CIK細(xì)胞干預(yù)非小細(xì)胞肺癌的臨床觀察

劉 冰,武文平,韓 冰,申方臣,劉建瑞,佟 瑞

(秦皇島市中醫(yī)醫(yī)院，河北 秦皇島066000)

CIK細(xì)胞干預(yù)非小細(xì)胞肺癌的臨床觀察

劉 冰,武文平,韓 冰,申方臣,劉建瑞,佟 瑞*

(秦皇島市中醫(yī)醫(yī)院，河北 秦皇島066000)

目的 觀察CIK細(xì)胞治療中晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床療效。方法 54例患者分成兩組，研究組28例(化療+CIK治療)，對(duì)照組26例(單純化療)，觀察兩組患者治療前后的臨床療效、毒性反應(yīng)、生活質(zhì)量、生存分析、免疫功能等指標(biāo)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 研究組有效率(RR)和疾病控制率(DCR)分別為35.7%與78.6%，高于對(duì)照組30.8%與69.2%，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意(P>0.05)；研究組KPS評(píng)分提高率為46.4%(13/28)，明顯高于對(duì)照組23.1%(6/26)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；研究組在CIK細(xì)胞治療前后及與對(duì)照組治療后相比，外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(P<0.05)；CIK細(xì)胞治療期間，患者無(wú)明顯毒副反應(yīng)。結(jié)論 CIK細(xì)胞治療可改善非小細(xì)胞肺癌患者的生活質(zhì)量，提高患者免疫功能，且無(wú)明顯毒副反應(yīng)。

非小細(xì)胞肺癌；CIK細(xì)胞；臨床療效

非小細(xì)胞肺癌( non-small cell lung cancer，NSCLC) 是我國(guó)常見惡性腫瘤之一，占肺癌總數(shù)的80%左右，大部分患者確診時(shí)已屬晚期，失去手術(shù)治療的機(jī)會(huì)，生存率低，生存期短[1]。放療和化療雖仍是目前治療中晚期非小細(xì)胞肺癌的主要手段，療效被臨床所肯定，但其毒副作用較大，對(duì)機(jī)體的免疫功能有一定的損傷[2]，影響患者的生存質(zhì)量[3,4]。腫瘤的生物免疫治療抗瘤活性高、毒副作用小，已廣泛應(yīng)用于臨床。CIK細(xì)胞( cytokine-induced killer cells，細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞)具有在體外可以大量擴(kuò)增、對(duì)腫瘤細(xì)胞直接殺傷作用以及能調(diào)節(jié)宿主免疫功能等優(yōu)勢(shì)，被認(rèn)為是新一代抗腫瘤過(guò)繼免疫治療的首選方案[5]。本研究選取河北省秦皇島市中醫(yī)院腫瘤科中晚期非小細(xì)胞肺癌患者28例進(jìn)行CIK治療，并與26例對(duì)照組進(jìn)行療效對(duì)比分析，旨在研究探討CIK治療中晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象的納入標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均經(jīng)組織病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查證實(shí)確診；預(yù)計(jì)生存期≥3個(gè)月，KPS≥60分；全身狀況良好，無(wú)嚴(yán)重的重要臟器損害，無(wú)不可控制的感染；無(wú)嚴(yán)重過(guò)敏體質(zhì)及哺乳期和妊娠期患者；所有患者均為自愿接受CIK細(xì)胞治療，并簽署治療知情同意書。

1.2 一般資料及分組

收集2014年3月至2015年12月我院腫瘤科符合納入標(biāo)準(zhǔn)的中晚期非小細(xì)胞肺癌患者共54例，其中男30例，女24例，年齡39-76歲，中位年齡52.5歲。其中臨床分期IIB期4例，IIIA期11例，IIIB期15例，IV期24例。組織學(xué)分型腺癌18例，鱗癌23例，混合癌8例，大細(xì)胞癌5例。所有患者均對(duì)本次研究知情同意，并根據(jù)是否接受CIK細(xì)胞治療分為研究組28例與對(duì)照組26例。兩組患者一般資料比較具有均衡性，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.3 CIK細(xì)胞制備及治療方法

