山楂葉總黃酮對2型糖尿病大鼠熱痛閾的影響①

陳熠飛，齊淑芳，陳 虹，張明月

(1.佳木斯中心醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154002；2.佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理教研室，黑龍江 佳木斯 154007)

山楂葉總黃酮對2型糖尿病大鼠熱痛閾的影響①

陳熠飛1，齊淑芳2，陳 虹1，張明月2

(1.佳木斯中心醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154002；2.佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理教研室，黑龍江 佳木斯 154007)

目的： 本實(shí)驗(yàn)旨在觀察山楂葉總黃酮(hawthornleavesflavonoids,HLF)對鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)致2型糖尿病大鼠在熱痛閾方面的作用。方法：共需60例研究對象，通過隨機(jī)分組，得正常對照組、模型組、HLF高、中、低劑量三個治療組、彌可保組共6組，每組研究例數(shù)相等。HLF低中高劑量治療組分別給予山楂葉總黃酮(HLF)70mg、140mg、210mg/kg·d，以此物質(zhì)進(jìn)行灌胃處理，彌可保組灌胃劑量為1.97mg/kg·d。結(jié)果：在模型組，所有研究對象普遍發(fā)生甩尾溫度上升現(xiàn)象，即熱痛閾升高(P<0.01),而HLF中高劑量治療組熱痛閾改變明顯低于模型組(P<0.01)，與正常組比較無顯著差異。結(jié)論：山楂葉總黃酮對糖尿病大鼠周圍神經(jīng)病變引起的熱痛閾的改變具有良好的治療作用，對痛覺靈敏度具有明顯的保留及改善作用。

山楂葉總黃酮；熱痛閾；2型糖尿病大鼠

糖尿病周圍神經(jīng)病變的英文全稱為(diabeticperipheralneuropathy)，簡寫為DPN。在2型糖尿病群體中，此并發(fā)癥具有很高的發(fā)生率,也是病人致殘的一個主要誘因。DPN傷害范圍會波及至多個神經(jīng)系統(tǒng)，其中主要有感覺神經(jīng)系統(tǒng)、自主神經(jīng)系統(tǒng)以及運(yùn)動神經(jīng)系統(tǒng)。其中，發(fā)生率最高的為感覺神經(jīng)病變[1]，通?；颊咦钕瘸霈F(xiàn)雙下肢異樣感覺，感覺不靈敏或缺失，隨病情的進(jìn)展可引起足部潰瘍、壞疽等病變，甚至導(dǎo)致截肢[2]。目前對糖尿病周圍神經(jīng)病變所導(dǎo)致的痛溫覺感覺異常的發(fā)病機(jī)制和治療取得了一定的進(jìn)展，但臨床上對此尚缺乏有效的防治方法。本文以2型糖尿病大鼠為對象，旨在觀察HLF對2型糖尿病大鼠熱痛閾的影響，為臨床合理使用HLF早期治療DPN所致的感覺異常，感覺不靈敏，提供一定的理論參考依據(jù)。

1 研究對象與方法

1.1 動物分組及模型的建立

采用3周齡，體重100～120g雄性大鼠70只，通過隨機(jī)分組，確定為正常對照組(10例)、模型組(60例)兩組。在模型組中，實(shí)施7d適應(yīng)性喂養(yǎng)，接著實(shí)施28d高脂高糖飲食，然后模型組禁食1d后加STZ(50mg/kg)，通過一次性腹腔注射，構(gòu)建2型糖尿病模型，經(jīng)過3d，對空腹血糖值進(jìn)行檢測，若其在>11. 1mmol/L之上，表明順利完成模型[3]。將構(gòu)建造模成功的模型組研究對象進(jìn)行隨機(jī)分組，按照例數(shù)均分原則，得到模型組、HLF高、中、低劑量治療組、彌可保組共5組。HLF低中高劑量治療組按體表面積折算不同物種動物間等效劑量的方法[4]分別給予70mg、140mg、210mg/kg的HLF，至于彌可保組，灌胃藥物為彌可保，計(jì)量為1.97mg/kg·d，共進(jìn)行6周。

1.2 觀察指標(biāo)及方法

1.2.1 一般情況觀察：詳細(xì)記錄全部研究對象的生理特性(毛色、神態(tài))、相關(guān)指標(biāo)(體重)，以及飲食狀況、尿量與行為舉止等狀況。

