大黃酚對腦缺血再灌注大鼠腦組織炎性損傷的保護(hù)作用

梁曉燕

【摘要】目的：

研究大黃酚對腦缺血再灌注損傷后大鼠腦組織炎性損傷的保護(hù)作用。方法：將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組，模型組和大黃酚組，采用兩側(cè)頸總動脈夾閉結(jié)合低血壓方法制備腦缺血再灌注損傷大鼠模型，治療組給予大黃粉治療， 測定各組大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β的含量，腦指數(shù)、 腦組織含水量、 腦組織中SOD的活力以及MDA 的含量。結(jié)果：與正常組相比，模型組大鼠的血清 IL-1β、 IL-6含量明顯升高，腦組織含水量， MDA 含量明顯升高，CAT、 SOD明顯降低；與模型組比較，大黃酚組大鼠的血清 IL-1β、 IL-6含量明顯降低，腦組織含水量， MDA 含量明顯降低，CAT、 SOD等的活力明顯升高。結(jié)論：大黃酚可減輕受損組織中的水腫及氧化應(yīng)激損傷，可能是通過影響血清 IL-1β、 IL-6含量變化而實現(xiàn)的。

【關(guān)鍵詞】 大黃酚；腦缺血再灌注；IL-6

【中圖分類號】 R45.39

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 B

【文章編號】2095-6851（2017）08-064-02

腦缺血是短暫性或持久性的神經(jīng)功能缺損癥狀為其臨床表現(xiàn)，發(fā)病率、 致殘率、 復(fù)發(fā)率均交高^[1]，腦缺血再灌注為腦梗死疾病的重要病理生理過程，與氧化應(yīng)激有著重要的關(guān)系。大黃酚是是蓼科植物大黃中游離蒽醌衍生物，在對腦損傷鼠所致記憶功能障礙、老化相關(guān)酶和耐缺氧方面有明顯的保護(hù)作用，另外他在治療卻缺血再灌注方面也有報道，主要是通過改善氧化應(yīng)激、 炎性損傷起作用的。因此，本實驗主要觀察大黃酚對腦缺血再灌注損傷大鼠腦組織清 IL-1β、 IL-6、 TNF-α 含量影響， 初步探討大黃酚治療腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用的。

1 實驗材料

1.1 動物及分組：

健康清潔級Wistar大鼠，雌雄各半，50只，體重200～250g，基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)。適應(yīng)性飼養(yǎng) 1 周后，采用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠隨機(jī)分為： 假手術(shù)組、 模型對照組，大黃酚組。大黃酚組分別灌胃給予相應(yīng)藥物， 給藥體積為10ml /kg，1 次 / d，模型組對照組和假手術(shù)組給予等體積生理鹽水，用藥 7d， 造模后繼續(xù)給藥2d。

2 模型制備

建立模型前6h對大鼠禁食，自由飲水，按照參考文獻(xiàn)進(jìn)行手術(shù)操作，假手術(shù)組大鼠手術(shù)步驟同模型組，但是不夾閉雙側(cè)頸總動脈，不抽取血液。

3 觀察指標(biāo)

3.1 大鼠腦組織勻漿檢測GSH-Px、SOD、CAT 酶活力以及 MDA、的測定：腦組織GSH-Px、SOD、CAT 酶活力以及 MDA含量，實驗操作嚴(yán)格按相應(yīng)測試盒說明書進(jìn)行操作。

3.2 大鼠腦指數(shù)及腦組織中含水量測定：含水量計算：含水量=（腦濕重量-腦干重量）/腦濕重量*100%。腦指數(shù)計算：（g/100g）=腦濕重（g）*100/體重（100g）。

3.3 檢測大鼠血清中IL-1β、IL-6等炎性因子含量：

以Elisa法測定IL-1β、IL-6等的含量，實驗過程嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

4 結(jié)果

4.1 各組大鼠腦指數(shù)、 腦組織含水量等的影響：

與假手術(shù)組相比，模型組大鼠腦指數(shù)、 腦組織含水量等影響指數(shù)及含水量明顯增加，差異顯著p<0.05； 與模型組相比，大黃酚組能明顯降低模型動物腦指數(shù)和腦組織含水量等變化p<0.05。

4.2 各組大鼠MDA及 SOD的影響：

與假手術(shù)組相比，模型組大鼠MDA含量明顯增加，SOD活力明顯降低，差異顯著p<0.05； 與模型組相比，大黃酚組大鼠MDA含量明顯降低，SOD活力明顯增加，差異顯著p<0.05；

4.3 各組大鼠血清中 IL-1β、 IL-6、等炎性因子含量的影響：

與假手術(shù)組相比，模型組大鼠血清中 IL-1β、 IL-6含量明顯增加差異顯著p<0.05； 與模型組相比，大黃酚組大鼠血清中 IL-1β、 IL-6含量明顯降低，差異顯著p<0.05。

5 討論

缺血再灌注腦損傷的重要發(fā)病機(jī)制之一是氧自由基產(chǎn)生增加及其介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)^[2]，腦缺血再灌注損傷時， 主要有自由基的生成、 白細(xì)胞高度聚集等病理過程。在自由基產(chǎn)生過程中，SOD是機(jī)體產(chǎn)生的自由基清除酶，MDA 是氧自由基引發(fā)的過氧化反應(yīng)的代謝產(chǎn)物。本實驗結(jié)果表明腦缺血再灌注大鼠腦組織中CAT、SOD活性明顯下降， 氧化產(chǎn)物 MDA明顯增加。大黃酚可以明顯增加大鼠 腦 中CAT、 SOD的活性， 說明大黃酚降低氧自由基對細(xì)胞的損傷，減輕機(jī)體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)。

本實驗結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，模型組大鼠血清中IL-6、 IL-1β的含量明顯升高， 大黃酚可明顯降低血清中 IL-1β、 IL-6含量，因此大黃酚可以減輕腦缺血再灌注大鼠腦組織炎癥損傷，大黃酚對大鼠腦缺血再灌注損傷有保護(hù)作用。

參考文獻(xiàn)

[1] 蘭晶，潘敬芳.姜黃素對腦缺血再灌注損傷大鼠PI3K/AKT/mTOR的影響[J].重慶醫(yī)學(xué)，2017，46（1）：36-39.

[2] 王君，曾文斌，岳惠玉，黨莎杰，韓麗春.氫飽和生理鹽水治療大鼠腦缺血再灌注損傷的效果研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2017，17（3）：433-437.

[3] 葛建彬，盧紅建，宋新建，李梅，陳丹丹，吳鋒.枸杞多糖對小鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其抑制NF-κB，TNF-α，IL-6和IL-1β表達(dá)的機(jī)制[J].中國中藥雜志，2017，42（2）：326-331.endprint