一種含姜黃食品對(duì)去卵巢模型鼠骨組織的影響

陸 寬,張 潔,劉文煒,霍 昕,劉建華,高玉瓊,馮發(fā)進(jìn)

(1.貴州省生物技術(shù)研究開(kāi)發(fā)基地,貴州貴陽(yáng) 550002; 2.貴州省科暉制藥廠,貴州貴陽(yáng) 550011; 3.貴州醫(yī)科大學(xué),貴州貴陽(yáng) 550025; 4. 貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院,貴州貴陽(yáng) 550002; 5.貴州省中科院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州貴陽(yáng) 550002)

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一種含姜黃食品對(duì)去卵巢模型鼠骨組織的影響

陸 寬1,2,張 潔3,劉文煒4,*,霍 昕1,劉建華5,高玉瓊1,馮發(fā)進(jìn)1

(1.貴州省生物技術(shù)研究開(kāi)發(fā)基地,貴州貴陽(yáng) 550002; 2.貴州省科暉制藥廠,貴州貴陽(yáng) 550011; 3.貴州醫(yī)科大學(xué),貴州貴陽(yáng) 550025; 4. 貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院,貴州貴陽(yáng) 550002; 5.貴州省中科院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,貴州貴陽(yáng) 550002)

目的:探討一種含姜黃食品對(duì)去卵巢模型鼠骨組織變化的影響。方法:采用雙側(cè)去卵巢法制備去卵巢誘發(fā)骨質(zhì)疏松大鼠模型,將動(dòng)物分為假手術(shù)組、模型對(duì)照組、含姜黃受試物組和不含姜黃受試物組,連續(xù)喂養(yǎng)90 d,測(cè)定各組大鼠體重變化、血清中骨保護(hù)素(Osteoprotegerin,OPG)及核因子Κ-β受體活化因子配體(Receptor Activator for Nuclear Factor Κ-βLigand,RANKL)水平、大鼠股骨長(zhǎng)度以及骨組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)。結(jié)果:喂養(yǎng)90 d后,姜黃組大鼠體重增長(zhǎng)趨勢(shì)與假手術(shù)組較為接近(p>0.05)。姜黃組大鼠血清OPG水平、股骨長(zhǎng)度、骨小梁厚度以及成骨細(xì)胞數(shù)顯著高于模型對(duì)照組(p<0.01),RANKL水平、骨小梁間隙以及破骨細(xì)胞數(shù)顯著低于模型對(duì)照組(p<0.01)。姜黃組與不含姜黃組比較,大鼠血清中OPG、骨小梁厚度高于不含姜黃組(p<0.05),RANKL、骨小梁間隙低于不含姜黃組(p<0.05);姜黃組大鼠股骨長(zhǎng)度及成骨細(xì)胞數(shù)顯著高于不含姜黃組(p<0.01),破骨細(xì)胞數(shù)顯著少于不含姜黃組(p<0.01)。結(jié)論:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,此含姜黃食品對(duì)去卵巢模型鼠骨組織退變有一定的抑制作用。

姜黃,去卵巢模型鼠,骨質(zhì)疏松,骨組織

骨質(zhì)疏松癥(Osteopomsis,OP)的發(fā)生與激素調(diào)控、免疫功能、鈣吸收、生活習(xí)慣等密切相關(guān),在年齡60歲以上人群和絕經(jīng)后婦女中尤為常見(jiàn)[1]。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(Postmenopausal,PMOP)是最常見(jiàn)的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥,是由于絕經(jīng)后女性卵巢功能衰退、雌激素水平下降、骨吸收大于骨形成的高轉(zhuǎn)換代謝引發(fā)的一種全身性骨骼疾病[2-3]。目前,醫(yī)學(xué)領(lǐng)域習(xí)慣采用激素替代療法來(lái)減少更年期骨折的風(fēng)險(xiǎn)[4-6],但是激素替代療法單用雌激素又往往會(huì)增加絕經(jīng)后女性患子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌等癌癥的風(fēng)險(xiǎn)[7-8]。因此,許多研究人員把注意力逐漸轉(zhuǎn)移到副作用小,且具有明確療效的保健食品領(lǐng)域。

