含Nisin復(fù)合型牛乳頭清洗消毒劑在大型牧場(chǎng)應(yīng)用效果的研究

梁恒宇，王貴元，郭坤，史孟琦，陳傲冰

（1.武漢生物技術(shù)研究院，武漢 430075；2.武漢大學(xué)藥學(xué)院，武漢 430072；3.黑龍江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，哈爾濱 150080；4.現(xiàn)代牧業(yè)集團(tuán)有限公司，哈爾濱 150614）

含Nisin復(fù)合型牛乳頭清洗消毒劑在大型牧場(chǎng)應(yīng)用效果的研究

梁恒宇1,2，王貴元1，郭坤3，史孟琦1，陳傲冰4

（1.武漢生物技術(shù)研究院，武漢 430075；2.武漢大學(xué)藥學(xué)院，武漢 430072；3.黑龍江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，哈爾濱 150080；4.現(xiàn)代牧業(yè)集團(tuán)有限公司，哈爾濱 150614）

乳酸鏈球菌素（Nisin）是一種食品級(jí)抗菌肽，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌引起的奶牛環(huán)境性、傳染性乳房炎具有明顯治療作用。本研究以Nisin為主要成分的復(fù)合型奶牛乳頭專(zhuān)用清潔消毒類(lèi)產(chǎn)品為研究對(duì)象，對(duì)其在大型牧場(chǎng)的實(shí)際應(yīng)用效果進(jìn)行了長(zhǎng)期跟蹤測(cè)試。結(jié)果表明，含Nisin復(fù)合型牛乳頭清洗消毒劑不僅殺菌率高，而且還能有效降低受試牧場(chǎng)乳房炎發(fā)病率和鮮奶中的體細(xì)胞數(shù)，并且能夠控制鮮奶中的微生物數(shù)量。同時(shí)，與碘伏相比，該產(chǎn)品還具有較低的使用單耗，從而顯著降低牧場(chǎng)生產(chǎn)成本。

大型牧場(chǎng)；奶牛乳房炎；牛乳頭清洗消毒劑；乳酸鏈球菌素

乳房炎是嚴(yán)重影響奶牛養(yǎng)殖業(yè)的三大疾病之一，是奶牛乳房因受到物理、化學(xué)、微生物等因素的剌激而產(chǎn)生的一種炎癥[1]。乳房炎不僅能引起奶牛乳腺組織發(fā)生病變，導(dǎo)致乳汁發(fā)生理化和細(xì)胞學(xué)性質(zhì)改變，在實(shí)際生產(chǎn)中還會(huì)造成奶牛產(chǎn)奶量下降和奶品質(zhì)降低，嚴(yán)重時(shí)奶牛會(huì)因泌乳機(jī)能完全喪失而被淘汰[2]。在眾多誘發(fā)因素中，病原微生物經(jīng)乳頭管侵入乳腺組織是導(dǎo)致奶牛乳房炎的主要病因[3]。據(jù)報(bào)道，能夠?qū)е履膛ｎ净既榉垦椎闹虏∥⑸镆殉?50種，其中包括細(xì)菌、真菌、病毒、支原體等各類(lèi)病原體[4]。

對(duì)奶牛乳房炎的防治應(yīng)采取綜合性措施。其中每次擠奶前和擠奶后分別使用專(zhuān)門(mén)產(chǎn)品對(duì)奶牛乳頭進(jìn)行清潔消毒是國(guó)際上通用的且行之有效的方法[5]，這對(duì)乳房炎的預(yù)防起著關(guān)鍵作用[6]。目前行業(yè)內(nèi)經(jīng)常使用的乳頭消毒產(chǎn)品中主要的殺菌成分包括碘[7]、醋酸氯己定、新潔爾滅、次氯酸鈉、過(guò)氧乙酸和高錳酸鉀等[8]。其中碘伏等含碘類(lèi)消毒液因其殺菌效果好而最為廣泛使用。但碘容易揮發(fā)，長(zhǎng)期使用高濃度含碘制劑還存在奶中碘超標(biāo)的風(fēng)險(xiǎn)[9]。而其他非含碘類(lèi)的消毒液存在著安全性較低、殺菌率較差、穩(wěn)定性較弱或?qū)δ膛Ｆつw刺激性較強(qiáng)等問(wèn)題[10]。因此，急需開(kāi)發(fā)出一種更加安全、天然且對(duì)皮膚無(wú)刺激的新一代奶牛乳頭消毒類(lèi)產(chǎn)品[11]。

