通腑定喘湯對(duì)慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰熱壅肺型患者M(jìn)MP-9/TIMP-1失衡的影響

胡丹丹 徐宇杰 樓黎明 夏文進(jìn) 陳素珍 王世強(qiáng)

浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院 杭州 310005

通腑定喘湯對(duì)慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰熱壅肺型患者M(jìn)MP-9/TIMP-1失衡的影響

胡丹丹 徐宇杰 樓黎明 夏文進(jìn) 陳素珍 王世強(qiáng)

浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第三醫(yī)院 杭州 310005

[目的]探討通腑定喘湯對(duì)慢性阻塞性肺病急性加重期（Acute Exacerbation Chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD）痰熱壅肺型患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9，MMP-9)/基質(zhì)蛋白金屬酶抑制劑-1(tissue inhibitor of metalloprotease-1,TIMP-1)的影響。[方法]60例AECOPD屬痰熱壅肺型患者按隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組和對(duì)照組，每組各30例；兩組常規(guī)治療相同，治療組予每日加用通腑定喘湯，連用14d。酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)兩組患者治療前后血清MMP-9及TIMP-1含量。[結(jié)果]組間比較，治療后治療組患者血清MMP-9含量及MMP-9/TIMP-1比值均較對(duì)照組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。組內(nèi)比較，治療組患者血清MMP-9、TIMP-1含量及MMP-9/TIMP-1比值較治療前降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。[結(jié)論]通腑定喘湯對(duì)AECOPD痰熱壅肺型患者血清MMP-9/TIMP-1失衡有調(diào)節(jié)作用。

慢性阻塞性肺疾病急性加重；痰熱壅肺；通腑定喘湯；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；基質(zhì)蛋白金屬酶抑制劑-1

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一種發(fā)生機(jī)制至今尚不完全明確的呼吸系統(tǒng)常見疾病，以持續(xù)氣流受限為主要特征。在COPD發(fā)生機(jī)制方面，近年來的研究表明，基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9，MMP-9)/基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(tissue inhibitor of metalloproteinase 1，TIMP-1)比值起著主要作用[1]。通腑定喘湯由定喘湯加制大黃組成，前期臨床研究揭示，屬痰熱壅肺型的慢性阻塞性肺病急性加重期（Acute Exacerbation Chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD）患者，使用通腑定喘湯14d后，可顯著降低血清炎癥指標(biāo)、改善患者肺功能并能提高臨床療效[2]。現(xiàn)代藥理表明定喘湯及大黃均具有抑菌、抗病毒、抗炎等作用[3,4]，而對(duì)MMP-9/TIMP-1是否有調(diào)節(jié)作用尚無文獻(xiàn)報(bào)道。本研究試圖通過觀察通腑定喘湯對(duì)屬痰熱壅肺型AECOPD患者血清MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP-1比值的影響，擬進(jìn)一步探討其可能的作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 研究對(duì)象為在我院2014年8月至2015年8月期間住院治療的AECOPD患者。診斷標(biāo)準(zhǔn)：中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[5]；西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《慢性阻塞性肺疾病診治指南》（2013年修訂版）[6]。（1）西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：患者符合COPD診斷標(biāo)準(zhǔn)，近期表現(xiàn)咳嗽加重，黃膿痰增多，發(fā)熱，呼吸困難等。（2）中醫(yī)辨證：痰熱壅肺證：咳嗽，咯痰黃稠而量多，胸悶，氣喘息粗，甚則鼻翼煽動(dòng)，或喉中痰鳴，煩躁不安，發(fā)熱口渴，或咳吐膿血腥臭痰，胸痛，大便秘結(jié)，小便短赤，舌紅苔黃膩，脈滑數(shù)。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合AECOPD西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)和中醫(yī)辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除肺心病患者；（2）近3月內(nèi)未參與其他臨床治療；（3）自愿參加，對(duì)研究?jī)?nèi)容充分了解并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）不符合上述標(biāo)準(zhǔn)者；（2）合并血液系統(tǒng)、肝、腎等重要臟器嚴(yán)重疾患者；（3）合并意識(shí)障礙、癲癇、精神病、腦血管病等患者；（4）不能配合治療，依從性差患者；（5）處于疾病穩(wěn)定期患者。將60例證屬痰熱壅肺型AECOPD患者按照隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和治療組。對(duì)照組30例，男19例，女11例，平均年齡（71.01±6.8）歲，平均病程（13.83±5.0）年，病情程度：輕度7例(24%)，中度14例(46%)，重度9例(30%)；治療組30例，男20例，女10例，平均年齡（68.52±7.4）歲，平均病程（14.01±4.1）年，病情程度：輕度8例(27%)，中度13例(43%)，重度9例(30%)。對(duì)兩組患者的年齡、性別、病程、病情程度等資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，顯示無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），具有可比性。

