分光光度法測(cè)定板藍(lán)根顆粒中水楊酸的含量

李夢(mèng)瑤，申婧翔

（長(zhǎng)治學(xué)院 化學(xué)系，山西 長(zhǎng)治 046011）

分光光度法測(cè)定板藍(lán)根顆粒中水楊酸的含量

李夢(mèng)瑤，申婧翔

（長(zhǎng)治學(xué)院 化學(xué)系，山西 長(zhǎng)治 046011）

采用可見分光光度法，在pH=2.4與硫酸鐵銨做顯色劑的條件下，水楊酸與Fe3+生成的紫紅色絡(luò)合物在λ=526 nm處有最大吸收，并對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。標(biāo)準(zhǔn)曲線法得線性方程為：A=0.0052c+0.0312，R2=0.9927，吸光度與濃度呈良好的線性關(guān)系。板藍(lán)根中水楊酸的含量為1.36×10-5g/mL，平均回收率為92.18%。

水楊酸；板藍(lán)根；分光光度法

1 引言

板藍(lán)根作為中國(guó)傳統(tǒng)中藥，具有清熱、解毒、涼血、利咽之功效，常用于治療細(xì)菌感染性疾病和病毒性疾病，尤其在抗病毒方面療效確切，是清熱解毒類中藥的代表藥物。研究表明，板藍(lán)根的有機(jī)酸成分能夠清除體內(nèi)的過氧自由基和內(nèi)毒素，從而避免了發(fā)燒、發(fā)熱現(xiàn)象，保護(hù)機(jī)體不受高燒高熱的傷害。水楊酸是板藍(lán)根有機(jī)酸的主要成分之一，目前已經(jīng)從板藍(lán)根中得到分離和確認(rèn)[1]。

目前對(duì)于游離水楊酸的測(cè)定，常用的方法有高效液相色譜法[2-3]、電化學(xué)方法[4]、紫外分光光度法[5-6]等。但對(duì)于可見分光光度法的研究較少，僅限于標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。文章采用了可見分光光度法，用硫酸鐵銨溶液作顯色劑來測(cè)定游離水楊酸的含量。該方法不僅可以消除濕度、溫度等環(huán)境對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，而且具有快捷、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)[7]。

2 實(shí)驗(yàn)部分

U-2910型紫外分光光度計(jì)，日立；PHS-3BW型pH計(jì)，上海般特儀器有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，艾卡（廣州）儀器有限公司。

板藍(lán)根顆粒，廣州白云山和記黃埔中藥有限公司；濃鹽酸（分析純），永飛化學(xué)試劑有限公司；濃硫酸（分析純），天津市凱通化學(xué)試劑有限公司；無水乙醇（分析純），天津市凱通化學(xué)試劑有限公司；冰乙酸（分析純），天津市大茂化學(xué)試劑廠；水楊酸（分析純），天津市大茂化學(xué)試劑廠；硫酸鐵銨（分析純），天津市凱通化學(xué)試劑有限公司；氫氧化鈉（分析純），天津市凱通化學(xué)試劑有限公司；酒石酸（分析純），天津市大茂化學(xué)試劑廠。

3 結(jié)果與討論

3.1 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化

3.1.1 最大吸收波長(zhǎng)的確定

分別準(zhǔn)確量取0.01 mol/L的水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1.50 mL和0.01 mol/L的硫酸鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液3.75 mL于50 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，以硫酸鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液作為參比液，測(cè)定其在400～800 nm的吸光度，得吸收曲線，如圖1所示。由圖1可知：該絡(luò)合物的最大吸收波長(zhǎng)為526nm。

3.1.2 pH條件的確定

取0.01 mol/L的水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1.50 mL、0.01 mol/L的硫酸鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液3.75 mL于50 mL容量瓶中，并用配制的pH值分別為1.5、2.0、2.4、3.2、3.6、4.0、4.5的CH2COOH-CH2COONa緩沖溶液稀釋到刻度，以硫酸鐵銨溶液作為參比液，測(cè)其吸光度，并做出吸光度隨pH變化的曲線A-pH，如圖2所示。

絡(luò)合物的組成隨pH值的變化較大，尤其是當(dāng)pH值過大時(shí)，稀硫酸鐵銨溶液會(huì)遭到嚴(yán)重的水解，因此會(huì)影響到吸光度的測(cè)定。由圖2可知：當(dāng)pH值在2.0～2.4時(shí)吸光度較大，并且在pH是2.4時(shí)達(dá)到最大值，為最佳pH測(cè)定值。

圖1 水楊酸鐵絡(luò)合物的吸收曲線

圖2 A-pH曲線

3.1.3 絡(luò)合物配比的確定

采用了摩爾系列法確定顯色劑用量從而測(cè)定絡(luò)合物的絡(luò)合比。取0.01mol/L的水楊酸溶液（SA）和0.01mol/L的硫酸鐵銨溶液共6 mL，分別按體積比為 0.20、0.33、0.50、0.71、1.00、1.40、1.60、2.0 0、3.00、5.00量取，稀釋且定容至50 mL容量瓶中，用硫酸鐵銨溶液作為參比液，測(cè)定其吸光度。繪制A～[n（SA）：n（NH4Fe（SO4）2）]曲線，如圖3所示。

圖3 吸光度隨摩爾比變化曲線

由圖3可知：當(dāng)n（SA）：n（NH4Fe（SO4）2）是2時(shí)，該體系會(huì)有最大吸光度，其絡(luò)合物的穩(wěn)定絡(luò)合比為2；當(dāng)n（SA）：n（NH4Fe（SO4）2）小于2時(shí)，A隨著物質(zhì)的量比的增大相應(yīng)的增大，由朗伯比爾定律可以知道，體系中的絡(luò)合物的濃度在這個(gè)過程中逐漸增大；當(dāng)n（SA）：n（NH4Fe（SO4）2）大于2時(shí)，吸光度隨之減小，也就是絡(luò)合物的濃度在減少。所以取其絡(luò)合比為2。

