雞蛋花水提液對(duì)小腸收縮活動(dòng)的影響

楊文林+張航+陸秋娜+齊梁煜+黃月維+毛麗雪+黃彥峰

【摘要】目的探討雞蛋花水提液對(duì)家兔離體小腸平滑肌收縮活動(dòng)的影響。方法采用小腸平滑肌離體灌流實(shí)驗(yàn)方法，觀察雞蛋花水提液對(duì)正常、抑制劑（阿托品）誘導(dǎo)的離體小腸平滑肌收縮幅度和頻率的影響。結(jié)果低、中、高三個(gè)劑量組的雞蛋花水提液均對(duì)正常家兔離體十二指腸平滑肌收縮幅度和頻率有明顯的興奮作用，低、中兩個(gè)劑量均對(duì)正常家兔離體空腸收縮幅度和頻率有明顯的興奮作用，低、中、高三個(gè)劑量均對(duì)正常家兔離體回腸收縮幅度和頻率有明顯的抑制作用；雞蛋花水提液對(duì)阿托品誘導(dǎo)的舒張十二指腸、空腸平滑肌收縮幅度和頻率各有不同程度的拮抗作用，同時(shí)能協(xié)同阿托品抑制回腸平滑肌收縮幅度和頻率。結(jié)論雞蛋花水提液能興奮十二指腸、空腸平滑肌收縮幅度和頻率，抑制回腸平滑肌收縮幅度和頻率，其機(jī)制可能與M膽堿受體有關(guān)，此外，也可能與腎上腺素能α或β受體有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】雞蛋花水提液；離體小腸平滑?。话⑼衅?/p>

中圖分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2017.04.016

【Abstract】ObjectiveTo observe the effect of plumier rubra L water extract on isolated small intestinal contractive activity of domestic rabbit.MethodsAn experimental method of small intestinal smooth muscle in vitro perfusion was used to observe the effect of plumier rubra L water extract on contraction amplitude and frequency of isolated small intestinal smooth muscle induced by normal or inhibitor（atropine）.ResultsThe plumier rubra water L extract of low，medium and high dose group had obviously excitatory effect on contraction amplitude and frequency of isolated duodenum smooth muscle of normal domestic rabbit.And the low and high dose of plumier rubra water L extract had obviously excitatory effect on amplitude and frequency of isolated jejunal contraction of normal domestic rabbit.In addition，the low，medium and high dose group had an inhibiting effect on amplitude and frequency of isolated ileum contraction of normal domestic rabbit.Plumier rubra water L extract had varying degrees of antagonistic effect on amplitude and frequency of duodenal and jejunal smooth muscle contraction induced by atropine，meanwhile，it could cooperate with atropine to inhibit the amplitude and frequency of ileum smooth muscle contraction.ConclusionPlumier rubra water L extract can stimulate the amplitude and frequency of duodenum and jejunum smooth muscle contraction，inhibit the amplitude and frequency of ileum smooth muscle contraction，and its mechanism may be related to M cholinergic receptor.In addition，it may also be associated with adrenergic α or β receptors.

【Key words】plumier rubra L water extract；smooth muscles of isolated small intestine；atropine

雞蛋花（Plumeria rubra L ）是夾竹桃科（Apocynaceae）雞蛋花屬小喬木，原產(chǎn)于熱帶美洲，現(xiàn)廣泛栽種于全球熱帶地區(qū)，在我國(guó)則主產(chǎn)于廣東、福建、廣西、海南等地。雞蛋花中含有多種化學(xué)成分，可分離出環(huán)烯醚萜類、三萜類、黃酮醇類、醇類、醛類、脂肪酸類等成分，且可制作涼茶用于治療婦科疾病[1～2]，具有抑菌、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、降血脂等作用[3]，也有清熱解毒和潤(rùn)肺止咳功能，臨床上可用于濕熱下痢、里急后重等癥[1]。但雞蛋花對(duì)離體小腸平滑肌收縮活動(dòng)是否有影響未見(jiàn)報(bào)道，故本實(shí)驗(yàn)以家兔為研究對(duì)象，觀察雞蛋花水提液對(duì)正常、抑制劑（阿托品） 誘導(dǎo)的離體小腸平滑肌收縮活動(dòng)的變化，旨在為臨床應(yīng)用雞蛋花提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料與方法

1.1試劑雞蛋花花瓣（廣西貴港市綠之源種植發(fā)展有限公司中藥飲片廠），硫酸阿托品注射液（河南弘制藥股份有限公司，批號(hào)：1407252）。endprint

1.2動(dòng)物家兔10只，體重2～3 kg，雌雄不限，由右江民族醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.3儀器BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（成都泰盟科技有限公司），HW-400E恒溫平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司），JH-2型肌張力換能器（北京航天醫(yī)學(xué)工程研究所，50 g）。