目前國(guó)際上關(guān)于以乳酸鏈球菌素（Nisin）作為主要?dú)⒕煞值娜轭^消毒劑的研究極少，但已有的研究表明，這類(lèi)產(chǎn)品與含碘量為1.0%的碘伏消毒劑的使用效果基本一致，比含碘量為0.1%、0.5%的碘伏和0.5%葡萄糖酸氯己定的效果更顯著[12]。Nisin作為一種食品級(jí)抗菌肽，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌引起的奶牛環(huán)境性和傳染性乳房炎具有明顯治療作用的效果已被證明[13]。本研究對(duì)以Nisin為主要成分的復(fù)合型奶牛乳頭專(zhuān)用清潔消毒類(lèi)產(chǎn)品為研究對(duì)象，對(duì)其在大型牧場(chǎng)的實(shí)際應(yīng)用效果進(jìn)行了長(zhǎng)期跟蹤測(cè)試，為更好地使用和推廣該產(chǎn)品提供了詳實(shí)的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 奶牛乳頭清洗消毒劑產(chǎn)品

本研究試驗(yàn)組所采用的乳頭消毒產(chǎn)品為以Nisin為主要成分的復(fù)合型奶牛乳頭清洗消毒劑（命名為A產(chǎn)品），由齊齊哈爾安泰生物工程股份有限公司生產(chǎn)和提供。該產(chǎn)品分?jǐn)D奶前和擠奶后兩種劑型。其中擠奶前產(chǎn)品為300g/瓶的粉末狀固體，將1瓶擠奶前產(chǎn)品加入20L水中，充分溶解5～10min后即可使用；擠奶后產(chǎn)品為25kg/桶的黏稠液體，可直接使用。對(duì)照組產(chǎn)品為美國(guó)某大品牌碘伏類(lèi)乳頭消毒液，擠奶前和擠奶后產(chǎn)品均為棕褐色濃稠液體。

1.2 試驗(yàn)時(shí)間及場(chǎng)地

本研究試驗(yàn)期為2014年5月～2016年7月，共計(jì)27個(gè)月。研究分兩個(gè)階段：第一階段為2014年5月1日～2015年5月31日，牧場(chǎng)全群使用美國(guó)某大品牌碘伏類(lèi)消毒液，總計(jì)13個(gè)月；第二階段為2015年6月1日～2016年7月30日，全群改用A產(chǎn)品，總計(jì)14個(gè)月。試驗(yàn)地點(diǎn)為黑龍江省哈爾濱市周邊某大型牧場(chǎng)。該牧場(chǎng)泌乳牛常年保持在3 500頭左右。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 奶牛乳頭皮膚表面微生物總數(shù)的測(cè)定及分析

每月上、中、下旬分別隨機(jī)挑選4～6頭健康泌乳奶牛對(duì)其乳區(qū)擦拭取樣。分別在消毒前、擠前消毒后（乳頭浸漬擠奶前產(chǎn)品20～30s后）和擠后消毒后這三個(gè)節(jié)點(diǎn)用無(wú)菌濕潤(rùn)棉簽在一個(gè)乳區(qū)的乳頭導(dǎo)管周?chē)つw約4cm2表面輕柔地涂擦6～8下，其間不斷轉(zhuǎn)換棉簽的擦拭面。采樣后剪掉棉簽取樣端并使其立即掉入裝有10mL無(wú)菌生理鹽水的離心管中并封蓋，迅速將樣品轉(zhuǎn)移至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行10倍梯度稀釋。吸取適當(dāng)稀釋梯度的稀釋菌懸液100μL滴加到平板上進(jìn)行涂布[14]。然后將平板平移至37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì)，計(jì)算殺菌率。

