左卡尼汀對糖尿病腹膜透析患者外周血T細胞亞群及炎癥因子的影響

楊蘆蓉，楊 林，宋志霞，何川鄂，馬 嵐（.三峽大學第一臨床醫(yī)學院/宜昌市中心人民醫(yī)院腎內(nèi)科，湖北宜昌 443000；.三峽大學藥學院，湖北宜昌 443000）

左卡尼汀對糖尿病腹膜透析患者外周血T細胞亞群及炎癥因子的影響

楊蘆蓉1＊，楊 林1，宋志霞1，何川鄂1，馬 嵐2（1.三峽大學第一臨床醫(yī)學院/宜昌市中心人民醫(yī)院腎內(nèi)科，湖北宜昌 443000；2.三峽大學藥學院，湖北宜昌 443000）

目的：探討左卡尼汀對糖尿病腹膜透析患者外周血T細胞及炎癥因子的影響。方法：選取2013年9月－2015年10月宜昌市中心人民醫(yī)院收治的100例糖尿病腹膜透析患者為研究對象，按隨機數(shù)字表法分為常規(guī)治療組和左卡尼汀組，各50例。常規(guī)治療組患者給予腹膜透析治療及常規(guī)治療；左卡尼汀組患者在常規(guī)治療組的基礎(chǔ)上加用左卡尼汀1.0 g加入0.9%的氯化鈉注射液20 mL中，每周3次，靜脈注射，連續(xù)應用12周。兩組患者均于治療前后檢測CD3+、CD4+、Th1、Th2及腫瘤壞死因子α（TNF-α）、干擾素γ（INF-γ）、白細胞介素10（IL-10），IL-4含量變化，并比較兩組患者T-bet及GATA-3轉(zhuǎn)錄因子表達量。結(jié)果：治療后，兩組患者CD3+、CD4+、Th2細胞、GATA-3表達量及IL-10、IL-4水平均顯著升高，Th1細胞、T-bet表達量及TNF-α、INF-γ水平顯著降低，且左卡尼汀組顯著優(yōu)于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結(jié)論：左卡尼汀可通過改善T細胞亞群及Th1/Th2細胞亞群，從而改善患者的炎癥狀態(tài)，促進相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子表達。

Th1；Th2；T細胞亞群；炎癥因子；左卡尼??；腹膜透析

糖尿病是引起終末期腎病的主要病因之一，腹膜透析作為一種有效的治療手段已被越來越多的患者所接受。但腹膜透析存在多種并發(fā)癥，且病死率較高，然而其相關(guān)機制至今仍未明確。有研究表明，免疫因素可引起腹膜透析患者多種因子的調(diào)控異常[1]。根據(jù)產(chǎn)生相關(guān)細胞因子的不同，T細胞分為Th1及Th2細胞，其中Th1主要分泌腫瘤壞死因子α（TNF-α）及干擾素γ（INF-γ），Th2細胞主要分泌白細胞介素10（IL-10）及IL-4等炎癥因子。在機體免疫系統(tǒng)中，Th1/Th2穩(wěn)態(tài)起著至關(guān)重要的作用，已有研究發(fā)現(xiàn)，Th1及Th2細胞參與糖尿病腹膜透析疾病的發(fā)生發(fā)展[2]，但國內(nèi)對此研究較少。為此，本研究觀察了糖尿病腹膜透析患者外周血Th1/Th2的變化，以探討其在糖尿病腹膜透析中的意義。

1 資料與方法

1.1 納入與排除標準

納入標準：符合《中國2型糖尿病防治指南》[3]中的糖尿病及糖尿病腎?、跗诘脑\斷標準。

排除標準：（1）有重度心功能不全（左室射血分數(shù)＜0.35）者；（2）有心肌梗死、腦梗死及腦出血等病史者；（3）嚴重營養(yǎng)不良者；（4）存在糖尿病酮癥及乳酸酸中毒等嚴重并發(fā)癥者；（5）近1個月使用其他抗氧化藥物者。

1.2 研究對象

選取2013年9月－2015年10月宜昌市中心人民醫(yī)院收治的糖尿病腹膜透析患者100例，按隨機數(shù)字表法分為常規(guī)治療組和左卡尼汀組，各50例。其中，常規(guī)治療組患者男性24例，女性26例；年齡為43～68歲，平均年齡（57.4±9.8）歲；病程1～7年，平均病程（4.1±1.3）年。左卡尼汀組患者男性25例，女性25例；年齡為45～70歲，平均年齡（58.2±9.1）歲；病程1～7年，平均病程（4.4±1.6）年。兩組患者在性別、年齡、病程等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，且患者與家屬均知情同意，并簽署知情同意書。

