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    廣西地區(qū)骨與關(guān)節(jié)結(jié)核患者外周血中白細(xì)胞介素23的水平及臨床意義

    2017-05-13 23:05:54吳昭元唐毓金卓航宇賀玉棚廖林波
    右江醫(yī)學(xué) 2017年2期
    關(guān)鍵詞:c反應(yīng)蛋白

    吳昭元+唐毓金+卓航宇+賀玉棚+廖林波+農(nóng)峰+盧賢哲

    【摘要】目的檢測廣西地區(qū)骨與關(guān)節(jié)結(jié)核患者外周血中白細(xì)胞介素23(IL23)的表達(dá)水平并探討其臨床意義。

    方法收集2015年7月~2016年7月收治的45例骨與關(guān)節(jié)結(jié)核患者作為觀察組, 選擇同期在體檢中心進(jìn)行健康體檢的54名健康者作為對照組。采用免疫酶聯(lián)吸附法(ELISA)檢測兩組外周血血清IL23的表達(dá)水平,同時(shí)采用常規(guī)方法對C反應(yīng)蛋白(CRP)和紅細(xì)胞沉降率(ESR)進(jìn)行檢測,比較兩組間IL23、CRP及ESR表達(dá)水平的差異,分析觀察組IL23水平與CRP、ESR水平之間的相關(guān)性。

    結(jié)果兩組受試者外周血IL23、CRP及ESR表達(dá)含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。觀察組IL23、CRP及ESR水平均顯著高于對照組;觀察組外周血IL23與CRP、ESR水平均無線性相關(guān)(P>0.05)。

    結(jié)論廣西地區(qū)骨與關(guān)節(jié)結(jié)核患者外周血中IL23的表達(dá)水平明顯升高,提示其可能在骨與關(guān)節(jié)結(jié)核發(fā)病中起重要作用。

    【關(guān)鍵詞】骨與關(guān)節(jié)結(jié)核;白細(xì)胞介素23;C反應(yīng)蛋白;紅細(xì)胞沉降率

    中圖分類號:R529.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:ADOI:10.3969/j.issn.10031383.2017.02.004

    【Abstract】ObjectiveTo detect the expression of interleukin23(IL23) level in peripheral blood of patients with bone and joint tuberculosis in Guangxi and to explore its clinical significance.

    MethodsFortyfive patients with bone and joint tuberculosis admitted to our hospital from July,2015 to July,2016 were selected as observation group.And fiftyfour healthy subjects were selected as control group.The levels of serum IL23 in peripheral blood were measured by enzymelinked immunosorbent assay(ELISA) in both groups and the levels of plasma C reactive protein(CRP) and erythrocyte sedimentation rate(ESR) were tested by routine method.The difference of levels of IL23,CRP and ESR was compared between the two groups and correlation between IL23 levels and CRP,ESR levels in the observation group was analyzed.

    ResultsDifference of expression levels of IL23,CRP and ESR in peripheral blood of both groups was statistically significant(P<0.001).The levels of IL23,CRP and ESR in the observation group were significantly higher than those in the control group,and there was no linear correlation between IL23 and CRP and ESR in the peripheral blood of the observation group(P>0.05).

    ConclusionThe expression of IL23 in peripheral blood of patients with bone and joint tuberculosis in Guangxi significantly increases,which suggests that IL23 may play an important role in the pathogenesis of bone and joint tuberculosis.

    【Key words】bone and joint tuberculosis;IL23;CRP;ESR

    骨與關(guān)節(jié)結(jié)核(bone and joint tuberculosis,BJTB)是由結(jié)核分枝桿菌侵入骨或關(guān)節(jié)而引起的化膿性破壞性病變,是常見的肺外結(jié)核,好發(fā)于脊柱,如果治療不及時(shí),后期容易出現(xiàn)竇道、畸形甚至截癱[1]。近年來,由于耐藥性(占結(jié)核病患者11%)的增加、合并HIV感染、人口流動(dòng)性的增加等使我國BJTB的發(fā)病率并沒有明顯下降[2~3]。BJTB發(fā)病較為隱匿,早期無典型的臨床癥狀,預(yù)防及早期診斷尤為重要。白細(xì)胞介素23(interleukin23,IL23)是由p19亞基和p40亞基通過二硫鍵連接產(chǎn)生的一種異源二聚體細(xì)胞因子,屬于IL12家族成員,由樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生參與免疫和炎癥反應(yīng)[4]。Cooper AM等[5]研究發(fā)現(xiàn)在結(jié)核分枝桿菌感染中,缺乏IL12和IL23共同的p40亞基比缺乏IL12 p35亞基導(dǎo)致結(jié)核分枝桿菌感染的易感性增加,提示IL23在機(jī)體感染分枝桿菌發(fā)病中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)通過對BJTB患者外周血中IL23表達(dá)水平進(jìn)行檢測,初步探討該細(xì)胞因子在BJTB發(fā)病中可能存在的機(jī)制,為早期BJTB的診斷、治療提供理論依據(jù)。

