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    氣相色譜法測(cè)定珍珠明目滴眼液中的乙醇?xì)埩袅?/h1>
    2017-08-10 09:55:11馮霞梁國(guó)強(qiáng)陳偉
    中國(guó)合理用藥探索 2017年5期
    關(guān)鍵詞:明目滴眼液殘留量

    馮霞,梁國(guó)強(qiáng),陳偉

    (1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京腦科醫(yī)院藥劑科,江蘇 南京 210029;2.蘇州市吳門醫(yī)派研究院,江蘇 蘇州 215003)

    氣相色譜法測(cè)定珍珠明目滴眼液中的乙醇?xì)埩袅?/p>

    馮霞1,梁國(guó)強(qiáng)2,陳偉2

    (1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京腦科醫(yī)院藥劑科,江蘇 南京 210029;2.蘇州市吳門醫(yī)派研究院,江蘇 蘇州 215003)

    目的:建立珍珠明目滴眼液中乙醇?xì)埩袅康臏y(cè)定方法。方法:采用氣相色譜法,鍵合交聯(lián)聚乙二醇為固定液的毛細(xì)管柱,載氣為氮?dú)?,氫火焰離子化檢測(cè)器(FID),進(jìn)樣口溫度為190℃,檢測(cè)器溫度為250℃,柱溫采用程序升溫,初始溫度為50℃,保持3 min,再以50℃/min的升溫速率升溫至200℃,保持5 min。載氣流速1.5 mL/ min,空氣流量450 mL/min;氫氣流量45 mL/min,分流比為30∶1。結(jié)果:乙醇濃度在21.01~105 050.48 μg/mL內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,72批樣品中有18批樣品的乙醇?xì)埩袅砍^(guò)0.5%。結(jié)論:本方法準(zhǔn)確、可靠,靈敏度高,適用于珍珠明目滴眼液中乙醇?xì)埩袅康臋z測(cè)。

    氣相色譜法;氫火焰離子化檢測(cè)器;珍珠明目滴眼液;乙醇?xì)埩?/p>

    珍珠明目滴眼液主要由珍珠液和冰片配伍制成,是國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的二級(jí)中藥保護(hù)品種,收載于《中藥成方制劑》第17冊(cè),其主要功能為清熱瀉火、養(yǎng)肝明目,主要用于肝虛火旺引起視力疲勞癥和慢性結(jié)膜炎,長(zhǎng)期使用可以保護(hù)視力[1-4]。

    珍珠明目滴眼液生產(chǎn)過(guò)程中運(yùn)用到乙醇,而滴眼液屬眼科用藥,要求比較嚴(yán)謹(jǐn),對(duì)制劑中乙醇?xì)埩袅啃枰M(jìn)行控制。因此,本研究采用氣相色譜法鑒定不同廠家珍珠明目滴眼液中的乙醇?xì)埩袅縖5-10],評(píng)價(jià)不同生產(chǎn)企業(yè)制劑生產(chǎn)工藝,為確保生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性及有效控制珍珠明目滴眼液的質(zhì)量提供參考依據(jù)。

    1 儀器與試藥

    PE Clarus 680 氣相色譜儀(美國(guó)PerkinElmer公司),乙醇為色譜純(美國(guó)Sigma-Aldrich公司),無(wú)水乙醇標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定研究院,批號(hào):1612772),正丁醇標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定研究院,批號(hào):160108),水為超純水(美國(guó)millipore公司Q3制備),色譜柱DB-WAX(30 m×0.320 mm,0.50 μm),樣品為市場(chǎng)收集的7個(gè)廠家的72批樣品。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜條件

    按照氣相色譜法[《中華人民共和國(guó)藥典》(2015年版)附錄Ⅵ E]測(cè)定,用鍵合交聯(lián)聚乙二醇為固定液的毛細(xì)管柱;起始溫度為50℃,維持3 min,再以10℃/min的速率升溫至80℃,再以50℃/min的速率升溫至200℃,維持5 min;進(jìn)樣口溫度190℃;氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)溫度250℃。載氣(N2)流量1.5 mL/min;空氣流量450 mL/min;氫氣流量45 mL/min,分流比為30∶1。