姜黃,又稱寶鼎香,姜科姜黃屬多年生草本植物,是國(guó)家公布可用于保健食品的植物原料之一,在亞洲主要用來(lái)制作為香料、調(diào)味料或著色劑,具有使用普遍、安全性高的特點(diǎn)。姜黃的主要功能性成分為姜黃素,其抗菌[9-10]、抗氧化[11]、減肥降脂[12]、抗腫瘤[13-14]、預(yù)防老年癡呆[15-16]及保肝[17]等作用被人們所熟知。隨著對(duì)姜黃研究的不斷深入,國(guó)內(nèi)外研究人員逐漸將注意力轉(zhuǎn)移到姜黃及其復(fù)方制劑或食品在預(yù)防絕經(jīng)后女性骨質(zhì)疏松模型方面的研究[18-20]。本文在前期研究基礎(chǔ)上,根據(jù)中醫(yī)藥理論擬定此含姜黃食品配方,以大鼠去卵巢誘導(dǎo)的絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型為研究對(duì)象,通過(guò)研究此食品配方對(duì)去卵巢大鼠骨保護(hù)素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子Κ-β受體活化因子配體(Receptor Activator for Nuclear Factor Κ-βLigand,RANKL)水平、股骨長(zhǎng)度及股骨形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)等指標(biāo)的影響,為其應(yīng)用于開(kāi)發(fā)預(yù)防骨質(zhì)疏松食品提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

姜黃、骨碎補(bǔ)、黃芪、葛根、山藥、茯苓、薏苡仁 均符合中國(guó)藥典(2010版)規(guī)定;大鼠OPG ELISA試劑盒、大鼠RANKL ELISA試劑盒 南京建成科技有限公司;水合氯醛(分析純) 天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司,批號(hào):20130110;青霉素(80萬(wàn)單位) 哈藥集團(tuán)制藥總廠,批號(hào):A1310001;甲醛、酒精、二甲苯 國(guó)產(chǎn)分析純;普通大鼠飼料 重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司(因大豆中的大豆異黃酮具有雌激素樣作用,避免對(duì)實(shí)驗(yàn)造成影響已用適當(dāng)物質(zhì)替換飼料中來(lái)源于大豆的成分);實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD雌性大鼠40只,SPF(Specific pathogen Free)級(jí),體重200～250 g,由重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司提供,動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(渝)2012-0005。動(dòng)物由專人飼養(yǎng)管理,分籠喂養(yǎng),單只單籠,每2 d更換一次墊料,室溫18～26 ℃,濕度40%～70%。

BL-150電子天平 德國(guó)Sartorius;0412-1臺(tái)式離心機(jī) 上海醫(yī)療器械有限公司;GF-M3000酶標(biāo)儀 山東高密彩虹分析儀器有限公司;RM2235型切片機(jī) 德國(guó)Leica;YT-6C型生物組織攤烤片機(jī) 湖北省孝感市亞光醫(yī)用電子技術(shù)有限公司;BX51型光學(xué)顯微鏡 日本OLYMPUS。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 受試樣品制備 取骨碎補(bǔ)3份、黃芪6份,用6倍重量水提3次,合并水提液,濃縮,得骨碎補(bǔ)、黃芪浸膏,備用。取姜黃1份、葛根3份、山藥6份、茯苓3份、薏苡仁6份粉碎成粗粉,備用。將骨碎補(bǔ)、黃芪浸膏與姜黃、葛根、山藥、茯苓、薏苡仁粗粉均勻混合,再與正常飼料混勻制備得到含姜黃受試物樣品飼料。另外,按以上相同步驟制備不添加姜黃受試物樣品飼料。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組 40只SPF級(jí)大鼠(雌性,體重200～250 g),適應(yīng)飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型對(duì)照組、含姜黃受試物組(以下簡(jiǎn)稱姜黃組)、不含姜黃受試物組(以下簡(jiǎn)稱不含姜黃組),每組10只。姜黃組喂食含姜黃受試物樣品飼料,不含姜黃組喂食不含姜黃受試物樣品飼料,假手術(shù)組及模型對(duì)照組喂食普通飼料,正常飲水飲食,連續(xù)喂食90 d,記錄各組每只動(dòng)物進(jìn)食量。

1.2.3 大鼠骨質(zhì)疏松模型建立 以10%水合氯醛,按0.35 mL/100 g體重腹腔注射麻醉,經(jīng)背部肋脊角切口摘除大鼠雙側(cè)卵巢[21]。術(shù)后經(jīng)后肢肌肉注射青霉素預(yù)防感染,連續(xù)5 d。術(shù)后5 d進(jìn)行陰道涂片,連續(xù)7 d,剔除造模失敗不合格大鼠。假手術(shù)組動(dòng)物進(jìn)行同樣手術(shù)步驟,但不摘除大鼠雙側(cè)卵巢。

