不同劑量分割模式照射Eca109細(xì)胞TNF和SODD的表達(dá)

蔡紅偉，馬代遠(yuǎn)，李賢富，周進(jìn)偉 ，蒲宇，董靈，譚榜憲

(1.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤科；2.醫(yī)學(xué)影像四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；3.閬中市人民醫(yī)院，四川 南充 637000)

不同劑量分割模式照射Eca109細(xì)胞TNF和SODD的表達(dá)

蔡紅偉1,3，馬代遠(yuǎn)1，李賢富1，周進(jìn)偉1，蒲宇2，董靈3，譚榜憲1

(1.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤科；2.醫(yī)學(xué)影像四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；3.閬中市人民醫(yī)院，四川 南充 637000)

目的：通過模擬不同劑量分割方式照射食管癌細(xì)胞Eca109，觀察比較各組別凋亡相關(guān)基因腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)和死亡結(jié)構(gòu)域沉默子(silencer of death domains,SODD)的各組別表達(dá)差異并分析原因及意義，嘗試為臨床實(shí)施的非常規(guī)放療提供潛在基礎(chǔ)理論依據(jù)。方法：設(shè)計(jì)具有相同BED的4種劑量分割模式，照射處于指數(shù)生長(zhǎng)期的Eca109細(xì)胞后，RT-PCR檢測(cè)各組TNF mRNA和SODD mRNA表達(dá)變化，Western Blot檢測(cè)各組TNF 蛋白和SODD蛋白表達(dá)變化。結(jié)果：各組TNF mRNA及蛋白的表達(dá)量均數(shù)差值比較，有顯著性差異；各組SODD mRNA及蛋白的表達(dá)均數(shù)差值比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：模擬照射各組中超分割組TNF mRNA表達(dá)上調(diào)幅度最大，SODD mRNA上調(diào)幅度亦最大。提示在射線誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞以某種方式走向死亡過程中，存在著促凋亡基因和抗凋亡基因之間的博弈。模擬照射各組中TNF蛋白和SODD蛋白均大部分下調(diào)，提示除DNA是射線的主要損傷靶點(diǎn)外，射線對(duì)其他細(xì)胞器的損傷作用亦不容忽視，因?yàn)樗鼈兊墓δ軤顟B(tài)可能影響到蛋白質(zhì)的合成。

劑量分割；Eca109；腫瘤壞死因子；死亡結(jié)構(gòu)域沉默子

食管癌是我國(guó)常見的惡性腫瘤，占惡性腫瘤死亡率第四位[1]。放射治療作為食管癌治療的三大手段之一，遺憾的是幾十年來常規(guī)的劑量分割模式(1.8～2.0 Gy/Fx，5 Fx/w)治療療效沒有得到明顯提高。近年來隨著以三維適形和調(diào)強(qiáng)放療為代表的新技術(shù)越來越多地應(yīng)用于臨床，在不增加正常組織損傷的前提下進(jìn)行食管癌的非常規(guī)劑量分割放療成為一個(gè)研究熱點(diǎn)。然而目前存在的問題是針對(duì)食管癌放療劑量分割的研究，臨床課題多，基礎(chǔ)研究少，故本實(shí)驗(yàn)通過模擬不同劑量分割方式照射Eca109細(xì)胞，觀察腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)和死亡結(jié)構(gòu)域沉默子(silencer of death domains,SODD)基因及蛋白的表達(dá)變化，并分析兩者的關(guān)系，嘗試為臨床選擇非常規(guī)分割放療治療食管癌提供潛在的基礎(chǔ)理論依據(jù)。

TNF是由多種細(xì)胞合成、釋放并引起全身系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子,其對(duì)細(xì)胞本身而言具有促凋亡和促增殖的雙重作用。目前人們對(duì)于TNF促凋亡與促增殖之間的關(guān)系及機(jī)制仍不清楚。SODD主要是在腫瘤壞死因子受體1 (tumor necrosis factor receptor1,TNF-R1)信號(hào)傳導(dǎo)通路中充當(dāng)負(fù)調(diào)節(jié)子，阻止TNF-R1信號(hào)傳導(dǎo)通路呈持續(xù)激活狀態(tài)，穩(wěn)定內(nèi)環(huán)境，維持正常組織細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞系與主要試劑

