LGR5參與了肝癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化

鄒來(lái)賓 王健 吳佳勉 嵇騰飛 曹天生

LGR5參與了肝癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化

鄒來(lái)賓 王健 吳佳勉 嵇騰飛 曹天生

目的研究LGR5與原發(fā)性肝癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）間的關(guān)系。方法采用免疫組織化學(xué)的方法（SP法）分別檢測(cè)20例原發(fā)性肝癌組織、20例癌旁組織及14例正常肝組織中LGR5、E?鈣粘蛋白（E?CAD）及N?鈣粘蛋白（N?CAD）的表達(dá)情況。并分析它們與原發(fā)性肝癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。結(jié)果①LGR5、E?CAD、N?CAD的表達(dá)：在20例肝癌組織中，LGR5、E?鈣粘蛋白、N?鈣粘蛋白的陽(yáng)性表達(dá)分別為15例（75%）、7例（35%）及16例（80%）。在20例癌旁組織中，陽(yáng)性表達(dá)分別為11例（55%）、11例（55%）及10例（55%）。在14例正常肝組織中，陽(yáng)性表達(dá)分別為例4（29%）、11例（79%）及4例（29%）。統(tǒng)計(jì)分析表明，LGR5在肝癌中的陽(yáng)性表達(dá)率均明顯高于癌旁及正常組織（Ρ＜0.05）。而E?鈣粘蛋白在肝癌中的陽(yáng)性表達(dá)率則明顯低于癌旁及正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)（Ρ＜0.05）。同時(shí)，N?鈣粘蛋白在肝癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于癌旁及正常組織（Ρ＜0.05）。②LGR5、E-鈣粘蛋白、N-鈣粘蛋白在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)與臨床病例參數(shù)的關(guān)系：LGR5的表達(dá)與患者術(shù)前肝功能有關(guān)（Ρ＜0.05），而與患者的年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、分級(jí)、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等無(wú)關(guān)（Ρ＞0.05）；E-CAD的表達(dá)與術(shù)前肝功能、年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、分級(jí)、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等均無(wú)關(guān)（Ρ均＞0.05）；N-CAD的表達(dá)與患者的術(shù)前肝功能、年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、分級(jí)、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等均無(wú)關(guān)（Ρ均＞0.05）。結(jié)論原發(fā)性肝癌中存在明顯的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象；LGR5與原發(fā)性肝癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化有關(guān)，可能是通過(guò)Wnt/β?catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路介導(dǎo)原發(fā)性肝癌的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。

LGR5；原發(fā)性肝癌；上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化；關(guān)系

0 引言

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，原發(fā)性肝癌的診療技術(shù)不斷提高，患者的平均生存時(shí)間有所延長(zhǎng)，但其死亡率仍居高不下，5年生存率依然維持在較低水平（約為5%）。導(dǎo)致這一結(jié)果最主要的原因是原發(fā)性肝癌易早期出現(xiàn)復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，而這也是導(dǎo)致肝癌臨床治療失敗的根本原因。因此，對(duì)于原發(fā)性肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制的研究具有重要意義。而目前上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化已被證實(shí)為腫瘤細(xì)胞發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的重要表型，其對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移具有重要作用［1，2］。E?鈣粘蛋白（E?cad?herin，E?CAD）、N?鈣粘蛋白（N?cadherin，N?CAD）作為上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial?mesenchymal transi?tion，EMT）的特征性分子標(biāo)記物，其在腫瘤中的表達(dá)可發(fā)生明顯改變。這提示我們可以通過(guò)檢測(cè)上皮表型E?CAD及間質(zhì)表型N?CAD的表達(dá)情況來(lái)研究腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。富含亮氨酸重復(fù)序列G?蛋白偶聯(lián)受體5（leucine?rich repeat?containing G?protein?coupled receptor 5，LGR5）是G蛋白偶聯(lián)受體超家族視紫紅質(zhì)亞家族的成員［3］。研究發(fā)現(xiàn)，LGR5在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及腫瘤細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中具有重要作用［4］。但LGR5在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中作用的機(jī)制還不十分清楚，LGR5在原發(fā)性肝癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中通過(guò)誘導(dǎo)EMT的過(guò)程也不十分清楚。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組化的實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)LGR5、E?CAD及N?CAD在原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)情況，從而探討LGR5與原發(fā)性肝癌EMT的關(guān)系，希望能為原發(fā)性肝癌的診治、預(yù)防提供新的理論基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1材料與方法

