圍生期孕產婦感染或定植的B族鏈球菌的耐藥情況及基因型研究

吳俊蘭++錢碧霞

[摘要] 目的 對圍生期孕產婦感染或定植的B族鏈球菌的耐藥情況及基因型進行研究，為臨床治療提供科學依據(jù)。方法 在2015年1月～2016年12月期間，選取780例圍生期孕婦生殖道分泌物，運用GBS培養(yǎng)鑒定和藥敏試驗，統(tǒng)計分析其結果。 結果 780例孕婦的GBS攜帶者共檢出245例，帶菌率達到31.4%。低于30歲組的帶菌率為28.6%，同30歲以上（包括30歲）的帶菌率40.5%對比，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=20.124，P<0.05）。D-抑菌圈試驗陽性率23.9%；萬古霉素和利奈唑胺的耐藥率為0%，青霉素為0.7%，氨芐西林為3.2%，頭孢曲松為6.7%，呋喃妥因為9.4%，左氧氟沙星為21.9%，克林霉素為23.7%，紅霉素為29.9%，四環(huán)素為58.2%。 結論 該區(qū)圍生期孕產婦生殖道的GBS帶菌率較高，感染率最高的是高齡孕婦；同時，圍生期孕婦感染GBS對萬古霉素、頭孢曲松、青霉素、呋喃妥因和氨芐西林的敏感率較高。

[關鍵詞] B族鏈球菌；圍生期；帶菌率；孕婦；藥敏試驗

[中圖分類號] R714.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2017）18-0012-04

Resistance and genotype of B streptococcus infected or colonized in perinatal pregnant woman

WU Junlan QIAN Bixia

Department of Breast Surgery， Lishui City Maternal and Child Health Hospital in Zhejiang Province， Lishui 323000， China

[Abstract] Objective To analyze the infection and drug resistance of B group streptococcus（GBS） in perinatal pregnant women， as a basis for clinicians to develop effective prevention and treatment measures. Methods The reproductive tract secretions of 780 perinatal pregnant women from January 2015 to December 2016 were examined by GBS culture and susceptibility testing， and the results were analyzed statistically. Results A total of 245 GBS carriers were detected in 780 pregnant women， and the carrier rate was 31.4%.The carrier rate of the below 30-year-old group was 28.6%， and the difference was statistically significant compared with 40.5% of the more than 30 years old group（including 30 years old） （χ2=20.124， P<0.05）. The resistance rate of vancomycin and linezolid was 0%. And the resistant rates of penicillin， ampicillin， ceftriaxone， nitrofurantoin， levofloxacin， clindamycin， erythromycin and tetracycline were 0.7%， 3.2%， 6.7%， 9.4%， 21.9%， 23.7%， 29.9% and 58.2% respectively. The positive rate of D-inhibition zone test was 23.9%. Conclusion GBS carrier rate of pregnant women in this area is high， and older women are more susceptible to infection. The sensitivity of perinatal pregnant women infected with GBS is higher than that of vancomycin， ceftriaxone， penicillin， nitrofurantoin and ampicillin.

[Key words] Group B streptococci； Perinatal period； Carrier rate； Pregnant women； Drug susceptibility test

B族鏈球菌（GBS）是β溶血需氧革蘭陽性鏈球菌，也被稱為鏈球菌。GBS在人體的定植部位主要是陰道和肛周，GBS病菌極易造成新生兒和孕婦感染，多數(shù)新生兒感染GBS同母嬰遲滯傳播存在聯(lián)系。GBS病菌感染孕婦泌尿系統(tǒng)，同時會引發(fā)產婦的產后敗血癥等，嚴重的甚至會導致孕婦胎膜早破、早產、嬰兒生長受限等情況，GBS屬于生產期感染的首要致病菌[1-3]。本文旨在分析圍生期孕婦生殖道B族鏈球菌感染及耐藥性，現(xiàn)將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將我院從2015年1月～2016年12月產科門診就診或是住院的圍產期孕婦780例作為研究對象，孕產期36～41周，年齡22～39歲。按照年齡對上述孕婦實施分組，≥30歲185例，孕產期36～40周，年齡30～39歲，平均（35.1±4.2）歲；<30歲595例，孕產期36～41周，年齡22～29歲，平均（25.7±3.8）歲。排除2周內攝入抗生素和伴復雜內科疾病的孕婦。此次研究所選的孕婦了解本次研究內容并且自愿參與。

