紫花前胡中化學成分的研究

廖志超+姜鑫+田文靜+林挺 陳海峰

[摘要]采用HP20大孔吸附樹脂、ODS、硅膠柱色譜、Sephadex LH20柱色譜和半制備HPLC等色譜分離手段對紫花前胡的化學成分進行研究。結合理化性質及MS， NMR等譜學數據鑒定化合物的結構，從紫花前胡80%乙醇提取物中分離并鑒定了12個化合物，分別是（9R，10R）9acetoxy8，8dimethyl9，10dihydro2H，8Hbenzo[1，2b：3，4b′]dipyran2one10yl ester（1）、 補骨脂呋喃香豆精（2）、順式3′，4′二千里光?；?′，4′二氫邪蒿內酯（3）、（3′R，4′R）3′angeloyloxy4′senecioyloxy3′，4′dihydroseselicalipteryxin（4）、（+）8，9dihydro8（2hydroxypropan2yl）2oxo2Hfuro[2，3h]chromen9yl3methylbut2enoate（5）、libanoridin（6）、絲立尼亭（7）、花椒素（8）、crocatone（9）、peujaponisinol B（10）、 peujaponisinol A（11）、ostenol（12）。其中，化合物1～5為首次從當歸屬植物中分離得到，化合物 7～12為首次從紫花前胡中分離得到。

[關鍵詞]當歸屬； 紫花前胡； 香豆素； 化學成分

Chemical constituents from root of Angelica decursiva

LIAO Zhichao， JIANG Xin， TIAN Wenjing， LIN Ting*， CHEN Haifeng*

（School of Pharmaceutical Sciences， Xiamen University， Xiamen 361102， China）

[Abstract]The compounds were isolated and purified by HP20 macroporous adsorption resin， ODS， silica gel， and Sephadex LH20 column chromatography， as well as semipreparative HPLC chromatography from the 80% ethanol extract of the root of Angelica decursiva， and their structures were identified based on their physiochemical properties and spectroscopic data Twelve compounds were structures were identified as （9R，10R）9acetoxy8，8dimethyl9，10dihydro2H，8Hbenzo[1，2b：3，4b′]dipyran2one10yl ester （1）， bakuchicin （2）， （3′， S，4′S）disenecioyloxy3′，4′dihydroseselin （3）， （3′R，4′R）3′angeloyloxy4′senecioyloxy3′，4′dihydroseselincalipteryxin （4）， （+）8，9dihydro8（2hydroxypropan2yl）2oxo2Hfuro[2，3h]chromen9yl3methylbut2enoate （5）， libanoridin （6）， selinidin （7）， suberosin （8）， crocatone （9）， peujaponisinol B （10）， peujaponisinol A （11）， and ostenol （12）， respectively Compounds 15 were isolated from the plants of Angelica genus for the first time Compounds 712 were isolated from A decursiva for the first time

[Key words]Angelica； Angelica decursiva； coumarins； chemical constituents

中藥紫花前胡是傘形科Umbelliferae當歸屬Angelica植物紫花前胡A decursiva的干燥根。紫花前胡為多年生草本植物，根圓錐狀，常數支根，表面黃褐色至棕色；具有疏散風熱，降氣化痰的功效[1]。紫花前胡中的主要化學成分為香豆素類化合物。香豆素是廣泛分布于植物界中的次生代謝產物，最早報道于1820年，迄今已有1 300多種[2]?，F代藥理學研究表明，香豆素類化合物具有抗神經衰弱、抗凝血、抗氧化、抗菌、抗癌、抗結核、降血糖、抗抑郁、抗炎等多方面的藥理活性[3]，在藥物的研究開發(fā)中發(fā)揮了重要的作用。本文以富含香豆素類成分的紫花前胡為研究對象，從其80%乙醇提取物中分離鑒定了12個化合物。

1材料

Thermo Scientific Q Exactive質譜儀（賽默飛公司）；Bruker Avance 600Ⅲ 型核磁共振儀（瑞士Bruker公司）；LC20A 分析型高效液相色譜儀（日本島津公司）；LC8A制備型高效液相色譜儀（日本島津公司）；半制備HPLC色譜柱（北京綠百草科技發(fā)展有限公司 Prep C18，10 mm×150 mm，5 μm） ； Sephadex LH20 填料（Pharmacia） ； ODS（40～63 μm，Pharmacia）； 大孔樹脂型號為 HP20（北京綠百草科技發(fā)展有限公司） ； 柱色譜用硅膠（200～300目） 及薄層色譜用GF254硅膠預制板（青島海洋化工廠）。有機溶劑均為分析純或色譜純。

