人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎的療效

翟俊山 李方 孫亞梅 宋久剛 吳凱 王艷梅 張林 姚怡 李楠

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎的療效

翟俊山 李方 孫亞梅 宋久剛 吳凱 王艷梅 張林 姚怡 李楠

目的 探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植術(shù)對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎（UC）小鼠的療效，以及對(duì)血清中腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）水平的影響。方法 選用雄性小鼠48只，完全隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUC-MSCs）治療組，每組16只。模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組通過(guò)口服5﹪葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)UC模型。對(duì)hUC-MSCs治療組小鼠經(jīng)尾靜脈注射臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞。觀察各組疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分；采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測(cè)量各組小鼠血清中TNF-α、IL-8的表達(dá)水平，各組數(shù)據(jù)兩組比較采用t檢驗(yàn)，多組比較使用重復(fù)測(cè)量資料的方差分析對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組DAI評(píng)分從第2天開始上升，直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束分別為8.72±0.71、4.01±0.35均高于正常對(duì)照組0.21±0.20，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F = 1 300.66，P ＜ 0.01）；模型對(duì)照組與hUCMSCs治療組比較，在造模期間及治療的第4天DAI評(píng)分分別為7.95±0.71、8.01±0.73，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t = -0.24，P = 0.08），在治療的第5天hUC-MSCs治療組DAI評(píng)分開始下降為7.23 ±0.82，且與模型對(duì)照組8.01±0.81相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t = -2.71，P = 0.01）。造模第7天，模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組兩組TNF-α分別為（363.32±15.84）pg/ml、（375.52±16.21）pg/ ml，均高于空白對(duì)照組（112.14±11.23）pg/ml（F = 624.12，P ＜ 0.01）；模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組兩組IL-8分別為（65.32±10.12）pg/ml、（57.21±8.71）pg/ml均高于空白對(duì)照組（25.02± 7.81）pg/ml（F = 34.29，P ＜ 0.01），但兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）；第2次干細(xì)胞注射7 d后即實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組TNF-α分別為（453.23±15.63）pg/ml、（276.84±17.91）pg/ml，仍高于空白對(duì)照組（134.32±12.31）pg/ml（F = 642.41，P ＜ 0.01）；模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組兩組IL-8分別為（75.23±6.72）pg/ml、（39.12±4.42）pg/ml仍高于空白對(duì)照組（27.12±5.91）pg/ml（F = 113.90，P ＜ 0.01），但hUC-MSCs治療組水平較造模結(jié)束時(shí)有所下降，低于模型對(duì)照組（P ＜ 0.05）。結(jié)論 間充質(zhì)干細(xì)胞移植術(shù)對(duì)UC小鼠有良好的治療作用，且能降低血清中TNF-α、IL-8的水平。

結(jié)腸炎，潰瘍性； 臍帶； 間質(zhì)干細(xì)胞； 腫瘤壞死因子α； 白細(xì)胞介素8

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種累積全結(jié)腸的慢性炎癥性腸病，同結(jié)直腸癌密切相關(guān)，與克隆恩?。–rohn's disease，CD）統(tǒng)稱炎癥性腸?。╥nflamaatory bowel disease，IBD）[1-2]。其確切病因仍不明確，可能與腸道細(xì)菌感染、患者情緒壓抑及遺傳因素有關(guān)[3]。UC的藥物治療主要包括5-氨基水楊酸、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑和分子靶向藥物等幾大類，但由于藥物治療只能使患者盡可能的長(zhǎng)期處于疾病的緩解期，并不能從根本上治愈疾病[4]。加之藥物長(zhǎng)期臨床使用易產(chǎn)生嚴(yán)重的不良反應(yīng)，新研發(fā)藥物價(jià)格昂貴，使UC藥物治療受到了限制。本研究對(duì)實(shí)驗(yàn)性UC小鼠模型進(jìn)行人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（human umbilical cord derived mesenchymal stem cells，hUC-MSCs）移植，觀察療效，并且同時(shí)測(cè)量移植前后小鼠血清中腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-8（IL-8）水平。

