• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    大豆苷元與氨基修飾β—環(huán)糊精包合物的制備、表征及水溶性

    2017-06-21 22:48鄧穎慧蘇麗娜龐艷華郭亞飛王芬
    分析化學(xué) 2017年5期
    關(guān)鍵詞:水溶性

    鄧穎慧+蘇麗娜+龐艷華+郭亞飛+王芬+廖霞俐+楊波

    摘 要 采用飽和水溶液法制備了大豆苷元分別與兩種氨基修飾β環(huán)糊精(ACD) 即單6氨基β環(huán)糊精(NCD) 和單6乙二胺基β環(huán)糊精(ENCD) 的固體包合物,并獲得最佳包合條件:大豆苷元與環(huán)糊精投料比為3∶1(n/n) ,攪拌時間為72 h,分別獲得83%和67%的產(chǎn)率。利用X射線粉末衍射和熱重分析對其進行了表征,證實了兩種包合物的形成。利用Job′s曲線法確定了主客體的包合比為1∶1,并利用熒光光譜滴定分析測得其包合穩(wěn)定常數(shù)KS分別為899.2和203.8 L/mol。水溶性實驗表明,通過與NCD和ENCD形成包合物,25℃下大豆苷元在水中的溶解度由原來的8.31 μg/mL增至15.2和13.2 mg/mL,分別提高了約1800和1500倍。

    關(guān)鍵詞 大豆苷元;氨基修飾β環(huán)糊精;固體包合物;包合行為;水溶性

    1 引 言

    大豆苷元,即7,4′二羥基異黃酮(Daidzein,圖1) ,又名黃豆苷元、大豆黃酮、大豆素等,是一種重要的異黃酮類化合物,主要存在于豆科類植物如大豆和葛根中。研究表明,大豆苷元具有多種重要的藥理作用,主要包括抗血栓和動脈粥樣硬化的形成[1]、抗糖尿病[2,3]、抗氧化[4,5]、骨骼保護[6,7]及抗腫瘤等作用[8,9],同時,大豆苷元還通過在腸道中代謝為Sequol而具有雌激素樣的作用[10,11]。但是,大豆苷元溶解性差,穩(wěn)定性低,口服吸收差,致使其生物利用度低,體內(nèi)吸收量少,大大阻礙了其藥理作用的有效發(fā)揮[12,13]。化學(xué)修飾手段,如成酸[14,15]、成鹽[16,17]和糖苷化[18,19]等,是近年來報道的提高大豆苷元的水溶性最為常見的途徑。但是,這些方法常存在制備困難、水溶性提高程度有限及大豆苷元活性受到影響等不利因素。因此,改善大豆苷元的水溶性,對提高其生物利用度、開發(fā)其藥用價值等均具有重要意義。

    環(huán)糊精(Cyclodextrin, CD) 是直鏈淀粉在環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶作用下生成的一系列環(huán)狀寡糖的總稱,通常含有6~8個D(+)吡喃葡萄糖單元,分別稱為α, β和γ環(huán)糊精。環(huán)糊精具有“內(nèi)疏水、外親水”的截錐狀分子結(jié)構(gòu),能與眾多有機/無機分子通過多種非共價相互作用,如范德華力、氫鍵作用、疏水作用等形成水溶性的主客體包合物或組裝成復(fù)雜的超分子體系。當(dāng)將環(huán)糊精作為超分子主體應(yīng)用于難溶藥物或生物活性分子時,可大大提升其水溶性、穩(wěn)定性和生物利用度等性質(zhì)[20~22]。

    本實驗室近年致力于以環(huán)糊精為主體的天然藥物超分子體系研究[23~27],發(fā)現(xiàn)用氨基等基團修飾β環(huán)糊精后,可極大地提升其水溶性。本研究以兩種氨基修飾的β環(huán)糊精衍生物(ACD) ,即單6氨基β環(huán)糊精(NCD) 和單6乙二胺基β環(huán)糊精(ENCD) 為主體,采用飽和水溶液法分別制備了它們與大豆苷元的固體包合物,優(yōu)化了包合條件,通過X射線粉末衍射(XRD) 和熱重(TG) 分析等手段對它們進行了表征,采用熒光光譜法確定了包合平衡常數(shù)和包合比,同時對包合物的水溶性進行測試。

    2 實驗部分

    2.1 儀器與試劑

    Shimadzu RF5301PC熒光分光光度計(日本島津公司); D/Max3B X射線衍射儀(日本理光公司); NETZSCH STA449F3同步熱分析儀(德國耐馳公司) 。