紫花前胡飲片經永春縣林業(yè)局鄒秀紅工程師鑒定為傘形科當歸屬植物紫花前胡A decursiva的干燥根。

2 提取分離

紫花前胡根飲片100 kg，以80%乙醇回流提取2次，每次3 h，合并乙醇提取液，濃縮得到浸膏20 kg。用蒸餾水混懸浸膏后，利用大孔樹脂進行不同極性部分的分離。用乙醇水進行洗脫，得到水洗脫部分、20%乙醇部分、60%乙醇部分和95%乙醇部分。將95%乙醇洗脫部分（4141 g）進行硅膠柱色譜分離，用氯仿甲醇系統（100∶0～0∶1）進行梯度洗脫，得到10個流分（Fr D1～D10）。Fr D1用水混懸，依次用石油醚和氯仿萃取，得到氯仿萃取物Fr D1B（903 g）。Fr D1B經硅膠柱色譜，用石油醚丙酮（30∶1～20∶1）進行梯度洗脫，得到7個流分（Fr D1B1～D1B7）。Fr D1B3 經Sephadex LH20柱色譜、反相柱色譜以及半制備HPLC純化得到化合物2（85 mg） 和其他6個流分（Fr D1B3A1～D1B3A7）。Fr D1B3A3經半制備HPLC純化得到化合物9（29 mg）；Fr D1B3A5經半制備HPLC純化得到化合物7（79 mg）和 8（22 mg）；Fr D1B6經反相柱色譜以及半制備HPLC純化得到化合物10（20 mg），11（28 mg），12（45 mg）；Fr D1B5經反相柱色譜，依次用甲醇水（60∶40～80∶20）梯度洗脫，得到10個流分（Fr D1B5A～D1B5J）；Fr D1B5D經半制備HPLC純化得到化合物6 （58 mg）和 1（71 mg）；Fr D1B5E經半制備HPLC純化得到化合物5（60 mg）；Fr D1B5H經反相柱色譜得到5個流分（Fr D1B5H1～D1B5H5）；Fr D1B5H2經半制備HPLC純化得到化合物3（428 mg）；Fr D1B5H5經半制備HPLC純化得到化合物4（185 mg）。

3結構鑒定

化合物1無色油狀，ESIMS m/z 383 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 624（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），735（1H，d，J=83 Hz，H5），681（1H，d，J=83 Hz，H6），530（1H，d，J=47 Hz，H3′），655（1H，d，J=47 Hz，H4′），209（3H，s，H2″），245（1H，dq，J=160，76 Hz H2），242（1H，dq，J=160，76 Hz H2），120（3H，dd，J=76 Hz，H3），145（3H，s，H5′），141（3H，s，H6′）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1599（C2），1132（C3），1433（C4），1126（C10），1292（C5），1144（C6），1566（C7），1070（C8），1540（C9），775（C2′），702（C3′），608（C4′），1700（C1″），207（C2″），1734（C1），275（C2），91（C3），227（C5′），248（C6′）。以上數據與文獻[4]對比，確定該化合物為（9R，10R）9acetoxy8，8dimethyl9，10dihydro2H，8Hbenzo[1，2b：3，4b′]dipyran2one10yl ester。

化合物2無色針狀，ESIMS m/z 209 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 640（1H，d，J=95 Hz，H3），781（1H，d，J=95 Hz，H4），744（1H，d，J=83 Hz，H7），738（1H，d，J=83 Hz，H8），770（1H，d，J=19 Hz，H2′），714（1H，d，J=19 Hz，H3′）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1609（C2），1445（C3），1141（C4），1169（C10），1574（C5），1135（C6），1238（C7），1088（C8），1485（C9），1041（C2′），1459（C3′）。以上數據與文獻[5]對比，確定該化合物為補骨脂呋喃香豆精。

化合物3白色粉末，ESIMS m/z 449 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 620（1H，d，J=95 Hz，H3），759（1H，d，J=95 Hz，H4），734（1H，d，J=84 Hz，H5），680（1H，d，J=84 Hz，H6），540（1H，d，J=49 Hz，H3′），662（1H，d，J=49 Hz，H4′），144（3H，s，H5′），142（3H，s，H6′），567（1H，q，J=12 Hz，H2″），188（3H，d，J=09 Hz，H4″），187（3H，d，J=09 Hz，H5″），562（1H，q，J=12 Hz，H2），219（3H，d，J=08 Hz，H4），215（3H，d，J=08 Hz，H5）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1599（C2），1131（C3），1432（C4），1125（C10），1290（C5），1144（C6），1568（C7），1076（C8），1540（C9），777（C2′），694（C3′），598（C4′），251（C5′），226（C6′），1651（C1″），1152（C2″），1575（C3″），274（C4″），203（C5″），1652（C1），1153（C2），1582（C3），274（C4），203（C5）。以上數據與文獻[6]對比，確定該化合物為順式3′，4′二千里光?；?′，4′二氫邪蒿內酯。