研究組患者在化療結(jié)束72 h后，于清晨安靜狀態(tài)下肝素鈉抗凝管抽取外周血50-100 ml，送至我院生物治療中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)分離、純化后，加入細(xì)胞培養(yǎng)液(所用CIK培養(yǎng)試劑均購(gòu)自北京五康生物公司)并置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)擴(kuò)增。至14天左右，當(dāng)CIK細(xì)胞總數(shù)達(dá)到5×109個(gè)以上，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)毒素、細(xì)菌、真菌、支原體等指標(biāo)均為陰性且臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)算細(xì)胞活率大于95%后，收集CIK細(xì)胞凍存?zhèn)溆?。研究組患者在化療結(jié)束72 h后開始CIK細(xì)胞回輸治療。無(wú)菌操作下，將復(fù)蘇的CIK細(xì)胞用生理鹽水洗滌2-3次，加入20%人血白蛋白5 ml，再重懸于200 ml生理鹽水?；颊呙咳蛰斠淮危看渭?xì)胞數(shù)量1×109左右，連續(xù)輸5天為一個(gè)療程，每次細(xì)胞發(fā)出后確保2 h內(nèi)回輸完畢。對(duì)照組僅接受常規(guī)化療方案。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 療效評(píng)價(jià) 所有患者均在接受2個(gè)療程以上治療后進(jìn)行療效評(píng)價(jià)。按照實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)(RECIST)分為完全緩解(complete remission，CR)、部分緩解(partial remission，PR)、穩(wěn)定( stable disease，SD)和進(jìn)展(progressive disease，PD)。有效率(response rate，RR)=(CR+PR)/總例數(shù)×100%，疾病控制率(disease control rate，DCR)=(CR+PR+SD)/總例數(shù)×100%。

1.4.2 安全性評(píng)價(jià) 對(duì)比觀察CIK細(xì)胞回輸過(guò)程中及回輸后患者有無(wú)不良反應(yīng)，如發(fā)熱等。并在一個(gè)療程完成后分別檢測(cè)2組患者的血常規(guī)、肝腎功能等指標(biāo)。

1.4.3 生活質(zhì)量評(píng)價(jià) 應(yīng)用卡氏評(píng)分(KPS)對(duì)比觀察研究組(CIK治療組)與單純化療組患者生活質(zhì)量改善情況。

1.4.4 生存分析 對(duì)比分析研究組與對(duì)照組的無(wú)進(jìn)展生存期(PFS)。PFS指從納入研究開始到疾病出現(xiàn)進(jìn)展或死亡時(shí)間。

1.4.5 免疫指標(biāo) 應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)2組患者治療前后的T細(xì)胞亞群改變，并對(duì)比分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 臨床療效評(píng)價(jià)

兩組患者在治療2個(gè)療程后進(jìn)行臨床療效評(píng)價(jià)，研究組有效率(RR)和疾病控制率(DCR)分別為35.7%與78.6%；對(duì)照組為30.8%與69.2%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩組有效率與疾病控制率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，詳細(xì)比較見表1。

表1 研究組與對(duì)照組臨床療效對(duì)比

2.2 安全性分析

兩組患者的主要毒性反應(yīng)為骨髓抑制及胃腸道反應(yīng)，表現(xiàn)為中性粒細(xì)胞減低、食欲下降、乏力、惡心、嘔吐等，研究組與對(duì)照組無(wú)明顯毒性反應(yīng)差異。CIK細(xì)胞治療組的患者常見不良反應(yīng)主要是發(fā)熱，研究組28例患者在治療期間出現(xiàn)發(fā)熱3例(10.7%)，但體溫均<38℃，經(jīng)過(guò)對(duì)癥處理后恢復(fù)正常。兩組患者均在一個(gè)療程結(jié)束后抽取靜脈血檢測(cè)血常規(guī)、肝腎功能，無(wú)明顯異常。

2.3 生活質(zhì)量評(píng)價(jià)

研究組KPS評(píng)分提高10分及以上者13例，穩(wěn)定10例，下降5例，提高率為46.4%(13/28)，明顯高于對(duì)照組23.1%(6/26)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同時(shí)對(duì)比治療后兩組患者的精神狀態(tài)、睡眠質(zhì)量、乏力、疼痛等指標(biāo)改善情況，研究組改善情況均顯著高于對(duì)照組，結(jié)果表明CIK細(xì)胞治療可以提高和改善患者的生活質(zhì)量。

