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    木薯組織培養(yǎng)中常用培養(yǎng)基簡(jiǎn)介

    2017-07-01 21:06:30文峰蘇文潘鄭華黃建祺羅燕春韋麗
    關(guān)鍵詞:再生

    文峰+蘇文潘+鄭華+黃建祺+羅燕春+韋麗君+雷開文

    摘 要:木薯是一種重要的糧食和工業(yè)原料作物。組織培養(yǎng)技術(shù)在木薯生物技術(shù)中起著重要的作用。本文對(duì)木薯組織培養(yǎng)中一些常用培養(yǎng)基進(jìn)行了總結(jié)與匯總,包括MS、CIM、MSN、CMM、CEM、GD、SH、TM2G 8種常用培養(yǎng)基的組成及其在木薯組織培養(yǎng)中所處的階段和作用等,為木薯組織培養(yǎng)工作者提供借鑒作用。

    關(guān)鍵詞:木薯 組織培養(yǎng) 培養(yǎng)基 再生

    木薯(Manihot esculenta Crantz)別名番薯、樹薯,屬于大戟科(Euphorbiaceae)木薯屬(Manihot)灌木,是一種重要的糧食和工業(yè)原料作物。組織培養(yǎng)技術(shù)在木薯生物技術(shù)中起著至關(guān)重要的作用。木薯組織培養(yǎng)技術(shù)雖能使木薯嫩葉、芽、花、愈傷組織、原生質(zhì)體等多種外植體再生成完整植株,但基因型或者再生效率仍有限制。文章對(duì) 木薯組織培養(yǎng)中MS、CIM、MSN、CMM、CEM、GD、SH、TM2G 8種常用培養(yǎng)基進(jìn)行了總結(jié)與匯總,為木薯組織培養(yǎng)工作者提供借鑒作用。

    1 木薯培養(yǎng)基組成和作用

    木薯培養(yǎng)基MS、CIM、MSN、CMM、CEM基本組成均一樣,都是由MS鹽和維生素(表1),加上20 g/L蔗糖、8 g/L瓊脂和2 μM CuSO4(也可不加)和激素組成,因激素的種類或激素的用量不同,而在木薯的組織培養(yǎng)再生過程中起的作用卻不同(表2)。

    木薯培養(yǎng)基CIM和MSN均可用于誘導(dǎo)胚胎,但常誘導(dǎo)的外植體不同。CIM常誘導(dǎo)的外植體可以是嫩葉、頂芽、腋芽等,用于初生、次生和循環(huán)的體細(xì)胞胚的誘導(dǎo),是體細(xì)胞胚發(fā)生的開始,能長(zhǎng)成球型胚、魚雷型胚和子葉型胚等不同類型的胚狀體;MSN常誘導(dǎo)的外植體是脆性胚性愈傷組織(FEC)或者由原生質(zhì)體分裂長(zhǎng)成的愈傷,在光下培養(yǎng),在MSN培養(yǎng)基上可以長(zhǎng)成球型胚、魚雷型胚和綠色子葉型胚等不同類型的胚狀體。CIM在暗環(huán)境下誘導(dǎo),而MSN在光下誘導(dǎo)。

    經(jīng)過CIM和MSN培養(yǎng)基誘導(dǎo)的魚雷型胚和子葉型胚的再生過程均一樣,都要經(jīng)過成熟、生芽伸長(zhǎng)、生根的過程,分別在CMM、CEM、MS培養(yǎng)基上完成。這幾個(gè)過程都要在光下培養(yǎng)。魚雷型胚和子葉型胚在CMM培養(yǎng)基上培養(yǎng)成熟,長(zhǎng)成綠色大子葉胚,一般需要1~4周。綠色大子葉胚在CEM培養(yǎng)基上培養(yǎng),起到生芽伸長(zhǎng)的作用,莖長(zhǎng)至2~3 cm一般需要1~2月。長(zhǎng)至2~3 cm的莖在MS培養(yǎng)基中生根,一般1周即可生根。至此一個(gè)再生過程就完成了。MS培養(yǎng)基也用于木薯組培苗的常規(guī)繼代。

    GD培養(yǎng)基用于木薯FEC的胚性維持和增殖,也可以用于FEC的誘導(dǎo)。SH培養(yǎng)基,也能起到FEC的胚性維持和增殖的作用。GD是固體培養(yǎng)基培養(yǎng),SH是液體培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng),F(xiàn)EC在GD和SH培養(yǎng)基中能夠相互轉(zhuǎn)換,性質(zhì)不改變。SH培養(yǎng)基培養(yǎng)相比于GD培養(yǎng)基培養(yǎng),細(xì)胞一致性更好,增殖更快。

    TM2G培養(yǎng)基用于木薯愈傷原生質(zhì)體的培養(yǎng),在培養(yǎng)過程中需要逐漸減小培養(yǎng)基的滲透壓,以利于細(xì)胞團(tuán)的生長(zhǎng),通常由減少葡萄糖的用量完成[8]。

    2 小結(jié)

    隨著細(xì)胞工程和基因工程的發(fā)展,高效的木薯再生體系技術(shù)顯得尤為重要,而培養(yǎng)基在木薯再生體系過程中起關(guān)鍵作用。木薯組織培養(yǎng)技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展,各組織培養(yǎng)階段形成了各自適宜的培養(yǎng)基。本文對(duì)各組織培養(yǎng)階段所常用的培養(yǎng)基進(jìn)行了總結(jié),為木薯組織培養(yǎng)工作者提供借鑒作用。

    參考文獻(xiàn)

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    [3] Zhang P, Puonti-Kaerlas J. PIG-mediated cassava transformation using positive and negative selection[J]. Plant Cell Reports, 2000, 19: 1041-1048.

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    [8] 文峰, 肖詩(shī)鑫, 聶揚(yáng)眉, 等. 木薯脆性胚性愈傷組織原生質(zhì)體培養(yǎng)與植株再生[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué), 2012, 45(19): 4050-4056.

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