)防心血管疾病的發(fā)生[6]。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究不同濃度的黃秋葵提取液對(duì)小鼠胃腸動(dòng)力的影響，結(jié)果表明，黃秋葵提取液對(duì)小腸推進(jìn)具有明顯的促進(jìn)作用，且隨著劑量的增高，促進(jìn)作用越顯著，但對(duì)胃排空的促進(jìn)作用無(wú)明顯影響。通過(guò)給予小鼠腹腔內(nèi)注射阿托品，胃排空率和小腸推進(jìn)率均顯著低于正常對(duì)照組，說(shuō)明阿托品致胃腸動(dòng)力障礙小鼠模型是成功的，在阿托品干預(yù)下，黃秋葵中劑量組、黃秋葵高劑量組均能明顯拮抗阿托品作用，促進(jìn)小腸運(yùn)動(dòng)，且有劑量依賴性，高劑量組小腸推進(jìn)率明顯高于低劑量組，同時(shí)高劑量組還能促進(jìn)由阿托品抑制的胃排空運(yùn)動(dòng)。阿托品是M受體的拮抗劑，其通過(guò)與膽堿M受體結(jié)合，阻止乙酰膽堿發(fā)揮作用，抑制腸道收縮，降低腸道興奮性，而黃秋葵能拮抗阿托品對(duì)小腸的抑制作用，說(shuō)明黃秋葵的作用機(jī)理可能為競(jìng)爭(zhēng)拮抗阿托品，起到擬膽堿作用，從而促進(jìn)小腸運(yùn)動(dòng)，而受體在胃腸道分布不同可能影響黃秋葵對(duì)胃排空的作用。另一方面，黃秋葵嫩果中富含黏性液體，其中的主要成分為果膠、黏性糖蛋白等[7]，該液體具有黏性高、乳化性較強(qiáng)、保濕性和懸浮穩(wěn)定性較好等特點(diǎn)[8]，具有潤(rùn)滑作用，黃秋葵可能通過(guò)潤(rùn)滑食物，促進(jìn)小腸的推進(jìn)。

綜上所述，黃秋葵具有促進(jìn)小腸運(yùn)動(dòng)，并能拮抗阿托品的作用，其機(jī)制可能有擬膽堿樣作用，但其確切機(jī)理仍待進(jìn)一步研究。

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