1.1 一般資料

20例肝癌組織及癌旁組織均取自花都區(qū)人民醫(yī)院普通外科2011年7月-2016年6月的原發(fā)性肝癌手術(shù)患者，而14例正常肝組織取自花都區(qū)人民醫(yī)院普通外科肝血管瘤患者，且均經(jīng)我院病理科證實(shí)。其中男性患者16例（80%），女性患者4例（20%）；年齡為36～68歲，中位年齡約為（48.4±11.3）歲。TNM腫瘤分期，Ⅰ期患者16例（80%），Ⅱ期患者2例（10%），Ⅲ期患者1例（5.0%），Ⅳ期患者1例（5.0%）；病理分級(jí)Ⅰ級(jí)患者1例（5.0%），Ⅱ期患者19例（95%）。同時(shí)患者均為首次發(fā)病住院治療，術(shù)前均未接受與原發(fā)性肝癌有關(guān)的處理。所有的組織標(biāo)本用福爾馬林固定，并進(jìn)行石蠟包埋，制成組織蠟塊，便于保存。同時(shí)收集患者的臨床病理資料包括患者的年齡、性別、術(shù)前肝功能、術(shù)前甲胎蛋白、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、分級(jí)、HBV、肝硬化等。S?P免疫組織化學(xué)超敏試劑盒、DAB顯色試劑盒、抗人E?鈣粘蛋白單克隆抗體、N?鈣粘蛋白抗體、LGR5抗體、GR抗體均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)步驟

取出石蠟包塊進(jìn)行連續(xù)切片，切片貼于載玻片上，然后放入70℃的烘箱中烤片熔蠟，常規(guī)脫蠟至水后將切片放入3%過(guò)氧化氫溶液中10min滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，然后用微波修復(fù)法修復(fù)切片組織標(biāo)本中的抗原；將50μL羊非免疫血清滴加至切片上37℃孵育15min，傾去上層血清并將已稀釋的一抗工作液（E?CAD、N?CAD、LGR5抗體稀釋比例均為1∶150）50μL滴加至切片上4℃冰箱孵育過(guò)夜，然后將50μL生物素標(biāo)記二抗滴加至切片組織上溫箱37℃孵育15min，然后滴加50 μL鏈霉菌抗生物素?過(guò)氧化物酶至切片組織上37℃溫箱孵育15min，滴加DAB顯色劑至切片組織上顯色3分鐘并置入蘇木素染液中進(jìn)行復(fù)染，置入1%的鹽酸乙醇溶液30 s進(jìn)行分化固定，最后將組織標(biāo)本進(jìn)行脫水、透明，并用中性樹膠進(jìn)行封片。另外，實(shí)驗(yàn)同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照組及陽(yáng)性對(duì)照組。以PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照組，以切片中已知抗原作為陽(yáng)性對(duì)照組。

1.3 結(jié)果評(píng)判

切片由我院2名病理科醫(yī)生在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察并計(jì)數(shù)，每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍鏡（400×）視野，每個(gè)高倍鏡視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，然后再計(jì)算出每張切片中陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分比。陽(yáng)性細(xì)胞評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)及染色強(qiáng)度：淡黃色至黃褐色不同程度著色的細(xì)顆粒狀，且無(wú)非特異性背景染色，其中不染色計(jì)為0分，淺黃色計(jì)為1分，棕黃色計(jì)為2分，而黃褐色計(jì)為3分。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比將其分為四個(gè)等級(jí)：小于等于5%計(jì)0分，大于6%且小于等于25%計(jì)1分，大于26%且小于等于50%計(jì)2分，大于51%且小于等于75%為3分，而大于等于75%計(jì)4分，將染色強(qiáng)度及等級(jí)得分相乘計(jì)算出最終得分，分?jǐn)?shù)達(dá)到4分為陽(yáng)性表達(dá)，低于4分為陰性表達(dá)［3］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)按α=0.05，而Ρ＜0.05為具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 LGR5、E?CAD、N?CAD的表達(dá)

在所有20例肝癌組織中，LGR5、E?CAD、N?CAD的陽(yáng)性表達(dá)分別為15例（75%）、7例（35%）及16例（80%）（見(jiàn)表2-1）。在20例癌旁組織中，LGR5、E?CAD、N?CAD的陽(yáng)性表達(dá)分別為11例（55%）、11例（55%）及10例（55%）（見(jiàn)表2-1）。在14例正常肝組織中，LGR5、E?CAD、N?CAD的陽(yáng)性表達(dá)分別為例4（29%）、11例（79%）及4例（29%）（見(jiàn)表2-1）。統(tǒng)計(jì)分析表明，LGR5在肝癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于癌旁及正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率（Ρ＜0.05）（見(jiàn)表2?1）。E?CAD在肝癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于癌旁及正常組織（Ρ＜0.05），而N?CAD在肝癌中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于癌旁及正常組織（Ρ＜0.05）（見(jiàn)表2-1）。

