• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    海參膠原低聚肽對(duì)糖尿病小鼠術(shù)后傷口愈合的促進(jìn)作用

    2017-08-22 06:26:53任金威陳啟賀
    關(guān)鍵詞:蛋白組乳清海參

    李 林,李 迪,徐 騰,劉 睿,任金威,陳啟賀,李 勇

    (北京大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院,北京 100191)

    海參膠原低聚肽對(duì)糖尿病小鼠術(shù)后傷口愈合的促進(jìn)作用

    李 林,李 迪,徐 騰,劉 睿,任金威,陳啟賀,李 勇

    (北京大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院,北京 100191)

    目的:觀察海參膠原低聚肽是否具有促進(jìn)db/db 2型糖尿病小鼠術(shù)后傷口愈合的作用。 方法:取90只10w齡的db/db小鼠分為5組,包括模型對(duì)照組乳清蛋白組和3個(gè)海參膠原肽組(從低到高分別為0.25、0.50、1.00 g/kg·BW),每組18只。另設(shè)一組同周齡、性別的db/m小鼠18只作為正常對(duì)照組。模型對(duì)照組和正常對(duì)照組使用溶劑(蒸餾水)灌胃。進(jìn)行背部切口手術(shù)后開始干預(yù),分別于術(shù)后第4、7、14d分批處死動(dòng)物,每組每次處死6只。術(shù)后觀察不同時(shí)期傷口愈合情況,測(cè)定血清生化指標(biāo)、皮膚切口抗張力強(qiáng)度以及進(jìn)行皮膚組織HE染色。結(jié)果:與模型對(duì)照組相比,海參膠原肽劑量組小鼠血清IL-8水平降低,IL-10水平升高,NO水平升高,傷口抗張力強(qiáng)度提升,傷口愈合較好。結(jié)論:海參膠原低聚肽能夠改善糖尿病小鼠術(shù)后營(yíng)養(yǎng)狀況,促進(jìn)傷口愈合。

    海參膠原低聚肽;糖尿??;傷口愈合

    糖尿病人傷口愈合緩慢是糖尿病的一種常見(jiàn)并發(fā)癥[1]。在臨床中,糖尿病患者由于傷口愈合困難,從而使其發(fā)生潰瘍、感染甚至壞疽和截肢[2]。尋找促進(jìn)糖尿病人傷口愈合的方法對(duì)于改善術(shù)后糖尿病人的生活質(zhì)量,減少并發(fā)癥的發(fā)生有著重要的作用。海參肽具有多種生物活性功能[3]。有研究發(fā)現(xiàn),海參膠原肽能夠促進(jìn)正常大鼠傷口膠原蛋白合成從而促進(jìn)傷口愈合[4]。本研究擬建立糖尿病小鼠傷口模型,觀察海參膠原低聚肽對(duì)糖尿病小鼠術(shù)后傷口愈合的影響。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    海參膠原低聚肽:淡黃色粉末,利用生物酶解技術(shù)從海參中提取、制備的小分子生物活性肽。經(jīng)高效液相色譜純化后,用質(zhì)譜儀對(duì)其分子質(zhì)量分布進(jìn)行分析可知,其相對(duì)分子質(zhì)量小于1 000的占89.44%,游離氨基酸含量占7.496%,其中精氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、谷氨酸含量較多。實(shí)驗(yàn)樣品由吉林肽谷生物工程有限責(zé)任公司提供。

    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    SPF級(jí)雄性db/db型糖尿病小鼠以及與之周齡、性別匹配的同窩出生的非糖尿病健康db/m小鼠,10w齡,由常州卡文斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司提供。

    清潔級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng),環(huán)境溫度21~23℃,相對(duì)濕度50%~60%,動(dòng)物分籠飼養(yǎng),自由進(jìn)食飲水。

    1.3 主要儀器和試劑

    高速冷凍離心機(jī)(德國(guó)Eppendorf 公司);PCLAB-UE生物醫(yī)學(xué)信號(hào)采集處理系統(tǒng)(北京微信斯達(dá)科技發(fā)展有限責(zé)任公司);力換能器(北京新航興業(yè)科貿(mào)有限公司);CK40-SL倒置顯微鏡(日本Olympus公司);小鼠IL-8、IL-10(ELISA)檢測(cè)試劑盒、小鼠NO檢測(cè)試劑盒(北京泰格諾克科技有限公司)。

    1.4 實(shí)驗(yàn)方法

    1.4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物創(chuàng)傷模型的建立 小鼠經(jīng)過(guò)4%水合氯醛麻醉后,進(jìn)行背部脫毛。常規(guī)皮膚消毒,于背部?jī)蓚?cè)分別切一個(gè)長(zhǎng)1.5cm的縱向切口。切口切開肌肉,深達(dá)腹腔。然后模擬臨床手術(shù)過(guò)程逐層縫合肌肉與皮膚。術(shù)后涂抹2%碘伏消毒,并注射青霉素G鈉(1 000 IU/g·BW)防止感染。術(shù)后禁食6h,保持正常飲水。手術(shù)當(dāng)天記為第0d。

