COX-2介導(dǎo)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞在乳腺癌進(jìn)展中的作用研究

曹清，程波，聶靜，樊洪，徐夢(mèng)鑫，李玉玲

（九江市第三人民醫(yī)院，江西 九江 332000）

COX-2介導(dǎo)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞在乳腺癌進(jìn)展中的作用研究

曹清，程波，聶靜，樊洪，徐夢(mèng)鑫，李玉玲

（九江市第三人民醫(yī)院，江西 九江 332000）

目的 探討COX-2介導(dǎo)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞在乳腺癌進(jìn)展中的作用，以提高乳腺癌的診治水平。方法 隨機(jī)選取2005年12月～2015 年12月乳腺病變微創(chuàng)手術(shù)或者外科手術(shù)標(biāo)本：癌旁正常乳腺組織50例，標(biāo)本均取自乳腺癌術(shù)后標(biāo)本，同時(shí)距腫物5cm外的正常乳腺組織；良性病變組織80例，導(dǎo)管原位癌54例及浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌135例，標(biāo)本均取自于乳腺病變微創(chuàng)手術(shù)及外科手術(shù)術(shù)后標(biāo)本，檢測(cè)標(biāo)本α-SMA和COX-2在乳腺各病變組織中的表達(dá)。結(jié)果 與癌旁正常乳腺組織、良性病變組織相比，導(dǎo)管原位癌組織α-SMA陽(yáng)性30例（陽(yáng)性率55.55%）、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織α-SMA陽(yáng)性70例（陽(yáng)性率51.85%），腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞陽(yáng)性率相對(duì)較高，表明腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞在后兩者中活化、累積。與癌旁正常乳腺組織、良性病變組織相比，導(dǎo)管原位癌組織COX-2陽(yáng)性28例（陽(yáng)性率51.85%）、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中COX-2陽(yáng)性73例（陽(yáng)性率54.07%），COX-2陽(yáng)性率相對(duì)較高，表明COX-2在后兩者中過表達(dá)。COX-2在乳腺癌過表達(dá)與腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞活化、累積相關(guān)。結(jié)論COX-2介導(dǎo)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞的過表達(dá)能夠提示乳腺癌進(jìn)展情況，在未來研究診斷和治療乳腺癌具有十分重要的臨床價(jià)值

環(huán)氧化酶-2；乳腺癌；腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞

目前，乳腺癌已逐漸成為全球女性最常見的惡性腫瘤，其導(dǎo)致的女性死亡率位居第二[1]?？芍橄侔┮呀?jīng)嚴(yán)重威脅到全球女性的身體健康。乳腺癌的發(fā)病機(jī)理主要是腫瘤細(xì)胞與腫瘤周圍微環(huán)境相互作用的結(jié)果[2]。腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）作為腫瘤微環(huán)境中的主要成分之一，在被活化之后，會(huì)釋放一部分腫瘤相關(guān)細(xì)胞因子（比如PDGF、EGF、MMP-2），進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移[3]。環(huán)氧化酶（COX-2）在前列腺素合成中作為一個(gè)誘導(dǎo)酶。在乳腺癌的組織中COX-2被檢測(cè)到有高表達(dá)，可以促進(jìn)線性膠原纖維的產(chǎn)生，也可以促進(jìn)DCIS向著浸潤(rùn)性癌的發(fā)展[4]。本文中旨在探討COX-2介導(dǎo)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞在乳腺癌進(jìn)展中的作用及兩者的相關(guān)聯(lián)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 隨機(jī)選取2005年12月～2015年12月乳腺病變微創(chuàng)手術(shù)或者外科手術(shù)標(biāo)本：癌旁正常乳腺組織50例，標(biāo)本均取自乳腺癌術(shù)后標(biāo)本，同時(shí)距腫物5cm外的正常乳腺組織；良性病變組織80例，導(dǎo)管原位癌54例及浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌135例，標(biāo)本均取自于乳腺病變微創(chuàng)手術(shù)及外科手術(shù)術(shù)后標(biāo)本。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)α-SMA在乳腺各病變周圍組織中的表達(dá)，初步評(píng)定成纖維細(xì)胞在各病變組織中的活化、累計(jì)情況；檢測(cè)COX-2在乳腺各病變組織中的表達(dá)。