1.2 治療方法 對(duì)照組采用常規(guī)西藥治療：持續(xù)低流量吸氧、支氣管擴(kuò)張劑改善氣道痙攣、抗生素抗感染、化痰、糖皮質(zhì)激素抑制炎癥反應(yīng)等對(duì)癥治療。按對(duì)照組上述常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，治療組加服通腑定喘湯（制大黃10g，黃芩10g，炙麻黃6g，杏仁10g，桑白皮10g，白果10g，炙蘇子15g，法半夏10g，款冬花10g，大棗10g）治療。通腑定喘湯藥物每日1劑，由本院中藥房采用全自動(dòng)煎藥機(jī)代煎，每次煎取200mL，早晚分2次溫服，共服14d。分別于治療前1天及治療結(jié)束后第1天抽取患者血清5mL，離心后備用。

1.3 觀察指標(biāo) 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)兩組患者治療前后血清MMP-9及TIMP-1含量。MMP-9 ELISA試劑盒、TIMP-1 ELISA試劑盒均購(gòu)自sigma公司，貨號(hào)分別為RAB0372、RAB0467。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件：計(jì)量資料以(±s)表示，若符合正態(tài)性分布，采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；若非正態(tài)分布，則采用非參數(shù)檢驗(yàn)。P<0.05則視為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

治療前，兩組患者血清MMP-9、TIMP-1含量及MMP-9/TIMP-1比值相互比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)；治療14d后，兩組患者血清MMP-9、TIMP-1含量及MMP-9/TIMP-1比值較治療前降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P< 0.05），而治療組患者血清MMP-9含量及MMP-9/ TIMP-1比值均較對(duì)照組降低明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。見表1。

表1 兩組血清MMP-9、TIMP-1和MMP-9/TIMP-1比值變化(±s)

表1 兩組血清MMP-9、TIMP-1和MMP-9/TIMP-1比值變化(±s)

注：與本組治療前相比，*P<0.05；與對(duì)照組同期相比，#P<0.05。

組別 治療組對(duì)照組治療前 治療后 治療前 治療后MMP-9（ng/ml）TIMP-1（ng/ml）MMP-9/TIMP-1比值258.58±40.26 154.87±41.26 1.75±0.42 141.27±30.55*#137.39±50.74*1.09±0.29#261.83±42.01 162.37±43.44 1.74±0.58 177.99±42.71*140.06±25.49*1.31±0.39*

3 討論

COPD是以氣道不完全性可逆氣流受限為特征的一種常見病，肺實(shí)質(zhì)破壞、黏液高分泌、氣道重塑等多種原因都可導(dǎo)致COPD氣流持續(xù)受限，而導(dǎo)致氣流受限的重要不可逆因素為氣道重塑。引起氣道壁結(jié)構(gòu)異常構(gòu)建的重要原因則是細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）的降解和沉積失衡。MMP-9是MMPs家族的重要成員，可破壞COPD患者的肺泡結(jié)構(gòu)及肺泡基質(zhì)成分，降解氣道和肺的ECM和基底膜，進(jìn)而介導(dǎo)炎癥細(xì)胞聚集、破壞氣道內(nèi)皮和上皮結(jié)構(gòu)，從而參與到氣道重塑過程[7,8]，導(dǎo)致氣流不可逆受限。TIMP-1則是MMP-9的天然抑制因子，其對(duì)MMP-9活性有明顯抑制作用，可促進(jìn)ECM在氣道壁大量沉積，從而具有修復(fù)氣道基底膜的作用[9]。正常情況下，MMP-9/ TIMP-1保持平衡，維持ECM的穩(wěn)態(tài)。在炎癥等因素刺激下，MMP-9/TIMP-1比例失調(diào)，ECM失去穩(wěn)態(tài)，二者就參與到氣道炎癥、修復(fù)過程中。因此，若能調(diào)節(jié)MMP-9/TIMP-1比值失衡，即可抑制氣道重塑，進(jìn)而可改善氣流受限，由此可為AECOPD患者提供新的治療思路。