    大豆苷元(純度>98%,阿拉丁試劑) 、β環(huán)糊精(食品級,98%,孟州華興) 為直接購買使用,NCD和ENCD為參考本實驗室已有方法[28,29]自制。其它試劑均為分析純,實驗用水為二次蒸餾水。

    2.2 實驗方法

    2.2.1 大豆苷元與氨基修飾β環(huán)糊精固體包合物的制備 在室溫(25℃) 及避光條件下,取大豆苷元76 mg(0.3 mmol) 溶于5 mL無水乙醇中,同時按一定比例取氨基修飾β環(huán)糊精溶于20 mL蒸餾水(pH≈7.0) 中,混合兩種溶液。室溫避光攪拌一定時間之后,減壓蒸去體系中的溶劑,再加少量水溶解。過濾除去其中的不溶固體,并用0.45 μm微孔濾膜過濾,得到澄清濾液。減壓蒸干后, 于40℃真空干燥24 h,即得到固體包合物。通過對大豆苷元與氨基修飾β環(huán)糊精的投料比及攪拌時間的優(yōu)化,以固體包合物的產(chǎn)率為指標(biāo)獲取兩種固體包合物形成的最佳條件。

    2.2.2 XRD分析 分別取大豆苷元、NCD、ENCD及它們的固體包合物作X射線粉末衍射分析。測試條件為:Cu靶,Kα輻射源(k=1.5460 ) ,電壓為40 kV,電流為100 mA,掃描速率為5°/min。

    2.2.3 熱力學(xué)性能測試 對大豆苷元、NCD、ENCD及它們的包合物進行了熱性質(zhì)研究。熱分析條件為:氮氣流速為70 mL/min,升溫速率為10℃/min,并由室溫升到400℃。

    2.2.4 熒光光譜滴定 采用熒光光譜滴定法測定大豆苷元與β環(huán)糊精衍生物的包合穩(wěn)定常數(shù)KS。首先,配制Na2CO3NaHCO3緩沖溶液(pH 10.5) ,并用其配制0.01 mol/L氨基修飾β環(huán)糊精溶液及3.0×105 mol/L大豆苷元溶液。取8支10 mL比色管,分別加入大豆苷元溶液1.0 mL,然后依次加入氨基修飾β環(huán)糊精溶液0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, 1.2, 1.5和2.0 mL。所有待測比色管均用緩沖溶液定容至10 mL,室溫下超聲30 min后,在λex/λem = 385/468 nm波長下測定。

    2.2.5 水溶性測試 采用飽和水溶液稱重法來進行包合物的水溶性測試。分別在2 mL蒸餾水(pH≈7.0) 中加入過量固體包合物,25℃避光劇烈攪拌1 h。濾紙過濾除去不溶固體后,再用0.45 μm微孔濾膜過濾,濾液減壓蒸干,稱重,以此計算包合物在水中的溶解度。

    3 結(jié)果與討論

    3.1 大豆苷元/NCD固體包合物的制備

    在大豆苷元/NCD固體包合物的制備過程中,大豆苷元與NCD的投料比(大豆苷元∶NCD,摩爾比) 及包合攪拌時間對生成包合物的收率有一定的影響。 實驗結(jié)果表明:隨著攪拌時間延長,收率隨之提高,且至72 h時基本達到平衡,此時繼續(xù)延長攪拌時間對提高收率不再起作用,這時包合脫包的可逆過程基本達到平衡。此外,隨著投料比的增加,收率也隨之增加。當(dāng)大豆苷元與NCD的投料比為3∶1時,收率基本趨于平衡,此時繼續(xù)提高投料比也不會導(dǎo)致收率的明顯變化。因此,經(jīng)篩選確定該包合物制備的最佳條件為:大豆苷元與NCD的投料比為3∶1,包合時間為72 h,此時收率為83%。具體的投料比和攪拌時間對包合物回收率所產(chǎn)生的影響如表1所示。

    3.2 大豆苷元/ENCD固體包合物的制備

    與大豆苷元/NCD固體包合物的制備過程相似,包合攪拌時間和投料比這兩個因素同樣對大豆苷元/ENCD固體包合物的收率產(chǎn)生明顯影響。實驗結(jié)果表明,隨著攪拌時間的延長,產(chǎn)率隨之提高,且當(dāng)攪拌時間為72 h時,收率達到最大;隨著投料比的增加,收率也隨之增大。當(dāng)大豆苷元與ENCD的投料比為3∶1(n/n) 時,收率達到最大。因此確定包合物制備的最佳條件為:大豆苷元與環(huán)糊精投料比為3∶1(n/n) ,包合時間為72 h時,產(chǎn)率為67%。具體的條件篩選過程如表2所示。