    1.4.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組 db/db小鼠90只,每組18只,隨機(jī)分為5組。包括模型對(duì)照組、乳清蛋白組(0.50 g/kg·BW)和海參膠原低聚肽劑量組(從低到高分別為0.25、0.50、1.00 g/kg·BW)。同時(shí)設(shè)立1組正常對(duì)照組,為18只同窩出生的非糖尿病db/m小鼠。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組用等體積溶劑(蒸餾水)進(jìn)行灌胃。于手術(shù)當(dāng)天開始灌胃進(jìn)行干預(yù),海參肽3個(gè)劑量組每天灌胃給予海參肽水溶液,乳清蛋白組給予乳清蛋白水溶液,正常對(duì)照組和模型對(duì)照組每天灌胃給予同體積的蒸餾水。灌胃量為0.1 mL/10g,每日1次。乳清蛋白水溶液和海參肽水溶液均用蒸餾水配置。分別于術(shù)后第4、7、14d分批處死小鼠,每組每次處死6只。

    1.4.3 傷口愈合的評(píng)價(jià)

    傷口愈合的組織病理學(xué)觀察:各組小鼠于第4、7、14d處死時(shí)取左側(cè)全層皮膚組織,組織切口距傷口邊緣0.5 cm,用甲醛固定用于做石蠟切片進(jìn)行HE染色。

    傷口的抗?jié)q強(qiáng)度測(cè)試:各組小鼠于第4、7、14d處死時(shí)取右側(cè)傷口皮膚,以傷口處為中線,寬0.5 cm,距傷口兩側(cè)各0.5 cm為長(zhǎng)的長(zhǎng)方形皮膚,去除皮下脂肪組織。將皮膚短邊的一頭連接到張力感受器,另一端連接到可以通過(guò)旋鈕微調(diào)距離的裝置上。緩慢調(diào)動(dòng)旋鈕拉伸皮膚,通過(guò)多功能生物信號(hào)采集系統(tǒng)記錄皮膚斷開時(shí)的張力大小。通過(guò)測(cè)微尺測(cè)量皮膚的厚度計(jì)算橫截面積,張力除以橫截面積即為皮膚的抗張強(qiáng)度。

    血清生化指標(biāo)檢測(cè):小鼠摘眼球采血后靜置30min,于4℃ 3 000r/min的條件下離心20min,取上層血清保存待用。用試劑盒測(cè)定血清中IL-8、IL-10、NO的水平,按照試劑盒說(shuō)明書操作。

    1.5 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)方法

    2 結(jié)果與分析

    2.1 術(shù)后小鼠傷口愈合組織病理學(xué)觀察結(jié)果

    由圖1可見(jiàn),術(shù)后第7d,正常對(duì)照組傷口表面完整性較好,創(chuàng)面毛細(xì)血管密集,成纖維細(xì)胞較多。模型對(duì)照組傷口表面完整性較差,瘢痕組織較多,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯,毛細(xì)血管形成較少。乳清蛋白組傷口創(chuàng)面毛細(xì)血管較少且有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。海參肽干預(yù)后可見(jiàn)毛細(xì)血管形成增多,瘢痕組織明顯減少,成纖維細(xì)胞聚集,且炎性細(xì)胞明顯低于模型對(duì)照組。

    由圖2可見(jiàn),術(shù)后第14d,正常對(duì)照組傷口表面愈合較好,表面平整,瘢痕組織小,少見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn),毛細(xì)血管密集,成纖維細(xì)胞較多。模型對(duì)照組傷口仍有大量瘢痕組織,伴隨大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),毛細(xì)血管和成纖維細(xì)胞均較少。乳清蛋白組瘢痕組織較多,毛細(xì)血管少。海參肽干預(yù)組瘢痕組織明顯減少,皮膚表面完整性較好,毛細(xì)血管較多,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯較少且伴有較多的成纖維細(xì)胞。

    圖1 術(shù)后第7d小鼠傷口愈合組織學(xué)觀察情況(40×)A:正常對(duì)照組 B:模型對(duì)照組 C:乳清蛋白組 D:海參肽低劑量組 E:海參肽中劑量組 F:海參肽高劑量組

    圖2 術(shù)后第14d小鼠傷口愈合組織學(xué)觀察情況(40×)A:正常對(duì)照組 B:模型對(duì)照組 C:乳清蛋白組 D:海參肽低劑量組 E:海參肽中劑量組 F:海參肽高劑量組