材料與方法

一、材料

1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：實(shí)驗(yàn)性SPF級(jí)C57BL/6J雄性小鼠48只，6 ～ 8周齡，體質(zhì)量20.1 ～ 23.2 g，購(gòu)自北京維通利華公司。在解放軍309醫(yī)院動(dòng)物房飼養(yǎng)，飼養(yǎng)室內(nèi)溫度：20 ～ 22℃；濕度：50﹪～ 60﹪；光照周期：12 h，實(shí)驗(yàn)開始前所有小鼠在上述飼養(yǎng)環(huán)境中適應(yīng)4 d。

2.試劑及儀器：hUC-MSCs由中美康士生物有限公司饋贈(zèng)、DSS干粉（美國(guó)MP公司）、細(xì)胞培養(yǎng)基（美國(guó)Gibco公司）、IX70顯微鏡（日本Olympus公司）、PKH26（西安依科生物技術(shù)有限公司）、TNF-α、IL-8與CRP試劑盒（美國(guó)強(qiáng)生公司）、CX23熒光顯微鏡（日本Olympus公司）。

二、方法

1.細(xì)胞懸液制備：取第2代細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)增，共培養(yǎng)擴(kuò)增5代。取第5代細(xì)胞移植前溶于生理鹽水中，在細(xì)胞懸液中加入濃度為4×10-6mmol/L的PKH26熒光示蹤劑，染色方法按說(shuō)明書進(jìn)行，最終細(xì)胞懸液濃度調(diào)整為1×107/ml。

2.動(dòng)物模型制備：對(duì)實(shí)驗(yàn)性小鼠編號(hào)后，通過(guò)SPSS統(tǒng)計(jì)軟件完全隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組、模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組，每組16只。空白對(duì)照組自由飲用蒸餾水，模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組小鼠自由飲用5﹪的葡聚糖硫酸鈉（dextran sulfate sodium，DSS），造模時(shí)間7 d。模型制備過(guò)程中，小鼠如出現(xiàn)稀便、糞便隱血陽(yáng)性，肉眼血便中任一項(xiàng)即可認(rèn)定造模成功。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如有小鼠死亡，移出飼養(yǎng)籠。

3.干細(xì)胞移植方法：造模結(jié)束后的第1天及第3天，對(duì)hUC-MSCs治療組小鼠經(jīng)尾靜脈分別緩慢注射已染色細(xì)胞懸液200 μl（含2×106個(gè)PKH26標(biāo)記的hUC-MSCs）；對(duì)空白對(duì)照組及模型對(duì)照組分別經(jīng)尾靜脈注射等體積PKH26染色劑與生理鹽水的混合液。

4.觀察指標(biāo)：實(shí)驗(yàn)第1天起，觀察實(shí)驗(yàn)小鼠的精神狀態(tài)，飲食、活動(dòng)和毛發(fā)，每天測(cè)量體質(zhì)量，觀察大便情況，是否成型，有無(wú)血便，是否粘連在肛門上。結(jié)合上述指標(biāo)對(duì)小鼠進(jìn)行疾病活動(dòng)度指數(shù)（DAI）評(píng)分（表1）。

表1 DAI評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

5.細(xì)胞因子測(cè)定：在造模第7天及試驗(yàn)結(jié)束后分別取各組小鼠6只，摘除眼球后眼眶取血。標(biāo)本離心10 min，相對(duì)離心場(chǎng)（relative centrifugal field，RCF）為300×g。取上層血清，分裝于EP管中，保存于-20 ℃中。采用美國(guó)強(qiáng)生公司試劑盒雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)細(xì)胞因子TNF-α及IL-8水平，檢測(cè)方法按試劑盒說(shuō)明書操作。并同時(shí)監(jiān)測(cè)C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）水平。

6.結(jié)腸組織病理及干細(xì)胞定位情況觀察：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死所有小鼠，留取結(jié)腸組織。部分結(jié)腸組織經(jīng)4﹪甲醛（福爾馬林）固定24 h后制作HE染色石蠟切片，光鏡下觀察結(jié)腸病理變化。部分結(jié)腸組織放入干冰凍存，于-70 ℃冰箱保存。按4 ～ 5 μm進(jìn)行切片，熒光顯微鏡下觀察干細(xì)胞分布情況。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物DAI評(píng)分、血清TNF-α及IL-8結(jié)果采用±s表示，模型對(duì)照組與治療組兩組之間比較用t檢驗(yàn)分析，空白對(duì)照組、模型對(duì)照組與治療組3組比較，使用重復(fù)測(cè)量資料的方差分析，以P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、干細(xì)胞擴(kuò)增情況