人食管癌Eca109細(xì)胞株購(gòu)于上海凱基生物。在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中常規(guī)培養(yǎng)傳代，當(dāng)細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。RT-PCR反應(yīng)試劑盒購(gòu)于天根公司，Western Blot 試劑盒購(gòu)于碧云天公司。TNF，SODD及內(nèi)參(ACTB)引物由上海生工合成，引物序列詳見表1。TNF抗體購(gòu)于Sigma公司，SODD抗體購(gòu)于Prosci公司。

表1 TNF，SODD及內(nèi)參(ACTB)的引物序列

1.2 模擬照射各組具體方案設(shè)計(jì)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Eca109細(xì)胞進(jìn)行模擬不同劑量分割方式照射，模擬照射分為超分割組，常規(guī)照射組，大分割組，大分割組又分兩個(gè)亞組。同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組(未照射組)。設(shè)計(jì)原則：各照射組之間等效生物劑量基本相同。根據(jù)等效生物劑量的換算公式：EQD2=nldl[(d1 +α/β)/(2 +α/β)],α/β值取腫瘤細(xì)胞常用值10 Gy。EQD2:超分割組(1)=10.175 Gy ；常規(guī)分割(2)=10.000 Gy；大分割組(3)=9.750 Gy；大分割組(7)=9.917 Gy。其中超分割組照射時(shí)兩次時(shí)間間隔不小于6 h[2]。具體照射方案設(shè)計(jì)見表2。

表2 模擬不同劑量分割照射設(shè)計(jì)方案(Gy)

0組代表空白對(duì)照(未照射)；1組代表超分割組(1.1 Gy/Fx)；2組代表常規(guī)分割(2 Gy/Fx)；3組代表大分割組(3 Gy/Fx)；7組代表大分割組(7 Gy/Fx)。

1.3 模擬照射參數(shù)設(shè)置

醫(yī)科達(dá)Precise直線加速器由川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤科提供，在模擬照射過程中其具體參數(shù)設(shè)置如下：射線能量：6 MV X-ray；機(jī)架角：180°；機(jī)頭角：0°；照射野大?。?0 cm×10 cm；照射源距腫瘤細(xì)胞(培養(yǎng)瓶底壁)距離：100 cm；設(shè)定劑量率：600 MU/min (實(shí)際劑量率：500 MU/min)；劑量建成：培養(yǎng)瓶下墊1 cm厚硅膠。

1.4 RT-PCR檢測(cè)TNF mRNA和SODD mRNA基因表達(dá)

模擬不同劑量分割方式照射Eca109細(xì)胞完成后繼續(xù)培養(yǎng)12～24 h，進(jìn)行模擬照射各組總RNA的提取，空白對(duì)照組同時(shí)進(jìn)行。按照RT-PCR試劑盒說明書步驟進(jìn)行總RNA提取，逆轉(zhuǎn)錄，聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)及瓊脂糖凝膠電泳成像。通過凝膠成像儀觀察結(jié)果，用凝膠成像系統(tǒng)自帶Image Lab 軟件進(jìn)行成像，并測(cè)其灰度值，根據(jù)目的基因條帶與內(nèi)參條帶的灰度比值代表其mRNA 表達(dá)水平，進(jìn)行半定量分析。

1.5 Western Blot檢測(cè)TNF和SODD蛋白表達(dá)

模擬不同劑量分割方式照射Eca109細(xì)胞完成后繼續(xù)培養(yǎng)12～24 h，進(jìn)行模擬照射各組總蛋白的提取，空白對(duì)照組同時(shí)進(jìn)行。按照Western Blot試劑盒說明書進(jìn)行蛋白變性，SDS-PAGE電泳，轉(zhuǎn)膜，封閉，一抗孵育，二抗孵育及蛋白顯像等常規(guī)步驟。通過凝膠成像儀觀察結(jié)果，用凝膠成像系統(tǒng)自帶Image Lab 軟件進(jìn)行成像，并測(cè)其灰度值，根據(jù)目的蛋白條帶與內(nèi)參條帶的灰度比值代表其蛋白表達(dá)水平，進(jìn)行半定量分析。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1TNFmRNA和SODDmRNA基因表達(dá)