表2?1 LGR5、E?CAD、N?CAD的表達(dá)情況

2.2 LGR5、E-CAD、N-CAD在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)與臨床病例參數(shù)的關(guān)系

LGR5在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)與患者術(shù)前肝功能相關(guān)（Ρ＜0.05）（見(jiàn)表2-2），而與患者的年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、腫瘤分級(jí)、HBV、肝硬化、AFP差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（見(jiàn)表2-2）。ECAD的表達(dá)與術(shù)前肝功能、年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、分級(jí)、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等均無(wú)關(guān)（Ρ均＞0.05）；N-CAD的表達(dá)與患者的術(shù)前肝功能、年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、分級(jí)、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等均無(wú)關(guān)（Ρ均＞0.05）。（見(jiàn)表2-2）。

表2?2 LGR5、E?CAD及N?CAD與臨床病理參數(shù)間的情況（n）

圖1 E?CAD免疫組化圖片

圖1?2 E?CAD免疫組化圖片

圖1?3 N?CAD免疫組化圖片

圖1?4 LGR5免疫組化圖片

3 討論

腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移是指癌細(xì)胞從其原始位置脫落，侵襲正常組織并逐漸向周邊蔓延，并通過(guò)血液、淋巴結(jié)等途徑轉(zhuǎn)移到其他地方定植，然后逐漸長(zhǎng)出同源腫瘤的過(guò)程［4］。其具體過(guò)程非常復(fù)雜，是由多種因素、多個(gè)環(huán)節(jié)相互作用的結(jié)果。而原發(fā)性肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程主要包括腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞間的粘附能力下降、細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞、腫瘤細(xì)胞的遠(yuǎn)處移動(dòng)及腫瘤細(xì)胞定植后形成新生血管等多個(gè)過(guò)程，而每個(gè)過(guò)程又受到許多調(diào)節(jié)因素的干擾。首先是粘附過(guò)程，肝癌細(xì)胞可向周圍組織伸出偽足，然后通過(guò)偽足與細(xì)胞外基質(zhì)成分發(fā)生粘附；肝癌細(xì)胞間的粘附力下降、肝癌細(xì)胞與細(xì)胞基質(zhì)間的粘附力增強(qiáng)是原發(fā)性肝癌發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的重要因素。其次是降解過(guò)程，肝癌細(xì)胞可誘導(dǎo)各種因子的表達(dá)，產(chǎn)生大量水解酶，從而降解細(xì)胞外基質(zhì)、局部破壞基底膜，導(dǎo)致細(xì)胞移出。然后是移動(dòng)過(guò)程，從基底膜移出的癌細(xì)胞可以縱深移動(dòng)，同時(shí)由于癌細(xì)胞獲得良好的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力，導(dǎo)致癌細(xì)胞向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。最后是新生血管形成過(guò)程，肝癌細(xì)胞不斷生長(zhǎng)、增殖需要腫瘤血管形成，同時(shí)新生轉(zhuǎn)移灶的形成也依賴腫瘤血管。而EMT是腫瘤細(xì)胞發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移的重要表型，其參與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的多個(gè)環(huán)節(jié)。EMT是指上皮細(xì)胞表型逐漸向間質(zhì)細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的過(guò)程［5］。在EMT過(guò)程中，上皮細(xì)胞失去細(xì)胞極性、細(xì)胞間連接消失、細(xì)胞骨架重組、從而失去細(xì)胞間黏附作用、外形演變?yōu)榧忓N形纖維細(xì)胞形態(tài)、變成間質(zhì)樣表型；細(xì)胞與基質(zhì)間的粘附作用增強(qiáng)導(dǎo)致細(xì)胞遷移和運(yùn)動(dòng)能力增強(qiáng)，細(xì)胞穿透基底膜從原發(fā)部位游離，遷移到周邊組織或進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)；同時(shí)細(xì)胞表型也發(fā)生了改變：上皮表型（E?CAD）表達(dá)下調(diào)，間質(zhì)表型（N?CAD）表達(dá)上調(diào)［6-9］。