1.3.2 牧場(chǎng)主要生產(chǎn)內(nèi)控指標(biāo)監(jiān)測(cè)

根據(jù)牧場(chǎng)每日的生產(chǎn)內(nèi)控指標(biāo)監(jiān)測(cè)記錄，分別按月統(tǒng)計(jì)牧場(chǎng)泌乳牛乳房炎月發(fā)病率、鮮奶中月平均體細(xì)胞數(shù)、鮮奶中月平均微生物總數(shù)和單頭奶牛消毒液日耗費(fèi)的月平均值，并對(duì)兩個(gè)階段的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析。

1.3.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)由SPSS 17.0軟件完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 奶牛乳頭清洗消毒劑殺菌能力的測(cè)試

本研究對(duì)受試牧場(chǎng)奶牛乳頭皮膚使用消毒產(chǎn)品前后微生物總數(shù)的變化進(jìn)行了長(zhǎng)達(dá)14個(gè)月的監(jiān)測(cè)。為了比較，在全群轉(zhuǎn)用A產(chǎn)品前的一個(gè)月（2015年5月）先對(duì)碘伏類(lèi)消毒液的殺菌能力進(jìn)行了測(cè)定，先后對(duì)18頭牛進(jìn)行了采樣和分析（表1）。在隨后的13個(gè)月內(nèi)（2015年6月～2016年6月），在全群使用A產(chǎn)品后，對(duì)其殺菌能力進(jìn)行了測(cè)定，其三個(gè)采樣節(jié)點(diǎn)乳頭皮表單位面積上的微生物總數(shù)月均值見(jiàn)表1所示。

表1 使用消毒液前后奶牛乳頭皮膚表面微生物數(shù)量及殺菌率

從表1可以看出，無(wú)論是碘伏產(chǎn)品，還是以Nisin為主要原料的A產(chǎn)品，均能有效殺滅和控制乳頭皮膚上的微生物數(shù)量。使用碘伏的單月平均數(shù)據(jù)顯示，消毒前乳頭皮表的微生物平均數(shù)量達(dá)1.31×107CFU/cm2，擠奶前消毒后降至1.20×106CFU/cm2，擠奶后消毒后又降至9.60×104CFU/cm2。使用碘伏擠前消毒后、擠后消毒后的平均殺菌率分別為90.84%和99.28%。

在全群改用A產(chǎn)品后，研究人員同樣發(fā)現(xiàn)該品牌擠奶前和擠奶后產(chǎn)品對(duì)奶牛皮膚表面的微生物同樣具有較好的殺滅作用，不同月份擠奶前消毒后和擠奶后消毒后平均殺菌率分別在79.98%～97.76%和98.58%～99.77%，與碘伏消毒液基本一致。從表1的數(shù)據(jù)還能得知，在使用A產(chǎn)品后，奶牛乳頭皮表微生物數(shù)量有明顯的漸進(jìn)下降趨勢(shì)。與2015年5月的數(shù)據(jù)相比，在使用A產(chǎn)品后的第一個(gè)月，奶牛乳房皮表微生物總數(shù)便降至6.31×106CFU/cm2，至2016年3月降至最低的3.56×104CFU/cm2，下降近177倍。進(jìn)入4月隨著季候的變化又緩慢增加至3.24×105CFU/cm2。這可能是由于隨著溫度的升高，環(huán)境中微生物數(shù)量增加造成的。

