腸道微生態(tài)制劑對結(jié)直腸癌患者術(shù)后免疫功能及并發(fā)癥的影響

李東正++周建農(nóng)

[摘要] 目的 探討腸道微生態(tài)制劑對結(jié)直腸癌患者術(shù)后免疫功能及并發(fā)癥的影響。 方法 采用隨機數(shù)字表法將江蘇省腫瘤醫(yī)院普通外科2015年6月～2016年4月手術(shù)治療的80例結(jié)直腸癌患者分為觀察組和對照組，每組40例。對照組術(shù)前給予常規(guī)腸道準(zhǔn)備，觀察組術(shù)前給予微生態(tài)制劑，比較兩組手術(shù)前后菌群的變化、炎癥因子、免疫功能及并發(fā)癥。 結(jié)果 觀察組術(shù)后7 d的致病菌少于對照組，益生菌多于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。觀察組術(shù)后7 d的C反應(yīng)蛋白、腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素6水平均低于對照組，CD4+高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。觀察組術(shù)后傷口感染、全身炎癥反應(yīng)綜合征、肺部感染、吻合口感染發(fā)生率均低于對照組，兩組術(shù)后感染總發(fā)生率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論 腸道微生態(tài)制劑可減少結(jié)直腸癌患者術(shù)后菌群失衡，改善患者術(shù)后炎性狀態(tài)和免疫功能，減少術(shù)后感染性并發(fā)癥的發(fā)生。

[關(guān)鍵詞] 腸道微生態(tài)制劑；結(jié)直腸癌手術(shù)；術(shù)后免疫力；并發(fā)癥

[中圖分類號] R735.35 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2016）12（b）-0106-05

Effect of intestinal Micro Ecological Preparations on immune function and complications in patients with colorectal cancer after operation

LI Dongzheng ZHOU Jiannong▲

Department of General Surgery， Jiangsu Cancer Hospital， Jiangsu Province， Nanjing 210000， China

[Abstract] Objective To investigate the effect of intestinal Micro Ecological Preparations on immune function and complications in patients with colorectal cancer after operation. Methods 80 cases of colorectal cancer operation in Department of General Surgery of Jiangsu Cancer Hospital during the June 2015 to April 2016 were randomly divided into the observation group and the control group according to the random number table. Before the surgery， the control group was given routine bowel preparation， and the observation group was given intestinal Micro Ecological Preparation. Changes of intestinal flora， inflammatory factors， immune function and complications in the two groups were compared. Results The pathogenic bacteria in the observation group was less than that in the control group， and the probiotics in the observation group was more than that in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. The level of C reactive protein， tumor necrosis factor α， interleukin 6 after 7 d of the operation in the observation group were lower than those in the control group， and CD4+ in the observation group was higher than that in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. The incidence of postoperative wound infection， SIRS， pulmonary infection in the observation group were lower than those in the control group， and the incidence of complications in the two groups had statistically significant difference （P < 0.05）. Conclusion Intestinal Micro Ecological Preparation can reduce the postoperative intestinal flora imbalance， and improve postoperative inflammatory state and immune function. It can reduce the incidence of postoperative infectious complications of patients with colorectal cancer.

[Key words] Intestinal Micro Ecological Preparation； Colorectal cancer surgery； Postoperative Immunity； Complications