化合物4白色粉末，ESIMS m/z 449 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 621（1H，d，J=95 Hz，H3），758（1H，d，J=95 Hz，H4），735（1H，d，J=86 Hz，H5），680（1H，d，J=86 Hz，H6），540（1H，d，J=49 Hz，H3′），665（1H，d，J=49 Hz，H4′），144（3H，s，H5′），149（3H，s，H6′），611（1H，qq，J=74，13 Hz，H2″），196（3H，dq，J=74，13 Hz，H4″），185（3H，q，J=12 Hz，H5″），561（1H，m，H2），219（3H，d，J=12 Hz，H4），187（3H，d，J=13 Hz，H5）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1599（C2），1133（C3），1432（C4），1125（C10），1291（C5），1144（C6），1567（C7），1076（C8），1540（C9），775（C2′），703（C3′），595（C4′），255（C5′），225（C6′），1663（C1″），1272（C2″），1394（C3″），158（C4″），204（C5″），1659（C1），1151（C2），1579（C3），274（C4），204（C5）。以上數據與文獻[7] 對比，確定該化合物為（3′S，4′S）disenecioyloxy3′，4′dihydroseselin。

化合物5無色油狀，ESIMS m/z 367 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 621（1H，d，J=95 Hz，H3），760（1H，d，J=95 Hz，H4），740（1H，d，J=84 Hz，H5），690（1H，d，J=84 Hz，H6），450（1H，d，J=65 Hz，H2′），700（1H，d，J=65 Hz，H3′），142（3H，s，H2″），140（3H，s，H3″），560（1H，brs，H2），190（3H，s，H4），220（3H，s，H5）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1599（C2），1131（C3），1436（C4），1133（C10），1314（C5），1078（C6），1639（C7），1129（C8），1517（C9），917（C2′），683（C3′），711（C1″），269（C2″），261（C3″），1648（C1），1145（C2），1615（C3），277（C4），207（C5）。以上數據與文獻[8] 對比，確定該化合物為（+）8，9dihydro8（2hydroxypropan2yl）2oxo2Hfuro[2，3 h]chromen9yl3methylbut2enoate。

化合物6白色粉末，ESIMS m/z 289 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 621（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），726（1H，d，J=83 Hz，H5），675（1H，d，J=83 Hz，H6），516（1H，dd，J=100，80 Hz，H2′），338（1H，dd，J=160，100 Hz，H3′），328（1H，dd，J=160，80 Hz，H3′），199（3H，s，H4″），157（3H，s，H1″CH3），151（3H，s，H1″CH3）。13CNMR（CDCl3， 150 MHz） δ： 1610（C2），1123（C3），1439（C4），1131（C10），1289（C5），1067（C6），1639（C7），1134（C8），1513（C9），887（C2′），276（C3′），821（C1″），1703（C3″），219（C4″），223（C1″CH3），209（C1″CH3）。以上數據與文獻[9] 對比，確定該化合物為libanoridin。

化合物7白色粉末，ESIMS m/z 351 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 623（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），724（1H，d，J=82 Hz，H5），679（1H，d，J=82 Hz，H6），521（1H，t，J=53 Hz，H3′），325（1H，dd，J=178，52 Hz，H4′），310（1H，dd，J=178，53 Hz，H4′），610（1H，qq，J=73，14 Hz，H3″），191（3H，dq，J=73，14 Hz，H4″），185（3H，q，J=14 Hz，H5），139（3H，s，H5′），138（3H，s，H6′）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1612（C2），1125（C3），1438（C4），1121（C10），1267（C5），1142（C6），1564（C7），1073（C8），1534（C9），766（C2′），693（C3′），232（C4′），248（C5′），228（C6′），1668（C1″），1274（C2″），1392（C3″），158（C4″），206（C5″）。以上數據與文獻[10] 對比，確定該化合物為絲立尼亭。