    2.2 溶液制備

    2.2.1 對(duì)照品溶液制備 精密稱取無(wú)水乙醇對(duì)照品8.429 67 g,置20 mL量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,精密量取1 mL,置20 mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,作為對(duì)照品溶液。

    2.2.2 內(nèi)標(biāo)溶液制備 精密稱取正丁醇4.7951 g,置100 mL量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,精密量取1 mL,置100 mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,作為內(nèi)標(biāo)溶液。

    2.2.3 樣品溶液制備 取0.50 g樣品加內(nèi)標(biāo)溶液0.5 mL,混勻,作為供試品溶液。

    3 系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)

    3.1 專屬性實(shí)驗(yàn)

    在“2.1”色譜條件下,對(duì)照品溶液中乙醇、正丁醇保留時(shí)間均在13 min內(nèi),分離良好,說(shuō)明上述色譜條件適用于本品的含量測(cè)定。見圖1。

    圖1 專屬性實(shí)驗(yàn)HPLC圖

    3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍

    精密量取上述對(duì)照品溶液加內(nèi)標(biāo)溶液適量稀釋制成每1 mL濃度分別為21.01,52.53,105.05,210.11,420.22,1050.55,2101.10和10505.48 μg濃度的溶液,各取1 μL,注入氣相色譜儀,記錄色譜圖,以各自的峰面積(Y)對(duì)其濃度(X)進(jìn)行線性回歸,回歸方程為:

    Y=0.003X-0.093(R2=0.999),

    結(jié)果表明在21.01~105 050.48 μg/mL范圍內(nèi)乙醇色譜峰面積與其濃度成良好線性關(guān)系。

    3.3 精密度

    取高、中、低濃度對(duì)照品溶液,重復(fù)進(jìn)樣5次,計(jì)算待測(cè)組分乙醇峰面積與內(nèi)標(biāo)物正丁醇峰面積之比的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為2.55 %,1.22%和3.88%,表明該方法精密度良好。

    3.4 重復(fù)性

    取同一批號(hào)的珍珠明目滴眼液(批號(hào):20120119)按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份,照“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣,內(nèi)標(biāo)法計(jì)算乙醇含量平均值為0.22%,RSD為0.65%,表明該方法重復(fù)性良好。

    3.5 穩(wěn)定性

    取同一批號(hào)的珍珠明目滴眼液(批號(hào):20120119)按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,照“2.1”項(xiàng)下色譜條件,分別于配制后0,2,4,8,10,20 h后進(jìn)樣,計(jì)算待測(cè)組分乙醇峰面積與內(nèi)標(biāo)物正丁醇峰面積之比的RSD為2.84%,表明20 h內(nèi)供試品溶液基本穩(wěn)定。

    3.6 加樣回收率

    取已知乙醇?xì)埩袅康臉悠罚ㄅ?hào):20120119)6份,分別加入1 050.55 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件,以內(nèi)標(biāo)法計(jì)算回收率平均值為96.65%,RSD為3.70 %。見表1。

    4 樣品測(cè)定

    取“2.2.3”項(xiàng)下樣品溶液1 μL注入氣相色譜儀,測(cè)定。按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液6份,按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定迷迭香酸的色譜峰面積,內(nèi)標(biāo)法計(jì)算乙醇含量,測(cè)定結(jié)果見表2。

    表1 乙醇加樣回收率

    表2 72批樣品乙醇?xì)埩袅?/p>

    (續(xù)表)

    4 結(jié)果與討論

    《中華人民共和國(guó)藥典》(2015年版)二部附錄Ⅷ P中規(guī)定,乙醇為第三類溶劑殘留,不得超過(guò)0.5%。針對(duì)現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)未設(shè)置滴眼液中乙醇?xì)埩袅康臋z查項(xiàng),建立了一種靈敏的氣相色譜測(cè)定乙醇?xì)埩袅康姆椒?,該方法能將珍珠明目滴眼液中的乙醇有效分離,具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性,可用于珍珠明目滴眼液的有關(guān)物質(zhì)檢查,對(duì)滴眼液中的第三類溶劑殘留進(jìn)行控制。依據(jù)上述方法檢驗(yàn),72批樣品中有20批樣品的乙醇?xì)埩袅砍^(guò)0.5%。從72批珍珠明目滴眼液樣品乙醇?xì)埩袅糠植记闆r圖中可以看出不同廠家生產(chǎn)的珍珠明目滴眼液樣品乙醇?xì)埩袅孔儎?dòng)幅度差別較大。建議增加珍珠明目滴眼液的乙醇?xì)埩袅康臋z查項(xiàng),以進(jìn)一步規(guī)范珍珠明目滴眼液的生產(chǎn)。

    [l] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn):中藥成方制劑[S].第17冊(cè).北京:人民衛(wèi)生出版社,1998.