各組TNFmRNA的表達(dá)量均數(shù)差值比較：0組與3組為0.10(P=0.01)；0組與7組為0.14 (P=0.00)；1組與3組為0.13(P=0.00)；1組與7組為0.18(P=0.00)； 2組與3組為0.09(P=0.03)；2組與7組為0.13(P=0.00)；有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表3、表4)。

各組SODDmRNA的表達(dá)均數(shù)差值比較：0組與1組為0.39(P=0.00)；0組與3為組0.14(P=0.03)；1組與組2為0.33(P=0.00)；1組與3組為0.25(P=0.00)；1組與7組為0.13(P=0.04)；2組與7組為0.13(P=0.00)；有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表3、表5)。

2.2TNF和SODD蛋白表達(dá)

各組TNF蛋白表達(dá)量均數(shù)差值比較：0組與1組為3.30(P=0.00)；0組與2組為4.98(P=0.00)；0組與3組為5.39(P=0.00)；0組與7組為4.61 (P=0.00)；有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表6、表7)。

各組SODD蛋白量均數(shù)差值比較：0組與1組為0.67(P=0.00)；0組與2組0.68(P=0.00)；0組與3組為0.76(P=0.00)；1組與7組為0.80(P=0.00)；2組與7組為0.82(P=0.00)；3組與7組為0.90(P=0.00)；有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表6、表8)。

組別TNFmRNASODDmRNA00．36±0．070．69±0．1010．39±0．071．06±0．1120．35±0．060．76±0．0830．25±0．050．84±0．0970．21±0．040．96±0．10

表4 TNF mRNA在正常Eca109細(xì)胞及模擬不同劑量分割方式照射后的表達(dá)量多組比較結(jié)果(LSD法)

(I)組別(J)組別均數(shù)差值(I-J)標(biāo)準(zhǔn)誤P值01-0．030．030．3820．010．030．7730．100．030．0170．140．030．00100．030．030．3820．040．030．2430．130．030．0070．180．030．0020-0．010．030．771-0．040．030．2430．090．030．0370．130．030．0030-0．100．030．011-0．130．030．002-0．090．030．0370．040．030．2570-0．140．030．001-0．180．030．002-0．130．030．003-0．040．030．25

表5 SODD mRNA在正常Eca109細(xì)胞及模擬不同劑量分割方式照射后的表達(dá)量多組比較結(jié)果(LSD法)

(I)組別(J)組別均數(shù)差值(I-J)標(biāo)準(zhǔn)誤P值01-0．390．060．002-0．060．060．323-0．140．060．037-0．260．060．00100．390．060．0020．330．060．0030．250．060．0070．130．060．04200．060．060．321-0．330．060．003-0．070．060．2470．130．060．00300．140．060．031-0．250．060．0020．070．060．247-0．120．060．06700．260．060．001-0．130．060．0420．190．060．0030．120．060．06

組別TNF蛋白SODD蛋白05．52±3．431．00±0．2312．22±1．690．32±0．0720．54±0．370．31±0．0730．12±0．090．23±0．0470．90±0．701．13±0．27

表7 TNF 蛋白在正常Eca109細(xì)胞及模擬不同劑量分割方式照射后的表達(dá)量多組比較結(jié)果(LSD法)

(I)組別(J)組別均數(shù)差值(I-J)標(biāo)準(zhǔn)誤P值013．301．100．0024．981．100．0035．391．100．0074．611．100．0010-3．301．100．0021．681．100．1432．091．100．0771．311．100．2420-4．981．100．001-1．681．100．1430．411．100．7170．361．100．7430-5．391．100．001-2．091．100．072-0．411．100．717-0．411．100．4870-4．611．100．001-1．311．100．2420．361．100．7430．781．100．48

表8 SODD蛋白在正常Eca109細(xì)胞及模擬不同劑量分割方式照射后的表達(dá)量多組比較結(jié)果(LSD法)