1.3 治療方法

常規(guī)治療組患者在采取腹膜透析治療的基礎(chǔ)上給予控制血壓、血糖、血脂，糾正貧血及鈣磷代謝紊亂等治療。左卡尼汀組患者在常規(guī)治療組的基礎(chǔ)上加用左卡尼汀注射液（東北制藥集團沈陽第一制藥有限公司，批準文號：國藥準字H20113215，規(guī)格：規(guī)格5 mL∶1 g）1.0 g加入0.9%氯化鈉注射液20 mL，每周3次，靜脈注射，連續(xù)應用12周。

1.4 觀察指標

（1）觀察兩組患者治療前后T細胞亞群、Th1/Th2細胞亞群表達水平。（2）觀察兩組患者治療前后炎癥因子（TNF-α、INF-γ、IL-10、IL-4）水平。（3）觀察兩組患者治療前后T-bet及GATA-3轉(zhuǎn)錄因子表達量。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以±s表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后T細胞亞群表達水平比較

治療前，兩組患者CD3+、CD4+表達水平比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者CD3+、CD4+表達水平均顯著升高，且左卡尼汀組顯著高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），詳見表1。

2.2 兩組患者治療前后Th1/Th2細胞亞群表達水平比較

表1 兩組患者治療前后T細胞亞群表達水平比較（±s,%%）Tab 1 Comparison of the expression of T cell subsets between 2 groups before and after treatment（±s,%%）

表1 兩組患者治療前后T細胞亞群表達水平比較（±s,%%）Tab 1 Comparison of the expression of T cell subsets between 2 groups before and after treatment（±s,%%）

注：與治療前比較，＊P＜0.05；與常規(guī)治療組比較，#P＜0.05Note：vs.before treatment，＊P＜0.05；vs.conventional therapy group，#P＜0.05

n組別常規(guī)治療組50左卡尼汀組50時期治療前治療后治療前治療后CD3+40.3±6.9 47.7±7.3＊39.8±7.1 55.4±7.9＊#CD4+15.4±6.1 21.5±6.9＊14.9±6.2 29.2±6.1＊#

治療前，兩組患者體內(nèi)CD4+INF-γ+T細胞（Th1細胞）及CD4+IL-10+T細胞（Th2細胞）表達水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者Th1細胞表達水平顯著降低，Th2細胞表達水平顯著升高，且左卡尼汀組顯著優(yōu)于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），詳見表2。

表2 兩組患者治療前后Th1/Th2亞群表達水平比較（±s,%%）Tab 2 Comparison of the expression of Th1/Th2 subsets between 2 groups before and after treatment（±s,%%）

表2 兩組患者治療前后Th1/Th2亞群表達水平比較（±s,%%）Tab 2 Comparison of the expression of Th1/Th2 subsets between 2 groups before and after treatment（±s,%%）

注：與治療前比較，＊P＜0.05；與常規(guī)治療組比較，#P＜0.05Note：vs.before treatment，＊P＜0.05；vs.conventional therapy group，#P＜0.05

CD4+IL-10+ 9.2±6.8 15.2±7.6＊8.9±6.9 18.9±7.1＊#組別常規(guī)治療組n 50左卡尼汀組50時期治療前治療后治療前治療后CD4+INF-γ+ 44.3±6.5 38.9±6.6＊45.1±6.4 31.5±6.8＊#

2.3 兩組患者治療前后炎癥因子水平比較

治療前，兩組患者體內(nèi)TNF-α、INF-γ、IL-10、IL-4水平比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者TNF-α、INF-γ水平顯著降低，IL-10、IL-4水平顯著升高，且左卡尼汀組顯著優(yōu)于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），詳見表3。

表3 兩組患者治療前后炎癥因子水平比較（±s，pg/mL）Tab 3 Comparison of inflammatory factor levels between 2 groups before and after treatment（±s，pg/mL）

表3 兩組患者治療前后炎癥因子水平比較（±s，pg/mL）Tab 3 Comparison of inflammatory factor levels between 2 groups before and after treatment（±s，pg/mL）

注：與治療前比較，＊P＜0.05；與常規(guī)治療組比較，#P＜0.05Note：vs.before treatment，＊P＜0.05；vs.conventional therapy group，#P＜0.05