1.2.4 分析測(cè)定

1.2.4.1 體重變化 手術(shù)前稱量各組大鼠體質(zhì)量,手術(shù)后每30 d稱量各組大鼠體質(zhì)量,取手術(shù)前、30、60、90 d后各組大鼠體重?cái)?shù)據(jù)進(jìn)行分析。

1.2.4.2 OPG、RANKL酶聯(lián)反應(yīng)檢測(cè) 大鼠喂食90 d后眼球摘除法采血,室溫血液自然凝固10～20 min,離心20 min左右(2000～3000 r/min),仔細(xì)收集上層血清。分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。分別在OPG、RANKL酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL,然后將樣品10 μL(樣品最終稀釋度為5倍)加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。用封板膜封板后置37 ℃溫育30 min。小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 s后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。除空白孔外每孔加入酶標(biāo)試劑50 μL。用封板膜封板后置37 ℃溫育30 min。小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 s后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。每孔先加入顯色劑A 50 μL,再加入顯色劑B 50 μL,輕輕振蕩混勻,37 ℃避光顯色15 min。每孔加終止液50 μL,終止反應(yīng)。以空白調(diào)零,450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度,檢測(cè)大鼠血清中OPG、RANKL水平。

1.2.4.3 股骨長(zhǎng)度及骨形態(tài)計(jì)量學(xué)測(cè)定 喂養(yǎng)90 d后處死各組大鼠,取大鼠左右股骨,去除周圍軟組織,測(cè)量左右股骨長(zhǎng)度。將股骨置于10%甲醛溶液中固定48 h后,置于中性混合脫鈣液中脫鈣。將脫鈣完成后的股骨流水沖洗干凈,取其下三分之一,沿矢狀面縱行切開(kāi)。將股骨放入自動(dòng)脫水機(jī)中脫水、透明、浸蠟12 h。在包埋框中注入熔化的石蠟,將股骨縱切面朝下置于包埋框內(nèi),使蠟塊迅速冷卻。將凝固的石蠟塊四周修理整齊,并編碼標(biāo)記。用切片機(jī)沿股骨矢狀面切成5 μm薄片,置于溫水中展開(kāi)用普通載玻片撈出待做HE染色切片,放入溫箱內(nèi)烘干。將石蠟包埋切片脫蠟,用蘇木素、伊紅染色,脫水后烤箱烘干,樹(shù)膠封片。檢查大鼠股骨的骨小梁厚度、骨小梁間隙、成骨細(xì)胞數(shù)以及破骨細(xì)胞數(shù)等指標(biāo)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠體重變化的影響

圖1 實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠體重的變化Fig.1 Body weight changes of rats during the experiment(±s,n=10)注:與模型對(duì)照組比較,a為p<0.05,A為p<0.01; 與假手術(shù)組比較,b為p<0.05,B為p<0.01;與姜黃組比較, c為p<0.05,C為p<0.01;圖2～圖5同。

由圖1可知,去卵巢前各組大鼠體重均值基本一致,手術(shù)后各組大鼠體重迅速增長(zhǎng)。喂養(yǎng)90 d后,與假手術(shù)組比較,模型對(duì)照組、姜黃組、不含姜黃組大鼠體重均有所增加,因?yàn)槌偈中g(shù)組外其余處理組去卵巢后,大鼠雌激素分泌減少,導(dǎo)致體重增加。資料顯示,雌激素可提高血液中載脂蛋白A1的含量,降低血清總膽固醇(TC)濃度,使β-脂蛋白減少、膽固醇與磷脂比例下降等作用[22],因此,可通過(guò)補(bǔ)充雌激素或雌激素樣作用的物質(zhì)緩解因雌激素缺乏導(dǎo)致脂代謝紊亂而引起的體重增長(zhǎng)。模型對(duì)照組大鼠體重增長(zhǎng)最為明顯(p<0.01),分別為假手術(shù)組、姜黃組及不含姜黃組的1.12倍、1.10倍及1.09倍,并且姜黃組與假手術(shù)組體重增長(zhǎng)趨勢(shì)較為接近(p>0.05),這是因?yàn)槭称放浞街泻懈鸶?具有一定的雌激素樣活性作用[23-25],可顯著降低去卵巢大鼠血清TC和肝臟中TG水平,且姜黃中的姜黃素能夠降低大鼠血清中總膽固醇水平[26],從而抑制雌鼠體重過(guò)度增加。