1.2.2 統(tǒng)計(jì)分析成纖維細(xì)胞活化和COX-2兩者在乳腺癌進(jìn)展中分子之間的聯(lián)系；COX-2的表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。

1.3 觀察指標(biāo) α-SMA以及COX-2在鏡下的胞漿呈現(xiàn)出棕黃色時(shí)為陽(yáng)性細(xì)胞，由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)生在鏡下觀察并判定結(jié)果。通過Q550CW圖像采集[5]分析系統(tǒng)把切片上的陽(yáng)性染色信號(hào)轉(zhuǎn)化成灰度并進(jìn)行分析，把組織切片空白處射入值作為定標(biāo)，每張切片的測(cè)定至少要5個(gè)高倍鏡視野，取其平均值作為測(cè)定值，最后用凈灰度值作為最終的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，并統(tǒng)計(jì)分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本研究數(shù)據(jù)均用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計(jì)數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與癌旁正常乳腺組織、良性病變組織相比，腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞在導(dǎo)管原位癌、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中陽(yáng)性率相對(duì)較高，表明腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞在后兩者中活化、累積。與癌旁正常乳腺組織、良性病變組織相比，COX-2在導(dǎo)管原位癌、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中 陽(yáng)性率相對(duì)較高，表明COX-2在后兩者中過表達(dá)。見表1。

表1 成纖維細(xì)胞在各病變組織中的活化和累積情況Table1 Activation and accumulation of fibroblasts in various pathological changes

3 討論

乳腺癌的發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟累積的過程，之前的研究一直認(rèn)為乳腺導(dǎo)管癌是從扁平上皮不典型增生開始的，進(jìn)一步演變?yōu)椴坏湫偷膶?dǎo)管增生，之后發(fā)展成導(dǎo)管原位癌，最后成為可致命性的浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌[6]。其發(fā)展過程也給了我們一個(gè)更加直觀的認(rèn)識(shí)過程，在之前的研究中，科研人員以及相關(guān)學(xué)者主要將目光集中在乳腺上皮細(xì)胞本身的分子遺傳學(xué)上，找尋乳腺癌細(xì)胞本身的分子基因的改變[7]。但是，隨著研究的進(jìn)行，更多的證據(jù)證明乳腺癌的發(fā)生發(fā)展不只是癌細(xì)胞本身。腫瘤微環(huán)境也扮演著不可忽視的重要作用，其本身就是一種復(fù)雜的概念，它主要包括炎癥因素、基底膜、血管微環(huán)境、成纖維細(xì)胞等，他們釋放的相關(guān)細(xì)胞因子和乳腺癌上皮細(xì)胞本身構(gòu)成了一個(gè)分子相互作用網(wǎng)絡(luò)。因此，在分子水平上，揭示癌細(xì)胞與腫瘤微環(huán)境之間的聯(lián)系給乳腺癌的研究者們提供了一種新的研究方向和思路。

乳腺密度的增加也被認(rèn)為是患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)因素，其相關(guān)檢測(cè)也經(jīng)常用于預(yù)測(cè)患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)[8]。乳腺密度和乳腺組織中成纖維細(xì)胞有密切的聯(lián)系。腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）作為腫瘤微環(huán)境中的主要成份，與正常乳腺組織中的成纖維細(xì)胞（Fs）相比，具有自身特有的生物特征，腫瘤中的CAFs被活化后，α-SMA會(huì)呈陽(yáng)性。在之前的研究中，被活化的基質(zhì)可以為乳腺腫瘤細(xì)胞提供結(jié)構(gòu)及營(yíng)養(yǎng)，使組織重組，在自身基因改變和相關(guān)活化基質(zhì)的雙重影響下，乳腺上皮細(xì)胞被激活，從而轉(zhuǎn)變成惡性腫瘤細(xì)胞。隨之出現(xiàn)無(wú)限增殖、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移[9]。

