姜少霞
(山東省萊西市人民醫(yī)院檢驗科,山東萊西266600)
全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗在沙門菌臨床檢驗中的作用分析
姜少霞
(山東省萊西市人民醫(yī)院檢驗科,山東萊西266600)
目的探討全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗在沙門菌臨床檢驗中的作用。方法選取本院2015年1月~2016年2月期間診治的腸熱癥患者71例作研究對象,并參照隨機抽簽方法予以分組,研究組(n=36)應(yīng)用全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗法,對照組(n=35)應(yīng)用常規(guī)檢驗法,對比2組患者的沙門菌檢驗陽性率。結(jié)果研究組患者的沙門菌陽性率是91.67%,遠高于對照組患者的74.29%(P<0.05)。結(jié)論全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗在沙門菌臨床檢驗中有積極作用,可提升沙門菌的陽性率,降低漏診等不良事件的發(fā)生率。
全面生化反應(yīng);血清學(xué)檢驗;沙門菌;陽性率
在我國市場經(jīng)濟持續(xù)發(fā)展、人們生活水平日益提升的大背景下,越來越多人傾向于外出就餐,而對于食物多樣化要求也日益提升,但人們普遍忽略了外出飲食衛(wèi)生問題。據(jù)調(diào)查[1],在全球食物中毒有關(guān)事件中,沙門氏菌作為致病細菌之一,其所占比率位居榜首。沙門氏菌通常生存在人或動物腸道中,而動物與人一旦被沙門氏菌感染,即可表現(xiàn)出惡心、嘔吐等癥狀,甚至進展為脫水、休克等,對患者生命安全造成威脅。因此,采取相應(yīng)檢驗手段提高沙門氏菌檢出率,對于患者疾病早期確診、及時治療等均有重要臨床意義。腸熱癥是沙門氏菌所致疾病中發(fā)生率最高的一種,而本研究為明確全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗在沙門菌臨床檢驗中的作用,將71例腸熱癥患者隨機分組,分別采取全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗法、常規(guī)檢驗法,現(xiàn)報道兩組患者沙門氏菌陽性率如下。
1.1 臨床資料納入本次研究的71例腸熱癥患者均為醫(yī)院自2015年1月~2016年2月收治,均已在參與此次研究前簽署了知情同意書,隨機將其分成研究組與對照組,2組分別是36例與35例。其中,研究組中男18例,女18例,年齡22~49歲,平均年齡(32.78±4.17)歲;對照組中男19例,女16例,年齡21~48歲,平均年齡(32.79±4.15)歲;兩組患者的性別、年齡等基線資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,可對比。
1.2 檢驗方法研究組應(yīng)用全面生化反應(yīng)和血清學(xué)檢測法,其檢驗流程和檢驗內(nèi)容如下:(1)選取設(shè)備與材料:檢驗設(shè)備包括均質(zhì)器、顯微鏡、天平、溫箱、滅菌平皿等,材料則包括玻璃棒、橡皮乳頭、鎳絡(luò)絲、酒精燈和接種棒等。同時,為配制試劑、培養(yǎng)基等,還需采取各種瓊脂、增菌液,如HE瓊脂、MgC12孔雀綠增菌液、四硫酸鈉增菌液以及亞硫酸鉍瓊脂等。另外,還需準(zhǔn)備氰化鉀培養(yǎng)基、氨基酸脫羧酶培養(yǎng)基;(2)樣本采集。研究組采集樣本時,需根據(jù)患者實際病情操作,即除血液采集之外,還需采集部分患者的骨髓液。其中,采集血液的時間為入院7d后,而采集骨髓液時間是入院21 d后。另外,對于部分患者還需采集其尿液、糞便、嘔吐物和食物,采集糞便、尿液的時間是入院14 d后。如果患者處于疾病發(fā)作急性期,則想在用藥前完成糞便采集。尿液需予以30 000 r/min的離心處理并沉淀為樣本;若患者有疑似沙門氏菌食物中毒情況,則需采集其所進食食物;(3)鑒定方法:研究組需在完成凝集工作后,再行血清學(xué)檢驗。因為大部分沙門氏菌是在A到F群,凝集時需應(yīng)用A到F多價O血清凝集,隨后對血清因子予以定群處理,即將6個O群因子血清予以定群,再使用H因子血清相進行凝集,讓第一相、第二相凝集,并以凝集結(jié)果作血清型的判定標(biāo)準(zhǔn)。而全面生化反應(yīng)檢驗,是先挑出可疑菌落,接種到TSI瓊脂內(nèi),對于瓊脂中所發(fā)生反應(yīng)予以觀察。若瓊脂中有斜面產(chǎn)酸現(xiàn)象,同時有硫化氫陰性菌株,則排除;接種TSI瓊脂時,注意選取蛋白陳水,并接種尿素瓊脂、拉氨酸脫羧酶等進行培養(yǎng),將周圍環(huán)境溫度控制于35℃~37℃,其培養(yǎng)時間需在1 d及以上。
對照組采取常規(guī)檢驗法,即使用過氧化氫酶檢測患者體內(nèi)的沙門氏菌。
1.3 觀察指標(biāo)(1)沙門菌的全面生化反應(yīng)實驗的陽性檢驗標(biāo)準(zhǔn)[2]:液面試劑是紅色,為陽性;液面試劑是黃色,提示為陰性;(2)血清學(xué)實驗的陽性檢驗標(biāo)準(zhǔn)[3]:傷寒沙門菌O凝聚效價在1:80及以上,H凝聚效價在1:160及以上,副傷寒沙門菌的H凝聚效價在1:80及以上,提示沙門菌的抗血清呈現(xiàn)為陽性。