    1資料與方法

    1.1一般資料

    選取2015年7月~ 2016年7月右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治的廣西籍壯族BJTB患者45例,既往未感染肺結(jié)核,排除自身免疫性疾病、慢性病、遺傳性疾病者,術(shù)后病理結(jié)果確診為BJTB,其中男29例,女16例,年齡16~75歲,平均(46.76±14.50)歲。同期隨機(jī)選取我院體檢中心的54名健康體檢者作為對照組,所有體檢者無明顯臨床癥狀,未患心、肺、腎等基礎(chǔ)疾病,各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)均正常,其中男30例,女24例,年齡21~63歲,平均(41.75±12.87)歲。所有受試者均來自廣西地區(qū)且征得本人或家屬的知情同意。兩組的性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

    1.2研究方法

    1.2.1血標(biāo)本的采集

    于清晨抽取空腹受試者肘正中靜脈血3 ml于促凝管,1500 r/min離心10 min后取上層血清放于-80℃冰箱冷藏用于待測IL23及C反應(yīng)蛋白(CRP)表達(dá)水平,同時(shí)抽取2 ml外周血于枸櫞酸鈉抗凝管中待測紅細(xì)胞沉降率(ESR)表達(dá)水平。

    1.2.2外周血IL23水平的檢測

    采用ELISA法進(jìn)行檢測,具體步驟按照IL23 ELISA 試劑盒(浙江聯(lián)科生物技術(shù)有限公司IL23 ELISA Kit)說明書進(jìn)行操作。

    1.2.3CRP、ESR含量的檢測

    使用全自動(dòng)生化分析儀(日本7600)、血沉分析儀(意大利Test1)檢測CRP、ESR表達(dá)水平,具體操作由我院檢驗(yàn)科人員嚴(yán)格按照英國RIQAS質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)完成。

    1.3觀察指標(biāo)

    觀察兩組IL23、CRP、ESR表達(dá)水平。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    對所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0進(jìn)行分析, 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(〖AKx-D〗±s)表示,兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),相關(guān)性運(yùn)用Pearson相關(guān)分析法,檢驗(yàn)水準(zhǔn):α=0.05,雙側(cè)檢驗(yàn)。

    2結(jié)果

    2.1不同濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品的OD值

    觀察組外周血IL23水平的標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制,如表1和圖1所示。

    2.2兩組IL23表達(dá)水平的比較

    觀察組和對照組的IL23水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),與對照組相比觀察組IL23水平顯著增高。見表2。

    2.3觀察組患者外周血IL23與CRP、ESR水平的相關(guān)性

    經(jīng)Pearson線性相關(guān)性分析,觀察組患者外周血IL23與CRP、ESR含量均無顯著相關(guān)性(r=0.138,P>0.05;r=0.243,P>0.05)。

    3討論

    骨與關(guān)節(jié)結(jié)核病情復(fù)雜、進(jìn)展機(jī)制不清、致殘率較高,使得治療難度增加。通常認(rèn)為骨與關(guān)節(jié)結(jié)核來源于肺部感染灶的血行轉(zhuǎn)移,但并非所有骨與關(guān)節(jié)結(jié)核患者都合并肺結(jié)核。目前關(guān)于結(jié)核桿菌與骨破壞之間的機(jī)制仍不明確。以往有研究[6]表明,破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞間的動(dòng)態(tài)平衡直接影響著健康骨形態(tài)的維持,而結(jié)核分枝桿菌含有多種抗原成分,能夠刺激單核、巨噬細(xì)胞系統(tǒng)釋放多種細(xì)胞因子如IL12、TNFα,誘導(dǎo)破骨細(xì)胞的成熟和活化導(dǎo)致平衡破壞而最終引起骨壞死[7]。

    當(dāng)結(jié)核桿菌侵入宿主后,許多細(xì)胞因子參與免疫反應(yīng),其中CD4+T淋巴細(xì)胞起著重要作用[8]。以往我們認(rèn)為IL23通過誘導(dǎo)CD4+T淋巴細(xì)胞分泌干擾素γ(IFNγ)參與結(jié)核免疫反應(yīng),但近來研究表明IL23還可以誘導(dǎo)CD4+T細(xì)胞分化成高活性TH17細(xì)胞,通過生成IL17A、IL17F、IL21、IL22等細(xì)胞因子促進(jìn)炎癥反應(yīng)[9]。國外有學(xué)者[10]就白細(xì)胞介素23受體基因(Arg381Gln)多態(tài)性與肺結(jié)核相關(guān)性進(jìn)行了研究,結(jié)果提示IL23R基因 rs11209026 位點(diǎn)與突尼斯人活動(dòng)性肺結(jié)核的疾病嚴(yán)重程度有關(guān)。另外,國內(nèi)學(xué)者卓文基等[11]對肺結(jié)核患者血清IL23表達(dá)水平進(jìn)行了檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核患者血清中IL23分泌水平顯著高于健康對照組,提示其可能在結(jié)核感染和免疫反應(yīng)中起作用,并認(rèn)為IL23在血清中分泌水平的差別,有可能成為肺結(jié)核臨床診斷依據(jù)之一。

