5%唑啉草酯·雙氟磺草胺可分散油懸浮劑高效液相色譜分析

潘 靜，徐 妍，傅 楊，東 琴，劉潤峰，高敬雨，金鼎俊

（1.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司，北京 102206；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，昆明 650201）

◆農(nóng)藥分析◆

5%唑啉草酯·雙氟磺草胺可分散油懸浮劑高效液相色譜分析

潘 靜1，徐 妍1，傅 楊2，東 琴1，劉潤峰1，高敬雨1，金鼎俊2

（1.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司，北京 102206；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，昆明 650201）

采用高效液相色譜，以乙腈＋0.05%磷酸水溶液為流動(dòng)相，使用C18反相柱和紫外可變波長檢測器，在260 nm波長下對5%唑啉草酯·雙氟磺草胺可分散油懸浮劑中有效成分進(jìn)行分離和定量分析。結(jié)果表明，唑啉草酯、雙氟磺草胺的線性相關(guān)系數(shù)分別為0.999 2和0.999 3，標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.09和0.02，變異系數(shù)分別為2.05%和2.44%，平均回收率分別為99.28%和99.69%。

唑啉草酯；雙氟磺草胺；高效液相色譜；分析

唑啉草酯，英文名稱pinoxaden，CAS號243973-20-8，分子式C23H32N2O4，化學(xué)名稱8-(2,6-二乙基-4-甲基苯基)-1,2,4,5-四氫-7-氧代-7H-吡唑并[1,2-d][1,4,5]雜氧二氮雜卓-9-基2,2-二甲基丙酸酯。唑啉草酯是由瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司開發(fā)的新苯基吡唑啉類除草劑[1]。該藥通過抑制乙酰輔酶A羧化酶（ACCase），阻止脂肪酸的合成，破壞細(xì)胞膜的含脂結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致雜草死亡。唑啉草酯具有內(nèi)吸傳導(dǎo)性，主要用于防除多種一年生禾本科雜草，如燕麥屬、黑麥草屬、虉草屬和狗尾草屬等[1-3]。

雙氟磺草胺，英文名稱florasulam，CAS號145701-23-1，分子式C12H8F3N5O3S，化學(xué)名稱2',6'-二氟-5-甲氧基-8-氟[1,2,4]三唑[1,5-c]嘧啶-2-磺酰苯胺。雙氟磺草胺是美國陶氏益農(nóng)公司開發(fā)的三唑并嘧啶磺酰胺類除草劑[4]。其主要用于苗后防除闊葉雜草，如豬殃殃、繁縷、蓼等，有效成分用量為3～10 g/hm2。雙氟磺草胺為乙酰乳酸合成酶（ALS）抑制劑，對麥類作物與草坪具有高度選擇性，可廣泛應(yīng)用于冬小麥、冬大麥、春小麥、春大麥、草坪、洋蔥及草地、牧場等[5]。

唑啉草酯和雙氟磺草胺復(fù)配能有效防除小麥田一年生禾本科雜草、闊葉雜草，速效性好，殺草譜廣。目前，關(guān)于唑啉草酯和雙氟磺草胺單劑的分析方法已有報(bào)道[2,5]。有關(guān)唑啉草酯和雙氟磺草胺復(fù)配可分散油懸浮劑的液相色譜分析，目前尚未見公開報(bào)道。

本文采用反相高效液相色譜，使用C18反相柱及紫外可變波長檢測器，對兩者復(fù)配產(chǎn)品中有效成分進(jìn)行分離和定量分析。此方法同時(shí)適用于唑啉草酯和雙氟磺草胺原藥及制劑的分析，具有簡便、快速、準(zhǔn)確，靈敏度高，重復(fù)性好的特點(diǎn)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

高效液相色譜儀（Agilent 1260），具可變波長紫外檢測器；色譜數(shù)據(jù)處理工作站；不銹鋼色譜柱（150 mm×4.6 mm），內(nèi)裝ZORBAX SB-C18填充物，粒徑5 μm；過濾器（濾膜孔徑0.45 μm）；進(jìn)樣器（50 μL）；超聲波清洗器。

乙腈（色譜純）；磷酸（分析純）；水（新蒸2次蒸餾水）；唑啉草酯標(biāo)樣（≥98.0%）、雙氟磺草胺標(biāo)樣（≥98.0%），沈陽化工研究院有限公司；5%唑啉草酯·雙氟磺草胺可分散油懸浮劑，江蘇明德立達(dá)作物科技有限公司。

1.2 液相色譜操作條件

流動(dòng)相：乙腈＋水（0.05%磷酸水溶液），體積比65∶35；流速：1.0 mL/min；柱溫：25℃；檢測波長：260 nm；進(jìn)樣體積：10 μL。保留時(shí)間：唑啉草酯約5.4 min，雙氟磺草胺約2.3 min。唑啉草酯、雙氟磺草胺標(biāo)樣及試樣液相色譜圖見圖1、圖2。圖2中，8.8 min處色譜峰為吡唑解草酯。

圖1 標(biāo)樣液相色譜圖

圖2 試樣液相色譜圖

1.3 測定步驟

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取唑啉草酯標(biāo)樣約26 mg、雙氟磺草胺標(biāo)樣約5 mg（精確至0.2 mg）于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，搖勻后備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取制劑試樣約610 mg（精確至0.2 mg）于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，搖勻后離心，取上清液備用。

1.3.3 測定

在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針中唑啉草酯、雙氟磺草胺響應(yīng)值相對變化小于1.5%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。

1.3.4 計(jì)算

將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中的唑啉草酯、雙氟磺草胺峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中唑啉草酯、雙氟磺草胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下式計(jì)算。