2.2 對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠血清中OPG、RANKL水平測(cè)定結(jié)果

OPG是1997年由Simonet等發(fā)現(xiàn)[27]的一種分泌型糖蛋白,是RANKL的誘導(dǎo)受體,通過(guò)與RANKL的結(jié)合減少破骨細(xì)胞的產(chǎn)生。RANK 是由Anderson 等[28]發(fā)現(xiàn)的,與RANKL結(jié)合進(jìn)而啟動(dòng)一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑[29]。RANK/RANKL信號(hào)通路參與破骨細(xì)胞的生成調(diào)節(jié),成骨細(xì)胞表達(dá)RANKL,與破骨細(xì)胞前體細(xì)胞表面的RANK結(jié)合,促進(jìn)破骨細(xì)胞的分化及活性,同時(shí)成骨細(xì)胞又可分泌OPG,與RANKL競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合,從而阻止RANKL與破骨細(xì)胞上的RANK結(jié)合,抑制破骨細(xì)胞形成、分化、存活、活化并誘導(dǎo)破骨細(xì)胞凋亡,使骨量增加。因此,OPG、RANKL水平與破骨細(xì)胞的生成密切相關(guān),并最終影響骨密度和骨強(qiáng)度。

由圖2可知,姜黃組、不含姜黃組與假手術(shù)組對(duì)比,大鼠OPG水平分別降低了13.5 ng/L(p<0.01)、20.33 ng/L(p<0.01),RANKL水平分別升高了0.005 nmol/L(p<0.01)、0.016 nmol/L(p<0.01)。這是因?yàn)榇萍に厝狈?導(dǎo)致大鼠內(nèi)分泌失調(diào),損害了細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng),從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生氧化應(yīng)激作用,促進(jìn)RANKL分泌[30-31]。

圖2 姜黃對(duì)大鼠血清中OPG及RANKL水平的影響Fig.2 Effect of turmeric on OPG and RANKL of rats(±s,n=10)

姜黃組、不含姜黃組與模型對(duì)照組對(duì)比,大鼠血清OPG水平分別升高了16.83 ng/L(p<0.01)、10.00 ng/L(p<0.01),RANKL水平分別降低了0.019 nmol/L(p<0.01)、0.0086 nmol/L(p<0.01)。姜黃組與不含姜黃組對(duì)比,大鼠血清OPG水平分別升高了6.83 ng/L(p<0.01),RANKL水平分別降低了0.011 nmol/L(p<0.01)。說(shuō)明姜黃組與不含姜黃組食品配方對(duì)提高OPG表達(dá)及抑制RANKL水平表達(dá)有一定的積極作用,這是因?yàn)閮山M配方中的葛根中含有類雌激素物質(zhì),一定程度上發(fā)揮了雌激素樣的活性作用[23-25],且配方中骨碎補(bǔ)中含有的黃酮類物質(zhì)對(duì)OPG的增加及RANKL的減少均有一定的作用[32]。通過(guò)姜黃組與不含姜黃組比較可知,含姜黃的食品配方作用更好,此結(jié)果與李義等[33]研究得出的結(jié)論相一致。這是因?yàn)?炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-1可以促進(jìn)RANKL的表達(dá)[34],而姜黃中的姜黃素能夠通過(guò)下調(diào)IL-1的方式抑制細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激作用的發(fā)生[35],從而促進(jìn)OPG的表達(dá),抑制RANKL的分泌。

2.3 實(shí)驗(yàn)大鼠股骨形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)結(jié)果

骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)是在骨代謝領(lǐng)域中的重要研究工具,是評(píng)價(jià)骨轉(zhuǎn)換與骨結(jié)構(gòu)的有效研究手段。骨小梁厚度、骨小梁間隙等靜力學(xué)指標(biāo)反映單位面積內(nèi)骨小梁連接狀況和骨小梁本身的結(jié)構(gòu)特征,骨結(jié)構(gòu)越優(yōu)化,骨的抗骨折能力就越強(qiáng)。骨小梁厚度、骨小梁間距是反映骨結(jié)構(gòu)的參數(shù),成骨細(xì)胞數(shù)及破骨細(xì)胞數(shù)則反映骨形成和骨吸收的骨重建參數(shù),并能解釋骨結(jié)構(gòu)參數(shù)的變化。幾個(gè)指標(biāo)之間密切相關(guān),互相聯(lián)系。

