三陰性乳腺癌中Lin28B的表達(dá)和臨床意義

施華球++謝瑞蓮

[摘要]目的 探討三陰性乳腺癌中Lin28B的表達(dá)情況及其臨床意義。方法 選取2008年1月～2013年12月我院收治的三陰性乳腺癌96例患者為觀察對(duì)象，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)癌組織和癌旁組織中Lin28B蛋白的表達(dá)，分析Lin28B蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者病理特征的相關(guān)性。結(jié)果 癌組織Lin28B的陽(yáng)性率為70.8%，在癌旁組織Lin28B的陽(yáng)性率為29.2%，兩者的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；Lin28B蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者的年齡、腫瘤分期和月經(jīng)狀態(tài)無(wú)關(guān)（P>0.05），但與患者的腫瘤分化程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ki67表達(dá)成正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論 Lin28B的表達(dá)與三陰性乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，可能影響病情的發(fā)展和患者的預(yù)后。

[關(guān)鍵詞]三陰性乳腺癌；Lin28B；臨床意義

[中圖分類(lèi)號(hào)] R737.9 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2017）07（c）-0036-03

Expression and clinical significance of Lin28B in triple-negative breast cancer

SHI Hua-qiu XIE Rui-lian

Department of Oncology，the First Affiliated Hospital of Gannan Medical College in Jiangxi Province，Ganzhou 341000，China

[Abstract]Objective To study the expression of Lin28B in triple-negative breast cancer （TNBC） and its clinical significance.Methods From January 2008 to December 2013，96 patients with TNBC treated in our hospital were selected as observation objects.The expression of Lin28B protein in cancer tissue and para-carcinoma tissue was detected by immunohistochemical method in order to analyze the correlation between Lin28B protein expression and pathological characteristics in patients with TNBC.Results The positivity rate of Lin28B from cancer tissue was 70.8% and in para-carcinoma tissue，its positivity rate was 29.2%，which was displayed statistical difference （P<0.05）.There was no relationship between Lin28B protein expression and age，the stage of tumor，and the condition of menstruation of patients （P>0.05）.The expression of Lin28B protein was positively correlated with tumor differentiation degree，distal metastasis，lymph node metastasis，Ki67 expression （P<0.05）.Conclusion The expression of Lin28B is related to the occurrence and development of TNBC，and may affect the development of disease and prognosis of patients.

[Key words]Triple negative breast cancer；Lin28B；Clinical significance

三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）是指雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progestrone receptor，PR）[1]和原癌基因Her-2均表現(xiàn)為陰性的乳腺癌，占乳腺癌患者總數(shù)的12%～17%[2]。TNBC主要病理表現(xiàn)為組織學(xué)分級(jí)高、組織分化程度低，故其預(yù)后差、臨床復(fù)發(fā)率高、轉(zhuǎn)移率高、死亡率高；另外，由于TNBC患者體內(nèi)缺少ER、PR、Her-2靶點(diǎn)，因此其對(duì)靶向治療不敏感，效果并不好[3-4]。本文重點(diǎn)研究Lin28B在三陰性乳腺癌中的表達(dá)，并探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2008年1月～2013年12月我院收治并診斷為三陰性乳腺癌的96例患者作為觀察對(duì)象，均為女性，年齡31～56歲，平均（48.1±7.95）歲。TNBC的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：ER（-）、PR（-）和Her-2（-）。ER和PR進(jìn)行細(xì)胞核染色，免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性細(xì)胞在10%以上者為陽(yáng)性。Her-2免疫組織化學(xué)染色“-”或“+”為陰性，“+++”為陽(yáng)性，“++”用色素原位雜交法（chromogen in situ hybridization，CISH）驗(yàn)證。ER、PR和Her-2均陰性即定義為三陰乳腺癌，有任何一個(gè)陽(yáng)性者即定義為非三陰乳腺癌。術(shù)前均未經(jīng)放療、化療和免疫療法。

1.2 癌組織中Lin28B蛋白檢測(cè)

采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)癌組織和癌旁組織中Lin28B蛋白的表達(dá)[5]。鼠抗人Lin28B單克隆一抗從Abcam公司（ab71415）購(gòu)買(mǎi)，工作濃度1∶50，磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffer solution，PBS）代替一抗稀釋液作為陰性對(duì)照，具體染色實(shí)驗(yàn)步驟依據(jù)試劑盒進(jìn)行[6]。癌組織和癌旁組織每組4張切片，每張切片采用高倍顯微鏡選取5個(gè)視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，每個(gè)視野分別對(duì)100個(gè)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。以陽(yáng)性細(xì)胞染色深度作為評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，并計(jì)算陽(yáng)性染色率。細(xì)胞膜或者細(xì)胞漿中出現(xiàn)棕黃色或者黃色的顆粒為陽(yáng)性染色，當(dāng)陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)≤10%時(shí)，為陰性表達(dá)（-），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)>10%。