高倍顯微鏡下觀察干細(xì)胞，擴(kuò)增至第4代時(shí)，形態(tài)呈長(zhǎng)梭形，融合率50﹪，擴(kuò)增至第5代時(shí)，融合率90﹪，呈旋渦狀排列（圖1）。

圖1 普通光顯微鏡下觀察人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)（×100）

二、造模情況

經(jīng)過(guò)自由飲用5﹪的DSS 7 d后，模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組小鼠均不同程度出現(xiàn)稀便、血便、體質(zhì)量下降，活動(dòng)度減少，精神萎靡等情況，認(rèn)為全部造模成功。但模型對(duì)照組與治療組分別有1只小鼠于第5和第7天死亡，予以剔除。對(duì)照組小鼠未出現(xiàn)稀便、血便等情況，試驗(yàn)中無(wú)死亡。

三、DAI評(píng)分

通過(guò)測(cè)量并記錄各組小鼠體質(zhì)量、大便性狀、血便情況，計(jì)算各組小鼠DAI評(píng)分情況。模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組DAI評(píng)分從第2天開始上升，直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束分別為8.72±0.71、4.01±0.35均高于正常對(duì)照組0.21±0.20，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F = 1300.66，P ＜ 0.01）；模型對(duì)照組與hUC-MSCs治療組比較，造模期間及治療的第4天DAI評(píng)分分別為7.95±0.71、8.01±0.73，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t = -0.24，P = 0.08），治療的第5天hUC-MSCs治療組DAI評(píng)分開始下降為7.23±0.82，且與模型對(duì)照組8.01±0.81相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t = -2.71，P = 0.01，表2）。

四、細(xì)胞因子水平

造模第7天，模型對(duì)照組與治療組兩組TNF-α、IL-8、CRP均高于空白對(duì)照組（P ＜ 0.01），但兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞ 0.05）；第2次干細(xì)胞注射7 d后即實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，模型對(duì)照組與治療組TNF-α、IL-8、CRP仍高于空白對(duì)照組（P ＜ 0.01），但治療組水平較造模結(jié)束時(shí)有所下降，低于模型對(duì)照組（P ＜ 0.05，表3）。

五、結(jié)腸組織病理及干細(xì)胞定位結(jié)果

1.病理結(jié)果：空白對(duì)照組小鼠結(jié)腸上皮黏膜完整，黏膜及黏膜下少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；模型對(duì)照組結(jié)腸上皮黏膜多處缺損，黏膜及黏膜下大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；hUC-MSCs治療組黏膜上皮缺損及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)程度輕于模型對(duì)照組（圖2）。

表2 hUC-MSCs移植術(shù)后各組小鼠DAI評(píng)分表（n = 16，±s）

表2 hUC-MSCs移植術(shù)后各組小鼠DAI評(píng)分表（n = 16，±s）

注：hUC-MSCs：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞；與正常對(duì)照組比較，aP ＜ 0.01；與模型對(duì)照組比較，bP ＜ 0.05

分組 第1天 第2天 第3天 第4天 第5天 第6天 第7天 第8天 第9天正常對(duì)照組 0.28±0.07 0.31±0.23 0.35±0.21 0.29±0.22 0.21±0.19 0.34±0.23 0.43±0.26 0.37±0.21 0.39±0.25模型對(duì)照組 0.26±0.03 2.01±0.07a 3.91±0.12a 4.12±0.23a 5.13±0.34a 6.08±0.44a 6.67±0.51a 7.23±0.61a 7.47±0.71a治療組 0.31±0.02 1.68±0.06a 3.47±0.14a 4.33±0.25a 5.52±0.31a 6.43±0.46a 6.55±0.48a 7.12±0.59a 7.63±0.67aF值 0.00 635.28 2 781.59 1 515.73 1 696.68 1 225.20 1 112.72 969.61 808.03 P值 ＞ 0.05 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01分組 第10天 第11天 第12天 第13天 第14天 第15天 第16天 第17天正常對(duì)照組 0.44±0.24 0.16±0.12 0.19±0.12 0.22±0.16 0.35±0.25 0.32±0.23 0.24±0.22 0.21±0.20模型對(duì)照組 7.65±0.67a 7.95±0.71a 8.01±0.81a 8.23±0.82a 8.43±0.79a 8.54±0.68a 8.61±0.65a 8.72±0.71a治療組 7.83±0.65a 8.01±0.73a 7.23±0.82ab 6.91±0.61ab 5.53±0.54ab 5.01±0.43ab 4.23±0.37ab 4.01±0.35abF值 918.22 930.65 663.18 827.28 822.15 1 165.67 1 384.16 1 300.66 P值 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01