1.2 標本采集

此次研究中的孕婦生殖道分泌物采集均由婦產科醫(yī)生執(zhí)行，孕婦在采樣前14 d內不能使用抗生素，并且取樣位置切忌接觸任何洗液以及栓劑，要在不清潔的情況下用消毒窺陰器擴張孕婦陰道，使用無菌棉拭子對孕婦陰道下部1/3的分泌物進行擦拭，然后在半小時內送檢。

1.3 標本處理

使用血瓊脂對送檢無菌棉拭子接種，并且孵育在35℃、5% CO2培養(yǎng)箱中18～24 h。觀察和挑選特征菌種，分純、培養(yǎng)、涂片、鏡檢（革蘭染色），最后生化鑒定得出結論。采用生物梅里埃VITEK2細菌檢定儀對菌株進行鑒定，采用配套卡片并實行藥敏試驗。鑒定方法主要依據(jù)全國檢驗操作規(guī)程，質控菌株是肺炎鏈球菌ATCC49619，按照2012美國臨床實驗室協(xié)會M100-S22文件判讀。針對紅霉素耐藥、中介GBS菌株實施擴散D-抑菌圈試驗。使用英克林霉素紙片2 μg、紅霉素紙片15 μg、OXOID紙片，紙片內含5%綿羊血Mueller-Hinton瓊脂培養(yǎng)基，紙片之間的距離為12 mm，并且孵育在35℃、5%CO2內長達20～24 h。

1.4 統(tǒng)計學方法

所有收集到的數(shù)據(jù)均用WPS表格建立數(shù)據(jù)庫，然后導入SPSS18.0中文版，進行統(tǒng)計學運算，計數(shù)資料用%表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1 圍生期孕婦GBS帶菌率

780例中檢出攜帶GBS共245例，帶菌率高達31.4%。<30歲組帶菌率是28.6%，與≥30歲（40.5%）帶菌率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

2.2孕婦感染GBS耐藥性

GBS陽性標本共245株，進行藥敏試驗后得到如下結果，D-抑菌圈試驗陽性率23.9%；萬古霉素和利奈唑胺的耐藥率為0%，青霉素為0.7%，氨芐西林為3.2%，頭孢曲松為6.7%，呋喃妥因為9.4%，左氧氟沙星為21.9%，克林霉素為23.7%，紅霉素為29.9%，四環(huán)素為58.2%。見表2。

3討論

妊娠期GBS感染易造成嬰兒感染，導致新生兒出現(xiàn)敗血癥、腦膜炎等。為充分降低該病菌圍生期感染，實行孕婦GBS篩查十分有必要，并且對GBS的感染預防及治療具有重要意義[4-7]。GBS在孕婦身上定植的臨床表現(xiàn)主要有以下3個：陰道瘙癢、陰道的分泌物變多、尿頻。此次研究內的GBS陽性者癥狀發(fā)生率明顯要高于GBS陰性者，但是其并沒有較為典型的臨床癥狀，給該病菌感染的確診造成了一定的困難。實驗室在診斷GBS中的經典手段為細菌培養(yǎng)，但是其需要耗費大量時間，GBS分離培養(yǎng)和鑒別診斷操作很復雜；血清學GBS檢測耗時短，但假陰性和假陽性率較高[8-10]。而熒光定量聚合酶鏈式反應被認為是最佳的GBS檢測法，最大的特點是快速、準確和高敏，受到條件限制，當前僅有三級醫(yī)院能夠實行該檢測。

關于GBS的診斷，細菌學檢查是診斷GBS感染的基本方法，借助從血液、腦脊液或是感染病灶內分離出的病原菌就能夠被確診。但是從胃液、皮膚、黏膜、氣管吸入物分離的GBS無法被確診為GBS感染?？焖倏乖瓩z測法能夠從體液內直接檢測出GBS抗原，比較常用的方法為乳膠凝集試驗（LA）、協(xié)同凝集試驗（COA）、對流免疫電泳（CIE）等，其敏感性要比培養(yǎng)低，但是對產前已經使用了抗生素治療的母親或是嬰兒以及非菌敗血癥的監(jiān)測很有用?？乖瓩z測具有假陽性，因此抗原檢測的陽性結果只能提示可能存在GBS感染，無法以此來確診是GBS的全身感染，并且還要結合感染的臨床表現(xiàn)進行綜合判斷，快速的抗原檢測能夠用在婦女分娩時的篩查[11-15]。

