利用華支睪吸蟲的排卵規(guī)律和消炎利膽片提高蟲卵檢出率的研究*

戴 芳，王 新，黃冬梅，馬貞麗

(廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院，廣西南寧 530001)

華支睪吸蟲病又稱肝吸蟲病，由于食用未經(jīng)煮熟且含有華支睪吸蟲囊蚴的淡水魚、蝦而感染，是危害人體健康的食源性寄生蟲病，華支睪吸蟲主要寄生于人體的膽管內(nèi)，輕度感染者多數(shù)癥狀不明顯，嚴(yán)重感染者可出現(xiàn)消化功能紊亂、肝區(qū)疼痛、膽結(jié)石、黃疸等，晚期患者常伴有肝硬化、肝膽管癌等[1]。華支睪吸蟲病在中國主要流行于廣東、廣西、遼寧和黑龍江等省份，廣西近年來發(fā)病率逐步上升[2-6]。該病的病原學(xué)檢查依據(jù)是在糞便、膽汁或十二指腸液中檢出華支睪吸蟲卵，通常采用水洗沉淀法、改良加藤厚涂片法和醚醛沉淀法等方法查找華支睪吸蟲卵[7]；而血清學(xué)檢查一般是采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測肝吸蟲免疫球蛋白G(IgG)抗體，其結(jié)果只能作為輔助診斷指標(biāo)。但在診療過程中，肝吸蟲IgG抗體陽性的患者中，卻有一小部分患者在糞便標(biāo)本中找不到蟲卵，這就給華支睪吸蟲病的臨床確診帶來很大困難，因此，進(jìn)一步提高華支睪吸蟲蟲卵的檢出率對(duì)提高華支睪吸蟲病的臨床診治效果有重要意義。本研究探討了利用消炎利膽片和華支睪吸蟲的排卵規(guī)律來提高糞便標(biāo)本中蟲卵的檢出率，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年3月至2018年2月在本院就診的門診和住院疑似華支睪吸蟲感染患者300例，其中男性210例，女性90例，平均(45.3±23.6)歲，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)有食生魚史者；(2)靜脈血清肝吸蟲IgG抗體陽性者；排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)服用驅(qū)蟲藥者。將患者隨機(jī)分成3組，3組間在年齡、性別上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2儀器與試劑 光學(xué)顯微鏡購自日本奧林巴斯株式會(huì)社，型號(hào)CX31；博賽1210酶標(biāo)儀、湘儀離心機(jī)、肝吸蟲IgG抗體檢測試劑盒均購自中國深圳華康生物工程有限公司；甲醛購自中國廣東汕頭市西隴化工廠；乙醚購自中國天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；改良加藤厚涂片法寄生蟲試劑盒檢測制片盒購自中國廣州市宜康生物科技有限公司；消炎利膽片購自中國廣東新峰藥業(yè)股份有限公司。

1.3方法

1.3.1血清學(xué)檢查 收集疑似患者的血清樣本，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血樣中華支睪吸蟲IgG。由專業(yè)人員按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，以630 nm下吸光度值(A)大于陰性對(duì)照2.1倍為陽性結(jié)果。

1.3.2蟲卵檢測方法 將符合條件的病例隨機(jī)分為3組，第1組為常規(guī)方法留取標(biāo)本的對(duì)照組，即患者連續(xù)留取3 d的糞便標(biāo)本送檢；第2組為服用利膽片組，患者按醫(yī)囑連續(xù)服用利膽片6 d，在服用第4日開始連續(xù)留取3 d的糞便標(biāo)本送檢；第3組則根據(jù)華支睪吸蟲的排卵周期，分別于第1、10、20日留取糞便標(biāo)本送檢。送檢的糞便標(biāo)本均同時(shí)采用改良加藤厚涂片法、水洗沉淀法和醚醛沉淀法3種方法檢測，只要其中一種方法找到華支睪吸蟲卵，即報(bào)告為檢出華支睪吸蟲卵，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)3組資料的檢測結(jié)果用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析。

2 結(jié) 果

2.13組糞便標(biāo)本華支睪吸蟲卵檢出率比較 第1組(常規(guī)組)病例中有76例檢測到華支睪吸蟲卵，陽性率為76.0%；第2組(服用消炎利膽片組)病例中有93例找到華支睪吸蟲卵，陽性率為93.0%；第3組(利用華支睪吸蟲排卵周期檢測組)病例中，有91例找到華支睪吸蟲卵，陽性率為91.0%。三組的檢出率用χ2檢驗(yàn)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中第2組和第3組的檢出率明顯高于第1組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而第2組和第3組的檢出率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組糞便標(biāo)本華支睪吸蟲卵檢出率比較