(I)組別(J)組別均數(shù)差值(I-J)標(biāo)準(zhǔn)誤P值010．670．100．0020．680．100．0030．760．100．007-0．130．100．2210-0．670．100．0020．010．100．8730．090．100．377-0．800．100．0020-0．680．100．001-0．010．100．8730．070．100．467-0．820．100．0030-0．760．100．001-0．090．100．372-0．070．100．467-0．900．100．00700．130．100．2210．800．100．0020．820．100．0030．900．100．00

3 討論

TNF和SODD同為TNF-R1信號(hào)傳導(dǎo)通路相同受體的競(jìng)爭(zhēng)性配體，腫瘤細(xì)胞受到損傷(輻射或藥物)誘導(dǎo)凋亡后兩者表達(dá)有怎樣的變化，本實(shí)驗(yàn)通過模擬不同劑量分割方式照射細(xì)胞Eca109后檢測(cè)兩者基因和蛋白的表達(dá)情況探索不同劑量分割方式在基因和蛋白層面的影響。

TNF mRNA的表達(dá)量超分割組較空白對(duì)照上調(diào)，但無(wú)顯著差異，常規(guī)分割較空白對(duì)照下調(diào)，亦無(wú)顯著性差異。大分割組(3)及大分割組(7)較其他 3 組明顯下調(diào)(圖1、圖3)。X射線照射細(xì)胞后通過誘導(dǎo)細(xì)胞以某種方式走向死亡，結(jié)合我課題組既往研究結(jié)果，射線損傷細(xì)胞后TNF扮演了促凋亡的角色，所以，超分割組在所有組別中表達(dá)量最高。但是其他模擬照射組表達(dá)量卻均降低，尤其在大分割的兩個(gè)組特別明顯，可能與細(xì)胞表現(xiàn)的死亡方式有關(guān)[3-6]。

SODD mRNA的表達(dá)量模擬照射各組均較未照射組表達(dá)上調(diào)，其中，超分割組上調(diào)最明顯，大分割組(7)次之，常規(guī)分割與大分割組(3)較空白對(duì)照均無(wú)顯著性差異(圖1、圖3)。

SODD在TNF-R1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中是一個(gè)負(fù)調(diào)節(jié)子(沉默子)，與TNF競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合TNF-R1，阻斷TNF-R1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路呈持續(xù)激活狀態(tài)，穩(wěn)定內(nèi)環(huán)境，維持正常組織細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。理論上，若組織細(xì)胞中SODD過表達(dá)，必將負(fù)調(diào)節(jié)TNF的最重要的生物學(xué)效應(yīng)(細(xì)胞凋亡)，從而使細(xì)胞免于TNF誘導(dǎo)的凋亡，出現(xiàn)永生性惡化甚至癌變；腫瘤細(xì)胞中若SODD過表達(dá)，將導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)細(xì)胞表面死亡受體介導(dǎo)的凋亡敏感性降低，對(duì)放射線和化療藥物表現(xiàn)出耐受性。國(guó)內(nèi)外的幾項(xiàng)研究均認(rèn)為具有抗凋亡功能的SODD的過表達(dá)意味著腫瘤的進(jìn)展或未控，而表達(dá)下調(diào)則預(yù)示著腫瘤受抑[7-9]。

凋亡的激活在很大程度上依賴于促凋亡基因及其蛋白與抑凋亡基因及其蛋白的博弈與平衡[10-11]。本實(shí)驗(yàn)中模擬照射各組SODD mRNA均較空白對(duì)照組表達(dá)上調(diào)，可能正是Eca109細(xì)胞射線損傷后發(fā)生的代償性改變,為了避免死亡的發(fā)生，而與TNF產(chǎn)生的對(duì)抗。這一點(diǎn)在超分割組中表現(xiàn)尤為明顯，超分割組TNF mRNA表達(dá)上調(diào)幅度最大，SODD mRNA上調(diào)幅度亦最大。

