TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3種方法用于梅毒螺旋體檢測的研究

唐英，潘海平，欒迪

1.青島市中心血站檢驗科，山東青島 266071；2.青島市李滄區(qū)中心醫(yī)院檢驗科，山東青島 266001

TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3種方法用于梅毒螺旋體檢測的研究

唐英1，潘海平1，欒迪2

1.青島市中心血站檢驗科，山東青島 266071；2.青島市李滄區(qū)中心醫(yī)院檢驗科，山東青島 266001

目的探究在梅毒螺旋體檢測中應用TP-ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）、TPPA（明膠顆粒凝集法）及FQ-PCR（熒光定量PCR法）3種方法檢測的價值。方法選取2014年1月—2015年6月收治的50例一期梅毒患者的血清標本作為實驗組，同時選取50例非梅毒患者血清標本作為對照組，對這2組標本均采用TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3種方法進行梅毒螺旋體的檢測，對比其檢測結(jié)果的差異性。結(jié)果FQ-PCR在梅毒螺旋體檢測中應用，其檢測的敏感度（92.00%）明顯高于TTPA檢測的敏感度（66.00%）以及TP-ELISA檢測的敏感度（68.00%）（P＜0.05）。結(jié)論FQ-PCR在梅毒螺旋體檢測中應用，具有較高的特異性以及敏感性，應用價值較高。

酶聯(lián)免疫吸附法；明膠顆粒凝集法；熒光定量PCR法；梅毒螺旋體

梅毒主要是由TP（梅毒螺旋體蒼白亞種）引起的傳染性疾病，患者在疾病早期以皮膚黏膜損傷為主要的臨床表現(xiàn)，晚期則會對其中樞神經(jīng)、心血管、眼部、骨骼等重要的臟器造成損傷，具有較為復雜的病程以及較強的傳染性，可通過性以及母嬰的方式傳播[1-2]。WHO報道顯示，90%以上的梅毒患者發(fā)生于發(fā)展中國家，在部分地區(qū)，梅毒已經(jīng)是較為常見的性病[3]。因此，采取有效措施對梅毒患者進行疾病檢測以及治療干預來改善其預后意義重大。該文主要對梅毒螺旋體檢測中應用TP-ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）、TPPA（明膠顆粒凝集法）及FQ-PCR（熒光定量PCR法）3種方法檢測的價值作分析，內(nèi)容如下文。

1 資料與方法

1.1 基本資料

選取2014年1月—2015年6月收治的50例一期梅毒患者作為實驗組，同時選取50例非梅毒患者作為對照組。

實驗組一期梅毒患者中，男女之比為20/30，年齡在17～62歲之間，年齡均值為（29.62±2.10）歲。

對照組患者中，男女之比為25/25，年齡在18～60歲之間，年齡均值為（30.20±2.09）歲。

兩組標本進行年齡、性別等基本資料對比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

FQ-PCR儀器為Cobas S201核酸檢測系統(tǒng)，試劑盒為Cobas Taqsreen MPX試紙盒；TPPA檢測儀器為全自動生化分析儀OLYMPUS AU400；TP-ELISA檢測儀器為Freedom evoclinical全自動加樣儀。

采用無菌棉拭子采集兩組的局部滲出液、分泌物以及局部淋巴結(jié)抽出液進行FQ-PCR。采用真空采血管采集靜脈血5mL作為血液樣本，將其置于無菌的試管中，并進行離心處理，取血清備用。所有檢測的操作均按照試劑盒的說明書嚴格進行操作。

1.3 觀察指標

對實驗組一期梅毒患者和對照組非梅毒患者經(jīng)TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3種方法檢測的結(jié)果進行觀察分析。

1.4 統(tǒng)計方法

研究數(shù)據(jù)錄入SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件進行處理，計數(shù)資料用χ2檢驗進行分析用[n（%）]表示。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

FQ-PCR在梅毒螺旋體檢測中應用，其檢測的敏感度（92.00%）明顯高于TTPA檢測的敏感度（66.00%）以及TP-ELISA檢測的敏感度（68.00%）差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。FQ-PCR在梅毒螺旋體檢測中的特異度（100.00%）與TTPA檢測的特異度（98.00%）以及TP-ELISA檢測的特異度（96.00%）相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05)。如表1。

表1 TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3種方法檢測結(jié)果對比

3 討論

梅毒是傳染性疾病的一種，其主要的傳播途徑為性傳播，梅毒已經(jīng)對我國新生兒和成人的身體健康造成了嚴重的影響，因此，采取有效措施對梅毒進行防治意義重[4]大。目前，并不存在霉素的特異性疫苗，早期對其疾病進行發(fā)現(xiàn)和治療已經(jīng)是對梅毒傳播進行控制的主要措施。

目前，對梅毒螺旋體進行檢測的方法主要包括分離培養(yǎng)法、直接鏡檢法、血清法、PCR法、金標法等，其中直接鏡檢法包括鍍銀染色法、暗視野顯微鏡法、直接熒光抗體實驗等，直接鏡檢法檢測的準確率較低，且對檢驗人員的要求較高[5]；分離培養(yǎng)法在檢測的過程中，需要采集家兔的睪丸部位進行接種，檢測較為復雜，臨床開展存在一定的局限性[6]；血清學檢測主要是對梅毒螺旋體進行檢測，包括VDRL（玻片試驗）、USR（反應素玻片試驗）、RPR（快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗）、TPPA、TRUST、FTA-ABS（熒光螺旋體抗體吸收試驗）等，但是梅毒早期患者的體內(nèi)并不存在梅毒抗體，因此，檢測存在一定的局限性[7]。

PCR法可以對梅毒螺旋體中的核酸進行檢測，在梅毒早期患者檢測中應用，具有一定的優(yōu)勢。本文研究結(jié)果顯示，F(xiàn)Q-PCR在梅毒螺旋體檢測中應用，其檢測的敏感度（92.00%）明顯高于TTPA檢測的敏感度（66.00%）以及TP-ELISA檢測的敏感度（68.00%）（P＜0.05）。但是該次研究受到引物設計的影響，應在兩周后再次采集患者的血清進行檢測，從而對患者的疾病進行確診。

TPPA檢測法是特異性試驗的一種，主要是以梅毒螺旋體作為抗原，雖然其具有較高的特異性，但是其在梅毒早期患者診斷中應用，敏感性較低，且檢測試劑的成本較高，檢測的過程較為復雜，且在檢測結(jié)果認讀的過程中，存在一定的主觀性，在大樣本的檢測中應用，較易因自凝現(xiàn)象而出現(xiàn)誤診的情況[8-9]。梅毒患者接受正規(guī)治療之后，其TPPA陽性會終身保持，因而將TPPA試驗作為對梅毒患者進行初診的方法較為合理。

TP-ELISA在梅毒螺旋體檢測中應用，也存在一定的假陽性情況，在檢測的過程中，在一定程度上需要憑借臨床醫(yī)療人員的經(jīng)驗來作判斷[10]。

綜上所述，TP-ELISA、TPPA及FQ-PCR 3種方法在梅毒螺旋體檢測中應用，均具有一定的價值，其中，F(xiàn)QPCR在梅毒螺旋體檢測中應用的敏感性與特異性更高，可以較好對梅毒患者的疾病早期進行發(fā)現(xiàn)，從而對其臨床疾病治療提供依據(jù)，改善梅毒患者的預后，應用價值較高。

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R446.6

A

1672-5654（2017）05（b）-0054-02

2017-02-18）

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.14.054

唐英（1978-），女，山東青島人，本科，主管技師，研究方向：血液檢測。