    2.2 術(shù)后各組小鼠傷口張力強(qiáng)度

    如表1所示,術(shù)后第7d,與正常對(duì)照組相比,模型對(duì)照組、乳清蛋白組、海參肽3個(gè)劑量組傷口張力強(qiáng)度均明顯較低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型對(duì)照組相比,乳清蛋白組傷口張力強(qiáng)度無(wú)顯著升高,海參肽3個(gè)劑量組傷口張力強(qiáng)度均明顯較高,其中海參肽中、高劑量組傷口張力強(qiáng)度增高更為顯著;與乳清蛋白組相比,海參肽3個(gè)劑量組傷口張力強(qiáng)度均明顯較高,其中海參肽中、高劑量組傷口張力強(qiáng)度增高更為顯著。術(shù)后第14d,與正常對(duì)照組相比,模型對(duì)照組、乳清蛋白組、海參肽3個(gè)劑量組傷口張力強(qiáng)度均明顯較低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型對(duì)照組相比,乳清蛋白組傷口張力強(qiáng)度無(wú)顯著升高,海參肽中、高劑量組傷口張力強(qiáng)度均明顯較高,其中海參肽中劑量組傷口張力強(qiáng)度增高更為顯著;與乳清蛋白組相比,海參肽中、高劑量組傷口張力強(qiáng)度均明顯較高。

    表1 術(shù)后第7、14d各組小鼠傷口張力強(qiáng)度

    注:*與正常對(duì)照組相比P<0.05、**與正常對(duì)照組相比P<0.01;#與模型對(duì)照組相比P<0.05、##與模型對(duì)照組相比P<0.01;△與乳清蛋白組相比P<0.05;△△與乳清蛋白組相比P<0.01。

    2.3 小鼠血清中白細(xì)胞介素8、10水平

    由表2、表3發(fā)現(xiàn),在同一時(shí)期里,各劑量組IL-8含量與模型對(duì)照組相比均有降低且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同樣在同一時(shí)期里,各個(gè)劑量組IL-10含量與模型對(duì)照組相比均有顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    表2 術(shù)后第4、7、14d各組小鼠血清白細(xì)胞介素8水平

    表3 術(shù)后第4、7、14d各組小鼠血清白細(xì)胞介素10水平

    注:*與正常對(duì)照組相比P<0.05、**與正常對(duì)照組相比P<0.01;#與模型對(duì)照組相比P<0.05、##與模型對(duì)照組相比P<0.01;△與乳清蛋白組相比P<0.05、△△與乳清蛋白組相比P<0.01。

    2.4 小鼠血清中一氧化氮(NO)檢測(cè)結(jié)果

    術(shù)后第14d,與正常對(duì)照組相比,模型對(duì)照組、乳清蛋白組、海參肽3個(gè)劑量組小鼠血清NO濃度均明顯較低(P<0.01);與模型對(duì)照組相比,海參肽3個(gè)劑量組小鼠血清NO濃度均明顯較高血清NO濃度均明顯較高(P<0.05);與乳清蛋白組相比,海參肽低、中劑量組小鼠血清NO濃度均明顯較高(P<0.01)(圖3)。

    圖3 術(shù)后第14d各組小鼠血清NO水平 注:*與正常對(duì)照組相比P<0.05、**與正常對(duì)照組相比P<0.01;#與模型對(duì)照組相比P<0.05、##與模型對(duì)照組相比P<0.01;△與乳清蛋白組相比P<0.05、△△與乳清蛋白組相比P<0.01。

    3 討論與結(jié)論

    db/db小鼠是自發(fā)性糖尿病模型小鼠,屬2型糖尿病模型。小鼠在1個(gè)月時(shí)開始貪食及發(fā)胖,繼而發(fā)生嚴(yán)重的糖尿病癥狀[5]。相比于手動(dòng)誘發(fā)糖尿病的小鼠,該模型鼠不存在人為誘導(dǎo)因素的干擾,糖尿病的產(chǎn)生與臨床患者更為相似[6],因此實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可靠。由于db/db小鼠純合子不育,需要用雜合子來(lái)交配繁殖,故引入m基因來(lái)保持小鼠的糖尿病表型[7]。純合子的db/db小鼠保持糖尿病表型,而雜合子的db/m小鼠為非糖尿病。本實(shí)驗(yàn)采用db/m小鼠作為正常對(duì)照,以對(duì)比正常的非糖尿病小鼠與糖尿病小鼠之間的差異。對(duì)照組中另設(shè)一組乳清蛋白組,意為提供與中劑量組同濃度蛋白質(zhì),排除額外攝入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)帶來(lái)的影響,說(shuō)明干預(yù)效果是由海參膠原低聚肽產(chǎn)生。