1.4實(shí)驗(yàn)步驟

1.4.1雞蛋花水提液的制備稱取干燥雞蛋花花瓣400 g，加入10倍的蒸餾水（4000 ml）常溫浸泡1 h，武火煮沸后文火煎煮1 h，過(guò)濾，濾渣再加入蒸餾水3200 ml，用武火煮沸后再文火煎煮1 h，過(guò)濾，將兩次濾液經(jīng)抽濾器抽濾，隔水蒸發(fā)濃縮，含生藥為2 g/ml，冰箱冷藏，用時(shí)恢復(fù)常溫。

1.4.2家兔離體小腸的制備家兔禁食24 h，自由飲水，實(shí)驗(yàn)前1 h進(jìn)食，實(shí)驗(yàn)時(shí)用木棒鈍擊后枕處死，立即剖腹分離十二指腸、空腸、回腸，各段取20 cm腸段，將其剪成1～2 cm于室溫臺(tái)式液清除內(nèi)容物，再將洗凈后的腸段分別置于有臺(tái)式液（參照實(shí)驗(yàn)生理科學(xué)的方法制備）[4]的培養(yǎng)皿中，通入空氣。

1.4.3實(shí)驗(yàn)方法 取小腸分為十二指腸、空腸、回腸三部分，每部分小腸分低、中、高（終濃度分別為1.6×10-6 g/L；2.4×10-6 g/L；3.2×10-6 g/L）、阿托品、阿托品+中劑量雞蛋花水提液5個(gè)組，每組分10段腸管。取一段腸管安放在38℃臺(tái)氏液的HW-400E恒溫平滑肌槽內(nèi)，一端固定在玻璃通氣鉤上，另一端固定于張力換能器上與BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)相連。維持浴槽內(nèi)臺(tái)氏液溫度至（38±0.5）℃，并持續(xù)均速通入空氣（約每分鐘 60個(gè)氣泡），調(diào)節(jié)腸肌收縮的前負(fù)荷為2.0 g，平衡30 min，實(shí)驗(yàn)時(shí)，記錄正常小腸平滑肌活動(dòng)曲線，然后用微量移液器向平滑肌槽中加入各種藥物，記錄給藥前后2 min腸管的運(yùn)動(dòng)波形，臺(tái)式液沖洗2次，待穩(wěn)定后加入受體阻斷劑阿托品200 μL，觀察及記錄小腸平滑肌收縮曲線變化，待穩(wěn)定后再加入中劑量雞蛋花水提液，觀察小腸收縮曲線。比較加入不同劑量雞蛋花水提液前后小腸平滑肌收縮幅度及收縮頻率的變化，觀察雞蛋花水提液對(duì)受體阻斷劑阿托品誘導(dǎo)小腸平滑肌舒張作用的影響。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組內(nèi)干預(yù)前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1不同劑量雞蛋花水提液對(duì)離體小腸收縮活動(dòng)的影響給藥前后進(jìn)行比較，低、中、高三個(gè)劑量組的十二指腸平滑肌收縮幅度增強(qiáng)（P<0.01）、頻率增快（P<0.05），提示雞蛋花水提液對(duì)十二指腸平滑肌收縮有興奮作用；與給藥前比較，低劑量雞蛋花水提液均使空腸平滑肌收縮頻率增快、幅度增大（P<0.01），中劑量雞蛋花水提液均使空腸平滑肌收縮頻率增快（P<0.01）、幅度增大（P<0.05），高劑量雞蛋花水提液可使空腸平滑肌收縮幅度增大（P<0.01），但頻率改變不顯著（P>0.05），提示雞蛋花水提液對(duì)空腸平滑肌收縮具有興奮作用；與給藥前比較，低、中劑量雞蛋花水提液均使回腸平滑肌收縮頻率減慢、幅度減?。≒<0.05），高劑量雞蛋花水提液均使回腸平滑肌收縮頻率減慢（P<0.05）、幅度減小（P<0.01），提示雞蛋花水提液對(duì)回腸平滑肌收縮具有抑制作用。見(jiàn)表1。