痰熱蘊(yùn)結(jié)、肺氣郁閉、肺失宣降[10]是AECOPD的主要病機(jī)特點(diǎn)，課題組前期臨床研究表明，“肺氣失宣→痰熱壅肺→肺壅腑實(shí)”極可能是導(dǎo)致AECOPD患者出現(xiàn)氣道炎癥、氣道重塑和進(jìn)行性氣道受限的關(guān)鍵性病理環(huán)節(jié)。在“肺與大腸相表里”及“治病理當(dāng)攻邪，邪去而元?dú)庾詮?fù)”等中醫(yī)理論指導(dǎo)下，課題組予通腑定喘湯治療此類患者。該方由定喘湯加制大黃組成，通過肺腸同治，上宣下通，因勢(shì)利導(dǎo)，使得腑通邪去，肺氣自復(fù)。前期臨床觀察表明，通腑定喘湯用于屬痰熱壅肺型的AECOPD患者，可降低患者炎癥指標(biāo)、改善患者的肺功能并顯著提高患者的臨床療效[2]?，F(xiàn)代藥理證實(shí)，定喘湯有抗變態(tài)反應(yīng)、抗病毒、抑菌、抗炎等作用，且具抗炎、平喘、化痰之效[3]。大黃對(duì)鏈球菌及葡萄球菌等多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌和某些革蘭氏陰性菌，均具有較強(qiáng)抑制作用；此外大黃還具有消除內(nèi)毒素和抗病毒的作用[4]。本研究通過觀察通腑定喘湯對(duì)AECOPD患者血清MMP-9、TIMP-1含量及MMP-9/TIMP-1比值的影響，以進(jìn)一步探討其可能的作用機(jī)制。研究表明，與對(duì)照組比較，治療組患者血清MMP-9含量及MMP-9/TIMP-1比值均較對(duì)照組明顯降低，降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療組治療前后比較，治療后各項(xiàng)指標(biāo)均較治療前下降，降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。表明通腑定喘湯改善AECOPD的機(jī)制可能與其調(diào)節(jié)MMP-9/TIMP-1失衡相關(guān)，其深入的作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

[1]Yang XP,Zhou ZS,Hu HB,et al.Effects of Gubenkeli capsule on matrix metallopeptidase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 levels in lung tissue of a rat model of chronic obstructive pulmonary disease[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2011,15 (11):2087-2090．

[2]徐宇杰，胡丹丹，樓黎明，等.通腑定喘湯治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰熱壅肺型30例觀察[J].浙江中醫(yī)雜志，2015，50(11)：790-791.

[3]李德順，李亞清.定喘湯及其拆方治療哮喘藥理作用實(shí)驗(yàn)研究[J].天津中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2003，22(1)：16-18.

[4]丁麗，鄒宇，李智永.大黃的藥理與臨床應(yīng)用[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2011，5（4）：165-166.

[5]鄭筱萸.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2002：54-57.

[6]中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.慢性阻塞性肺疾病診治指南(2013年修訂版)[J].中華結(jié)核和呼吸雜志，2013，36(4)：255-264.

[7]Yang Xiaoping，Zhou Zhaoshan，Hu Haibo，et al.Effects of Gubenkeli capsule on matrix metallopeptidase 9 and tissue inhibitor of metalloproteinase 1 levels in lung tissue of a rat model of chronic obstructive pulmonary disease[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research，2011，15(11)：2087-2090.

[8]Yadav RK，Gupta SP，Sharma PK，et al．Recent advances in studies on hydroxamates as matrix met alloproteinase inhibitors:areview[J]．Curr Med Chem，2011，18(11):1704-1722．

[9]Schirmer H，Bassoda Silva L，Teixeira PJ，et al.Matrix metalloproteinase gene polymorphisms：lack of association with chronic obstructive pulmonary disease in a Brazilian population[J].Genet Mol Res，2009，8(3)：1028-1034.

[10]李建生，李彬，余學(xué)慶，等.清熱化痰方藥治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰熱壅肺證的臨床療效評(píng)價(jià)[J].中醫(yī)雜志，2011，52(3)：203-207.

Influence of Tongfu Dingchuan Decoction on Expression of MMP-9/TIMP-1 in Acute Exacerbation Chronic Obstructive Pulmonary Disease Patients with Syndrome of Phlegm-heat Obstructing Lung

HU Dandan，XU Yujie，LOU Liming，et al
The Third Hospital Affiliated to Zhejiang Traditional Chinese Medical University,Hangzhou(310005)

[Objective]To observe the effect of Tongfu Dingchuan Decoction on expression of MMP-9/TIMP-1 in acute exacerbation chronic obstructive pulmonary disease patients with syndrome of phlegm-heat obstructing lung.[Methods]60 patients of AECOPD with syndrome of phlegm-heat obstructing lung were randomly divided into two groups(each n=30).The treatmeat group were treated by Tongfu Dingchuan Decoction,while all patients in the two groups were treated following the routine western medicine.All patients would be treated for 14 days.MMP-9 and TIMP-1 in serum were detected by enzyme-linked immunoassay(ELISA).[Results]After the therapeutic course,compared with normal group,the expressions of MMP-9 and MMP-9/TIMP-1 in serum were decreased in patients with COPD(P<0.05).[Conclusion]Tongfu Dingchuan Decoction has effect on patient with AECOPD by regulating the balance of MMP-9/TIMP-1.

acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease;phlegm-heat obstructing lung;Tongfu Dingchuan Decoction;Matrix metallopeptidase-9;tissue inhibitor of metalloproteinase 1

R273

：A

：1005-5509（2017）05-0397-03

10.16466/j.issn1005-5509.2017.05.013

2016-09-22）

浙江省中醫(yī)藥科技計(jì)劃（2012ZA069；2012ZB069）

Fund project:Item of Zhejiang Provincial TCM Administration（2012ZA069；2012ZB069）

徐宇杰，E-mail：sky20010827@yeah.net