    3.3 XRD分析

    采用XRD分析對大豆苷元在形成包合物前后的晶體/非晶體形態(tài)進行了表征。圖2為大豆苷元、NCD、ENCD及它們之間的兩種固體包合物的XRD圖譜。從圖2可見,大豆苷元本身呈現(xiàn)典型的晶體形態(tài)(a) ,而兩種氨基修飾β環(huán)糊精NCD和ENCD均為無定形態(tài)粉末(b和d) 。而在形成包合后,兩種包合物均不再表現(xiàn)出大豆苷元的晶體形態(tài)特征,而是更多地呈現(xiàn)與其主體(NCD和ENCD) 相似的無定形態(tài)特征。通常,環(huán)糊精如與另一組分只形成簡單的物理混合物時,其XRD分析結(jié)果將呈現(xiàn)兩者圖譜的簡單加合。因此,該變化可初步證明大豆苷元與氨基修飾β環(huán)糊精之間形成了主客體包合物,而非物理混合物。

    3.4 包合物的熱力學(xué)性能

    通過熱重(TG) 分析對大豆苷元形成包合物前后的熱力學(xué)性質(zhì)的改變進行了探討。圖3記錄了大豆苷元、NCD、ENCD及兩種固體包合物的TG曲線,大豆苷元在308.82℃開始分解(曲線a) ,NCD在303.25℃開始分解(曲線b) ,而大豆苷元/NCD包合物在296.83℃開始分解(曲線c) ,即形成包合物后分解溫度較大豆苷元和NCD均有所降低。另一方面,ENCD的分解溫度為272.91℃(曲線d) (其中向上的尖峰應(yīng)為儀器誤差) ,而與大豆苷元形成包合后,包合物的分解溫度降至245.04℃(曲線e) 。從包合前后主、客體及包合物之間熱重曲線的明顯區(qū)別可進一步證實大豆苷元與兩種氨基修飾β環(huán)糊精均形成了包合物。

    3.5 包合比的確定

    以Na2CO3NaHCO3緩沖溶液(pH 10.5) 配制大豆苷元分別與NCD和ENCD的混合溶液。保持大豆苷元與氨基修飾β環(huán)糊精的總濃度不變(3.0 × 105 mol/L) ,使大豆苷元在其中的物質(zhì)的量的比率在0.1~0.9變化。通過測定它們的熒光強度變化獲得Job′s曲線(圖4) ,進而得到大豆苷元的兩種包合物的包合比。由圖4可見,從曲線中最高點所對應(yīng)的橫坐標(biāo)(0.5) 可知,大豆苷元與兩種氨基修飾β環(huán)糊精的包合化學(xué)計量比均為1∶1,此結(jié)果與本研究組之前的研究結(jié)果[30]一致。

    3.6 包合穩(wěn)定常數(shù)的測定

    NCD和ENCD與大豆苷元的混合溶液的熒光光譜曲線如圖5所示。熒光光譜曲線均是以Na2CO3NaHCO3緩沖溶液(pH 10.5) 為介質(zhì)而測得,檢測波長為:λex/λem=385/468 nm。

    由于大豆苷元與NCD和ENCD的包合比均為1∶1,所以其包合穩(wěn)定常數(shù)Ks滿足公式(1) :

    KS: 包合穩(wěn)定常數(shù)(L/mol);[CD]0和[CD]分別為環(huán)糊精的初始濃度及環(huán)糊精濃度(mol/L); [Daidzein]0和[Daidzein]分別為大豆苷元的初始濃度及大豆苷元濃度(mol/L); [CD·daidzein]:環(huán)糊精/大豆苷元包合物的濃度(mol/L);ΔF: 大豆苷元熒光強度的變化;Δε: 有無環(huán)糊精時大豆苷元的摩爾消光系數(shù)差值。

    由此可推出公式(2) :

    其中,ΔF可以根據(jù)實驗中環(huán)糊精濃度改變測得的熒光強度差值計算得到,然后根據(jù)非線性最小二乘法計算得到包合物的KS值。表3給出了兩種包合物包合穩(wěn)定常數(shù)KS及吉布斯自由能變化ΔG,兩種氨基修飾β環(huán)糊精對大豆苷元的包結(jié)能力NCD>ENCD,這與兩者在同一條件下的包合收率大小一致(83%和67%) ,表明包合能力的強弱可能影響氨基修飾β環(huán)糊精與同一客體形成包合物的收率。