表3 造模第7天及實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組小鼠細(xì)胞因子TNF-α、IL-8與CRP水平（±s）

表3 造模第7天及實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組小鼠細(xì)胞因子TNF-α、IL-8與CRP水平（±s）

注：hUC-MSCs：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞；與正常對(duì)照組比較，aP ＜ 0.01；與模型對(duì)照組比較，bP ＜ 0.05

TNF-α（pg/ml） IL-8（pg/ml） CRP（mg/ml）造模第7天 實(shí)驗(yàn)結(jié)束 造模第7天 實(shí)驗(yàn)結(jié)束 造模第7天 實(shí)驗(yàn)結(jié)束空白對(duì)照組 6 112.14±11.23 134.32±12.31 25.02± 7.81 27.12±5.91 0.35±0.12 0.41±0.13模型對(duì)照組 6 363.32±15.84a 453.23±15.63a 65.32±10.12a 75.23±6.72a 1.57±0.18a 1.43±0.16a治療組 6 375.52±16.21a 276.84±17.91ab 57.21± 8.71a 39.12±4.42ab 1.62±0.15a 0.88±0.21abF值 624.12 642.41 34.29 113.90 134.36 54.17 P值 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01 ＜ 0.01分組 只數(shù)

圖2 光學(xué)顯微鏡下觀察各實(shí)驗(yàn)組小鼠結(jié)腸組織病理照片（HE染色，×200）

2.干細(xì)胞定位結(jié)果：PKH26染色劑在熒光顯微鏡下發(fā)紅光，觀察小鼠結(jié)腸組織冰凍切片可見黏膜及黏膜下大量細(xì)胞發(fā)紅色熒光，證實(shí)干細(xì)胞在結(jié)腸組織中主要定位于黏膜及黏膜下層（圖3）。

圖3 熒光顯微鏡下觀察hUC-MSCs在結(jié)腸定位情況（PKH26染色）

討 論

干細(xì)胞因其良好的分化潛能，目前成為醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)，在一些常規(guī)藥物治療效果不佳的疾病如腦梗塞[5]、肝硬化[6-7]方面展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。其中的hUC-MSCs因其來(lái)源方便，不涉及醫(yī)學(xué)倫理，組織相容性低等特點(diǎn)，成為研究的熱點(diǎn)[8]。

在本次試驗(yàn)中，采用目前公認(rèn)的DSS進(jìn)行UC動(dòng)物造模[9]。經(jīng)過(guò)7 d自由飲用模型組與治療組除各有1只老鼠死亡均不同程度出現(xiàn)了稀便、血便，DAI評(píng)分明顯高于正常對(duì)照組，本研究認(rèn)為這種造模方法可靠、簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)。

UC主要損傷部位是結(jié)腸淺表黏膜，黏膜表面充血糜爛，出現(xiàn)隱窩膿腫，黏膜細(xì)胞脫落壞死引起大便性狀改變、便血，臨床上出現(xiàn)腹痛、消瘦等癥狀。治療UC黏膜細(xì)胞的修復(fù)是重要的一環(huán)[10]。干細(xì)胞因其潛在多向分化屬性，從尾靜脈注入體內(nèi)后可遷徙并定居于腸黏膜表面，分化并增殖為新的結(jié)腸黏膜細(xì)胞[11]。這個(gè)現(xiàn)象在本實(shí)驗(yàn)中通過(guò)在結(jié)腸組織中觀察到熒光染色的干細(xì)胞，而得以證實(shí)。但具體如何通過(guò)趨化、黏附、定位在腸道黏膜機(jī)制尚不清楚。在本實(shí)驗(yàn)中，治療組的小鼠經(jīng)過(guò)2次干細(xì)胞移植，活動(dòng)狀態(tài)、飲食狀況、便血情況均得到改善，DAI評(píng)分較模型組下降，顯示出干細(xì)胞在治療UC上良好的效果。