    傷口愈合包括凝血期、炎癥期、增殖期與塑性期,這四個(gè)時(shí)期之間沒(méi)有明顯的界限[8]。在正常傷口愈合的過(guò)程中,炎癥反應(yīng)迅速發(fā)生并持續(xù)3d左右,然而在糖尿病患者的傷口愈合過(guò)程中,炎癥反應(yīng)的持續(xù)時(shí)間明顯延長(zhǎng)并影響傷口的正常愈合[9]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)各組小鼠皮膚切口進(jìn)行病理觀察,與模型對(duì)照組相比,各劑量組明顯可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的減少,提示海參膠原低聚肽對(duì)于糖尿病小鼠傷口愈合過(guò)程中的炎癥反應(yīng)具有一定的抑制作用。有研究表明,炎性相關(guān)因子IL-8增加可能延長(zhǎng)炎癥期引起糖尿病傷口愈合障礙[10]。同時(shí),對(duì)于抗炎因子IL-10,也有報(bào)道其調(diào)節(jié)成纖維細(xì)胞再生,促進(jìn)組織修復(fù)[11]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)小鼠IL-8和IL-10進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果相對(duì)于模型對(duì)照組,顯示各劑量組IL-8水平降低而IL-10水平升高。說(shuō)明海參膠原低聚肽的干預(yù),避免了慢性傷口愈合過(guò)程的炎癥反應(yīng)過(guò)度延長(zhǎng),從而對(duì)糖尿病傷口的愈合有著一定的促進(jìn)作用。創(chuàng)傷修復(fù)過(guò)程中毛細(xì)血管的再生能夠?yàn)閯?chuàng)傷部位組織提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)肉芽組織的形成。本研究通過(guò)對(duì)db/db 2型糖尿病小鼠傷口皮膚組織進(jìn)行HE染色發(fā)現(xiàn),3個(gè)海參肽劑量組的小鼠傷口處微血管的形成相對(duì)于模型對(duì)照組顯著增加。

    傷口重塑以及瘢痕的形成主要受膠原的影響[12-13]。本實(shí)驗(yàn)病理檢測(cè)顯示,3個(gè)劑量組小鼠傷口處成纖維細(xì)胞明顯多于模型對(duì)照組。通過(guò)傷口抗張強(qiáng)度測(cè)試也發(fā)現(xiàn)中劑量和高劑量組小鼠傷口抗張力強(qiáng)度顯著高于模型對(duì)照組,說(shuō)明海參肽中、高劑量組小鼠傷口愈合程度顯著優(yōu)于模型對(duì)照組。除了分泌膠原酶以外,成纖維細(xì)胞還會(huì)分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)[14-15]。VEGF可以影響血管的新生和血管通透性的增加,刺激內(nèi)皮細(xì)胞遷移通過(guò)細(xì)胞外基質(zhì),從而改善傷口愈合過(guò)程中的血管形成[16]。有研究發(fā)現(xiàn),對(duì)db/db小鼠進(jìn)行VEGF的局部治療可以通過(guò)促進(jìn)局部血管生成改善傷口處的新生血管生成情況[17]。由此可以推測(cè)VEGF或者刺激其產(chǎn)生的藥物可用于促進(jìn)慢性傷口愈合的組織修復(fù)。目前已經(jīng)證明NO可以增加VEGF的表達(dá)從而刺激新生血管的形成[18],并且NO是促進(jìn)VEGF表達(dá)的最為有效的因子[19]。本實(shí)驗(yàn)各個(gè)劑量組NO水平均顯著高于模型對(duì)照組,因此,可以推測(cè)海參膠原低聚肽可能促進(jìn)糖尿病小鼠NO水平升高,從而促進(jìn)新生血管的形成,進(jìn)而改善慢性傷口的愈合。

    本研究通過(guò)建立db/db 2型糖尿病小鼠術(shù)后傷口模型,設(shè)立蒸餾水以及乳清蛋白干預(yù)作為對(duì)照組,探討海參膠原低聚肽對(duì)于糖尿病小鼠術(shù)后傷口愈合的促進(jìn)作用,結(jié)果提示,海參膠原低聚肽能夠促進(jìn)糖尿病小鼠手術(shù)后傷口的NO生成和新生血管形成,減少炎癥反應(yīng)并且增強(qiáng)傷口抗張力強(qiáng)度,說(shuō)明海參膠原低聚肽能夠促進(jìn)糖尿病人傷口愈合。◇

    [1]SALAZAR J J,ENNIS W J,KOH T J.Diabetes medications:Impact on inflammation and wound healing[J].Diabetes Complications,2016,30(4):746-752

    [2]Greenhalgh DG.Wound healing and diabetes mellitus[J].Clin.Plast.Surg,2003,30(1):37-45.

    [3]趙芹.海參膠原蛋白多肽抗氧化活性的研究[D]. 中國(guó)海洋大學(xué),2008.

    [4]梁銳,張召鋒,趙明,等.海洋膠原肽對(duì)剖宮產(chǎn)大鼠傷口愈合促進(jìn)作用[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2010,26(9):1144-1145.

    [5]吳靜,王華旻,李晶,等.db/db小鼠的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用[J].生理科學(xué)進(jìn)展,2013,44(1):12-18.

    [6]劉芳,楊華,周文江,等.誘發(fā)性2型糖尿病小鼠模型與自發(fā)性db/db 小鼠特性的比較[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào),2014,10(6):54-59.