    3.7 包合物的水溶性

    通過飽和水溶液法測試表明,大豆苷元與NCD及ENCD形成包合物后,在水中的溶解度分別提高至15.2和13.2 mg/mL(以大豆苷元的質(zhì)量計算) ,相對于同樣條件下大豆苷元本身的溶解度(8.31 μg/mL) 分別提高了約1800和1500倍。與此同時,與文獻報道的β環(huán)糊精常見衍生物如2羥丙基β環(huán)糊精(HPβCD) [30,32]、磺丁基醚β環(huán)糊精(SBEβCD) [31]以及β環(huán)糊精[32]等相比,本研究所使用的兩種氨基修飾β環(huán)糊精對大豆苷元具有更強的增溶能力(見表4) 。

    實驗結(jié)果表明,利用飽和水溶液法制備的大豆苷元與兩種氨基修飾β環(huán)糊精NCD和ENCD的固體包合物,均可明顯提高大豆苷元的水溶性,形成包合物后,大豆苷元在水中的溶解度分別提高了約1800和1500倍,對大豆苷元的增溶能力強于已報道的環(huán)糊精及其衍生物。這些實驗結(jié)果可為設(shè)計和開發(fā)新的大豆苷元的水溶性制劑提供新的研究思路。

    References

    1 Gottstein N,Ewins B A, Eccleston G P, Hubbard G P, Kavanagh I C, Minihane A M, Weinberg P D, Rimbach G. Brit. J. Nutr., 2003, 89: 607-615

    2 Park M H,Ju J W, Park M J, Han J S. Eur. J. Pharmacol., 2013, 712: 48-52

    3 Cheong S H,F(xiàn)uruhashi K, Ito K, Nagaoka M, Yonezawa T, Miura Y, Yagasaki K. J. Nutr. Biochem., 2014, 25: 136-143

    4 Fritz K L,Seppanen C M, Kurzer M S, Csallany A S. Nutr. Res., 2003, 23: 479-487

    5 Dwiecki K, Neunert G, Polewski P, Polewski K. J. Photochem. Photobiol. B, Biol., 2009, 96: 242-248

    6 Fonseca D, Ward W E. Bone, 2004, 35: 489-497

    7 Somjen D, Katzburg S, Kohen F, Gayer B, Livne E. J. Cell. Biochem., 2008, 103: 1826-1832

    8 de Lemos M L. Ann. Pharmacother., 2001, 35: 1118-1121

    9 Liu X, Suzuki N,Laxmi Y R S, Okamoto Y, Shibutani S. Life Sci., 2012, 91: 415-419

    10 Lu Z, Zhou R, Kong Y, Wang J, Xia W,Guo J, Liu J, Sun H, Liu K, Yang J, Mi M, Xu H. Curr. Cancer Drug Targets, 2016, 16: 455-465

    11 Kang N J, Lee K W,Rogozin E A, Cho Y Y, Heo Y S, Bode A M, Lee H J, Dong Z. J. Biol. Chem., 2007, 282: 32856-32866

    12 King R A,Bursill D B. Am. J. Clin. Nutr., 1998, 67: 867-872

    13 Setchell K D R, Brown N M, Desai P, ZimmerNechemias L, Wolfe B E, Brashear W T, Kirschner A S, Cassidy A, Heubi J E. J. Nutr., 2001, 131: 13625-13755

    14 Kanakubo A, Koga K, Isobe M, Fushimi T, Saitoh T, Ohshima Y, Tsukamoto Y. Tetrahedron, 2001, 57: 8801-8805

    15 Chen X L, Shi X N,Qu L B, Yuan J W, Lu J S, Lu Y F. Chin. J. Chem., 2007, 25: 1008-1013

    16 Fairley B,Botting N P, Cassidy A. Tetrahedron, 2003, 59: 5407-5410

    17 Soidinsalo O, Whl K. Steroids, 2004, 69: 613-616

    18 Needs P W, Williamson G. Carbohydr. Res., 2001, 330: 511-515

    19 Shimoda K, Sato N, Kobayashi T, Hamada H, Hamada H. Phytochemistry, 2008, 69: 2303-2306

    20 Loftsson T, Brewster M E. J. Pharm. Sci., 1996, 85: 1017-1025

    21 Rajewski R A, Stella V J. J. Pharm. Sci., 1996, 85: 1142-1169

    22 Loftsson T, Duchêne D. Int. J. Pharm., 2007, 329: 1-11

    23 Han B, Yang B, Yang X, Zhao Y, Liao X, Gao C, Wang F, Jiang R. J. Biosci. Bioeng., 2014, 117: 775-779

    24 Wang F, Yang B, Zhao Y, Liao X, Gao C, Jiang R, Han B, Yang J, Liu M, Zhou R. J. Biomater. Sci. Polym. Ed., 2014, 25: 594-607