2.2 牧場(chǎng)不同階段使用不同類(lèi)型消毒劑乳房炎發(fā)病率的變化

圖1 牧場(chǎng)不同階段使用不同類(lèi)型消毒劑的乳房炎月發(fā)病率

擠奶過(guò)程中使用消毒劑對(duì)奶牛乳頭進(jìn)行消毒是預(yù)防乳房炎的關(guān)鍵步驟。本研究所在牧場(chǎng)乳房炎發(fā)病率變化總體呈現(xiàn)夏季較高，秋季至冬季逐漸降低，進(jìn)入春季又開(kāi)始緩慢升高的趨勢(shì)。從圖1中可以看出，牧場(chǎng)在第一階段使用碘伏時(shí)，乳房炎發(fā)病率最高為2014年8月的4.8%，最低為2015年1月的2.2%；在第二階段使用A產(chǎn)品后，奶牛乳房炎發(fā)病率最高為2015年7月時(shí)的4.4%，而最低為2016年的7月的1.4%，這一數(shù)值是該牧場(chǎng)建場(chǎng)7年以來(lái)的歷史最低值。

從圖1還可以看出，2015年在第二階段啟用新消毒劑后，牧場(chǎng)乳房炎月發(fā)病率相比第一階段同期高的月份只有兩個(gè)，即最初的6月和7月。這兩個(gè)月的乳房炎發(fā)病率分別為3.2%和4.4%，比第一階段同期（2014年6月和7月）僅分別高出0.1個(gè)百分點(diǎn)和0.2個(gè)百分點(diǎn)。而其他月份使用A產(chǎn)品后的乳房炎發(fā)病率均比第一階段相同月份時(shí)低。尤其是2015年11月、12月，以及2016年2月、3月、4月和5月，分別比2014年11月、2014年12月、2015年2月、2015年3月、2015年4月和2015年5月低1.0、0.4、0.7、1.6、0.8和1.3個(gè)百分點(diǎn)。

圖1的結(jié)果還表明：2014年5月、2015年5月以及2016年5月這三個(gè)月份的乳房炎發(fā)病率分別為3.0%、3.2%和1.9%，這其中2014年5月和2015年5月使用的均是碘伏，而2016年5月使用的是A產(chǎn)品；2014年6月、2015年6月以及2016年6月這三個(gè)月份的乳房炎發(fā)病率分別為3.1%、3.2%和2.1%，這其中2014年6月使用的是碘伏，2015年6月和2016年6月使用的是A產(chǎn)品，而2015年6月是該牧場(chǎng)首次使用該產(chǎn)品，與2014年和2015年同期相比，2016年6月的發(fā)病率降低了1.0和1.1個(gè)百分點(diǎn)；2014年7月、2015年7月和2016年7月這三個(gè)月份的乳房炎發(fā)病率分別為4.2%、4.4%和1.4%，這其中2014年7月份使用的是碘伏，2015年7月份和2016年7月份使用的是A產(chǎn)品，與2014年和2015年同期相比，2016年7月的發(fā)病率降低了2.8和3.0個(gè)百分點(diǎn)。從以上數(shù)據(jù)可以看出，在使用碘伏時(shí)，不同年份的同一月份，牧場(chǎng)乳房炎發(fā)病率沒(méi)有顯著變化，而使用A產(chǎn)品一年后，牧場(chǎng)乳房炎發(fā)病率顯著下降。

2.3 牧場(chǎng)不同階段使用不同類(lèi)型消毒劑鮮奶中體細(xì)胞數(shù)的變化

牧場(chǎng)在不同階段鮮奶中月度平均體細(xì)胞數(shù)（SCC）變化情況見(jiàn)圖2所示。在第一階段的研究中，13個(gè)月中SCC均值低于20萬(wàn)個(gè)/mL的有3個(gè)月份，其中最低值（19.6萬(wàn)個(gè)/mL）出現(xiàn)在2015年4月；而在第二階段中，14個(gè)月中SCC均值低于20萬(wàn)個(gè)/mL的有13個(gè)月份，其中最低值（18.8萬(wàn)個(gè)/mL）出現(xiàn)在2016年4月。而且，2015年6月～2016年5月的數(shù)據(jù)與2014年同期相比均較低。其中，2015年8月份平均SCC較上年同期低3.50萬(wàn)個(gè)/mL，同比下降達(dá)15%。