2.3.1 對(duì)大鼠股骨長(zhǎng)度的影響 由圖3可知,姜黃組、不含姜黃組及模型對(duì)照組較假手術(shù)組大鼠股骨平均長(zhǎng)度分別低0.01、0.005、0.015 cm,其中,姜黃組與假手術(shù)組無(wú)明顯差異(p>0.05),而另外兩組與假手術(shù)組均存在顯著性差異(p<0.01)。這是因?yàn)榇笫箅p側(cè)摘除卵巢后,由于雌激素缺乏而導(dǎo)致破骨細(xì)胞功能亢進(jìn),骨更新速度加快[36-37]。姜黃組、不含姜黃組與模型對(duì)照組比較,大鼠股骨長(zhǎng)度分別較模型對(duì)照組長(zhǎng)0.13、0.10 cm,且姜黃組較不含姜黃組大鼠股骨平均長(zhǎng)度長(zhǎng)0.04 cm。說(shuō)明姜黃組與不含姜黃組食品配方對(duì)大鼠股骨長(zhǎng)度縱向生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用,且姜黃組對(duì)模型鼠股骨縱向生長(zhǎng)促進(jìn)作用更為明顯,是由于姜黃素能夠降低血骨鈣素濃度,對(duì)模型鼠體內(nèi)破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收有抑制所用[35],結(jié)果與Sophocleous等[38]得出結(jié)論一致。

圖3 姜黃對(duì)大鼠股骨長(zhǎng)度的影響Fig.3 Effect of turmeric on the femur

2.3.2 對(duì)大鼠股骨結(jié)構(gòu)參數(shù)的影響 由圖4可知,假手術(shù)組骨小梁厚度為(27.92±7.5) μm,骨小梁間隙為(11.30±4.71) μm。姜黃組、不含姜黃組及模型對(duì)照組與假手術(shù)組比較,骨小梁厚度分別降低了11.6%、27.3%、73.35%,其中姜黃組與假手術(shù)組骨小梁厚度無(wú)明顯差異(p>0.05);骨小梁間隙分別增加了61.2%、101%、162%。這是因?yàn)楣堑闹厮苁且环N動(dòng)態(tài)平衡過(guò)程,雌激素缺乏會(huì)導(dǎo)致骨吸收增加而骨形成減少,破壞了原有的動(dòng)態(tài)平衡系統(tǒng),從而導(dǎo)致骨小梁厚度變薄[39]以及骨小梁間距增加[40]。

圖4 姜黃對(duì)大鼠股骨骨小梁厚度及間隙的影響Fig.4 Effect of turmeric on trabecular thickness and space of rats(±s,n=10)

姜黃組、不含姜黃組骨小梁厚度均高于模型對(duì)照組(p<0.01),分別為模型對(duì)照組的3.3倍和2.7倍,骨小梁間隙均低于模型對(duì)照組(p<0.01),分別為模型對(duì)照組的61.5%和76.7%;姜黃組與不含姜黃組比較,骨小梁厚度增加了4.38 μm(p<0.01)、骨小梁間隙減少了4.5 μm(p<0.05)。這是因?yàn)閮山M配方中均有雌激素樣作用活性成分,能夠?qū)侵厮芷胶馄鸬揭欢ǖ拇龠M(jìn)作用。并且,姜黃素能夠調(diào)控多種重要的靶分子,如:轉(zhuǎn)錄因子、激活蛋白-1、白細(xì)胞介素-1等[41]參與骨重塑的調(diào)控[42],進(jìn)而達(dá)到穩(wěn)定其平衡的作用。

2.3.3 對(duì)大鼠股骨靜態(tài)參數(shù)的影響 如圖5所示,姜黃組、不含姜黃組、模型對(duì)照組與假手術(shù)組比較,成骨細(xì)胞數(shù)分別降低了9.6%、26.5%、54.2%,破骨細(xì)胞數(shù)分別增高了40%、133%、253%,且均呈顯著性差異(p<0.01)。這是因?yàn)榇萍に厝狈?huì)誘導(dǎo)破骨細(xì)胞的增殖、分化[43],從而導(dǎo)致成骨細(xì)胞的降低及破骨細(xì)胞的增加。

圖5 姜黃對(duì)大鼠股骨成骨細(xì)胞數(shù)及破骨細(xì)胞數(shù)的影響Fig.5 Effect of turmeric on osteoblast and osteoclast in rats(±s,n=10)