    25 Xiao D, Yang B, Zhao Y, Liao X, Yang X, Wang F, Chen Y, Zhou R. J. Incl. Phenom. Macrocycl. Chem., 2014, 79: 349-356

    26 Ren Y, Liu Y, Niu R, Liao X, Zhang J, Yang B. J. Mol. Struct., 2016, 1117: 1-7

    27 Ren Y, Liu Y, Yang Z, Niu R, Gao K, Yang B, Liao X, Zhang J. Mater. Sci. Eng. C Mater. Biol. Appl., 2016, 69: 68-76

    28 Ren Y, Yang B, Liao X. RSC Adv., 2016, 6: 22034-22042

    29 Ren Y, Yang B, Liao X. Catal. Sci. Technol., 2016, 6: 4283-4293

    30 Deng Y, Pang Y,Guo Y, Ren Y, Wang F, Liao X, Yang B. J. Mol. Struct., 2016, 1118: 307-315

    31 LEI YingJie, YU Mei, ZHAO Kang. Food Sci., 2005, 26(10): 134-137

    雷英杰, 俞 玫, 趙 康. 食品科學(xué), 2005, 26(10): 134-137

    32 GE YueBin, CHEN DaWei, XIE LiPing, WANG HongZhong, ZHENG GuiLan, ZHANG RongQing. Chin. J. Chin. Mater. Med., 2006, 31(24): 2039-2041