IL-4 134.6±19.2 234.2±16.9＊132.7±18.4 292.9±17.1＊#組別常規(guī)治療組n 50左卡尼汀組50時期治療前治療后治療前治療后TNF-α 321.3±14.5 267.6±18.9＊323.5±13.9 154.5±18.3＊#INF-γ 349.2±16.7 244.8±17.1＊351.2±17.1 136.9±16.8＊#IL-10 125.2±22.3 172.9±23.6＊122.3±21.7 231.5±24.8＊#

2.4 兩組患者治療前后T-bet及GATA-3轉(zhuǎn)錄因子表達量比較

治療前，兩組患者體內(nèi)T-bet及GATA-3表達量比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者T-bet表達量顯著降低，GATA-3表達量顯著升高，且左卡尼汀組顯著優(yōu)于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），詳見圖1、圖2。

圖1 兩組患者T-bet轉(zhuǎn)錄因子表達量比較Fig 1 Comparison of the expression of T-bet transcription factor between 2 groups

圖2 兩組患者GATA-3轉(zhuǎn)錄因子表達量比較Fig 2 Comparison of the expression of GATA-3 transcription factor between 2 groups

3 討論

目前，由糖尿病引發(fā)的終末期腎病的發(fā)病率逐年升高，腹膜透析以其設備簡單、操作方便的特點被廣大患者所采用。已有研究表明，長期炎性物質(zhì)、化學因素、代謝性酸中毒、貧血及氧化應激的刺激，體內(nèi)肌酐、β2微球蛋白等的聚集，均導致機體處于微炎癥狀態(tài)，表現(xiàn)為體內(nèi)存在較高濃度的IL-1、IL-6及超敏C反應蛋白等炎癥因子，并且這些炎癥因子還可促進單核巨噬細胞分泌更多的炎癥因子，使機體處于慢性炎癥狀態(tài)，從而加重腎衰竭的發(fā)展，并增加并發(fā)癥的發(fā)生[4-6]，對預后產(chǎn)生不良的影響。因此，如何降低這些炎癥反應，從而提高患者的生存率和生活質(zhì)量已經(jīng)成為臨床研究的重點內(nèi)容。左卡尼汀是廣泛存在于體內(nèi)的一種常見氨基酸——左旋肉毒堿，是脂肪氧化過程中的重要分子，具有一定的抗炎和抗氧化作用，可抑制氨基末端激酶及體內(nèi)磷酸化蛋白的活性，從而抑制炎癥因子的分泌，降低體內(nèi)單核細胞的活化，改善患者生存質(zhì)量[7]。

Th1/Th2細胞是由體內(nèi)幼稚T細胞分化而來，參與適應性免疫應答，兩者具有獨立的分化和調(diào)節(jié)機制，可通過多種途徑調(diào)節(jié)機體免疫狀態(tài)。傳統(tǒng)觀念根據(jù)分泌的細胞因子的不同將兩者分開，Th1細胞可分泌較多的TNF-α、INF-γ等，多介導細胞免疫；Th2細胞可分泌較多的IL-10、IL-4等，多介導體液免疫[8]，并且，體內(nèi)Th1/Th2的失衡可導致多種疾病的發(fā)生發(fā)展[9]。在T細胞向不同方向分化中，不同的轉(zhuǎn)錄因子起著不同的作用[10]。T-bet在Th1細胞分化中起著決定性的作用，而GATA-3在Th2細胞分化中起著決定性的作用。

T細胞作為機體免疫反應中最主要的效應細胞，左卡尼汀可通過調(diào)控T細胞的反應來影響疾病的相關(guān)進展[11]。本研究結(jié)果顯示，治療后，左卡尼汀組患者T細胞亞群及Th1/Th2細胞亞群表達水平、炎癥因子水平、T-bet及GATA-3轉(zhuǎn)錄因子表達量均顯著優(yōu)于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），與多項研究結(jié)果基本吻合[11-12]。提示左卡尼汀可明顯改善機體炎癥狀態(tài)，促進機體T細胞向Th2細胞極化偏移，從而改善機體的炎性狀態(tài)，促進疾病的恢復。

綜上所述，左卡尼汀可通改善T細胞亞群及Th1/ Th2細胞亞群，從而改善患者的炎癥狀態(tài)，促進相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子表達。但本研究樣本量較小，有待大樣本、多中心的研究進一步探討。

[1] 張鴻雁，趙新梅，李素娟，等.腎康注射液對腹膜透析患者微炎癥反應狀態(tài)改善的研究[J].河北醫(yī)科大學學報，2014，35（2）：221-223.