    [7]唐慧青,陳立新,梁磊,等.型糖尿病模型-小鼠的生物學(xué)特性研究[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué),2011,31(1):62-65.

    [8]鐵璐等.糖尿病傷口愈合的分子機(jī)制[J].生理科學(xué)進(jìn)展,2010,41(6):407-412.

    [9]Zhang,Z,et al..Oral administration of skin gelatin isolated from Chum salmon (Oncorhynchus keta)enhances wound healing in diabetic rats.[J].Marine Drugs,2011,9(5):696-711.

    [10]SINGH K,et al.Increased expression of TLR9 associated with pro-inflammatory S100A8 and IL-8 in diabetic wounds could lead to unresolved inflammation in type 2 diabetes mellitus (T2DM)cases with impaired wound healing[J].Journal of Diabetes and its Complications,2016,30(1):99-108.

    [11]BALAJI S,WANG X,KING A,et al.Interleukin-10-mediated regenerative postnatal tissue repair is dependent on regulation of hyaluronan metabolismvia fibroblast-specific STAT3 signaling[J].The FASEB Journal,2017,31(3):868-881.

    [12]王益民,韋??担瑒⒚?成纖維細(xì)胞與創(chuàng)傷修復(fù)的研究進(jìn)展[J].中國(guó)修復(fù)重建外科雜志,2000,14(2):126-128.

    [13]LI J,CHEN J,KIRSNER R.Pathophysiology of acute wound healing[J].Clinics in Dermatology,2007,25(1):9-18.

    [14]BITTO A,et al.Simvastatin enhances VEGF production and ameliorates impaired wound healing in experimental diabetes[J].Pharmacol Res,2008,57(2):159-169.

    [15]CHA J,KWAK T,BUTMARC J,et al.Fibroblasts from non-healing human chronic wounds show decreased expression of beta ig-h3,a TGF-beta inducible protein[J].J Dermatol Sci,2008,50(1):15-23.

    [16]Santos S C,et al.VEGF and VEGFR-2 (KDR)internalization is required for endothelial recovery during wound healing[J].Exp Cell Res,2007,313(8):1561-1574.

    [17]RD Galiano,OM Tepper,CR Pelo,et al..Topical vascular endothelial growth factor accelerates diabetic wound healing through increased angiogenesis and by mobilizing and recruiting bone marrow-derived cells[J].American Journal of Pathology,2004,164(6):1935-1947.

    [18]B Romanasouza,AP Nascimento,A Montealtocosta.Propranolol improves cutaneous wound healing in streptozotocin-induced diabetic rats[J].European Journal of Pharmacology,2009,611(1):77-84.

    [19]MB Witte,T Kiyama,A Barbul.Nitric oxide enhances experimental wound healing in diabetes[J].British Journal of Surgery,2002,89(12):1594-1601.

    (責(zé)任編輯 李婷婷)

    Effect of Sea Cucumber Collagen Oligopeptide in Diabetic Wound Healing

    LI Lin,LI Di,XU Teng,LIU Rui,REN Jin-wei,CHEN Qi-he,LI Yong

    (School of Public Health,Peking University,Beijing 100191,China)