    [2] 程敏,葉小弟,繆云萍,等.珍珠明目滴眼液改善兔眼球結(jié)膜微循環(huán)的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2012,17(8):856-859.

    [3] 牛耘麗,徐蔚.珍珠明目滴眼液治療慢性結(jié)膜炎的臨床研究[[J].同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2005,26(2):62-64.

    [4] 沈愛祥,王繼紅,丁潔瑾,等.珍珠明目滴眼液聯(lián)合自體血清治療角膜潰瘍臨床療效分析[J].遼寧中醫(yī)雜志,2011,38(7):1361-1363.

    [5] 韓海,賈運(yùn)濤.參麥注射液中殘留乙醇和乙酸乙酯的氣相色譜限量檢查[J].中南藥學(xué),2004,2(5):278-279.

    [6] 韓海.毛細(xì)管氣相色譜法檢查參麥注射液中殘留乙醇和乙酸乙酯限量[J].暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2005,26(3):446-448.

    [7] 林秋婕,陳贊民.頂空氣相色譜法測(cè)定紫杉醇注射液中乙醇含量[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué),2007,7(7):1211-1212.

    [8] 楊先炯,王永林,王愛民,等.氣相色譜法測(cè)定注射用辛芍凍干粉針有機(jī)溶劑殘留量[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20(2):342-343.

    [9] 丁泉,黃健,楊揚(yáng).頂空氣相色譜法測(cè)定脈絡(luò)寧注射液中有機(jī)溶劑殘留量[J].福建分析測(cè)試,2010,19(2):63-65.

    [10] 肖樹雄,莫結(jié)麗.頂空氣相色譜法測(cè)定參芪扶正注射液中乙醇?xì)埩袅縖J].中國(guó)藥師,2010,13(12):1763-1765.

    本文編輯:魯守琴

    Determination of Residual Ethanol Content in Zhenzhu Mingmu Eye Drops by Gas Chromatography

    Feng Xia1, Liang Guo-qiang2, Chen Wei2
    (1. Department of Pharmacy, Nanjing Brain Hospital Affiliated to Nanjing Medical University, Jiangsu Nanjing 210029, China; 2. Suzhou Institute of Wumen Chinese Medicine, Jiangsu Suzhou 215003, China)

    Objective:To establish a method for determination of residual ethanol content in zhenzhu mingmu eye drops.Methods:Gas chromatography (GC) was adopted by using a capillary column (DB-WAX) with FID detector, serving hehelium as carrier gas. The temperature of injection port was 190℃ and that of detector was 250℃. Programmed rising of column temperature was adopted. The initial column temperature was 50℃, which was maintained for 3 mins and raised to 200℃ at a rate of 50℃/min, then maintained for 5 mins. The flow rate of carrier gas was 1.5 mL/min, while the air flow was 450 mL/min, the hydrogen flow was 45 mL/min, and the split ratio was 30∶1.Results:The calibration curve showed a good linearity at a ethanol concentration range of 21.01~105 050. 48 μg/mL. The residual ethanol contents in 18 of 72 batches of samples were more than 0.5%.Conclusion:The method is accurate, reliable and sensitive for the determination of residual ethanol content in zhenzhu mingmu eye drops.

    Gas Chromatography; Hydrogen Flame Ionization Detector; Zhenzhu Mingmu Eye Drops; Residual Ethanol Content

    R286.0

    A

    10.3969/j.issn.2096-3327.2017.05.014

    2017 - 04 - 01

    馮霞,女,主管中藥師。研究方向:中藥學(xué)、中藥藥理。E-mail:1565661221@qq.com

    陳偉,男,碩士,主管中藥師。研究方向:中藥學(xué)。E-mail:540584399@qq.com

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