    葛月賓, 陳大為, 謝莉萍, 王洪鐘, 鄭桂蘭, 張榮慶. 中國中藥雜志, 2006, 31(24): 2039-2041

    猜你喜歡
    水溶性
    二氧化硫性質(zhì)實驗聯(lián)合改進創(chuàng)新研究
    重慶市四季PM2.5化學(xué)組分分析
    水溶性半無機硅鋼片漆的研制與應(yīng)用
    金屬活動性順序表簡單應(yīng)用策略研究
    一種基于香豆素衍生物的鐵離子水溶性熒光探針的合成及其應(yīng)用
    水溶性肥料的優(yōu)勢
    碳富勒烯水溶性復(fù)合物固體材料的制備
    包裝及農(nóng)用水溶性聚乙烯醇薄膜專利技術(shù)綜述
    低聚水溶性殼聚糖制備反應(yīng)條件的選擇
    水溶性肥料
    亚洲电影在线观看av| www.色视频.com| 长腿黑丝高跟| 亚洲va在线va天堂va国产| 又爽又黄无遮挡网站| 欧美潮喷喷水| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲综合色惰| 欧美zozozo另类| 久99久视频精品免费| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲av五月六月丁香网| 国产真实伦视频高清在线观看| 久久精品影院6| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 99热这里只有是精品在线观看| 欧美中文日本在线观看视频| 日本一本二区三区精品| 在线观看免费视频日本深夜| 久久久久久伊人网av| 99久久无色码亚洲精品果冻| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产精品人妻久久久久久| 午夜福利高清视频| 天堂√8在线中文| 久久久久国内视频| 日本欧美国产在线视频| 有码 亚洲区| 婷婷精品国产亚洲av| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲成人久久性| 国产高清视频在线播放一区| 少妇丰满av| 一进一出好大好爽视频| 麻豆国产97在线/欧美| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 91在线精品国自产拍蜜月| 天堂√8在线中文| 亚洲无线在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 99精品在免费线老司机午夜| 22中文网久久字幕| 变态另类丝袜制服| 精品人妻熟女av久视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久久久久国产a免费观看| 好男人在线观看高清免费视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 亚洲成人av在线免费| 成人国产麻豆网| 欧美激情在线99| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 欧美最新免费一区二区三区| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 男女那种视频在线观看| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲自偷自拍三级| 简卡轻食公司| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 欧美日本视频| 欧美人与善性xxx| 国产精品亚洲美女久久久| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲国产精品合色在线| 欧美bdsm另类| 亚洲五月天丁香| 亚洲国产精品国产精品| 精品一区二区三区人妻视频| 亚洲无线在线观看| 最近的中文字幕免费完整| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 日韩高清综合在线| 天堂网av新在线| 麻豆久久精品国产亚洲av| 长腿黑丝高跟| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 久久久精品94久久精品| 久久人人爽人人片av| av在线亚洲专区| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 俄罗斯特黄特色一大片| 免费黄网站久久成人精品| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲av.av天堂| 春色校园在线视频观看| 成人欧美大片| 午夜影院日韩av| 一个人免费在线观看电影| 晚上一个人看的免费电影| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 日韩中字成人| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲人成网站在线播| 免费av观看视频| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲内射少妇av| 一级黄片播放器| 搡老熟女国产l中国老女人| 成人三级黄色视频| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲在线观看片| 欧美一区二区精品小视频在线| 淫秽高清视频在线观看| 91精品国产九色| 国语自产精品视频在线第100页| 久久久成人免费电影| 亚洲五月天丁香| 亚洲四区av| avwww免费| a级毛片a级免费在线| 一进一出抽搐动态| 亚洲人成网站高清观看| 中文资源天堂在线| 亚洲电影在线观看av| 国产三级在线视频| 日韩欧美三级三区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 在线播放国产精品三级| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 又黄又爽又刺激的免费视频.| 黄色日韩在线| 精品久久国产蜜桃| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲第一区二区三区不卡| 色哟哟·www| 日本黄色片子视频| 精品不卡国产一区二区三区| 国产一区二区激情短视频| 桃色一区二区三区在线观看| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲内射少妇av| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产精品国产高清国产av| 高清日韩中文字幕在线| 51国产日韩欧美| 成人永久免费在线观看视频| 国产精品久久久久久精品电影| 日本欧美国产在线视频| 久久亚洲国产成人精品v| av国产免费在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 午夜免费男女啪啪视频观看 | av黄色大香蕉| 国产三级中文精品| 美女内射精品一级片tv| 麻豆一二三区av精品| 无遮挡黄片免费观看| 夜夜爽天天搞| 国产av麻豆久久久久久久| 深夜a级毛片| 中国美女看黄片| 国产av麻豆久久久久久久| 亚洲自拍偷在线| 亚洲精品久久国产高清桃花| 久久亚洲国产成人精品v| 国内揄拍国产精品人妻在线| av女优亚洲男人天堂| 国产成人一区二区在线| 亚洲自偷自拍三级| 99久国产av精品| 插逼视频在线观看| 久久久精品94久久精品| 国产av一区在线观看免费| av在线蜜桃| 99九九线精品视频在线观看视频| 又爽又黄a免费视频| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲精品影视一区二区三区av| 成人综合一区亚洲| 亚洲美女黄片视频| 国产精品嫩草影院av在线观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 有码 亚洲区| 国产v大片淫在线免费观看| 女同久久另类99精品国产91| 免费大片18禁| 最近最新中文字幕大全电影3| 日韩精品青青久久久久久| 欧美zozozo另类| 免费观看精品视频网站| 一a级毛片在线观看| 