式中：A1—標(biāo)樣溶液中，唑啉草酯（雙氟磺草胺）峰面積的平均值；A2—試樣溶液中，唑啉草酯（雙氟磺草胺）峰面積的平均值；m1—唑啉草酯（雙氟磺草胺）標(biāo)樣質(zhì)量，g；m2—試樣質(zhì)量，g；P—標(biāo)樣中唑啉草酯（雙氟磺草胺）質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件的選擇

采用紫外可見分光光度計(jì)UV-1800在190～400 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描。唑啉草酯在200～230 nm、255～275 nm均有較大吸收，雙氟磺草胺在190～210 nm、245～275 nm均有較大吸收?？紤]到溶劑及助劑對吸收的影響，以及樣品中兩組分的峰高及峰面積盡量接近，最終選定以260 nm作為檢測波長（見圖3）。

圖3 唑啉草酯、雙氟磺草胺紫外掃描圖

色譜柱選擇常規(guī)使用的ZORBAX SB-C18反相柱。根據(jù)唑啉草酯、雙氟磺草胺理化性質(zhì)，用乙腈溶解標(biāo)樣及試樣，選擇乙腈和磷酸水溶液作為流動(dòng)相。為了得到較好的分離效果和峰形，將流動(dòng)相按不同體積比在色譜柱上進(jìn)行選擇比較試驗(yàn)。當(dāng)流速控制在1.0 mL/min，乙腈＋0.05%磷酸水溶液（體積比65∶35）為流動(dòng)相時(shí)，有效成分與雜質(zhì)能有效分離，峰形對稱，基線平穩(wěn)，保留時(shí)間短。

2.2 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn)

按1.3.1中方法配制不同質(zhì)量濃度的唑啉草酯、雙氟磺草胺標(biāo)樣溶液，在上述色譜條件下，每個(gè)濃度重復(fù)進(jìn)樣2次，當(dāng)相鄰2針的峰面積相對偏差小于1%，求其峰面積平均值。以兩者質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得唑啉草酯線性方程為y=16.003 9 x＋148.797 3，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 2（見圖4）；雙氟磺草胺線性方程為y=17.4132x-2.7702，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 3（見圖5）。表明方法線性關(guān)系良好。

圖4 唑啉草酯線性關(guān)系圖

圖5 雙氟磺草胺線性關(guān)系圖

2.3 分析方法的精密度試驗(yàn)

選取有代表性的5%唑啉草酯·雙氟磺草胺可分散油懸浮劑試樣，在上述色譜操作條件下平行測定5次。唑啉草酯和雙氟磺草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.09和0.02，變異系數(shù)分別為2.05%和2.44%，結(jié)果見表1。

表1 分析方法的精密度測定結(jié)果

2.4 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

采用標(biāo)準(zhǔn)添加法，在5%唑啉草酯·雙氟磺草胺可分散油懸浮劑試樣中加入一定量的唑啉草酯、雙氟磺草胺標(biāo)樣，再按上述色譜操作方法進(jìn)行分析。唑啉草酯的平均回收率為99.28%，雙氟磺草胺的平均回收率為99.69%，結(jié)果見表2。

表2 分析方法的準(zhǔn)確度測定結(jié)果

3 結(jié)論

本文提出的5%唑啉草酯·雙氟磺草胺可分散油懸浮劑中有效成分的分析方法，同時(shí)適用于唑啉草酯、雙氟磺草胺原藥及制劑的分析。試驗(yàn)結(jié)果表明，唑啉草酯、雙氟磺草胺在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，方法準(zhǔn)確度和精密度較高，且操作簡便、快速、準(zhǔn)確，是產(chǎn)品質(zhì)量控制和應(yīng)用研究中較為理想的分析方法。

[1]萬琴.除草劑唑啉草酯的合成研究[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2015,14(2): 25-27.

[2]武鵬,于榮.5%唑啉草酯乳油高效液相色譜分析方法研究[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理,2016,37(4):48-50.

[3]葉萱.新穎除草劑——唑啉草酯[J].世界農(nóng)藥,2014,36(1): 60-61.

[4]劉長令.世界農(nóng)藥大全:除草劑卷[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社, 2008:100-101.

[5]張鵬,劉偉,唐永軍,等.雙氟磺草胺的液相色譜分析方法研究[J].山東化工,2010 39(9):36-38.

（責(zé)任編輯：柏亞羅）

Analysis of Pinoxaden＋Florasulam 5%OD by HPLC

PAN Jing1,XU Yan1,FU Yang2,DONG Qin1,LIU Run-feng1,GAO Jing-yu1,JIN Ding-jun2
(1.Beijing Mindleader Agroscience Co.,Ltd.,Beijing 102206,China;2.Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,China)

A method for separation and quantitative analysis of pinoxaden+florasulam 5%OD by HPLC was described, using acetonitrile and phosphoric acid solution(0.05%)as mobile phase,on ZORBAX SB-C18column and UV-absorbance detector,at 260 nm wavelength.The results showed that the linear correlation coefficients of pinoxaden and florasulam were 0.999 2 and 0.999 3,the standard deviations were 0.09 and 0.02,the variation coefficients were 2.05%and 2.44%, and the average recoveries were 99.28%and 99.69%,respectively.

pinoxaden;florasulam;HPLC;analysis

TQ 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.04.008

2016-12-30

云南省科技惠民計(jì)劃專項(xiàng)（2016RA007）

潘靜（1974—），女，安徽省鳳陽縣人，工程師，主要從事農(nóng)藥質(zhì)量分析與檢測工作。E-mail：panjing@mdldagro.com