1.4 統(tǒng)計學(xué)方法本研究中資料均應(yīng)用SPSS17.0軟件分析。計數(shù)資料以例數(shù)(n)表示,其組間率(%)對比則以χ2檢驗分析;計量資料以“x±s”表示,2組計量資料對比則接受t檢驗;P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
研究組患者的沙門菌陽性率是91.67%,對照組患者的沙門菌陽性率是74.29%,2組患者沙門菌陽性率的組間對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。
當(dāng)今時代,盡管食品衛(wèi)生問題是常見熱點話題之一,但一直未得到人們充分重視,導(dǎo)致食品中毒事件時有發(fā)生,對人民群眾身體健康造成一定威脅。根據(jù)有關(guān)調(diào)查研究報告證明[4],不衛(wèi)生食物中多數(shù)含有大量致病菌,且沙門菌所占比率最高。沙門菌是一大群抗原構(gòu)造、形態(tài)和生化性狀相近的革蘭陰性桿菌[5],廣泛存在于自然界,是一種腸桿菌科的致病因素,可引發(fā)胃腸道病癥,以腸熱癥最為常見。腸熱癥是副傷寒病、傷寒病總稱,好發(fā)于老年人和嬰幼兒,主要由腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌等所導(dǎo)致[6],患者主要臨床癥狀包括惡心、嘔吐、水樣排泄物和高熱等,嚴(yán)重者有腎衰竭、脫水和休克等臨床表現(xiàn)。傳統(tǒng)臨床上使用的過氧化氫酶檢測法,即常規(guī)檢驗方法,其在腸熱癥臨床檢查中有一定使用價值,然而常規(guī)檢驗法存在設(shè)備不足、容易受到外界因素如溫度等的影響[7],導(dǎo)致其檢驗準(zhǔn)確性不高,需另選其他檢測方法提升其檢驗準(zhǔn)確率。
全面生化反應(yīng)實驗,是收集可疑菌落,使用氨基酸脫羧酶、尿素瓊脂培養(yǎng)[8],并依據(jù)其顏色判定其屬于陰性或者陽性,而陽性者即可確定為沙門氏菌。隨后,采取血清學(xué)檢驗法證明其生化反應(yīng)的檢驗結(jié)果,即凝聚可疑菌落和相應(yīng)抗體,以混合后的生理鹽水檢測其是否存在顆粒沉淀情況,以此評估其是否為沙門菌。根據(jù)本組研究結(jié)果得知,研究組患者的沙門菌陽性率是91.67%,明顯較對照組的74.29%高,可見全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗法應(yīng)用于沙門菌臨床檢驗中的檢測效果更佳,優(yōu)于常規(guī)檢驗方法。另外,沙門菌容易誘發(fā)腸道病,因而在檢驗期間需注意維護檢驗操作環(huán)境,避免分離菌、防陽性對照菌破壞檢驗環(huán)境。同時,對于生化實驗、血清檢驗設(shè)備儀器等,需在檢驗前后作相應(yīng)清洗、消毒處理,以免致病菌擴散。
綜上所述,全面生化反應(yīng)與血清學(xué)檢驗法應(yīng)用于沙門菌臨床檢驗中效果確切,可顯著提高沙門菌檢驗陽性率,從而避免漏診、誤診現(xiàn)象發(fā)生,并為患者治療方案的制定提供理論依據(jù)。
表1 兩組患者沙門菌陽性率對比(n)
[1]金輝,王世蓉,周麗杰.論全面生化反應(yīng)和血清學(xué)在沙門菌臨床檢驗中的應(yīng)用研究[J].中國保健營養(yǎng),2012,22(10):1241.
[2]徐君.全面生化反應(yīng)在急性腹瀉患者沙門氏菌檢測中檢驗中的應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè),2012,9(16):116.
[3]柳清梅.沙門菌臨床檢驗中全面生化反應(yīng)和血清學(xué)檢驗的應(yīng)用分析[J].中國實用醫(yī)刊,2014,41(23):68-70.
[4]王玉霞.梅毒螺旋體的血清學(xué)檢驗與臨床應(yīng)用[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2015,21(18):58-59.
[5]黃福海,潘旭東.高膽紅素血癥患兒肝腎功能及心肌酶血清學(xué)水平的變化分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2015,21(14):23-24.
[6]楊賢斌.全面生化反應(yīng)和血清學(xué)檢驗在沙門菌臨床檢驗中的應(yīng)用效[J].求醫(yī)問藥,2013,11(9):175-176.
[7]宿飛,沈福杰,王怡珺,等.上海市黃浦區(qū)2008-2011年沙門菌感染流行病學(xué)分析[J].上海預(yù)防醫(yī)學(xué),2013,25(1):4-6,16.
[8]秦麗云,郭玉梅,呂國平,等.2011至2012年石家莊地區(qū)沙門菌食物中毒分離株分子流行病學(xué)特征[J].微生物學(xué)雜志,2014,34(1):84-87.
10.3969/j.issn.1009-4393.2017.19.023