二倍體太子參叢生芽誘導(dǎo)研究

王琨++丁馳++崔志鋼

摘要 為了提高二倍體太子參組織培養(yǎng)中叢生芽的誘導(dǎo)率，以優(yōu)良二倍體太子參萌發(fā)的芽為外植體，以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度NAA、6-BA的激素對(duì)外植體進(jìn)行誘導(dǎo)。結(jié)果表明，NAA和6-BA對(duì)二倍體太子參叢生芽誘導(dǎo)均有促進(jìn)作用，且以MS為基本培養(yǎng)基，添加0.5 mg/L NAA和1.0 mg/L 6-BA最適宜二倍體太子參叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)。

關(guān)鍵詞 太子參；組織培養(yǎng)；二倍體；外植體

中圖分類號(hào) S567.5+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-5739（2017）08-0067-01

Study on Induction of Diploid Radix Pseudostellariae Crowded Buds

WANG Kun DING Chi CUI Zhi-gang ZHAO Hui-fang

（Tongren Polytechnic College，Tongren Guizhou 554300）

Abstract In order to improve the training of multiple shoot induction rate of diploid Raiix Pseudostellaria tissues，taking excellent diploid Radix Pseudostellaria germination buds as explants，MS as the basic medium，adding different hormone concentrations of NAA，6-BA，the explants were induced.The results showed that NAA and 6-BA were both promoted for diploid bud induction ginseng，and adding 0.5 mg/L NAA and 1.0mg/L 6-BA with MS as the basic medium were most suitable for diploid bud induction culture of Radix Pseudostellariae.

Key words Radix Pseudostellariae；tissue culture；diploid；explant

太子參為石竹科植物，其塊根含有皂苷、多糖、氨基酸等活性物質(zhì)。近年來(lái)，太子參在化妝品和食療保健品的研制開(kāi)發(fā)上應(yīng)用廣泛，需求不斷增加，逐漸成為一個(gè)新起的中藥種類[1]。由于近些年來(lái)使用單一的太子參栽培品種，加之長(zhǎng)期進(jìn)行無(wú)性繁殖，使太子參栽培品種退化，病蟲害發(fā)生種類增多、程度加重，嚴(yán)重影響了太子參的產(chǎn)量和品質(zhì)[2-3]。本文利用組織培養(yǎng)技術(shù)，在無(wú)菌條件下對(duì)太子參進(jìn)行離體培養(yǎng)，篩選出一套適合二倍體優(yōu)質(zhì)太子參種苗培養(yǎng)的較優(yōu)條件。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

外植體：二倍體太子參栽培品種黔太子參1號(hào)。外植體培養(yǎng)物料：腐殖土和菇渣。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 外植體的獲取。當(dāng)太子參塊根上萌發(fā)出長(zhǎng)1 cm左右的芽時(shí)，剪取肥大、芽頭完整、無(wú)損傷、無(wú)病害且健壯一致的芽，用低濃度的洗衣粉水浸泡12～15 min，再用流水沖洗20 min。在無(wú)菌條件下，先用70%乙醇浸泡10 s，無(wú)菌水沖洗3～4次，再用0.1% HgCl2消毒8 min，無(wú)菌水沖洗4～5次[3]。切掉幼芽基部待用。

1.2.2 太子參叢生芽誘導(dǎo)。NAA設(shè)置0、0.1、0.5、1.0、1.5 mg/L 6個(gè)濃度梯度，6-BA設(shè)置0、0.1、0.5、1.0、1.5 mg/L 5個(gè)濃度梯度，共16個(gè)處理，將1.2.1中得到的外植體分別接種于16種添加不同濃度激素組合的 MS培養(yǎng)基上。人工控制光照強(qiáng)度為3 000 lx，培養(yǎng)室溫度為（25±1） ℃，每天連續(xù)光照12 h的環(huán)境下培養(yǎng)，每種不同激素配比的培養(yǎng)基接種100瓶，每瓶培養(yǎng)基接種外植體1個(gè)，35 d后記錄叢生芽誘導(dǎo)數(shù)和苗高生長(zhǎng)情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度NAA對(duì)二倍體太子參莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響