而本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，E?CAD在肝癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)（35%）明顯低于癌旁（55%）及正常肝組織（79%），而N?CAD在肝癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)（80%）明顯高于癌旁（55%）及正常肝組織（29%）；這與腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的特征相符；這充分說(shuō)明原發(fā)性肝癌細(xì)胞中存在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)研究還發(fā)現(xiàn)，LGR5在肝癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)（75%）明顯高于癌旁（55%）及正常肝組織（29%）（Ρ＜0.05）。這說(shuō)明LGR5參與了原發(fā)性肝癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，但其具體作用機(jī)制仍不完全清楚。Yamamoto［8］等應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT?PCR技術(shù)檢測(cè)LGR5mRNA的表達(dá)情況，結(jié)果顯示其在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中出現(xiàn)明顯過(guò)度表達(dá)，同時(shí)發(fā)現(xiàn)LGR5在肝癌中的過(guò)度表達(dá)常伴隨著β?連環(huán)素基因片段中第三外顯子突變。而β?連環(huán)素是Wnt/β?catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路中最關(guān)鍵的效應(yīng)物。這說(shuō)明LGR5可能與β?連環(huán)素有關(guān)，LGR5可能是通過(guò)Wnt/β?catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路參與腫瘤的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化［10，11］。在Wnt/β?catenin轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中，Wnt蛋白與卷曲蛋白受體（Fizzled）結(jié)合，使活化的Fizzled作用于細(xì)胞漿的蓬亂蛋白，從而使結(jié)腸腺瘤樣息肉蛋白（APC）/軸蛋白（axin）/3b糖原合成激酶（GSK?3b）復(fù)合體失去穩(wěn)定，導(dǎo)致β?連環(huán)素磷酸化水平下降，從而引起β?catenin在胞漿內(nèi)大量聚集，穩(wěn)定的β?連環(huán)素進(jìn)入細(xì)胞核，與T細(xì)胞因子（T cell factor/lymphoid enhancer factor，TCF/LEF）家族成員結(jié)合，從而調(diào)節(jié)Wnt信號(hào)通路中靶基因的表達(dá)［12，13］。

同時(shí)本課題還對(duì)LGR5、E-CAD、N-CAD與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系進(jìn)行研究。結(jié)果顯示，LGR5在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)與患者術(shù)前肝功能相關(guān)，而與患者的其他臨床病理參數(shù)差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。E-CAD的表達(dá)與術(shù)前肝功能、年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、分級(jí)、HBV、肝硬化、甲胎蛋白差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而N-CAD的表達(dá)與患者的術(shù)前肝功能、年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤TNM分期、分級(jí)、HBV、肝硬化、甲胎蛋白等均無(wú)關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)免疫組化的實(shí)驗(yàn)方法研究了LGR5在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)情況，為原發(fā)性肝癌的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化作用機(jī)制提供新實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時(shí)為進(jìn)一步研究肝癌的侵襲轉(zhuǎn)移提供了理論依據(jù)；希望LGR5能夠成為肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的一個(gè)新的作用靶點(diǎn)，為臨床治療原發(fā)性肝癌提供一種新的、有效的治療手段。

［1］Chambers AF，Groom AC，Macdonald IC.Dissemination and growth of cancer cells in metastatic sites［J］.Nat Rev Cancer. 2002，2（8）：563-572.

［2］Fidler IJ.The pathogenesis of cancermetastasis：the‘seed and soil’hypothesis revisited［J］.Nat Rev Cancer，2003，3（6）：453-458.

［3］Kumar KK，Burgess AW，Gulbis JM.Structure and function of LGR5：an enigmatic G?protein coupled receptormarking stem cells［J］.Protein Sci，2014，23（5）：551-565.

［4］Effendi K，Yamazaki K，F(xiàn)ukuma M，Sakamoto M.Overexpres?sion of［J］.Liver Cancer，2014，3（3-4）：451-457

［5］Bagnato A，RosanòL.Epithelial?mesenchymal transition in ovarian cancer progression：a crucial role for the endothelin axis［J］.Cells Tissues Organs，2007，185（1-3）：85-94.

［6］Guarino M.Epithelial?mesenchymal transition and tumour inva?sion［J］.Int JBiochem Cell Biol，2007，39（12）：2153-2160.

［7］Guarino M，Rubino B，Ballabio G.The role ofepithelial?mesen?chymal transition in cancer pathology［J］.Pathology，2007，39（3）：305-318.