    目前IL23與肺結(jié)核的相關(guān)研究較多,也提示其參與結(jié)核的免疫反應(yīng)當(dāng)中,但卻未見文獻(xiàn)報(bào)道其是否參與骨與關(guān)節(jié)結(jié)核免疫反應(yīng),而廣西地區(qū)作為結(jié)核的高發(fā)地帶,因此我們選取本區(qū)內(nèi)骨與關(guān)節(jié)結(jié)核患者45例和健康對照組54例進(jìn)行血清IL23表達(dá)水平的檢測,為明確IL23是否參與骨與關(guān)節(jié)結(jié)核免疫作用及具體機(jī)制研究提供依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)采用ELISA 法進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示與對照組相比,骨與關(guān)節(jié)結(jié)核患者血清IL23 表達(dá)水平較高,也許同它參與結(jié)核自身免疫反應(yīng)作用有關(guān),這與卓文基等的研究結(jié)果相同,提示IL23可能通過誘導(dǎo)CD4+T 細(xì)胞向Th1 細(xì)胞分化,促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IFNγ以及擴(kuò)大TH17細(xì)胞群產(chǎn)生IL17等方式參與機(jī)體對結(jié)核病的免疫應(yīng)答,它的表達(dá)水平也可能成為骨與關(guān)節(jié)結(jié)核的診斷及愈后標(biāo)準(zhǔn)之一。

    CRP是一種急性相蛋白,可以在炎癥刺激下由肝細(xì)胞合成,正常人的血清中含量很低,而炎癥感染者血中有較高的表達(dá)。而ESR在很多情況下都能夠變快,常見的有炎癥、惡性腫瘤、貧血等疾病。而本研究對兩組受試人群外周血中的CRP及ESR水平檢測結(jié)果也發(fā)現(xiàn):觀察組受試人群外周血中CRP及ESR水平與對照組相比,均明顯升高(P<0.01),提示骨與關(guān)節(jié)結(jié)核病變與活動(dòng)性炎癥性反應(yīng)有關(guān)。CRP及ESR并非是結(jié)核特異性表達(dá)蛋白,它們的表達(dá)水平受多種因素影響,作用機(jī)制復(fù)雜,本研究中觀察組受試人群血清IL23 表達(dá)水平與CRP、ESR水平之間無顯著相關(guān)性,說明它們可能存在各自不同的調(diào)控機(jī)制,是否存在某種相關(guān)性及具體的作用機(jī)理值得我們進(jìn)一步研究。

    綜上所述,IL23在骨與關(guān)節(jié)結(jié)核患者外周血血清中表達(dá)水平較高,表明可能與骨與關(guān)節(jié)結(jié)核的免疫反應(yīng)有著密切關(guān)系,具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。隨著對骨與關(guān)節(jié)結(jié)核的認(rèn)識(shí)以及對IL23精確的分子結(jié)構(gòu)、抗炎作用機(jī)制的認(rèn)識(shí)不斷加深,IL23有可能成為骨與關(guān)節(jié)結(jié)核臨床診斷依據(jù)及判斷愈后方面更好的指標(biāo),為今后早期預(yù)防及控制提供幫助。

    參考文獻(xiàn)

    [1]骨關(guān)節(jié)結(jié)核臨床診斷與治療進(jìn)展及其規(guī)范化專題研討會(huì)學(xué)術(shù)委員會(huì).正確理解和認(rèn)識(shí)骨與關(guān)節(jié)結(jié)核診療的若干問題[J].中國防癆雜志,2013,35(5):384392.

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    (收稿日期:2016-11-18 修回日期:2017-04-12)

    (編輯:梁明佩)

    基金項(xiàng)目:2015年國家自然科學(xué)基金應(yīng)急管理項(xiàng)目(81541136);2012年廣西衛(wèi)生廳重點(diǎn)課題(重2012083);2011年廣西教育廳課題(201106LX431);2010年廣西衛(wèi)生廳課題(重2010059)

    作者簡介:吳昭元,男,在讀碩士研究生,研究方向:脊柱與骨關(guān)節(jié)疾病。Email:543802117@qq.com

    ▲通信作者:唐毓金。Email:tangyujin196709@163.com

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