1.2.2 體重：造模成功后，每兩周記錄一次體重。

1.2.3 空腹血糖測定：造模成功后，每兩周檢測一次。取尾部末梢血1滴用血糖試紙配指尖血糖儀檢查血糖。

1.2.4 熱痛閾測定：通過搖尾試驗(yàn)進(jìn)行檢測。藥物治療6周后，借助改良熱痛閾測量法，將大鼠固定，同時使鼠尾外露,將尾尖置于恒溫水浴箱中，其中水位2cm,剛開始溫度控制在36℃,之后，不斷增加水溫，保持2℃/min速度，當(dāng)發(fā)現(xiàn)鼠尾露出水面時，記錄當(dāng)時溫度，后者即為熱痛閾值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 一般情況觀察

造模前各組動物毛發(fā)光滑，毛色以及飲食無異常，反應(yīng)與行為正常，無遲滯表現(xiàn)。大鼠完成造模后，有若干癥狀表現(xiàn)出來：飲、食以及尿量均增多、體重慢慢降低、體毛變枯變黃且脫落明顯、大便不成形、意志低沉、反應(yīng)能力差，行動緩慢等，整體較正常對照組狀態(tài)差。低劑量HLF治療組大鼠同樣發(fā)生毛發(fā)稍枯、體重變化微弱、飲食與活動頻率降低。中高劑量HLF治療組大鼠表現(xiàn)為：整體狀態(tài)慢慢轉(zhuǎn)良，并且體重增加。彌可保組大鼠表現(xiàn)較好,但整體狀態(tài)不如中高劑量HLF治療組。

2.2 各組大鼠治療前后體重變化

經(jīng)過4周高脂高糖喂養(yǎng)，所有研究對象體重值上升，參比正常對照組，均存在明顯差異。模型組大鼠體重減輕，“三多一少”癥狀突出，參比正常對照組，存在明顯差異(P<0.05)。高中劑量HLF治療組大鼠體重在治療第4周前均表現(xiàn)為下降,給藥4周后,體重出現(xiàn)增長態(tài)勢,經(jīng)過42d的給藥干預(yù),體重值明顯上升，參比模型組，存在顯著差異(P<0.01)。見表1。

表1 治療后各組大鼠體重變化±s，g)

以正常組為參比，△P<0.05，△△P<0.01；以模型組為參比，*P<0.05，**P<0.01；以彌可保組為參比，#P<0.05，##P<0.01。

2.3 各組大鼠治療前后空腹血糖變化

模型組大鼠空腹血糖明顯升高。隨HLF治療時間變化，HLF治療組大鼠各組空腹血糖值均降低，其劑量水平直接關(guān)系到降血糖效果，兩者表現(xiàn)出量效關(guān)系。整個治療過程中，彌可保組空腹血糖與模型組比較無差異。見表2。

表2 治療后各組研究對象空腹血糖變化±s，mmol/L)

以正常組為參比，△P<0.05，△△P<0.01；以模型組為參比，*P<0.05，**P<0.01；以彌可保組為參比，#P<0.05，##P<0.01。

2.4 治療后每組研究對象熱痛閾值的變化

經(jīng)過42d治療，就熱痛閾值方面，參比正常組，模型組顯著升高，即；參比模型組，4個治療組研究對象均發(fā)生下降，，差異顯著。其中HLF高、中劑量組與彌可保組之間不存在顯著差異。見表3。