[2] 馮志紅，周曉玲，陳孟華，等.腹膜透析患者血清鐵調(diào)素與殘余腎功能及微炎性反應狀態(tài)的相關(guān)關(guān)系[J].中華腎臟病雜志，2014，30（10）：739-743.

[3] 中華醫(yī)學會糖尿病學分會.中國2型糖尿病防治指南[M].北京：北京大學醫(yī)學出版社，2014：36-78.

[4] 任克軍，王青，胡順金，等.微炎癥狀態(tài)對腹膜透析患者營養(yǎng)狀況的影響[J].實用醫(yī)學雜志，2015，31（3）：427-429.

[5] 劉曉云.左卡尼汀聯(lián)合百令膠囊對腹膜透析患者殘余腎功能、微炎癥狀態(tài)及營養(yǎng)狀況的影響[J].實用藥物與臨床，2014，17（7）：860-864.

[6] 陳娜，陳孟華.探討腹膜不同轉(zhuǎn)運類型對腹膜透析患者的營養(yǎng)狀況、炎癥及心血管并發(fā)癥的影響[J].中國血液凈化，2014，13（7）：485-488.

[7] 梁波，覃學美，周方，等.高通量血液透析聯(lián)合左卡尼汀改善尿毒癥患者貧血的臨床評價[J].中國實驗診斷學，2015，19（2）：287-289.

[8] 何欽，陶飛寶，葉旭星，等.益氣、化瘀、清熱中藥對胃癌前病變患者Th1/Th2免疫漂移的影響[J].中國藥房，2015，26（17）：2367-2369.

[9] 張俊貞.雷公藤多苷治療兒童紫癜性腎炎的研究進展[J].中國藥房，2012，23（48）：4596-4598.

[10] 郎明霞，戚建巨.小劑量羅紅霉素對支氣管哮喘患者氣道高反應性的影響[J].中國藥房，2014，25（24）：2261-2263.

[11] 余堂宏，胡宏，陳燕，等.左卡尼汀對腹膜透析患者微炎癥和營養(yǎng)狀態(tài)的影響[J].醫(yī)學綜述，2012，18（17）：2894-2896.

[12] 胡宏，余堂宏.左卡尼汀對慢性腎衰竭腹膜透析患者微炎癥狀態(tài)的影響[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志，2012，11（18）：1488-1489.

（編輯：黃 歡）

Effects of Levocarnitine on Peripheral Blood T Cell Subsets and Inflammatory Factors in Diabetic Patients Underwent Peritoneal Dialysis

YANG Lurong1，YANG Lin1，SONG Zhixia1，HE Chuan’e1，MA Lan2（1.Dept.of Nephrology，F(xiàn)irst College of Clinical Medicine，China Three Gorges University/Yichang Central People’s Hospital，Hubei Yichang 443000，China；2.School of Pharmacy，China Three Gorges University，Hubei Yichang 443000，China）

OBJECTIVE：To investigate the effects of levocarnitine on peripheral blood T cell subsets and inflammatory factors in diabetic patients underwent peritoneal dialysis.METHODS：A total of 100 diabetic patients underwent peritoneal dialysis in selected as research objects were divided into conventional therapy group and levocarnitine group according to random number table，with 50 cases in each group.Conventional therapy group

peritoneal dialysis and conventional therapy.Levocarnitine group was additionally given levocarnitine 1.0 g added into 0.9%Sodium chloride injection 20 mL intravenously，3 times a week，on the basis of conventional therapy group for 12 weeks.CD3+，CD4+，the proportion of Th1 and Th2，the contents of TNF-α，INF-γ，IL-10 and IL-4 in supernatant were all detected before and after treatment.The expression of T-bet and GATA-3 were compared between 2 groups.RESULTS：After treatment，CD3+，CD4+，Th2 cells，GATA-3 expression and IL-10，IL-4 levels were significantly increased，the expression of Th1 cells，T-bet content and TNF-α and INF-γ were significantly reduced，and levcarnitine group was significantly better than conrentional therapy group，with statistically significant（P＜0.05）.CONCLUSIONS：Levocarnitine can improve inflammatory reaction and the expression of related transcription factors by promoting T cell subsets and Th1/Th2 cell subsets.

Th1；Th2；T cell subsets；Inflammatory factors；Levocarnitine；Peritoneal dialysis

R459.5

A

1001-0408（2017）20-2837-03

2016-07-20

2017-04-28）

＊副主任醫(yī)師。研究方向：腎內(nèi)科疾病。電話：0717-6483576。E-mail：296639644@qq.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.20.29