化合物8無色針狀，ESIMS m/z 245 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 623（1H，d，J=95 Hz，H3），762（1H，d，J=95 Hz，H4），718（1H，s，H5），678（1H，s，H8），331（2H，d，J=74 Hz，H2′），528（1H，tq，J=73，13 Hz，H3′），177（3H，s，4′CH3），170（3H，s，4′CH3），390（3H，s，7OCH3）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1616（C2），1128（C3），1439（C4），1119（C10），1274（C5），1275（C6），1607（C7），985（C8），1545（C9），278（C2′），1213（C3′），1337（C4′），258（C4′），178（C5′），559（7OCH3）。以上數據與文獻[11] 對比，確定該化合物為花椒素。

化合物9無色針狀。ESIMS m/z 209 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 714（1H，d，J=12 Hz，H2），727（1H，d，J=12 Hz，H4），606（2H，s，H7），292（2H，q，J=72 Hz，H2′），121（3H，t，J=72 Hz，H3′），395（3H，s，H1OCH3）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1393（C1），1026（C2），1319（C3），1086（C4），1435（C5），1023（C7），1489（C9），1989（C1′），316（C2′），849（C3′），566（C1OCH3）。以上數據與文獻[12] 對比，確定該化合物為crocatone。

化合物10無色油狀，ESIMS m/z 367 [M+Na]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 622（1H，d，J=95 Hz，H3），760（1H，d，J=95 Hz，H4），733（1H，d，J=86 Hz，H5），679（1H，d，J=86 Hz，H6），414（1H，d，J=47 Hz，H3′），646（1H，d，J=47 Hz，H4′），147（3H，s，H5′），144（3H，s，H6′），572（1H，m，H2″），224（3H，s，H5″），192（3H，s，H6″）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1606（C2），1125（C3），1439（C4），1125（C10），1287（C5），1146（C6），1561（C7），1107（C8），1542（C9），778（C2′），714（C3′），602（C4′），255（C5′），226（C6′），1656（C1″），1152（C2″），1592（C3″），276（C5″），205（C6″）。以上數據與文獻[13] 對比，確定該化合物為peujaponisinol B。

化合物11無色針狀，ESIMS m/z 367 [M+Na]+。1HNMR（600 MHz，CDCl3） δ： 624（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），733（1H，d，J=86 Hz，H5），679（1H，d，J=86 Hz，H6），521（1H，d，J=47 Hz，H3′），543（1H，d，J=47 Hz，H4′），149（3H，s，H5′），142（3H，s，H6′），580（1H，m，H2″），220（3H，s，H5″），192（3H，s，H6″）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1601（C2），1130（C3），1433（C4），1123（C10），1292（C5），1145（C6），1570（C7），1072（C8），1542（C9），787（C2′），717（C3′），629（C4′），255（C5′），212（C6′），1675（C1″），1149（C2″），1598（C3″），277（C5″），206（C6″）。以上數據與文獻[14] 對比，確定該化合物為peujaponisinol A。

化合物12白色粉末，ESIMS m/z 231 [M+H]+。1HNMR（CDCl3，600 MHz） δ： 625（1H，d，J=95 Hz，H3），763（1H，d，J=95 Hz，H4），723（1H，d，J=86 Hz，H5），680（1H，d，J=86 Hz，H6），362（2H，d，J=72 Hz，H2′），528（1H，m，H3′），176（3H，br s，H5′），183（3H，br s，H6′）。13CNMR（CDCl3，150 MHz） δ： 1616（C2），1132（C3），1441（C4），1127（C10），1266（C5），1125（C6），1362（C7），1147（C8），1583（C9），221（C2′），1203（C3′），1531（C4′），258（C5′），180（C6′）。以上數據與文獻[15] 對比，確定該化合物為ostenol。

4小結

本研究從紫花前胡中分離得到12 個化合物，其中化合物1～5為首次從當歸屬植物中分離得到，化合物 7～12為首次從紫花前胡中分離得到，豐富了紫花前胡香豆素類成分的結構多樣性。前人研究發(fā)現化合物1可以發(fā)揮抗多重耐藥作用，且與多重耐藥抑制劑verapamil 和cyclosporine A活性相當[16]；化合物2具有血管舒張活性[16]，抗氧化活性[17]和對HepG2腫瘤細胞抑制作用[18]；化合物3具有抗炎[19]，抑制黑色素瘤的作用[20]；化合物6可以調節(jié)炎癥過敏反應[21]，治療由于紫外線照射造成的皮膚損傷[22]，另外還可以發(fā)揮抗炎作用[23]；化合物7可以調節(jié)平滑肌收縮從而調節(jié)血管和肌肉的舒張[24]，抗真菌[25]和抗炎作用[26]；化合物8對杜什曼蟲前鞭毛體有作用[27]，還可以發(fā)揮抗炎活性[28]。因此，本研究可以為這些化合物的制備提供新的植物來源。

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[責任編輯丁廣治]