統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，在整個(gè)第二階段使用A產(chǎn)品的過(guò)程中，受試牧場(chǎng)的SCC均值為19.50±0.52萬(wàn)個(gè)/mL，與第一階段的21.64±1.54萬(wàn)個(gè)/mL相比，二者之間存在極顯著差異（P＜0.01）。以上結(jié)果表明，A產(chǎn)品具有有效降低牧場(chǎng)鮮奶中體細(xì)胞數(shù)的作用。

圖2 牧場(chǎng)不同階段使用不同類(lèi)型消毒劑的鮮奶中月平均體細(xì)胞數(shù)

2.4 牧場(chǎng)不同階段使用不同類(lèi)型消毒劑鮮奶中微生物數(shù)量的變化

圖3 牧場(chǎng)不同階段使用不同類(lèi)型消毒劑的鮮奶中月平均微生物數(shù)量

鮮奶中的微生物數(shù)量可反映出泌乳牛乳腺的健康狀況和擠奶時(shí)的環(huán)境衛(wèi)生情況。從圖3可以看出，2015年5～8月，受試牧場(chǎng)鮮奶中微生物數(shù)量逐漸上升，這與上一年度同期的數(shù)據(jù)結(jié)果不同。但2015年9～11月，該牧場(chǎng)鮮奶中的微生物數(shù)逐漸下降，并且低于2014年同期水平。2015年11月該牧場(chǎng)鮮奶中微生物數(shù)量平均為0.59萬(wàn)個(gè)/mL，與當(dāng)年8月份相比下降了31.4%。

從圖3可以看到，在整個(gè)研究階段，牧場(chǎng)所有月份生產(chǎn)的鮮奶中平均微生物數(shù)均低于1萬(wàn)個(gè)/mL，最低值出現(xiàn)在開(kāi)始使用A產(chǎn)品的第一個(gè)月（2015年6月），數(shù)值為0.43萬(wàn)個(gè)/mL。以上數(shù)據(jù)也同樣證明，A產(chǎn)品不僅能夠很好地控制奶牛乳房炎發(fā)病率，同時(shí)能夠降低鮮奶中微生物總數(shù)，從而提高原奶的質(zhì)量。

統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，在分別使用碘伏和A產(chǎn)品的情況下，兩個(gè)不同階段鮮奶中微生物均數(shù)分別為0.73±0.12萬(wàn)個(gè)/mL、0.65±0.13萬(wàn)個(gè)/mL，二者之間并無(wú)顯著性差異。以上分析結(jié)果表明，A產(chǎn)品和含碘消毒液同樣具有良好的控制鮮奶中微生物的作用。

2.5 牧場(chǎng)不同階段使用不同類(lèi)型消毒劑單頭奶牛消毒劑平均日耗費(fèi)的變化

圖4 牧場(chǎng)不同階段使用不同類(lèi)型消毒劑的單頭奶牛消毒劑日耗費(fèi)

乳頭消毒劑的使用成本是牧場(chǎng)關(guān)心的重要問(wèn)題。經(jīng)過(guò)綜合成本核算，使用A產(chǎn)品消耗費(fèi)用均可維持在1.00元/（頭·d），最低時(shí)僅為0.63元/（頭·d），最高時(shí)為0.99元/（頭·d）。而使用原碘伏產(chǎn)品的消耗費(fèi)用在13個(gè)月內(nèi)有5個(gè)月超過(guò)了1.00元/（頭·d），最低時(shí)為0.74元/（頭·d），最高時(shí)達(dá)到1.14元/（頭·d），詳見(jiàn)圖4。