    sea cucumber oligopeptide;diabetes mellitus;wound healing

    國(guó)家自然科學(xué)基金(項(xiàng)目編號(hào):81573138)。

    李林(1991— ),男,碩士,研究方向:肽營(yíng)養(yǎng)學(xué)。

    李勇(1957— ),男,教授,研究方向:肽營(yíng)養(yǎng)學(xué)。

    猜你喜歡
    蛋白組乳清海參
    基于轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組分析篩選五龍鵝產(chǎn)蛋相關(guān)候選基因
    感謝海參
    意林彩版(2022年2期)2022-05-03 10:25:08
    GLUT1在甲基苯丙胺與HIV-Tat蛋白協(xié)同誘導(dǎo)大鼠血腦屏障通透性改變中的作用研究
    食管疾病(2019年2期)2019-07-03 06:22:16
    古今八珍之蔥燒海參
    金橋(2018年2期)2018-12-06 09:30:38
    海參易變彎,摻了糖
    精料不同蛋白質(zhì)水平對(duì)泌乳水牛泌乳量和乳成分的影響
    海參
    透析乳清對(duì)雞生長(zhǎng)和小腸對(duì)養(yǎng)分吸收的影響
    飼料博覽(2014年7期)2014-04-05 15:18:33
    乳清低聚肽的制備及其抗氧化活性
    乳清生物技術(shù)處理研究進(jìn)展
    婷婷亚洲欧美| 国产成年人精品一区二区| 男女那种视频在线观看| 免费在线观看成人毛片| 99热6这里只有精品| 99热全是精品| 亚洲国产精品成人久久小说 | 亚洲性久久影院| 欧美成人精品欧美一级黄| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲四区av| 少妇熟女欧美另类| 色尼玛亚洲综合影院| 99热这里只有是精品50| 天堂影院成人在线观看| 青春草国产在线视频 | 18+在线观看网站| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲第一电影网av| 欧美3d第一页| 亚洲欧美清纯卡通| 毛片一级片免费看久久久久| 日日干狠狠操夜夜爽| 精品免费久久久久久久清纯| 深夜精品福利| 久久精品综合一区二区三区| 婷婷色综合大香蕉| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 在线a可以看的网站| 小说图片视频综合网站| 日本黄大片高清| 黄色日韩在线| 国内精品一区二区在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产av一区在线观看免费| 久久久国产成人精品二区| 国产精品蜜桃在线观看 | a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 亚洲欧美精品综合久久99| 99在线视频只有这里精品首页| 午夜精品在线福利| 性色avwww在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 久久中文看片网| avwww免费| 久久人人精品亚洲av| 亚洲电影在线观看av| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久人人爽人人片av| 国内精品宾馆在线| 一级毛片我不卡| 哪里可以看免费的av片| 色噜噜av男人的天堂激情| eeuss影院久久| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲美女视频黄频| 国产爱豆传媒在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| 九草在线视频观看| 99热精品在线国产| 亚洲在线观看片| 在线国产一区二区在线| 成人二区视频| 亚洲国产色片| 成人av在线播放网站| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲av熟女| 亚洲av一区综合| 亚洲自偷自拍三级| 国产精品一及| av在线观看视频网站免费| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产精华一区二区三区| or卡值多少钱| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 欧美三级亚洲精品| 久久久久久久久久久免费av| 成人欧美大片| 亚洲天堂国产精品一区在线| 成人亚洲精品av一区二区| 高清毛片免费观看视频网站| 搡老妇女老女人老熟妇| АⅤ资源中文在线天堂| 日日撸夜夜添| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 十八禁国产超污无遮挡网站| 51国产日韩欧美| 嫩草影院新地址| 丰满乱子伦码专区| 九九热线精品视视频播放| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲av男天堂| 国产一区二区三区av在线 | 男女视频在线观看网站免费| 乱人视频在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 久久精品国产清高在天天线| 热99在线观看视频| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日本五十路高清| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲第一区二区三区不卡| av天堂中文字幕网| 国内精品美女久久久久久| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲一区二区三区色噜噜| 欧美激情久久久久久爽电影| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产探花极品一区二区| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 免费黄网站久久成人精品| 干丝袜人妻中文字幕| 亚洲最大成人av| 五月玫瑰六月丁香| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产av在哪里看| 国产精品国产高清国产av| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产高清三级在线| 日韩大尺度精品在线看网址| 啦啦啦韩国在线观看视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 一区二区三区高清视频在线| 黄色日韩在线| 白带黄色成豆腐渣| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产 一区精品| 久久99蜜桃精品久久| 在线观看一区二区三区| 少妇人妻一区二区三区视频| 在线观看av片永久免费下载| 99久久久亚洲精品蜜臀av| av天堂在线播放| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产一区二区三区av在线 | 偷拍熟女少妇极品色| 日韩成人av中文字幕在线观看| 久久久久久大精品| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 精品久久久噜噜| 国产大屁股一区二区在线视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲精品456在线播放app| 最近2019中文字幕mv第一页| 男人的好看免费观看在线视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 欧美在线一区亚洲| 亚洲国产精品成人综合色| 美女内射精品一级片tv| 日本欧美国产在线视频| 亚洲高清免费不卡视频| 99久国产av精品国产电影| av女优亚洲男人天堂| 好男人在线观看高清免费视频| 18禁在线播放成人免费| 日韩高清综合在线| 国产中年淑女户外野战色| 最近的中文字幕免费完整| 国产黄色视频一区二区在线观看 | a级毛片免费高清观看在线播放| 综合色丁香网| 禁无遮挡网站| 校园春色视频在线观看| av在线老鸭窝| 免费无遮挡裸体视频| 中文欧美无线码| 精品午夜福利在线看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 欧美在线一区亚洲| 国产精华一区二区三区| 