結(jié)直腸癌是僅次于胃癌的消化道惡性腫瘤[1]，嚴(yán)重危害人類的健康。手術(shù)是治療結(jié)直腸癌的首選治療方法。但手術(shù)會造成患者腸道內(nèi)明顯的菌群失衡[2]，這主要是由于結(jié)直腸癌的術(shù)前腸道準(zhǔn)備導(dǎo)致腸黏膜缺血、缺氧，破壞了腸道正常的形態(tài)，使腸黏膜受損。同時抗生素的使用非選擇性地殺滅革蘭陰性桿菌和厭氧菌，加之手術(shù)刺激等形成高分解代謝，加速了營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，進(jìn)一步加重了腸黏膜屏障受損[3]。這種菌群失衡在一定程度上會使細(xì)菌發(fā)生移動，造成炎癥反應(yīng)，還可導(dǎo)致機體體液免疫、細(xì)胞免疫以及非特異性免疫功能下降[4]。因此對于結(jié)直腸癌手術(shù)患者及時給予腸道菌群調(diào)整是十分必要的。微生態(tài)制劑是一種生理性活菌制劑，可改善手術(shù)患者的免疫功能、提高營養(yǎng)狀態(tài)、維持和保護(hù)腸黏膜屏障功能，在控制術(shù)后感染發(fā)生方面具有一定優(yōu)勢[5]。本研究以結(jié)直腸癌患者為研究對象，分析腸道微生態(tài)制劑對患者術(shù)后免疫功能及并發(fā)癥的影響，為日后圍術(shù)期的處理提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取于江蘇省腫瘤醫(yī)院普通外科2015年6月～2016年4月接受手術(shù)治療的80例結(jié)直腸癌患者為研究對象，納入標(biāo)準(zhǔn)：①參照2015年版原衛(wèi)生部制定的《結(jié)直腸癌診療規(guī)范》[6]，符合結(jié)直腸癌診斷標(biāo)準(zhǔn)者；②年齡<75歲者；③經(jīng)盆腔CT、結(jié)腸鏡及病理學(xué)診斷確診，腸鏡顯示結(jié)腸或直腸單個腫瘤者；④均自愿參與研究，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會同意；⑤術(shù)前1個月未使用過導(dǎo)瀉藥、微生態(tài)活菌劑、抗生素者；⑥活檢病理檢查證實為腺癌者；⑦肝腎功能正常者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他重要器官嚴(yán)重疾病者；②神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、消化系統(tǒng)疾病者等；③自身免疫性疾病者；④術(shù)前有腸梗阻，不能耐受手術(shù)者；⑤一般狀況差，嚴(yán)重營養(yǎng)不良者；⑥腸道炎癥、穿孔等表現(xiàn)，既往有胃腸手術(shù)史者；⑦術(shù)前使用糖皮質(zhì)激素者；⑧腹腔或盆腔CT或B超提示腫瘤有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者；⑨有結(jié)直腸手術(shù)或放化療史者。采用隨機數(shù)字表法將所有患者分為觀察組（40例）和對照組（40例），兩組患者在年齡、性別、病變位置、Dukes分期、病理類型等一般資料方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（均P > 0.05）。見表1。該研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

兩組手術(shù)方式基本一致，給予腹腔鏡根治術(shù)或開腹根治術(shù)治療。

對照組術(shù)前給予傳統(tǒng)腸道準(zhǔn)備，術(shù)前3 d口服0.8 g維生素K（昆山雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號：130604），0.4 g甲硝唑（亞寶藥業(yè)集團股份有限公司，批號：140209），1 g卡那霉素（昆明賽諾制藥有限公司，批號：13102202），3次/d。術(shù)前2～3 d指導(dǎo)患者進(jìn)食半流質(zhì)飲食，術(shù)前1 d全流質(zhì)飲食。術(shù)前晚口服30 mL蓖麻油，進(jìn)行腸道清潔。麻醉誘導(dǎo)期靜脈推注2 g舒巴坦+頭孢哌酮。術(shù)后1 d將胃管拔除，給予早期腸內(nèi)營養(yǎng)。

觀察組于術(shù)前5 d口服腸道微生態(tài)制劑，2.0 g雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片（內(nèi)蒙古雙奇藥業(yè)股份有限公司，批號：150610），3次/d，不服用抗生素，其他處理措施同對照組。術(shù)后1 d拔除胃管進(jìn)行早期腸內(nèi)營養(yǎng)時繼續(xù)服用2.0 g雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片，3次/d，連續(xù)7 d。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 菌群檢測 兩組患者于術(shù)前3 d、術(shù)后7 d收集新鮮大便500 mg（糞便中段），將樣本置于無菌密封裝置內(nèi)，保存于-4℃冰箱中備檢。檢測指標(biāo)包括致病菌（大腸埃希菌、腸球菌、葡萄球菌、消化鏈球菌、類桿菌）和益生菌（乳酸桿菌、雙歧桿菌、酵母菌）[5]。檢測時將以上菌群置于含有4.5 mL標(biāo)本稀釋液中的小瓶中，置旋渦混合器，以300 r/min震蕩1 min左右充分混勻。接種完畢后選擇性培養(yǎng)基平板上行細(xì)菌培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)24 h后觀察結(jié)果并計數(shù)，分析腸道細(xì)菌比例。