表3 經(jīng)42d治療后各組研究對象熱痛 閾值的變化

以正常組為參比，△P<0.05，△△P<0.01；以模型組為參比，*P<0.05，**P<0.01；以彌可保組為參比，#P<0.05，##P<0.01。

3 討論

作為一類代謝異常綜合征，糖尿病具高發(fā)病率，其致病主因?yàn)檫z傳以及環(huán)境兩方面因素的協(xié)同作用,在現(xiàn)今人類生活方式影響下，此病的發(fā)生率上升速度加快。糖尿病所導(dǎo)致的長期高糖狀態(tài)能夠使多個系統(tǒng)器官受累,引起組織器官的功能障礙甚至衰竭，糖尿病致死的主要原因也在于此。糖尿病患者常會出現(xiàn)痛溫覺感覺異常,其原因多為糖尿病導(dǎo)致的DPN,對DPN的治療成為了棘手問題，由DPN所導(dǎo)致的疼痛作為一種神經(jīng)病理性疼痛甚至表現(xiàn)出對阿片類藥物的抵抗[5]。DPN病人的生活質(zhì)量嚴(yán)重下降，若干感覺異常表現(xiàn)頻繁出現(xiàn)在病人身上，諸如疼痛、麻木以及發(fā)熱等[6]。臨床上常以改善神經(jīng)功能，有效控制血糖視為治療的主要目標(biāo)[7]，同時，幫助患者養(yǎng)成富有科學(xué)性與規(guī)律性的飲食習(xí)慣，保持運(yùn)動與飲食的合理化，對必要營養(yǎng)元素進(jìn)行及時補(bǔ)充，起到應(yīng)用的輔助治療效果。

抗氧化、調(diào)節(jié)血脂、抗腦組織和心肌缺血等特點(diǎn)作為HLF藥理學(xué)活性已經(jīng)被多項(xiàng)研究證明[8]，在本實(shí)驗(yàn)中，進(jìn)行高脂高糖飲食同STZ腹腔注射聯(lián)合處理，誘導(dǎo)構(gòu)建2型糖尿病大鼠模型[9]，接著，經(jīng)過6周山楂葉總黃酮治療，低中高劑量HLF治療組空腹血糖測定發(fā)現(xiàn)都出現(xiàn)下降，同時恢復(fù)了一定的體重，尤其在高劑量治療組，表現(xiàn)更為顯著。表明HLF可以劑量依賴性恢復(fù)胰島胰島素分泌功能，有助于空腹血糖值的下降，同時對糖尿病癥狀加以有效緩解。各個治療組均有改善熱痛覺遲鈍的作用，HLF中高劑量治療組的效果更為明顯(P<0.01)。本實(shí)驗(yàn)通過對STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病大鼠經(jīng)HLF治療后血糖水平、生物行為學(xué)以及熱痛閾值的研究表明， 針對2型糖尿病大鼠，HLF有助于其血糖值的降低，體重的上升，同時在這些研究對象DPN引發(fā)的熱痛閾值上升方面，起到積極緩解作用，改善2型糖尿病大鼠DPN所致的熱痛覺遲鈍現(xiàn)象。

[1]LlewelynJG.Thediabeticneuropathies:types,diagnosisandmanagement[J].NeurosurgeonPsychiatry，2003, 74：15

[2]張國艷, 田寶文，李長紅, 等.依那普利葉酸片對早期糖尿病腎病的腎臟保護(hù)作用[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2013,36(6):56-57

[3]李偉, 張紅,殷松樓,等.不同劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)SD大鼠糖尿病腎病模型的研究[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2006,26(1):52-55

[4]趙偉,孫國志.不同種實(shí)驗(yàn)動物間用藥量換算[J].畜牧獸醫(yī)科技信息,2010，(5):52-53

[5]萬麗,羅愛林,田玉科.連續(xù)小劑量嗎啡腹腔注射對CCI大鼠抗傷害效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版) ,2005,34(2):232-235

[6]孫蕊,劉世超.α-硫辛酸聯(lián)合甲鈷胺治療糖尿病周圍神經(jīng)病變37例[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2010,(33):156-157

[7]賈竹敏．α-硫辛酸聯(lián)合甲鈷胺治療糖尿病周圍神經(jīng)病變的臨床觀察[J]．中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2010,3(13):143-144

[8]于棟華,包順茹,于純淼,等. 山楂葉總黃酮藥理作用研究進(jìn)展[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,3(15):174-177

[9]劉中柱, 盧文婷.山楂葉總黃酮對糖尿病腎病大鼠腎臟中VEGF表達(dá)影響[J]. 黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2013,36(6):63-64

黑龍江省教育廳科研項(xiàng)目，編號：11551471。

陳熠飛(1991～)男，黑龍江佳木斯人，在讀碩士研究生。

齊淑芳(1972～)女，黑龍江密山人，碩士，副教授，碩士研究生導(dǎo)師。E-mail:qishufang666@163.com。

R

B

1008-0104(2017)02-0016-02

2016-12-20)