注：與第1組相比，*P<0.05；與第2組相比，#P>0.05。

3 討 論

華支睪吸蟲病的危害相當(dāng)大，2009年華支睪吸蟲感染被世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機(jī)構(gòu)確定為膽管癌Ⅰ類致癌因素[8]。有報(bào)道稱從2016-2018年，廣西肝吸蟲IgG抗體陽性率分別為21.83%、29.88%和36.48%，陽性率逐年增高[6]。該疾病的病原學(xué)檢查，是以在糞便、膽汁或十二指腸液中檢查出華支睪吸蟲卵為確診該病的依據(jù)。雖然檢測方法學(xué)在不斷地發(fā)展，但糞便中找華支睪吸蟲卵的檢出率仍然難以讓人滿意，分析原因有以下幾點(diǎn)(1)華支睪吸蟲長期寄生在人體的膽道系統(tǒng)，成蟲在肝膽管內(nèi)破壞膽管上皮和黏膜下血管，再加上蟲體的分泌物、代謝產(chǎn)物和機(jī)械刺激等因素的作用，可引起膽道的一系列病理改變，可表現(xiàn)為膽管炎、膽囊炎和膽結(jié)石等，導(dǎo)致膽管不同程度擴(kuò)張，膽管壁粗糙、增厚，甚至堵塞，蟲卵排入腸道不順暢和排不出來；(2)華支睪吸蟲的排卵是有規(guī)律的，平均22～34 d為1個(gè)周期[9]；(3)部分華支睪吸蟲病病例只是輕度感染，蟲少排卵也少，檢出率也低。因此，必須采取有針對(duì)性的措施來進(jìn)一步提高華支睪吸蟲蟲卵的檢出率。研究表明，消炎利膽片由溪黃草、穿心蓮、苦木等多種中草藥研制而成的一種中藥復(fù)方制劑，其中溪黃草有清熱利濕、逐瘀利膽的作用；穿心蓮、苦木，二者均可清熱解毒、燥濕瀉火，合用可共奏清熱燥濕、逐瘀利膽之功。現(xiàn)代藥理學(xué)證明，消炎利膽片中的溪黃草、穿心蓮還具有抗菌、抗炎、抗病毒、護(hù)肝及解熱等多種作用，能夠有效抑制炎性物質(zhì)[10-13]。因此，消炎利膽片能刺激肝臟分泌膽汁，促進(jìn)膽囊收縮，促進(jìn)膽汁的排泄，減少膽汁的淤積，使膽管內(nèi)的蟲卵能更順利被排出膽管，本研究中，服用消炎利膽片組檢出蟲卵率明顯高于常規(guī)組(P<0.05)，說明利用消炎利膽片的這些功效能明顯提高華支睪吸蟲卵的檢出率。特別是華支睪吸蟲嚴(yán)重感染、兼有膽管炎或膽結(jié)石的患者，往往會(huì)出現(xiàn)膽管壁不光滑或有膽結(jié)石的阻塞，導(dǎo)致蟲卵排出不順暢的情況，用消炎利膽片來提高華支睪吸蟲卵的檢出率效果更為明顯。而華支睪吸蟲輕度感染者，其糞便中的蟲卵較少，本研究中，根據(jù)華支睪吸蟲的排卵周期、增加檢測次數(shù)和多點(diǎn)采樣糞便標(biāo)本來提高檢出率，分別于第1、10、20天留取糞便標(biāo)本，檢出率達(dá)到91.0%，檢出華支睪吸蟲蟲卵率亦明顯高于常規(guī)組(P<0.05)，說明利用華支睪吸蟲的排卵規(guī)律間隔一定的時(shí)間多次留取大便比連續(xù)留取3日的傳統(tǒng)方法檢出率更高，更利于臨床確診。

綜上所述，對(duì)于有食用未煮熟的淡水魚蝦史，且肝吸蟲抗體陽性者，建議連續(xù)服用6日的消炎利膽片，從第4日開始連續(xù)留取3日的糞便標(biāo)本送檢；如果不愿口服消炎利膽片者，可分別于第1、10、20日留取糞便標(biāo)本送檢，這兩種留取糞便標(biāo)本的方法較傳統(tǒng)方法都能明顯提高華支睪吸蟲的檢出率。這樣就有更多的華支睪吸蟲病患者能被明確診斷，這不僅能提高華支睪吸蟲病的臨床診治效果，也能減少濫用驅(qū)蟲藥物，降低藥物對(duì)人體的傷害。