將太子參莖尖接種于MS誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)10 d后，莖尖開(kāi)始萌發(fā)，頂芽和腋芽逐漸出現(xiàn)，35 d時(shí)，對(duì)頂芽和腋芽的生長(zhǎng)情況和苗高進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果如表1所示?？梢钥闯觯谖刺砑?-BA條件下，MS培養(yǎng)基中添加NAA濃度分別為0、0.1、0.5、1.0、1.5 mg/L的都能誘導(dǎo)太子參的生長(zhǎng)。其中未添加NAA的培養(yǎng)基誘導(dǎo)分化叢生芽數(shù)達(dá)到55個(gè)，添加1.0 mg/L的NAA平均苗高達(dá)到2.3 cm。方差分表明，添加NAA對(duì)太子參莖尖誘導(dǎo)叢生芽無(wú)顯著影響，對(duì)太子參叢生芽生長(zhǎng)有較好促進(jìn)作用。

2.2 不同濃度6-BA對(duì)二倍體太子參莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響

由表2可知，在叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中以添加6-BA 1.0 mg/L對(duì)叢生芽誘導(dǎo)影響最大，誘導(dǎo)率達(dá)61%。方差分析表明，添加6-BA對(duì)叢生芽誘導(dǎo)影響顯著。同時(shí)，隨著6-BA濃度的增加，平均苗高呈進(jìn)一步增長(zhǎng)趨勢(shì)。

2.3 不同濃度NAA和6-BA對(duì)二倍體太子參莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)的影響

由表3可知，當(dāng)在MS培養(yǎng)基中添加NAA 0.5 mg/L和6-BA 1.0 mg/L時(shí)，誘導(dǎo)太子參莖尖分化叢生芽數(shù)最高，誘導(dǎo)率達(dá)75%。方差分析表明，不同激素組合處理對(duì)太子參莖尖叢生芽誘導(dǎo)的芽數(shù)和平均株高影響達(dá)到極顯著水平。

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加NAA和6-BA均能促進(jìn)二倍體太子參叢生芽的產(chǎn)生，且以NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L，誘導(dǎo)叢生芽和促進(jìn)叢生芽生長(zhǎng)效果最佳。但選用不同基因型外植體和在不同試驗(yàn)條件下激素對(duì)二倍體太子參組培苗培養(yǎng)的影響還有待進(jìn)一步的研究。

在植物組織培養(yǎng)中，激素對(duì)于器官形成、細(xì)胞分裂和胚胎發(fā)生起著重要的調(diào)節(jié)作用，植物激素的濃度、配比和培養(yǎng)基種類是選擇的關(guān)鍵。本試驗(yàn)結(jié)果表明，MS培養(yǎng)基較為適合二倍體太子參莖尖組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)。宋麗莎等[4]只用1/2MS培養(yǎng)基作為二倍體太子參的生根壯苗培養(yǎng)基，本試驗(yàn)則在MS培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加了NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L，且取得了較好的結(jié)果；對(duì)于激素方面，有學(xué)者也在培養(yǎng)基中用到KT、IAA、GA和IBA[5-6]，但本試驗(yàn)只選用了常用的6-BA和NAA，也取得了較好的試驗(yàn)效果。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 劉訓(xùn)紅，闞毓銘.太子參研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2000，11（12）：1131-1132.

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[3] 黃勇毅，林叢發(fā).閩東太子參花葉病發(fā)病規(guī)律調(diào)查及防治途徑研究[J].寧德師專學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2004，16（1）：65-68.

[4] 宋麗莎，黎嬌凌，肖國(guó)學(xué)，等.太子參組織培養(yǎng)與快繁技術(shù)[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（6）：55-57.

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