久久久色成人| 亚洲欧美日韩高清专用| 秋霞在线观看毛片| 99久国产av精品| kizo精华| 网址你懂的国产日韩在线| 午夜福利高清视频| 久久99热这里只有精品18| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲高清免费不卡视频| 午夜爱爱视频在线播放| 一级av片app| 成人欧美大片| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 精品国内亚洲2022精品成人| 97超碰精品成人国产| 九九在线视频观看精品| 国产极品天堂在线| 国产高清激情床上av| 精品久久久久久久久av| 国模一区二区三区四区视频| 日韩一区二区三区影片| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲国产精品国产精品| 在线播放国产精品三级| 亚洲在久久综合| 夫妻性生交免费视频一级片| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 亚洲精品色激情综合| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日本免费a在线| 国产亚洲精品久久久com| 麻豆国产av国片精品| 欧美成人免费av一区二区三区| 日韩一区二区视频免费看| 日本成人三级电影网站| 中文欧美无线码| 久久中文看片网| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 亚洲成人久久爱视频| 嫩草影院入口| 一本一本综合久久| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美日本视频| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 亚洲av.av天堂| 亚洲av熟女| 1024手机看黄色片| 老司机福利观看| 久久这里有精品视频免费| 中文亚洲av片在线观看爽| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 精品久久久久久久末码| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产精品不卡视频一区二区| 久久精品91蜜桃| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 亚洲av二区三区四区| 成人特级黄色片久久久久久久| 91av网一区二区| 少妇的逼好多水| 能在线免费看毛片的网站| 国产精品久久久久久久久免| 久久这里有精品视频免费| 成人永久免费在线观看视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲av.av天堂| 美女内射精品一级片tv| 特大巨黑吊av在线直播| 国内精品久久久久精免费| 国产伦在线观看视频一区| 久久久久久九九精品二区国产| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 欧美性感艳星| 成人av在线播放网站| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品99久久久久久久久| 九草在线视频观看| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲av成人av| 日韩欧美精品免费久久| 国产视频内射| 国产高清三级在线| 色综合色国产| 国产爱豆传媒在线观看| 久久这里只有精品中国| 一夜夜www| 少妇人妻精品综合一区二区 | 亚洲一区高清亚洲精品| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲人成网站在线观看播放| 精品熟女少妇av免费看| 久久这里只有精品中国| a级毛片a级免费在线| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国产老妇女一区| 最新中文字幕久久久久| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久99久视频精品免费| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 尾随美女入室| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲内射少妇av| 欧美色视频一区免费| 男女那种视频在线观看| 在线a可以看的网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 九九热线精品视视频播放| 1024手机看黄色片| 国产精品久久久久久久久免| a级一级毛片免费在线观看| 在线a可以看的网站| 日韩中字成人| 91久久精品国产一区二区三区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产久久久一区二区三区| 国产精品不卡视频一区二区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 欧美一区二区国产精品久久精品| 在现免费观看毛片| 联通29元200g的流量卡| 欧美精品一区二区大全| 日日撸夜夜添| 国产成人a∨麻豆精品| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久久久免费精品人妻一区二区| 黄片无遮挡物在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 最近手机中文字幕大全| 免费av观看视频| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产精品一区www在线观看| 中文资源天堂在线| 精华霜和精华液先用哪个| 观看美女的网站| 青春草国产在线视频 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产免费男女视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 永久网站在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 99久国产av精品国产电影| 久久人妻av系列| 成人毛片60女人毛片免费| 精品午夜福利在线看| 国产真实乱freesex| 国产午夜精品论理片| 精品一区二区免费观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产一级毛片在线| 亚洲av二区三区四区| 美女黄网站色视频| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 日本与韩国留学比较| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲欧美精品综合久久99| 免费av不卡在线播放| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 一级av片app| 国产极品精品免费视频能看的| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 久久午夜亚洲精品久久| 亚洲人成网站高清观看| 国产成人精品久久久久久| 久久人人爽人人爽人人片va| av女优亚洲男人天堂| 欧美潮喷喷水| 波多野结衣高清无吗| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲av不卡在线观看| 99视频精品全部免费 在线| 97在线视频观看| 一级av片app| 少妇高潮的动态图| 色吧在线观看| 能在线免费观看的黄片| 赤兔流量卡办理| 成人国产麻豆网| 精品欧美国产一区二区三| 国产伦理片在线播放av一区 | 久久久精品94久久精品| 青春草国产在线视频 | 2022亚洲国产成人精品| 男女边吃奶边做爰视频| 国产美女午夜福利| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 丰满的人妻完整版| 亚洲av免费高清在线观看| 免费观看精品视频网站| 日本与韩国留学比较| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久人妻av系列| 美女大奶头视频| 日韩欧美精品免费久久| 人人妻人人看人人澡| 少妇丰满av| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲欧美精品综合久久99| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲综合色惰| 