對(duì)兩個(gè)階段月消毒液費(fèi)用單耗進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表明使用碘伏和A產(chǎn)品的平均單耗分別為0.99±0.10元/（頭·d）、0.85±0.09元/（頭·d），二者存在顯著差異（P＜0.05）。與第一階段使用碘伏相比，使用A產(chǎn)品后單頭奶牛每日消毒液的消耗成本降低了14.14%。該牧場(chǎng)每天的泌乳牛頭數(shù)為3 500頭，按照統(tǒng)計(jì)均值計(jì)算，使用A產(chǎn)品可為牧場(chǎng)節(jié)約藥浴費(fèi)用達(dá)17.89萬(wàn)元/年。

3 討論

作為奶廳擠奶操作規(guī)程中的關(guān)鍵控制點(diǎn)，對(duì)乳頭進(jìn)行清洗和消毒是牧場(chǎng)控制環(huán)境性和傳染性病原的重要手段之一，其效果直接影響到乳房炎的發(fā)病率[15]。殺菌率是判斷這類(lèi)產(chǎn)品質(zhì)量的重要依據(jù)，因此客觀(guān)評(píng)價(jià)產(chǎn)品的殺菌效果具有重要意義[16]。奶牛在兩次擠奶期間會(huì)在飼舍停留8～12h，這期間奶牛會(huì)在臥床上躺臥，因此臥床上的環(huán)境微生物會(huì)黏附在乳頭皮膚上。每次擠奶前，對(duì)奶牛乳頭進(jìn)行前藥浴處理是為了清洗掉奶牛乳頭皮膚上的泥土、碎屑等污物，同時(shí)殺滅微生物。使用后藥浴，是為了在乳頭孔閉合前保護(hù)乳腺免受病原體的侵害。本研究證明A產(chǎn)品具有良好的殺菌能力，擠奶前和擠奶后產(chǎn)品對(duì)乳頭皮表微生物的殺滅率分別在79.98%～97.76%和98.58%～99.77%，與含碘類(lèi)消毒劑相似。無(wú)論哪種類(lèi)型的消毒劑，藥浴后的殺菌率都不可能達(dá)到100%，這是由于奶廳的環(huán)境衛(wèi)生、毛巾的潔凈程度以及工人的操作習(xí)慣等因素都會(huì)導(dǎo)致微生物殘留，因此藥浴后仍能在乳頭皮膚上分離到一定數(shù)量的微生物[17]。

Nisin是一種由34個(gè)氨基酸組成的食品級(jí)抗菌肽，通過(guò)干擾細(xì)胞膜的正常功能并造成膜穿孔而對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌具有高效的殺滅作用[13]。其與螯合劑復(fù)配可以有效抑制革蘭氏陰性細(xì)菌的生長(zhǎng)[18]。Nisin是A產(chǎn)品的主要?dú)⒕煞?。此外，該產(chǎn)品中還含有食品級(jí)螯合劑、增效劑和有機(jī)酸等物質(zhì)，可以有效擴(kuò)展Nisin的抑菌譜。有報(bào)道稱(chēng)，使用含有Nisin的消毒劑與碘伏奶牛皮表的殺菌率無(wú)明顯差異，但使用前者后乳頭的狀態(tài)與后者相比略有改善[19]。這與本研究所得結(jié)果一致。本文通過(guò)對(duì)大型牧場(chǎng)長(zhǎng)期的臨場(chǎng)應(yīng)用研究和跟蹤測(cè)試，不僅證明了A產(chǎn)品和碘伏同樣具有很高的殺菌率，而且長(zhǎng)期使用該產(chǎn)品能夠起到降低皮膚微生物總數(shù)的作用，從而對(duì)乳腺可以起到充分的保護(hù)。

乳房炎發(fā)病率是牧場(chǎng)最為關(guān)心的生產(chǎn)數(shù)據(jù)。大型牧場(chǎng)乳房炎月發(fā)病率＜2%為優(yōu)秀，＜4%為可接受?？焖俑咝У臄D奶前消毒，配合擠奶后成膜消毒液在乳頭上的長(zhǎng)時(shí)間保護(hù)，再加上合理的牛群管理措施，可以有效預(yù)防乳房炎。本研究證明，A產(chǎn)品能夠有效防控牧場(chǎng)乳房炎的發(fā)病率。與傳統(tǒng)的碘消毒液相比，經(jīng)過(guò)連續(xù)兩個(gè)月的全群使用后，使得受試牧場(chǎng)乳房炎月發(fā)病率出現(xiàn)持續(xù)降低。使用一年左右，乳房炎發(fā)病率與使用含碘消毒液的歷史同期相比下降幅度超過(guò)30%，效果十分顯著。