TNF蛋白分子量為17 kD，其活性形式是三聚體(51 kD)，本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果發(fā)現(xiàn)在彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)約51 kD處有大量的蛋白印跡，而17 kD位置蛋白印跡淺顯(圖4)，這與相關(guān)文獻(xiàn)吻合[12-14]。故課題組在進(jìn)行灰度值比對(duì)時(shí)采取測(cè)量TNF三聚體以獲得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。TNF蛋白的表達(dá)量模擬照射各組均較未照射組表達(dá)下調(diào)，且均有顯著性差異。各模擬劑量分割照射組之間無(wú)顯著性差異(圖2、圖4)。SODD蛋白表達(dá)量各模擬劑量分割照射組除了大分割組(7)均表達(dá)下調(diào)，且均有顯著性差異。大分割組(7)較空白對(duì)照表達(dá)上調(diào)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表達(dá)下調(diào)的各組之間亦均無(wú)顯著性差異(圖2、圖4)。

模擬不同劑量分割方式照射各組細(xì)胞TNF，SODD蛋白的表達(dá)情況出現(xiàn)了與各自mRNA表達(dá)不一致的結(jié)果。其原因可能是mRNA翻譯成蛋白的過程中出現(xiàn)了差錯(cuò)。但具體機(jī)制并不清楚，可能與射線對(duì)核糖體(蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，線粒體高爾基體等細(xì)胞器的破壞作用有關(guān)。

從本實(shí)驗(yàn)RT-PCR和Western Blot的結(jié)果可以看出：在射線誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞以某種方式走向死亡過程中，可能存在著促凋亡基因和抗凋亡基因之間的博弈，若促凋亡基因占優(yōu)勢(shì)，則腫瘤細(xì)胞走向死亡，若抗凋亡基因占優(yōu)勢(shì)，則腫瘤細(xì)胞加速增殖。另一方面，促凋亡基因表達(dá)升高，可能會(huì)反應(yīng)性地引起抗凋亡基因的表達(dá)上調(diào)[10-11]。這是否可提示臨床上不能因?yàn)橐粋€(gè)基因的表達(dá)變化而推斷疾病的轉(zhuǎn)歸。然而，這種基因之間的博弈也是動(dòng)態(tài)變化的，本實(shí)驗(yàn)的不足之處在于因?yàn)閷?shí)驗(yàn)條件與時(shí)間的限制，未能在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢查這兩個(gè)基因的表達(dá)，而只是在模擬照射結(jié)束后第1天進(jìn)行檢測(cè)，未能進(jìn)行動(dòng)態(tài)研究。射線對(duì)細(xì)胞的損傷效應(yīng)遠(yuǎn)比我們目前知道的復(fù)雜的多，本實(shí)驗(yàn)中兩個(gè)凋亡相關(guān)基因的蛋白受射線照射后下調(diào)，與mRNA的表達(dá)升高不一致，提示出來DNA是射線的主要損傷靶外，射線對(duì)其他細(xì)胞器的損傷作用亦不容忽視，因?yàn)樗鼈兊墓δ軤顟B(tài)可能直接影響到腫瘤細(xì)胞的增殖與凋亡狀態(tài)。但是目前放射腫瘤學(xué)少有關(guān)于放射線對(duì)DNA以外的其他細(xì)胞器損傷的理論與基礎(chǔ)研究。

[1] Zhao P,Dai M,Chen W,etal.Cancer Trends in China[J].Jpn J Clin Oncol,2010,40(4):281-285.

[2] 殷蔚伯，余子豪，徐國(guó)鎮(zhèn)，等.腫瘤放射治療學(xué)[M].第4版,北京：中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2008.

[3] 蔡紅偉，譚榜憲，李賢富，等.不同劑量分割模式照射Eca109細(xì)胞死亡方式與毒性的初步研究[J].川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2016,31(4)：479-489.

[4] 高榮蓮，董波，饒亞嵐，等.大劑量射線照射后PC12細(xì)胞死亡方式的研究[J].中華放射醫(yī)學(xué)與防護(hù)雜志,2006,10( 26):449-452．

[5] 汪靜，汪芳.關(guān)于細(xì)胞死亡方式的研究進(jìn)展[J].實(shí)用醫(yī)藥雜志，2006,10(23):1250-1252.

[6] Jamison JM,Gilloteaux J,Taper HS,etal.Autochizis:a novel cell death[J].Biochemical Pharmacology,2002,63(10):1773-1783.