2.2雞蛋花水提液對(duì)阿托品所致十二指腸平滑肌效應(yīng)的影響與給藥前比較，加入阿托品后十二指腸收縮頻率減慢、幅度減?。≒<0.01），與阿托品組比較，加入雞蛋花水提液800 μL后十二指腸平滑肌收縮頻率增快、幅度增大（P<0.01），提示雞蛋花水提液可拮抗阿托品抑制十二指腸平滑肌收縮作用；與給藥前比較，加入阿托品后空腸平滑肌收縮頻率減慢、幅度減小（P<0.01），與阿托品組比較，加入雞蛋花水提液800 μL后空腸平滑肌收縮頻率增快、幅度增大（P<0.01），提示雞蛋花水提液可拮抗阿托品抑制空腸平滑肌收縮作用；與給藥前比較，加入阿托品后回腸平滑肌收縮頻率減慢、幅度減?。≒<0.01），與給阿托品組比較，加入雞蛋花水提液800 μL后回腸平滑肌收縮頻率減慢（P<0.01）、振幅減?。≒<0.05），提示雞蛋花水提液可協(xié)同阿托品抑制回腸平滑肌收縮作用。見(jiàn)表2。

3討論

現(xiàn)已證明，胃腸運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)由交感神經(jīng)、副交感神經(jīng)系統(tǒng)，腸神經(jīng)系統(tǒng)以及神經(jīng)遞質(zhì)和胃腸激素等控制，在離體實(shí)驗(yàn)中小腸運(yùn)動(dòng)脫離神經(jīng)支配，也不受機(jī)體內(nèi)分泌激素的影響，雞蛋花水提液對(duì)十二指、空腸平滑肌收縮幅度和頻率有興奮作用，使自發(fā)活動(dòng)張力增加，振幅增大，頻率加快；而對(duì)家兔離體回腸則呈抑制作用，使自發(fā)活動(dòng)張力下降，振幅減小，頻率減慢。提示雞蛋花水提液對(duì)家兔離體小腸不同部位呈現(xiàn)不同的作用，可能與中草藥成分有關(guān)，其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

胃腸道存在著多種受體，如膽堿能M受體、腎上腺素能α和β受體、組胺受體、胃泌素受體等[5]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，加入雞蛋花水提液使離體十二指腸、空腸收縮幅度、頻率增高，阿托品+雞蛋花水提液組給藥后離體十二指腸、空腸平滑肌的收縮幅度和頻率高于單純阿托品組，提示雞蛋花水提液有促進(jìn)十二指腸、空腸收縮作用及對(duì)阿托品有拮抗阿作用。阿托品為膽堿能M受體阻斷劑，與M受體結(jié)合后占領(lǐng)位點(diǎn)，競(jìng)爭(zhēng)性拮抗乙酰膽堿（Ach）的激動(dòng)作用[6]。而Ach是平滑肌內(nèi)興奮傳遞的化學(xué)物質(zhì)能，激動(dòng)M膽堿受體使胞內(nèi)第二信、三磷酸肌醇（IP3）和二?；视停―G）濃度上升，進(jìn)而引起Ca2+釋放和底物蛋白磷酸化激發(fā)平滑肌產(chǎn)生收縮效應(yīng)[7]。推測(cè)，一方面可能雞蛋花水提液中含有乙酰膽堿受體激動(dòng)劑成分，加入雞蛋花水提液后，通過(guò)激動(dòng)膽堿能M受體引起平滑肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)內(nèi)儲(chǔ)存的Ca2+釋放至胞質(zhì)，使胞內(nèi)Ca2+濃度達(dá)到一定水平時(shí)，觸發(fā)促平滑肌收縮；另一方面可能是雞蛋花水提液中含有某種成分，該成分可刺激副交感神經(jīng)節(jié)后纖維釋放乙酰膽堿，激活十二指腸、空腸平滑肌細(xì)胞M受體，促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)，使平滑肌收縮幅度及頻率增高并拮抗阿托品抑制平滑肌收縮。雞蛋花水提液組給藥后，回腸收縮幅度、頻率降低，阿托品+雞蛋花水提液組給藥后回腸平滑肌收縮幅度、頻率低于單純阿托品組，提示雞蛋花水提液可抑制回腸收縮作用及對(duì)阿托品有拮抗作用。交感神經(jīng)節(jié)后纖維末梢釋放去甲腎上腺素，然后進(jìn)一步經(jīng)苯乙胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶的作用， 使去甲腎上腺素甲基化形成腎上腺素，作用于胃腸道平滑肌細(xì)胞膜上的腎上腺素能受體，使胃腸平滑肌張力降低[8]，推測(cè)是雞蛋花水提液中某種成分激動(dòng)回腸平滑肌上的腎上腺素能α或β受體，從而引起回腸平滑肌舒張以及協(xié)同阿托品抑制回腸收縮活動(dòng)，具體的作用機(jī)制有待研究。

綜上所述，雞蛋花水提液能興奮十二指腸、空腸平滑肌收縮幅度和頻率，抑制回腸平滑肌收縮幅度和頻率，其機(jī)制除與M膽堿受體有關(guān)外，也可能與腎上腺素能α或β受體等有關(guān)。

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