體細(xì)胞數(shù)是反映乳腺健康狀況的重要指標(biāo)，一般奶牛乳中SCC高于20萬(wàn)個(gè)/mL便有可能感染乳房炎。SCC還與奶牛的泌乳階段、季節(jié)、年齡、感染細(xì)菌的種類(lèi)和數(shù)量有關(guān)。關(guān)于乳中SCC的上限美國(guó)規(guī)定是75萬(wàn)個(gè)/mL，歐盟是40萬(wàn)個(gè)/mL。2015年我國(guó)牛奶中SCC平均值已降至51萬(wàn)個(gè)/mL。在本研究中，從受試牧場(chǎng)SCC指標(biāo)來(lái)看，A產(chǎn)品的表現(xiàn)也優(yōu)于碘伏類(lèi)產(chǎn)品。在使用含碘消毒劑的13個(gè)月里，平均SCC為21.64±1.54萬(wàn)個(gè)/mL；而改用A產(chǎn)品后，13個(gè)月的平均SCC降至19.51±0.53萬(wàn)個(gè)/mL。二者之間具有顯著性差異。

鮮奶中的微生物總數(shù)是牧場(chǎng)管理的另一項(xiàng)重要指標(biāo)。研究結(jié)果表明，A產(chǎn)品與碘伏在這一指標(biāo)上沒(méi)有差異，這兩種產(chǎn)品均能將受試牧場(chǎng)鮮奶中的微生物數(shù)量控制在0.70萬(wàn)個(gè)/mL左右的水平。

從使用成本上看，A產(chǎn)品與碘伏相比也略占優(yōu)勢(shì)。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，長(zhǎng)期使用A產(chǎn)品可以使牧場(chǎng)藥浴成本下降14.14%。這一差異，將為大型牧場(chǎng)每年節(jié)約十余萬(wàn)甚至數(shù)十萬(wàn)元的成本。

[1] Contreras G A, Rodríguez J M. Mastitis： Comparative Etiology and Epidemiology[J]. Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia, 2011, 16(4)：339-356.

[2] Oliveira L, Hulland C, Ruegg P L. Characterization of clinical mastitis occurring in cows on 50 large dairy herds in Wisconsin[J].Journal of Dairy Science, 2013, 96(12)：7538-49.

[3] Oikonomou G, Machado V S, Santisteban C, et al. Microbial Diversity of Bovine Mastitic Milk as Described by Pyrosequencing of Metagenomic 16s rDNA[J]. PLoS One, 2012, 7(10)： 1-13.

[4] Tiwari J G, Babra C, Tiwari H K, et al. Trends In Therapeutic and Prevention Strategies for Management of Bovine Mastitis：An Overview[J]. Journal of Vaccines and Vaccinations, 2013, 4(2)：1000176.1-1000176.11.

[5] Oliver S P, Lewis M J, Ingle T L, et al. Prevention of bovine mastitis by a premilking teat disinfectant containing chlorous acid and chlorine dioxide[J]. Journal of Dairy Science, 1993, 76： 287-291.

[6] 周慶民,侯美如,馮萬(wàn)宇,等. 不同種類(lèi)奶牛乳頭藥浴消毒劑的應(yīng)用效果研究[J]. 中國(guó)乳業(yè),2014,148：30-31.

[7] 木村直美,張克家,陸鋼.中藥乳頭浸蘸劑防治奶牛隱性乳房炎的研究[J]. 中國(guó)獸醫(yī)雜志, 2003,39(10)：29-32.