［8］Tania M，Khan MA，F(xiàn)u J.Epithelial tomesenchymal transition inducing transcription factors and metastatic cancer［J］.Tu?mour Biol，2014，35（8）：7335-7342.

［8］Ghahhari NM，Babashah S.Interplay between microRNAs and WNT/β?catenin signalling pathway regulates epithelial?mesen?chymal transition in cancer［J］.Eur JCancer，2015，51（12）：1638-1649.

［9］Yamamoto Y，Sakamoto M，F(xiàn)ujii G，et al.Overexpression of orphan G?protein?coupled receptor，Gpr49，in human hepatocel?lular carcinomaswith beta?cateninmutations［J］.Hepatology，2003，37（3）：528-533.

［10］Nakata S，Phillips E，Goidts V.Emerging role for leucine?rich repeat?containing G?protein?coupled receptors LGR5 and LGR4 in cancerstem cells［J］.CancerManag Res，2014，6：171-180.

［11］Pai SG，Carneiro BA，Mota JM，et al.Wnt/beta?catenin path?way：modulating anticancer immune response［J］.J Hemato?lOncol，2017，10（1）：101.

［12］宋竹雯，魏瀟凡，高建超，等.LGR5在肝癌細(xì)胞及肝癌組織中的表達(dá)及意義［J］.解剖學(xué)報(bào)，2011，42（6）：802-806.

［13］Yang L，TangH，KongY，etal.LGR5 promotesbreastcancerpro?gressionandmaintainsstem?likecells throughactivationofWnt/β?cateninsignaling［J］.Stem Cells，2015，33（10）：2913-2924.

“第二屆嶺南逸仙顱底外科學(xué)術(shù)論壇”成功舉辦

第二屆嶺南逸仙顱底外科學(xué)術(shù)論壇于2017年6月3日在廣州成功舉行。本次會(huì)議由廣東省醫(yī)師協(xié)會(huì)主辦，中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院承辦，由廣東醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科分會(huì)主任委員、中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科主任王海軍教授擔(dān)任大會(huì)主席，由中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院神經(jīng)外科主任、廣東醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科顱底鞍區(qū)學(xué)組副組長(zhǎng)鄧躍飛教授擔(dān)任大會(huì)執(zhí)行主席，共邀請(qǐng)14位來(lái)自臺(tái)灣、北京、上海等地方的顱底外科專家學(xué)者到會(huì)發(fā)言和擔(dān)任點(diǎn)評(píng)嘉賓，參會(huì)人員200余人。

廣東醫(yī)師協(xié)會(huì)常務(wù)副會(huì)長(zhǎng)吳少林、上海華山醫(yī)院神經(jīng)外科主任鐘平教授、北京中日友好醫(yī)院神經(jīng)外科主任于炎冰教授、中南大學(xué)湘雅二院神經(jīng)外科主任蔣宇剛教授、中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院神經(jīng)外科主任郭英教授、廣東省人民醫(yī)院神經(jīng)外科主任周東教授、廣州軍區(qū)總院神經(jīng)外科主任王國(guó)良教授、廣州市第一人民醫(yī)院主任曹志愷教授以及來(lái)自中國(guó)臺(tái)灣的許秉權(quán)教授等。