1.3.2 血液樣本的采集 清晨取空腹肘靜脈血4 mL，混勻后4℃，2500 r/min離心10 min，取血清分裝，做好標(biāo)記，-80℃條件保存，測定當(dāng)日于37℃水浴中迅速復(fù)融。

1.3.3 炎癥指標(biāo)的檢測 取上層血清用于炎癥指標(biāo)的檢測，指標(biāo)包括腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、C反應(yīng)蛋白（CRP）。采用免疫比濁法測定CRP，使用CRP試劑盒（復(fù)星長征公司，批號：AR 0146）；采用雙抗體夾心酶標(biāo)免疫法（ELISA）檢測TNFα、IL-6，使用TNFα試劑盒（武漢博士德公司，批號：2401149511）和IL-6試劑盒（武漢博士德公司，批號：1331145511）。

1.3.4 免疫功能指標(biāo)的檢測 取上層血清用于免疫功能檢測。指標(biāo)包括CD4+和CD8+，采用美國B.D流式細(xì)胞儀檢測。以上血液檢驗均由醫(yī)院檢驗科工作人員進(jìn)行測定，統(tǒng)一質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，所有檢測試劑均在有效期內(nèi)，按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[7]，嚴(yán)格按照說明書的操作標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.3.5 并發(fā)癥發(fā)生情況 統(tǒng)計兩組患者術(shù)后感染性并發(fā)癥的發(fā)生情況，包括傷口感染、全身炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS）、肺部感染、腹腔感染、吻合口感染。其中SIRS的判定標(biāo)準(zhǔn)為[8]：心率>90次/min；體溫>38℃或 <36℃；呼吸頻率20次/min或過度通氣，動脈血二氧化碳分壓（PaCO2）<32 mmHg；外周白細(xì)胞計數(shù)>12.0×109/L或<4.0×109/L或未成熟粒細(xì)胞比例>10%。符合以上兩項或兩項以上即可診斷為SIRS。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，符合正態(tài)分布的組間比較采用t檢驗，手術(shù)前后腸道菌群計數(shù)差別比較采用配對樣本t檢驗，兩組腸道菌群計數(shù)差別比較采用獨立樣本t檢驗，不符合正態(tài)分布的采用秩和檢驗，計數(shù)資料用百分率（%）表示，采用χ2檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者手術(shù)前后菌群比例變化的比較

兩組患者術(shù)前3 d的腸道菌群情況比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。觀察組術(shù)后7 d的致病菌比例顯著下降，益生菌比例顯著上升，與術(shù)前相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。對照組術(shù)后7 d的致病菌葡萄球菌比例上升，益生菌雙歧桿菌和乳酸桿菌比例下降，與術(shù)前相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。觀察組術(shù)后7 d的菌群與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

2.2兩組患者手術(shù)前后炎癥因子水平的比較

兩組患者術(shù)前炎癥因子水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。兩組患者術(shù)后7 d的炎癥因子水平升高，與術(shù)前相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。觀察組術(shù)后7 d的CRP、TNF-α、IL-6水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表3。

2.3 兩組患者手術(shù)前后免疫功能指標(biāo)的比較

兩組患者術(shù)前免疫功能指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。兩組術(shù)后7 d的CD4+、CD8+較術(shù)前3 d有下降趨勢。觀察組術(shù)后7 d的CD4+高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。兩組術(shù)后7 d的CD8+、CD4+/CD8+比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。見表4。

2.4 兩組患者術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率的比較

觀察組術(shù)后傷口感染、SIRS、肺部感染、吻合口感染發(fā)生率均低于對照組，兩組術(shù)后感染總發(fā)生率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表5。