環(huán)氧化酶（COX-2）可以參與多種腫瘤的發(fā)生過程，比如有結(jié)腸癌、胃癌、肝癌、膀胱癌等的癌組織中，其可呈現(xiàn)高表達(dá)。在乳腺癌的組織中，研究人員也可以檢測(cè)出COX-2的高表達(dá)，它的表達(dá)的程度和不良的預(yù)后有關(guān)。動(dòng)物的研究發(fā)現(xiàn)，COX-2的過表達(dá)可以促進(jìn)血管再生、腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲，促進(jìn)了腫瘤的發(fā)展和轉(zhuǎn)移[10]。它的表達(dá)會(huì)隨著腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)移階段的增強(qiáng)而表達(dá)增強(qiáng)。COX-2的過表達(dá)和乳腺密度升高有關(guān)，基因表達(dá)分析表明，PTGS2在高密度的膠原基質(zhì)乳腺上皮細(xì)胞中表達(dá)上升。COX-2的過表達(dá)可以促使線性膠原纖維產(chǎn)生，與此同時(shí)推動(dòng)了DCIS向著浸潤(rùn)性癌的方向發(fā)展。這一觀點(diǎn)也得到了近期研究[11-12]中的證實(shí)。

本研究中發(fā)現(xiàn)COX-2在乳腺癌過表達(dá)與腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞活化、累積相關(guān)。COX-2過表達(dá)可以促進(jìn)血管再生、腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。COX-2介導(dǎo)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞，對(duì)于治療乳腺癌見效快，成功率高。

綜上所述，COX-2介導(dǎo)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞的過表達(dá)能夠提示乳腺癌進(jìn)展情況，在未來研究診斷和治療乳腺癌具有十分重要的臨床價(jià)值。

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COX-2 mediated tumor associated fibroblasts in the progression of breast cancer

Cao Qing,Cheng Bo,Nie Jing,Fan HongXu Meng-xin,Li Yu-ling
（Jiujiang Third People's Hospital,Jiujiang,Jiangxi，332000，China）

Objective To investigate the role of COX-2 in the progression of breast cancer,and to improve the level of diagnosis and treatment of breast cancer.Methods Randomly selectedsurgical specimens from the minimally invasive breast lesions surgery orbreast surgery from December 2005 to December2015.Including 50 cases of adjacent normal breast tissue specimens,which were taken from patients with breast cancerand normal breast tissue from the tumor outside 5cm,80 cases of benign lesions,54 cases of ductal carcinoma in situ and 135 cases of invasive ductal carcinoma.Samples were all taken from postoperative minimally invasive breast lesionsand breast surgery.Tested the expression of a-SMA and COX-2 in breast lesions.Results Compared with normal breast tissues and benign disease tissues,the positiveexpression ofa-SMA in ductal carcinoma in situwas 30 cases(positive rate 55.55%)and positiveexpression ofa-SMA in infiltrating ductal carcinomawas 70 cases(positive rate 51.85%),tumor associated fibroblasts showed high positive rate,which showed tumor associated fibroblasts cells activation and accumulation in the latter two groups. Compared with benign disease tissues and normal breast tissues,COX-2 positivecases number in ductal carcinoma in situ was28(positive rate 51.85%)and in invasive ductal carcinoma was 73(positive rate 54.07%),the positive rate of COX-2 is relatively high in the latter two groups,which showed that over expression of COX-2 in the latter two groups.Overexpression of COX-2 in breast cancer was associated with activation and accumulation of tumor associated fibroblasts.Conclusion The overexpression of COX-2 mediated tumor associated fibroblasts can prompt the development of breast cancer.It is importance to diagnose and treat breast cancer in the future.

Cox-2;Breast cancer;Tumor associated fibroblasts

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.06.006