[7] 陶紅芳，胡群，張柳清，等.SODD和Bcl-2蛋白表達(dá)在兒童急性白血病中的意義及相關(guān)性探討[J].中國(guó)腫瘤臨床，2007,34(3):136-144.

[8] Annunziata CM,Kleinberg L,Davidson B,etal.BAG-4/SODD and associated antiapoptotic proteins are linked to aggressiveness of epithelial ovarian cancer[J].Clin Cancer Res,2007,13(22 Pt 1):6585-6592.

[9] 張琰，劉雅恬，趙炎斌，等.極低頻率電磁場(chǎng)對(duì)肝癌細(xì)胞SODD和Survivin基因表達(dá)的影響[J].中國(guó)腫瘤外科雜志,2012,4(2):101-104.

[10]Joiner M， van der Kogel A.Basic Clinical Radiobiology[M].The 4th Edition,London:Hodder Arnold,2009：168-177.

[11]蔡紅偉，馬代遠(yuǎn)，譚榜憲.TNF，SODD與腫瘤細(xì)胞調(diào)亡[J].川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013,28(4)：400-403.

[12]Carswell EA，Old LG，Kassel RL，etal．An endotoxin-induced serum factor that causes necrosis of tumors[J].Proc Natl Acad Sci USA,1975,72(9):3666-3670.

[13]Smyth MJ,Johnstone RW.Role of TNF in Lymphocyte-Mediated Cytotoxicity[J].Microsc Res Tech,2000,50(3):196-208.

[14]Zhang L,Shimizu S,Tsujimoto Y.Two distinct Fas-activated signaling pathways revealed by an anti-tumor drug[J].Oncogene,2005,24(18):2954-2962.

(學(xué)術(shù)編輯：杜小波)

Expression of TNF and SODD in Eca109 cells under different dose fractionation mode irradiation

CAI Hong-wei1，3，MA Dai-yuan1，LI Xian-fu1，ZHOU Jin-wei1，PU Yu2，DONG Ling3，TAN Bang-xian1

(1.DepartmentofOncology，AffiliatedHospitalofNorthSichuanMedicalCollege；2.SichuanKeyLaboratoryofMedicalImaging；3.LangzhongPeople’sHospital,Nanchong637000，Sichuan，China)

Objective：Hope to provide some theoretical basis for unconventional radiotherapy,we observe and compare expression of apoptosis related genes (TNF and SODD)between groups by simulating different dose fractionation on esophageal cancer cells Eca109.Methods：Design the dose fractionation mode with the same BED.Irradiation is exponential growth phase Eca109 of cells.Detect TNF mRNA and SODD mRNA，expression in each group with RT-PCR on the first day after simulation irradiation.Detect TNF protein and SODD proteins，expression in each group with Western Blot on the first day after simulation irradiation.Results：Mean differences of the TNF mRNA’s and protein’s expression quantity in each group were compared,all were statistically significant;Mean differences of the SODD mRNA’s and protein’s expression quantity in each group were compared,all were statistically significant.Conclusion：Among the simulation irradiation groups,the hyperfractionated group’s TNF mRNA’s expression was the highest,so was SODD mRNA.It suggests that a fight should exist between promoting apoptotic genes and anti-apoptotic gene in the process of induced tumor cells’ dying.In the analog irradiation groups,both TNF protein and SODD protein suffered massive reduction.It suggests that injury of other organelles except DNA can not be ignored,because their functional status may affect the synthesis of protein.

Dose fractionation;Eca109;Tumor necrosis factor;Silencer of death domains

10.3969/j.issn.1005-3697.2017.02.001

中央財(cái)政支持地方高校發(fā)展專項(xiàng)資金(2010-2012年)；四川省教育廳重點(diǎn)課題(11ZA191)；南充市科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(11A0149)

2016-09-01

蔡紅偉(1982-)，男，碩士,主治醫(yī)師。E-mail：chw69940@126.com

譚榜憲，E-mail：tbx_nsmc@126.com

時(shí)間：2017-5-5 16∶46

http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170505.1646.018.html

1005-3697(2017)02-0155-05

R392.11

A