姜黃組、不含姜黃組與模型對(duì)照組比較,成骨細(xì)胞數(shù)分別高97%、60.5%,破骨細(xì)胞數(shù)分別低60%、34%,均呈現(xiàn)顯著性差異(p<0.01)。姜黃組的成骨細(xì)胞數(shù)比不含姜黃組的高23%(p<0.01),破骨細(xì)胞數(shù)低40%(p<0.01)。這是因?yàn)閮山M配方中的成分發(fā)揮了雌激素樣活性作用,抑制了破骨細(xì)胞的分化、增值。并且,多個(gè)研究組研究發(fā)現(xiàn),姜黃素能夠通過(guò)不同路徑以不同方式對(duì)破骨細(xì)胞進(jìn)行作用,促進(jìn)其成熟、凋亡[31,44-46]。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,該含姜黃食品配方對(duì)大鼠體重不正常增長(zhǎng)、骨小梁厚度的降低、骨小梁間隙的變大、成骨細(xì)胞水平的降低以及破骨細(xì)胞水平的升高均有一定的抑制作用,對(duì)大鼠股骨長(zhǎng)度的增長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用。說(shuō)明此含姜黃的食品配方能夠維持大鼠骨量、延緩骨結(jié)構(gòu)的破壞,通過(guò)減少、抑制具有骨吸收作用破骨細(xì)胞的數(shù)量、活性和壽命來(lái)減少骨質(zhì)流失率。并且,各組成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞分化情況與血清中OPG及RNAKL表達(dá)水平結(jié)果相一致,說(shuō)明各項(xiàng)指標(biāo)之間具有良好的相互關(guān)聯(lián)性。本研究為此含姜黃食品配方開(kāi)發(fā)成為預(yù)防絕經(jīng)后女性骨質(zhì)疏松保健食品提供了一定的理論及實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

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Effects of the food contained turmeric on bone tissue in ovariectomized rats

LU Kuan1,2,ZHANG Jie3,LIU Wen-wei4,*,HUO Xin1,LIU Jian-hua5,GAO Yu-qiong1,FENG Fa-jin1

(1.Guizhou Institute of Biotechnology Research and Development,Guiyang 550002,China; 2.Kehui Pharmaceutical Factory in Guizhou Province,Guiyang 550011,China; 3.Guizhou Medical University,Guiyang 550025,China; 4.Guizhou Province Hospital of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550002,China; 5.The Key Laboratory of Chemistry for Natural Products of Guizhou Province and Chinese Academy of Sciences,Guiyang 550002,China)

Objective:To explore the effects of the food contained turmeric on bone tissue in ovariectomized rats. Methods:The osteoporosis model was established by removing the ovaries of the rats. The animals were divided into sham group,model group,turmeric group,and excluding turmeric group,continuous feeding 90 d. Then,the weight,femur length,and bone parameters of each group were measured. Blood was gained from the eyeballs of rats. Osteoprotegerin(OPG)and receptor activator for nuclear factor Κ-βligand(RANKL)level were measured by ELISA method. Results:The rats weight of turmeric group increased relatively close to the control group(p>0.05). The turmeric group had significant increase(p<0.01)in the level of OPG,femur length,trabecular thickness,and the number of osteoblast,as well as significant decrease(p<0.01)in the level of RANKL,trabecular space,and the number of osteoclast compared to the model group. The turmeric group had significant increase in the level of OPG and trabecular thickness(bothp<0.05),femur length and the number of osteoblast(bothp<0.01),as well as significant decrease in the level of RANKL and trabecular space(bothp<0.05),the number of osteoclast(p<0.01)compared to the excluding turmeric group. Conclusion:The results indicated that the food contained turmeric had inhibitory effect on bone tissue degeneration in ovariectomized rats.

turmeric;ovariectomized rats;osteoporosis;bone tissue

2016-12-02

陸寬(1987-)，男，碩士，助理研究員，主要從事保健食品研發(fā)及中藥研究,E-mail:wukong4608@163.com。

*通訊作者:劉文煒(1982-)，女，碩士，主管藥師，主要從事中藥制劑開(kāi)發(fā)研究，E-mail:khliuwenwei@163.com。

貴州省社會(huì)發(fā)展攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目[黔科合SY字(2014)3013]；貴州省開(kāi)發(fā)類科研院所技術(shù)開(kāi)發(fā)研究專項(xiàng)資金項(xiàng)目[黔科合成字(2013)5028];貴州省科技人才建設(shè)項(xiàng)目[黔科合人才團(tuán)隊(duì)(2014)4011]。

TS201.4

A

1002-0306(2017)11-0334-06

10.13386/j.issn1002-0306.2017.11.056