国内精品宾馆在线| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 好男人在线观看高清免费视频| 国产午夜精品论理片| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲精品国产av成人精品 | 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 噜噜噜噜噜久久久久久91| or卡值多少钱| 午夜爱爱视频在线播放| 精品国内亚洲2022精品成人| 在线a可以看的网站| 久久国产乱子免费精品| 欧美性猛交黑人性爽| 麻豆成人午夜福利视频| 国产久久久一区二区三区| 麻豆一二三区av精品| 不卡一级毛片| 久久午夜福利片| 99热这里只有是精品在线观看| 联通29元200g的流量卡| 全区人妻精品视频| 日本 av在线| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产精品一区www在线观看| 联通29元200g的流量卡| 久久久成人免费电影| 久久久久性生活片| av在线蜜桃| 99国产精品一区二区蜜桃av| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产高清视频在线观看网站| 高清毛片免费看| 欧美又色又爽又黄视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产免费男女视频| 久久久久久国产a免费观看| 日本三级黄在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 中国美女看黄片| 欧美高清成人免费视频www| 国产精品av视频在线免费观看| 三级毛片av免费| .国产精品久久| 综合色av麻豆| 亚洲在线自拍视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 一级黄片播放器| 特级一级黄色大片| 国产一区二区在线观看日韩| 亚洲精品粉嫩美女一区| 久久午夜亚洲精品久久| 国产av一区在线观看免费| 欧美区成人在线视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国内精品宾馆在线| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 我的老师免费观看完整版| 欧美在线一区亚洲| 国产成人一区二区在线| 九九热线精品视视频播放| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产 一区精品| 精品一区二区三区视频在线| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 欧美日本亚洲视频在线播放| 成人性生交大片免费视频hd| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 一区二区三区免费毛片| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 成人漫画全彩无遮挡| 天堂网av新在线| 午夜a级毛片| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 身体一侧抽搐| 日韩高清综合在线| .国产精品久久| 99九九线精品视频在线观看视频| 内地一区二区视频在线| 12—13女人毛片做爰片一| 丝袜美腿在线中文| 国产精品一区二区免费欧美| 又粗又爽又猛毛片免费看| 日韩高清综合在线| 黄色一级大片看看| 日本爱情动作片www.在线观看 | 日韩av在线大香蕉| 伊人久久精品亚洲午夜| 综合色丁香网| 国产成人一区二区在线| 中国国产av一级| 99热精品在线国产| 欧美精品国产亚洲| 国产在视频线在精品| 美女大奶头视频| 秋霞在线观看毛片| 中文字幕av成人在线电影| 国产亚洲精品久久久com| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 我要搜黄色片| 尾随美女入室| 国产精品爽爽va在线观看网站| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 少妇丰满av| 成人鲁丝片一二三区免费| 一进一出抽搐gif免费好疼| 日韩高清综合在线| 99视频精品全部免费 在线| а√天堂www在线а√下载| 97超碰精品成人国产| 国产男人的电影天堂91| 黄色欧美视频在线观看| 国产成年人精品一区二区| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲国产精品sss在线观看| 99热全是精品| 男人舔奶头视频| 最近在线观看免费完整版| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 两个人视频免费观看高清| 久久久久免费精品人妻一区二区| av在线天堂中文字幕| 午夜视频国产福利| 男女边吃奶边做爰视频| 99久久精品一区二区三区| 日韩欧美三级三区| 精品久久久久久久久久免费视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲人成网站在线播| 成人三级黄色视频| 性欧美人与动物交配| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲在线自拍视频| 国产亚洲91精品色在线| 青春草视频在线免费观看| 亚州av有码| 色尼玛亚洲综合影院| 一a级毛片在线观看| 一级av片app| 欧美日本亚洲视频在线播放| 女人被狂操c到高潮| 波多野结衣高清无吗| 能在线免费观看的黄片| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产淫片久久久久久久久| 成人特级黄色片久久久久久久| 美女内射精品一级片tv| 亚洲av五月六月丁香网| 两个人视频免费观看高清| 特级一级黄色大片| 岛国在线免费视频观看| 国产黄片美女视频| 久久久久国内视频| 欧美三级亚洲精品| 最近在线观看免费完整版| 国产午夜福利久久久久久| 日韩欧美精品免费久久| 在线天堂最新版资源| 日韩高清综合在线| 小说图片视频综合网站| 男插女下体视频免费在线播放| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 日韩av在线大香蕉| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 日本 av在线| 欧美性感艳星| 久久精品国产亚洲av天美| 国产精品综合久久久久久久免费| a级毛片a级免费在线| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| av在线蜜桃| 日韩av在线大香蕉| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 午夜福利在线在线| 一个人观看的视频www高清免费观看| 午夜精品一区二区三区免费看| 91av网一区二区| 老司机影院成人| 国产毛片a区久久久久| 色哟哟·www| 国内精品久久久久精免费| 国产精品人妻久久久影院| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲18禁久久av| 中文字幕久久专区| 一级毛片电影观看 | 美女 人体艺术 gogo| 日韩精品青青久久久久久| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 嫩草影视91久久| 麻豆乱淫一区二区| 午夜福利18| 性欧美人与动物交配| 91av网一区二区| 色av中文字幕| 日韩制服骚丝袜av| 一本精品99久久精品77| 久久人人爽人人爽人人片va| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产成人一区二区在线| 色播亚洲综合网| 婷婷精品国产亚洲av| 日韩欧美精品免费久久| 国产免费一级a男人的天堂| 午夜爱爱视频在线播放| 免费看a级黄色片| 久久久国产成人精品二区| 无遮挡黄片免费观看| 特大巨黑吊av在线直播| 一进一出好大好爽视频| 亚洲三级黄色毛片| 嫩草影院精品99| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲色图av天堂| 