[8] 張春剛,陳錦昌,張楠,等. 安全型奶牛乳頭藥浴液的牧場(chǎng)應(yīng)用效果研究[J]. 中國(guó)奶牛,2014,5：21-23.

[9] 周慶民,侯美如,馮萬(wàn)宇,等. 不同種類(lèi)奶牛乳頭藥浴消毒劑的應(yīng)用效果研究[J]. 中國(guó)乳業(yè),2014, 148：30-31.

[10] Klostermann K, Crispie F, Flynn J, et al. Efficacy of a teat dip containing the bacteriocin lacticin 3147 to eliminate Grampositive pathogens associated with bovine mastitis[J]. Journal of Dairy Science, 2010, 77(2)：231-238.

[11] Sears P M, Smith B S, Stewart W K, et al. Evaluation of a nisinbased germicidal formulation on teat skin of live cows[J]. Journal of Dairy Science, 1992, 75：3185-3190.

[12] Montalbán-López M, Sánchez-Hidalgo M, Valdivia E, et al. Are bacteriocins underexploited? Novel applications for old antimicrobials[J]. Current Pharmaceutical Biotechnology, 2011, 12(8)：1205-1220.

[13] 南松劍. 微酸性電解水用于奶牛場(chǎng)消毒和奶牛乳房炎控制的研究[D]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué),2011：51.

[14] Nickerson S C. Importance of pre- and post-milking teat dipping[M]. Dairy Research Report-Louisiana Agricultural Experiment Station. 1992：81-82.

[15] Zarkower A, Scheuchenzuber W J. Teat apex microflora：influence of washing and dipping procedures[J]. Cornell Veterinarian, 1977, 67(3)：404-412.

[16] 馮軍科,馬宏磊,邵曉磊,等. 擠前藥浴與擠后藥浴對(duì)乳頭的滅菌效果觀(guān)察[J]. 中國(guó)奶牛,2014, 4：53-55.

[17] Boziaris I S, Adams M R. Effect of chelators and nisin produced in situ on inhibition and inactivation of Gram negatives[J].International Journal of Food Microbiology, 1999, 53：105-113.

[18] Serieys F, Poutrel B. Field trial evaluation of two teat dips containing nisin or polyvinylpyrrolidone iodophor designed for use before and after milking[J]. Veterinary Research, 1996, 27：295-303.

[19] NMC. Guidelines on normal and abnormal raw milk based on somatic cell counts and signs of clinical mastitis[M]. NMC Protocols, Guidelines and Procedures, 2001.

Abstract:Nisin is a kind of food grade antibacterial peptide. It has obvious therapeutic action on the environmental and infectious mastitis caused by gram positive bacteria in dairy cattle. In this work, the specific cleaning and disinfection product of teat dip with Nisin as the main component was studied, and the long-term effects of its application on large farms were tested. The results showed that the teat dip containing Nisin could not only increase the bactericidal rate on cow nipple skin, but also effectively reduce the number of somatic cells, the incidence of mastitis and the number of microorganisms in fresh milk. At the same time, compared with iodophor, this product showed lower unit consumption, thus signifcantly decrease application costs of dairy farms.

Application of Compound Teat Dip Containing Nisin in a Large Dairy Farm

LIANG Heng-yu1,2, WANG Gui-yuan1, GUO Kun3, SHI Meng-qi1, CHEN Ao-bing4
(1. Wuhan Institute of Biotechnology, Wuhan 430075; 2. Wuhan University School of Pharmaceutical Sciences, Wuhan 430072; 3. Heilongjiang University College of Life Sciences, Harbin 150080; 4. Modern Farming (Group) Co., LTD, Harbin 150614)

Large dairy farm; Bovine mastitis; Teat dip; Nisin

S858.23

A

1004-4264（2017）08-0029-05

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.08.007

2016-08-10

梁恒宇（1980-），男，博士，主要研究方向?yàn)椴≡⑸锖褪称飞锛夹g(shù)。