2.4 生存分析

研究組和對(duì)照組患者中位PFS分別為6.8個(gè)月和6.2個(gè)月。研究組的PFS略長(zhǎng)于對(duì)照組，但兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

2.5 免疫指標(biāo)變化

流失細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示，開始CIK細(xì)胞治療前兩組間T淋巴細(xì)胞亞群水平無(wú)顯著差異(P>0.05)。研究期間，對(duì)照組進(jìn)行化療后T淋巴細(xì)胞亞群水平無(wú)明顯變化(P>0.05)。研究組在CIK細(xì)胞治療前后及與對(duì)照組治療后相比，T細(xì)胞亞群有明顯變化，表現(xiàn)為外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CD8+絕對(duì)計(jì)數(shù)無(wú)明顯變化(P>0.05)，見表2。

表2 兩組患者CIK治療前后T細(xì)胞亞群變化

注：對(duì)照組僅單純化療，研究組為化療+CIK治療；與對(duì)照組相比，*P<0.05

3 討論

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)以高發(fā)病率、高死亡率、低生存期[6]為特點(diǎn)，對(duì)患者的身體、心理和社會(huì)均造成嚴(yán)重打擊。因NSCLC發(fā)現(xiàn)確診已多為中晚期，故目前針對(duì)NSCLC患者的治療主要是放化療，但毒副反應(yīng)嚴(yán)重。生物治療是繼手術(shù)、放療、化療后的第四種治療模式[7]，近年來(lái)越來(lái)越受到人們的重視。CIK細(xì)胞目前被認(rèn)為是新一代的抗腫瘤過(guò)繼細(xì)胞免疫治療的首選方案[8]。CIK細(xì)胞是將人體外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)在體外用IL-2、抗CD3單抗、IFN-γ等多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)培養(yǎng)增殖后獲得的異質(zhì)性細(xì)胞群，同時(shí)具有T淋巴細(xì)胞抗瘤生物活性和NK細(xì)胞的非MHC限制性殺瘤特點(diǎn)[9,10]。CIK細(xì)胞體外培養(yǎng)增殖速度快、殺瘤活性高、具有提高機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答、降低腫瘤負(fù)荷、防止腫瘤復(fù)發(fā)等功能。其作用機(jī)制主要是CIK細(xì)胞被抗原或細(xì)胞因子刺激后，胞內(nèi)絲裂原活化蛋白激酶/細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(MAPK/ERK)通路和信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子(STAT)通路被激活后可分泌IL-2、IFN-γ 、TNF-α等多種細(xì)胞因子，可直接抑制腫瘤細(xì)胞增殖，并可通過(guò)調(diào)節(jié)Tregs細(xì)胞等增強(qiáng)機(jī)體免疫功能間接殺傷腫瘤細(xì)胞[11-13]；其次CIK細(xì)胞表面的NCR3等受體可與腫瘤細(xì)胞表面相應(yīng)抗原分子結(jié)合，CIK細(xì)胞活化后胞外分泌毒性顆粒，穿透、裂解腫瘤細(xì)胞，從而發(fā)揮殺傷作用[14-16]。

本研究從兩組(研究組與對(duì)照組)的近期臨床療效、安全性、生活質(zhì)量及免疫指標(biāo)變化等方面進(jìn)行對(duì)比分析，結(jié)果顯示研究組(化療+CIK治療)的臨床有效率及疾病控制率均高于對(duì)照組；研究組的KPS評(píng)分顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，表明CIK治療可明顯改善患者的生活質(zhì)量；研究組在CIK細(xì)胞治療后T細(xì)胞亞群有明顯改變，外周血CD3+、CD4+及CD4+/CD8+絕對(duì)計(jì)數(shù)明顯增加，表明CIK治療可提高改善患者的免疫功能，且治療期間并無(wú)明顯毒副作用。這與國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究報(bào)道結(jié)果相符[17,18]。

基于本次研究，對(duì)于中晚期的NSCLC患者，可采用化療聯(lián)合CIK治療方案，改善患者的生活質(zhì)量，具有良好的臨床應(yīng)用前景。

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河北省秦皇島市科技局科研計(jì)劃項(xiàng)目(201401A121)

1007-4287(2017)07-1155-03

R734.2

A

2016-06-26)

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