1.3病理特征分析方法

組織分化程度分為Ⅰ級(jí)（高分化，G1）、Ⅱ級(jí)（中分化，G2）、Ⅲ級(jí)（低分化，G3），分級(jí)愈高，惡性程度愈高。腫瘤分期基于原發(fā)腫瘤的大小，T1：<2 cm；T2：2～5 cm；T3：>5 cm；T4：腫瘤存在浸潤(rùn)，如侵犯皮膚、胸腔。Ki67用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)，檢測(cè)過(guò)程和結(jié)果判定按照Ki67檢測(cè)抗體（購(gòu)自ABCA公司）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)胞核內(nèi)棕黃色顆粒，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<5%為陰性，>5%為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用x±s表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，Lin28B蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者病理特征相關(guān)性采用Spearman相關(guān)性分析方法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 Lin28B蛋白的表達(dá)

在癌組織中Lin28B的陽(yáng)性例數(shù)為68例（70.8%），陰性例數(shù)為28例（29.2%）；癌旁組織中Lin28B的陽(yáng)性例數(shù)為17例（17.7%），陰性例數(shù)為79例（82.3%）。癌組織和癌旁組織中Lin28B表達(dá)的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 Lin28B蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者病理特征的相關(guān)性分析

Lin28B蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者的年齡、腫瘤分期和月經(jīng)狀態(tài)之間無(wú)關(guān)（P>0.05）；Lin28B蛋白表達(dá)與三陰性乳腺癌患者的腫瘤分化程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ki67表達(dá)均成正相關(guān)（P<0.05）（表1）。

3討論

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，Lin28B與癌癥的發(fā)生緊密相關(guān)，其在發(fā)育中的組織以及胚胎干細(xì)胞中的表達(dá)較高，伴隨著體內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)分化成熟，其表達(dá)量逐漸降低，最后直至消失。研究表明，在人類(lèi)的腫瘤中Lin28B蛋白過(guò)表達(dá)情況比較多見(jiàn)，其表達(dá)異常較常見(jiàn)于腸癌、肝癌以及乳腺癌等疾病[8-9]。

目前的研究認(rèn)為，Lin28B蛋白通過(guò)抑制let-7 microRNA來(lái)發(fā)揮促進(jìn)腫瘤增殖的功能。let-7 家族通過(guò)作用于Lin28B、c-myc、K-RAS等原癌基因和cyclinD1/2等細(xì)胞周期蛋白抑制腫瘤增殖，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。161例食管癌患者中關(guān)于let-7和Lin28B的研究表明，食管癌細(xì)胞中Lin28B的表達(dá)明顯高于非癌性細(xì)胞，對(duì)于腫瘤浸潤(rùn)生長(zhǎng)的區(qū)域其表達(dá)量更高[10-12]；食管癌患者生存預(yù)后差、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等與Lin28B高表達(dá)具有相關(guān)性，let-7低表達(dá)也與Lin28B有關(guān)；多因素研究表明在食管癌中Lin28B是一種獨(dú)立預(yù)后因子；體內(nèi)試驗(yàn)表明，Lin28B特異性敲除后能夠降低癌細(xì)胞的侵襲以及轉(zhuǎn)移能力[13]。Lin28B蛋白能夠加速食管癌的進(jìn)展，導(dǎo)致不良預(yù)后，而通過(guò)抑制Lin28B蛋白表達(dá)能夠降低食管癌細(xì)胞的侵襲和增殖能力，抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。

本研究結(jié)果顯示，癌組織中Lin28B的表達(dá)高于癌旁組織（P<0.05），且Lin28B蛋白表達(dá)與患者的腫瘤分化程度、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ki67表達(dá)均呈正相關(guān)（P<0.05），因此，Lin28B的高表達(dá)可能與三陰性乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。Sakurai等的研究發(fā)現(xiàn)檢測(cè)26例患者的癌旁乳腺腺體，其中檢測(cè)到均有Lin28B蛋白，其中的16例患者的癌組織也有Lin28B蛋白表達(dá)，并且表達(dá)含量明顯高于癌旁組織[14]。另外，也有研究表明，在三陰性乳腺癌中Lin28B表達(dá)明顯上調(diào)，且Lin28B的高表達(dá)是促進(jìn)炎癥通路的一部分，作用于NF-κB促進(jìn)其表達(dá)，故Lin28B的高表達(dá)可能促進(jìn)細(xì)胞由炎癥向惡性腫瘤的轉(zhuǎn)變[15]。

綜上所述，Lin28B的高表達(dá)可能與三陰性乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展緊密相關(guān)，有可能會(huì)成為三陰性乳腺癌治療中新的治療靶點(diǎn)，但是由于研究臨床樣本太少，還需要大量的臨床研究進(jìn)一步驗(yàn)證。

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（收稿日期：2017-04-21 本文編輯：許俊琴）