99riav亚洲国产免费| 不卡一级毛片| 久久人人爽人人片av| 亚洲自拍偷在线| 色av中文字幕| av免费在线看不卡| 国产av麻豆久久久久久久| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲,欧美,日韩| а√天堂www在线а√下载| 亚洲经典国产精华液单| 最近手机中文字幕大全| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 欧美一区二区精品小视频在线| 美女 人体艺术 gogo| 色在线成人网| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日本a在线网址| 成年版毛片免费区| 一本一本综合久久| 日韩av不卡免费在线播放| 99热这里只有是精品在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 内地一区二区视频在线| 天堂动漫精品| 国产乱人偷精品视频| 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美日韩国产亚洲二区| 婷婷六月久久综合丁香| 桃色一区二区三区在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 俄罗斯特黄特色一大片| 老女人水多毛片| 日韩人妻高清精品专区| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲av成人精品一区久久| 在线观看一区二区三区| 国产精品一二三区在线看| 两个人的视频大全免费| 最后的刺客免费高清国语| 伦理电影大哥的女人| 日韩成人av中文字幕在线观看 | 一区福利在线观看| 又爽又黄无遮挡网站| 日日啪夜夜撸| 亚洲成人久久爱视频| 我的老师免费观看完整版| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美人与善性xxx| 最近视频中文字幕2019在线8| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲精品色激情综合| 国产大屁股一区二区在线视频| 香蕉av资源在线| 联通29元200g的流量卡| 观看美女的网站| 免费av不卡在线播放| 久久99热6这里只有精品| 少妇人妻一区二区三区视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久人人爽人人爽人人片va| 伦精品一区二区三区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 麻豆国产97在线/欧美| 久久久久久久久久成人| 日韩av在线大香蕉| 国产免费一级a男人的天堂| 亚洲成a人片在线一区二区| 少妇丰满av| 成人美女网站在线观看视频| 欧美一区二区亚洲| 99视频精品全部免费 在线| 三级毛片av免费| 少妇丰满av| 成人美女网站在线观看视频| 我要搜黄色片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 午夜老司机福利剧场| 午夜福利高清视频| 校园春色视频在线观看| 亚洲熟妇熟女久久| 国产探花极品一区二区| 午夜精品在线福利| 日本与韩国留学比较| 久久精品国产亚洲av天美| 九色成人免费人妻av| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产大屁股一区二区在线视频| 淫秽高清视频在线观看| 波野结衣二区三区在线| 精品欧美国产一区二区三| 国产精品一区二区性色av| 国产淫片久久久久久久久| 国产高潮美女av| 中国美女看黄片| 中国美白少妇内射xxxbb| 日本精品一区二区三区蜜桃| 九九爱精品视频在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲人成网站在线观看播放| 我的女老师完整版在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 一a级毛片在线观看| 成人亚洲精品av一区二区| 国产精品综合久久久久久久免费| 超碰av人人做人人爽久久| 中文字幕久久专区| 久久99热这里只有精品18| 少妇人妻精品综合一区二区 | 天美传媒精品一区二区| 观看免费一级毛片| 亚洲成人精品中文字幕电影| 午夜福利成人在线免费观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 成年版毛片免费区| 亚洲欧美日韩高清专用| 婷婷精品国产亚洲av在线| 99久国产av精品| 精品人妻视频免费看| 久久久久性生活片| 日本黄色视频三级网站网址| 国产高清有码在线观看视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 亚洲第一电影网av| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 午夜老司机福利剧场| 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品三级大全| 免费观看精品视频网站| 精品乱码久久久久久99久播| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲自偷自拍三级| 成人欧美大片| 嫩草影院精品99| 一个人看视频在线观看www免费| 国产高清有码在线观看视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 男人的好看免费观看在线视频| 国产午夜福利久久久久久| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 大型黄色视频在线免费观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产真实伦视频高清在线观看| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产精品1区2区在线观看.| 国产亚洲精品久久久com| 大型黄色视频在线免费观看| 又爽又黄无遮挡网站| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 精华霜和精华液先用哪个| 国产欧美日韩精品一区二区| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久久a久久爽久久v久久| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产精品综合久久久久久久免费| 直男gayav资源| 深爱激情五月婷婷| 女同久久另类99精品国产91| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲国产精品sss在线观看| 人妻久久中文字幕网| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产成人91sexporn| 亚洲人成网站高清观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美成人a在线观看| 人人妻人人看人人澡| 在线观看美女被高潮喷水网站| 色综合色国产| 给我免费播放毛片高清在线观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产精品伦人一区二区| 丰满的人妻完整版| 日韩大尺度精品在线看网址| 日韩强制内射视频| 国产精品乱码一区二三区的特点| 欧美成人a在线观看| 我的老师免费观看完整版| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲国产欧美人成| 天天一区二区日本电影三级| 插阴视频在线观看视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲欧美精品综合久久99| 香蕉av资源在线| 国产高清三级在线| 久久久久久国产a免费观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 观看美女的网站| 看十八女毛片水多多多| 男人的好看免费观看在线视频|