3.1.3 顯色時(shí)間的確定

取0.01 mol/L的稀硫酸鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液3.75 mL、0.01 mol/LSA標(biāo)準(zhǔn)溶液1.50 mL定容于50 mL容量瓶中，放置不同的時(shí)間后測(cè)定其吸光度隨時(shí)間的變化關(guān)系，如圖4所示。

圖4 A-t曲線

由圖4可知：當(dāng)放置時(shí)間在5～60 min內(nèi)吸光度比較穩(wěn)定，但在測(cè)定過程中，40 min后會(huì)發(fā)現(xiàn)溶液開始稍微顯渾濁，這可能是稀硫酸鐵銨水解所導(dǎo)致。由此可知，該絡(luò)合反應(yīng)最佳顯色時(shí)間為5min。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精確量取0.01 mol/L的3.75 mL稀硫酸鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液和不同體積的水楊酸（SA）標(biāo)準(zhǔn)溶液于50 mL容量瓶中，用pH=2.4的緩沖溶液將其定容配制成不同濃度的SA-NH4Fe（SO4）2溶液。以稀硫酸鐵銨溶液作參比液，分別測(cè)定每組溶液的吸光度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。如圖5所示。線性方程為：A=0.0052c+0.0312，R2=0.9927，線性關(guān)系良好。

圖5 A-c標(biāo)準(zhǔn)曲線

3.3 精密度試驗(yàn)

精確量取0.01vmol/L水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00 mL、0.05%酒石酸溶液1.00 mL和0.01 mol/L的硫酸鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00 mL于50 mL容量瓶中，然后用pH為2.4的緩沖溶液稀釋至刻度搖勻，每隔5 s測(cè)其吸光度值，共測(cè)定9次，所得數(shù)據(jù)如表1所示，求出其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為0.59%。由RSD可以知道精密度良好。

表1 精密度測(cè)定數(shù)據(jù)

3.4 樣品測(cè)定

準(zhǔn)確稱取板藍(lán)根粗粉4.0203 g，用50 mL70%乙醇超聲提取兩次，每次30 min，將兩次的提取液合并，并減壓濃縮到稀膏狀，再用70%乙醇分次洗滌后定容到50 mL容量瓶中，用0.45 um微孔濾膜濾過，得板藍(lán)根待測(cè)液。量取10.00 mL于50 mL容量瓶中，加入3.75 mL0.01 mol/L的硫酸鐵銨，用pH為2.4的緩沖溶液稀釋至刻度搖勻并測(cè)其吸光度。所得數(shù)據(jù)如表2所示。

由表2可知：板藍(lán)根待測(cè)液中水楊酸含量為1.36×10-5g/mL。

表2 水楊酸含量測(cè)定結(jié)果

3.5 回收率實(shí)驗(yàn)

在4個(gè)50 mL的容量瓶中各自加入板藍(lán)根待測(cè)液2.00 mL，并標(biāo)序，按表3加入0.01 mol/L水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（SA），然后加入0.01 mol/L的稀硫酸鐵銨標(biāo)準(zhǔn)溶液3.75mL，稀釋至刻度并測(cè)吸光度。測(cè)定結(jié)果如表3所示。由表3可知：平均回收率為92.18%，RSD為7.92%。

表3 回收率測(cè)定結(jié)果

4 結(jié)論

結(jié)果表明，測(cè)定該絡(luò)合物的吸光度的最佳條件為：吸收波長(zhǎng)為526 nm，pH值為2.4，顯色時(shí)間為5 min，絡(luò)合比為2。在最佳條件下測(cè)系列水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 A=0.0052c+0.0312，R2=0.9927。精密度測(cè)定中，RSD為0.59%?；厥章蕼y(cè)定中，平均回收率為92.18%，RSD為7.92%。求得板藍(lán)根中水楊酸含量為1.36×10-5g/mL。該方法不僅快捷和準(zhǔn)確而且重現(xiàn)性好，可獲得滿意結(jié)果。

［1］施峰，安益強(qiáng)，賈曉斌，等.不同產(chǎn)地板藍(lán)根藥材中水楊酸量的比較［J］.中草藥，2009，40（2）：271-275.

［2］年四輝，李藍(lán)，劉麗敏，等.HPLC法測(cè)定板藍(lán)根及其制劑中水楊酸苯甲酸的含量［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（21）：92-95.

［3］陳新善，孔愛英.HPLC法測(cè)定阿司匹林腸溶片中游離水楊酸含量［J］.中醫(yī)藥事，2003，17（8）：505-507.

［4］羅紅梅，廖鈁，譚寶玉，等.水楊酸在多壁碳納米管修飾電極上的電化學(xué)行為及其測(cè)定［J］.分析科學(xué)學(xué)報(bào)，2009，29（6）：665-668.

［5］李娟.紫外分光光度法測(cè)定ASP腸溶片中游離水楊酸含量［J］.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2010，26（15）：2267-2268.

［6］陳理，栗家言，胡紅.紫外分光光度法測(cè)定水楊酸滴耳液中水楊酸的含量［J］.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2008，24（6）：916-917.

［7］張金磊.稀硫酸鐵銨分光光度法測(cè)定水楊酸的含量［J］.廣州化工，2011，39（22）：70-72．

（責(zé)任編輯 王璟琳）

O655

A

1673-2014（2017）02-0014-03

2016—12—10

李夢(mèng)瑤（1989— ），女，山西長(zhǎng)治人，助理實(shí)驗(yàn)師，主要從事碳量子點(diǎn)及熒光小分子探針性能研究。