久久午夜福利片| 欧美一级a爱片免费观看看| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 中国美女看黄片| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久人人精品亚洲av| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产乱人偷精品视频| 九草在线视频观看| 99视频精品全部免费 在线| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产精品,欧美在线| 最近手机中文字幕大全| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲成人久久性| 亚洲精品色激情综合| 一进一出抽搐动态| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 男女边吃奶边做爰视频| 最近的中文字幕免费完整| 国产成人一区二区在线| 精品久久久久久久久久久久久| 美女脱内裤让男人舔精品视频 | 国产一区亚洲一区在线观看| 国产人妻一区二区三区在| 特级一级黄色大片| 看非洲黑人一级黄片| 国产成人a∨麻豆精品| 久久人妻av系列| 悠悠久久av| 午夜亚洲福利在线播放| 国产在视频线在精品| 成人毛片a级毛片在线播放| 九九热线精品视视频播放| 精品久久久久久成人av| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 日韩三级伦理在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 丝袜美腿在线中文| 国产探花在线观看一区二区| 国产真实伦视频高清在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 99久久人妻综合| 美女脱内裤让男人舔精品视频 | 国产精品一区二区三区四区久久| 在线免费观看不下载黄p国产| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲av.av天堂| 国模一区二区三区四区视频| 国产成人a区在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 一级毛片久久久久久久久女| 别揉我奶头 嗯啊视频| 久久久久久九九精品二区国产| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲不卡免费看| 成人亚洲欧美一区二区av| 日韩欧美三级三区| 亚洲国产色片| 国产免费男女视频| 久久精品国产自在天天线| 国产精品久久视频播放| 国产精品人妻久久久久久| 国产精品国产高清国产av| 成年女人看的毛片在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 日本在线视频免费播放| 22中文网久久字幕| 欧美成人一区二区免费高清观看| 在线播放无遮挡| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲国产精品国产精品| 男女啪啪激烈高潮av片| 精品久久久久久久末码| 麻豆一二三区av精品| 亚洲综合色惰| 国产69精品久久久久777片| 色5月婷婷丁香| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 蜜臀久久99精品久久宅男| 中国美女看黄片| 欧美人与善性xxx| 久久中文看片网| 亚洲精品456在线播放app| 国产爱豆传媒在线观看| 午夜福利在线观看吧| 国产欧美日韩精品一区二区| 免费av毛片视频| 极品教师在线视频| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲av熟女| 少妇的逼水好多| 日韩三级伦理在线观看| 成年av动漫网址| 村上凉子中文字幕在线| videossex国产| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产av不卡久久| 国产乱人偷精品视频| 午夜福利在线在线| 亚洲欧美清纯卡通| 久久久久久久久久成人| 亚州av有码| 成人鲁丝片一二三区免费| 成人毛片a级毛片在线播放| 99国产精品一区二区蜜桃av| 搞女人的毛片| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 久久久精品大字幕| 一区福利在线观看| 少妇熟女欧美另类| 亚洲欧美精品自产自拍| 好男人视频免费观看在线| 欧美日韩国产亚洲二区| 国产亚洲91精品色在线| av在线老鸭窝| 国内揄拍国产精品人妻在线| 精品无人区乱码1区二区| 人体艺术视频欧美日本| 免费搜索国产男女视频| 欧美日本视频| 长腿黑丝高跟| 久久人妻av系列| 国产不卡一卡二| 一级av片app| 日韩一本色道免费dvd| 久久九九热精品免费| 国语自产精品视频在线第100页| 成人特级av手机在线观看| 亚洲人成网站高清观看| 草草在线视频免费看| 免费看av在线观看网站| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 可以在线观看毛片的网站| 色综合亚洲欧美另类图片| 校园春色视频在线观看| 亚洲自拍偷在线| 在线免费十八禁| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 最近最新中文字幕大全电影3| 男人舔女人下体高潮全视频| 一级av片app| 日韩一本色道免费dvd| 日本欧美国产在线视频| 网址你懂的国产日韩在线| 日韩成人av中文字幕在线观看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 欧美日韩在线观看h| 亚洲国产色片| 久久精品91蜜桃| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 亚洲av第一区精品v没综合| 午夜久久久久精精品| 草草在线视频免费看| 久久精品久久久久久久性| 只有这里有精品99| 桃色一区二区三区在线观看| 97超碰精品成人国产| 国产av不卡久久| 中文字幕久久专区| 国产一区亚洲一区在线观看| 日韩欧美国产在线观看| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产乱人偷精品视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 精品日产1卡2卡| 日本色播在线视频| 国产一级毛片在线| 2021天堂中文幕一二区在线观| 在线免费观看不下载黄p国产| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 青春草视频在线免费观看| 久久中文看片网| 真实男女啪啪啪动态图| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看| 免费看av在线观看网站| 亚洲欧美精品专区久久| 国产一级毛片在线| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产精品伦人一区二区| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 特大巨黑吊av在线直播| 精品人妻视频免费看| 一级av片app| 国产 一区精品| 国产精品伦人一区二区| 美女大奶头视频| 一级av片app| 哪个播放器可以免费观看大片| 91精品国产九色| 美女大奶头视频| 精品久久久久久成人av| 少妇丰满av| av黄色大香蕉| 深夜精品福利| 欧美潮喷喷水| 国产精品日韩av在线免费观看| 午夜视频国产福利| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产精品精品国产色婷婷| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 日本免费a在线| 婷婷亚洲欧美| 久久6这里有精品| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 性插视频无遮挡在线免费观看| 黄色日韩在线| 午夜福利视频1000在线观看| 三级国产精品欧美在线观看| 国产真实乱freesex| 日本免费一区二区三区高清不卡| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲真实伦在线观看| 欧美成人精品欧美一级黄| 午夜a级毛片|