3 討論

結(jié)直腸癌是比較常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，發(fā)病率占惡性腫瘤的第3位，死亡率的第5位。近年來，我國結(jié)直腸癌的發(fā)病率有逐漸升高的趨勢。對于有條件接受手術(shù)治療的患者，盡早手術(shù)治療，切除病灶，是延長患者生存期，改善預(yù)后的關(guān)鍵。有研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者在術(shù)前就伴有腸道微生態(tài)、代謝模式的改變以及細(xì)胞免疫功能的下降，而手術(shù)會對腸道造成嚴(yán)重的創(chuàng)傷，加劇腸道屏障的破壞，使細(xì)菌發(fā)生移位和產(chǎn)生內(nèi)毒素血癥[9-10]。內(nèi)毒素血癥可刺激肝巨噬細(xì)胞，提高血液中炎性因子的濃度，包括IL-6、IL-2、TNF等，造成全身炎癥反應(yīng)，嚴(yán)重者可發(fā)生器官功能不全，同時也增加術(shù)后感染并發(fā)癥的發(fā)生[11]。這種狀態(tài)不僅不利于患者術(shù)后的康復(fù)，而且也增加了腫瘤復(fù)發(fā)的機會。結(jié)直腸癌術(shù)后發(fā)生腸道菌群失調(diào)除卻疾病自身的原因，可能還與術(shù)前口服腸道抗生素、非選擇性地殺滅厭氧菌、革蘭陰性桿菌以及抑制雙歧桿菌的生長有關(guān)[12]。近年來，微生態(tài)免疫營養(yǎng)制劑在結(jié)直腸癌患者中逐漸應(yīng)用起來。有研究報道[13]，微生態(tài)制劑可降低結(jié)直腸癌患者術(shù)后炎癥反應(yīng)，抑制感染和減少并發(fā)癥發(fā)生。

本研究結(jié)果表明，與術(shù)前腸道常規(guī)準(zhǔn)備的對照組相比，采用微生態(tài)制劑后，患者術(shù)后7 d的致病菌比例顯著下降，益生菌比例顯著上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，與以往研究結(jié)果基本一致[14-15]。結(jié)直腸癌患者圍術(shù)期口服微生態(tài)制劑，可通過補充雙歧桿菌以及乳酸桿菌的分布數(shù)量，構(gòu)成腸道的生物屏障，而且菌膜產(chǎn)生親脂分子抑制致病菌和條件致病菌對腸上皮黏附和定植，使腸道菌群重新恢復(fù)動態(tài)平衡[16-17]。本研究結(jié)果還證實，微生態(tài)制劑除了有效糾正腸道菌群失調(diào)以外，還能顯著降低結(jié)直腸癌術(shù)后7 d的CRP、TNF-α、IL-6水平，降低炎癥反應(yīng)帶給患者的傷害。近來還有研究報道[18-19]，益生菌的補充能夠激活吞噬細(xì)胞的活性，刺激T淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞的成熟，誘導(dǎo)產(chǎn)生代謝素，活化免疫細(xì)胞，促進(jìn)機體免疫球蛋白的產(chǎn)生，從而提高機體的免疫力。本研究結(jié)果顯示，與術(shù)前常規(guī)腸道相比，采用微生態(tài)制劑后，患者術(shù)后7 d的CD4+高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。另有研究報道[20]，結(jié)腸癌術(shù)后采用微生態(tài)制劑，能夠提高患者的免疫力，改善營養(yǎng)狀況，促進(jìn)胃腸功能的恢復(fù)。微生態(tài)制劑中的乳酸菌能夠游離脂肪酸、氨、過氧化氫和細(xì)菌素，產(chǎn)生有機酸，這些物質(zhì)能夠刺激脾中NK細(xì)胞活性，促使Th1細(xì)菌增殖，造成IgE抗體增加，有效抗菌[21]，加之乳酸菌本身可抑制病原菌在體內(nèi)的復(fù)制，可有效對抗感染，減少術(shù)后感染相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生，改善內(nèi)毒素休克狀態(tài)下腸道黏膜功能損害[22]。本研究結(jié)果還顯示，與術(shù)前常規(guī)腸道相比，采用微生態(tài)制劑后，患者傷口感染、SIRS、肺部感染等并發(fā)癥的發(fā)生率低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

綜上所述，腸道微生態(tài)制劑能夠減少結(jié)直腸癌患者術(shù)后菌群失衡，改善患者的術(shù)后炎性狀態(tài)和免疫功能，降低術(shù)后感染性并發(fā)癥的發(fā)生，值得推廣。

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（收稿日期：2016-09-05 本文編輯：王紅雙）