在GBS的預防中，最常用的只有化學預防和免疫預防這兩種，母親帶菌是新生兒早發(fā)GBS感染的主要病因，并且多出現(xiàn)在子宮中，對此美國CDC提出要選擇性地對孕婦實行化學預防?；瘜W預防策略主要有以培養(yǎng)為依據(jù)的預防策略[16-19]。全部孕產婦有如下情況，分娩在37周內，孕產婦存在GBS菌血癥或前一胎有GBS感染；雖無上述情況但是未做培養(yǎng)或是已經做培養(yǎng)結果未知或是培養(yǎng)結果是陽性；雖然培養(yǎng)陰性但是產褥期發(fā)熱超過38℃，胎膜早破在12 h以上，必須要給予藥物治療。以危險因素為唯一依據(jù)的預防策略，胎齡在37周內分娩，產前胎膜早破大于12 h，產時體溫≥38℃，以前曾分娩出GBS感染嬰兒，孕期存在GBS菌尿，上述存在一項及以上的病史及癥狀的孕婦都要給予藥物預防。

免疫預防主要是使用蛋白-莢膜多糖結合疫苗預防。該類疫苗的作用已經得到動物實驗的證實，給動物注射疫苗以后可以使其產生特異性IgG抗體，而且吞噬調理的作用也顯著增強，進而能夠有效防止GBS感染。但是當前這種蛋白結合疫苗并未在臨床上被使用，一旦使用將會對全部的育齡婦女實行免疫保護，實現(xiàn)新生兒免受GBS的感染。

妊娠期女性GBS帶菌率受到采集時間、部位和檢測方法等的影響，各國家以及地區(qū)差異很大[20-21]。如北京地區(qū)孕婦帶菌率為7.1%，而上海的孕婦帶菌率為3.7%，桂林為7.5%，南京為4.2%。此次研究在2015年1月～2017年1月期間，對780例圍生期孕婦生殖道分泌物實行GBS培養(yǎng)鑒定和藥敏試驗，同時針對結果實行統(tǒng)計學分析。在780例孕婦內一共檢出GBS攜帶者245例，帶菌率達到31.4%。低于30歲組的帶菌率為28.6%，同30歲以上（包括30歲）的帶菌率40.5%對比，差異存在統(tǒng)計學意義（χ2=20.124，P<0.05）。高于30歲的孕婦的GBS帶菌率要明顯高于小于30歲的女性，可能是因為超過30歲的女性和低于30歲的女性比較，導致人工流產人數(shù)和概率相應的也會增加，在妊娠期女性的雌激素水平相對會高一些，以上因素會造成生殖道細菌微環(huán)境的變化，在相關的研究報道中[22-24]，30歲以上的孕婦生殖道中GBS更易滋生及繁殖。

抗生素對防治圍生期孕婦感染GBS十分有效，并且能在一定程度上降低新生兒感染和死亡率。美疾病預防控制中心建議孕婦GBS感染者借助青霉素G以及氨芐青霉素進行防治，若是孕婦對以上藥物存在過敏，則換為克林霉素、紅霉素。此次試驗內分離出245株GBS，對其具有抗菌性的10種藥物：萬古霉素和利奈唑胺的耐藥率為0%，青霉素為0.7%，氨芐西林為3.2%，頭孢曲松為6.7%，呋喃妥因為9.4%，左氧氟沙星為21.9%，克林霉素為23.7%，紅霉素為29.9%，四環(huán)素為58.2%；D-抑菌圈試驗陽性率23.9%。依據(jù)藥敏結果調整用藥，對于孕婦感染GBS患者的預防和治療都具有重要意義。

綜上所述，該區(qū)孕婦的GBS帶菌率較高，高齡孕婦的感染者最多，同時，圍生期孕婦感染GBS對萬古霉素、青霉素、頭孢曲松、呋喃妥因和氨芐西林的敏感率較高，可更精確和有效地為圍生期孕婦使用抗生素預防和治療GBS感染提供有利參考。

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（收稿日期：2017-03-07）