會(huì)議就鞍結(jié)節(jié)腦膜瘤、復(fù)雜顱底溝通瘤、海綿竇腫瘤、顱底復(fù)雜腦膜瘤、垂體瘤、顱咽管瘤、腦干腫瘤等方面作了主題演講與討論。一、總結(jié)了鞍結(jié)節(jié)鞍膈腦膜瘤的手術(shù)經(jīng)驗(yàn)：會(huì)議期間，鐘平教授回顧了鞍膈腦膜瘤治療的發(fā)展歷程，介紹了上海華山醫(yī)院運(yùn)用多種入路切除鞍結(jié)節(jié)鞍膈腦膜瘤的一系列經(jīng)驗(yàn)。二、明確了腦干腫瘤的手術(shù)治療價(jià)值：蔣宇剛教授通過(guò)對(duì)腦干腫瘤的系統(tǒng)性研究，提出了當(dāng)前腦干腫瘤的手術(shù)治療意義以及未來(lái)的研究和發(fā)展方向。三、國(guó)際上首次提出了復(fù)雜顱底腫瘤的新的分型：鄧躍飛教授總結(jié)多年手術(shù)經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合大量臨床病例，對(duì)復(fù)雜顱底溝通腫瘤提出了新的臨床分型，在臨床手術(shù)中具有較強(qiáng)的實(shí)用性和指導(dǎo)意義；四、鞍區(qū)及鞍旁病變也是此次會(huì)議的討論焦點(diǎn)之一，鐘平教授、許秉權(quán)教授、潘軍教授、毛志剛分別就鞍膈腦膜瘤、海綿竇區(qū)腫瘤、海綿竇腫瘤、顱咽管瘤、垂體瘤等進(jìn)行了專題闡述。五、新理念、新技術(shù)在神經(jīng)外科中的最新應(yīng)用：賀世明教授詳細(xì)闡述了ERAS（加速康復(fù)外科）的臨床價(jià)值及在神經(jīng)外科中的發(fā)展；伍益主任就3D-slicer圖像融合技術(shù)在顱底外科手術(shù)中應(yīng)用，進(jìn)行了實(shí)例展示；六、內(nèi)鏡技術(shù)的全面提升：內(nèi)鏡技術(shù)在此次會(huì)議期間得到重點(diǎn)關(guān)注，郭英教授提出應(yīng)將開顱手術(shù)和內(nèi)鏡手術(shù)相結(jié)合，取長(zhǎng)補(bǔ)短；黃國(guó)棟教授通過(guò)內(nèi)鏡經(jīng)鼻治療顱底腫瘤的成功經(jīng)驗(yàn)，進(jìn)一步強(qiáng)化了對(duì)顱底重建的認(rèn)識(shí)，通過(guò)大量病例數(shù)據(jù)和典型手術(shù)錄像，具體介紹了神經(jīng)內(nèi)鏡等微創(chuàng)技術(shù)在顱底腫瘤中的應(yīng)用。七、推動(dòng)了顱底外科多學(xué)科協(xié)作的進(jìn)一步發(fā)展：中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院口腔頜面外科陳偉良教授的研究使得顱底外科的治療更加豐富，啟發(fā)了思路。（來(lái)源：中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院官網(wǎng)，http://www.syshospital.com/ Item/334088.aspx）

LGR5 involves in epithelial?mesenchymal transition in hepatocellular carcinoma

ZOU Laibin， WANG Jian，WU Jiamian，JI Tengfei，CAO Tiansheng.Department of General Surgery，The people HospitalofHuadu District，Guangzhou 510800，China.

Objective To research the relationships between Orphan G?protein?coupled Receptor（LGR5）with epithelial?mesenchymal transition of hepatocellular carcinoma.M ethods To test the expression of LGR5，E?CAD and N?CAD in 20 HCC tissues，20 paracancerous tissues of HCC and 14 normal liver tissues by immunohistochemistry and to analyze the expressions of them with some clinic?pathological parameters.Results In 20 HCC specimens，the positive expressions of LGR5，E?CAD and N?CADwere 15 cases（70%），7 cases（35%）and 16 cases（80%）respectively.In 20 paracancerous tissues of HCC specimens，the positive expressionswere 11 cases（55%），11 cases（55%）and 10 cases（55%）.While in all14 cases ofnormal liver tissues，the positive expressions are 4 cases（29%），11 cases（79%），4 cases（29%）respectively.Statistical analysis showed that the positive expression rate of LGR5 in HCC were obviously higher than that in paracancer and normal liver（Ρ＜0.05）.The expression of LGR5 was correlated with liver function（Ρ＜0.05），butno statistically significantwith age，gender，tumor size，tumor TNM stages，pathologicalgrades，HBV and liver cirrhosis serum alpha fetoprotein（Ρ＞0.05）. There was no statistical significance between the expression of E-CAD with the function of liver，age，gender，tumor size，tumor TNM stages，pathological grades，HBV and liver cirrhosis serum alphafetoprotein（all P＞0.05）；The expression of N-CAD wasnot correlated with liver function，age，gender，tumor size，tumor TNM stages，pathological grades，HBVand liver cirrhosis serum alpha fetoprotein（all Ρ＞0.05）.Conclusion Primary livercanceroccurshasobviousEMTphenomenon.LGR5 is related to EMT of invasion and metastasis in primary liver cancer and itmay be able tomediate EMT in primary liver cancer through theWnt/β?catenin signal pathway.

LGR5；hepatocellular carcinoma；epithelial?mesenchymal transition；relationship

R735.7

A

10.3969/j.issn.1009?976X.2017.03.006

2017-03-10）

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目（2012B02070004)

510800廣州廣州市花都區(qū)人民醫(yī)院

鄒來(lái)賓，Email：675214235@qq.com