UC發(fā)病機(jī)制中免疫因素起了重要的作用，免疫紊亂是突出表現(xiàn)，多種免疫細(xì)胞參與其中，誘導(dǎo)不正常的免疫反應(yīng)。據(jù)報(bào)道，UC腸道內(nèi)細(xì)菌具有和結(jié)腸黏膜組織類似的免疫原性，造成了自身免疫組織對(duì)結(jié)腸黏膜的攻擊，其中細(xì)胞炎性因子是重要的因素[12]。TNF-α與IL-8是腸道兩種重要的炎性因子，相互作用，共同誘發(fā)炎性反應(yīng)。TNF-α由巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞等釋放，主要發(fā)揮局部作用，低濃度就可以誘導(dǎo)腸道黏膜出現(xiàn)炎癥反應(yīng)[13]。TNF-α作用機(jī)制為通過(guò)誘導(dǎo)IL-8等細(xì)胞因子，趨化自然殺傷細(xì)胞、細(xì)胞毒性T細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞，引起炎癥反應(yīng)[14]。因此降低TNF-α和IL-8在體內(nèi)的水平，可以降低腸道炎性反應(yīng)，減輕臨床癥狀。在本實(shí)驗(yàn)中，模型對(duì)照組與治療組在造模結(jié)束后，小鼠血清中TNF-α與IL-8明顯高于正常對(duì)照組，說(shuō)明這兩種細(xì)胞因子與UC發(fā)病密切相關(guān)。治療組經(jīng)過(guò)臍帶血干細(xì)胞移植，兩種細(xì)胞因子水平較模型對(duì)照組明顯下降，說(shuō)明臍帶血干細(xì)胞移植可以降低小鼠結(jié)腸炎癥反應(yīng)。這一點(diǎn)通過(guò)同時(shí)監(jiān)測(cè)小鼠體內(nèi)經(jīng)典CRP水平也得到了證實(shí)。但是干細(xì)胞移植降低TNF-α和IL-8水平的具體機(jī)制尚需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)去探索。

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Curative effect of human umbilical cord mesenchymal stem cells on ulcerative colitis mice

Zhai Junshan, Li Fang, Sun Yamei, Song Jiugang, Wu Kai, Wang Yanmei, Zhang Lin, Yao Yi, Li Nan.Department of Gastroenterology, the 309th Hospital of Chinese People's Liberation Army, Beijing 100091, China

Corresponding author: Li Nan, Email: fmmuzjs@163.com

Objective To investigate human umbilical cord derived mesenchymal stem cells（hUC-MSCs）transplantation for the treatment of ulcerative colitis（UC）in mice, and evaluated the effect of hUC-MSCs on tumor necrosis factor-alpha（TNF-α）and interleukin-8（IL-8）production.Methods Forty eight male adult mice were randomly divided into three groups, namely normal control group, model control group and hUC-MSC group, with 16 mice in each group.UC was induced by drinking 5﹪ dextran sulfate sodium（DSS）.The hUC-MSC group was treated by i.v.hUC-MSCs cells through tail vein.The disease activity index（DAI）was evaluated and TNF-α and IL-8 were detected by ELISA.t-test was used to determine statistical significance between the two groups, and ANOVA was used among the three groups.Results The DAI began to rise at the second day for the model control group and the hUC-MSCs group, which were（8.72±0.71）and（4.01± 0.35）respectively at the end of the experiment, both higher than the normal control group（0.21 ±0.20, F = 1 300.66, P = 0.000）.The DAI were not different between the model control group and the hUC-MSCs group at the 4 days after induction of UC（7.95±0.71 vs 8.01±0.73, t = - 0.236, P = 0.08153）.The DAI of the hUC-MSCs group began to decrease at the 5th treatment day and was lower than that of the model control group（7.23±0.82 vs 8.01±0.81, t = -2.707, P = 0.0111）.TNF-α levels of the model control group（363.32±15.84）pg/ml and the hUC-MSCs group（375.52 ±16.21）pg/ml were similar（P ＞ 0.05）, but higher than that of the normal group（112.14±11.23）pg/ml at the 7th day（F = 624.12, P = 0.000）; IL-8 level of the model control group（65.32±10.12）pg/ml and the hUC-MSCs group（57.21±8.71）pg/ml were similar（P ＞ 0.05）, but higher than that of the normal group（25.02±7.81）pg/ml at the 7th day（F = 34.29, P = 0.000）.Seven days after the second injection of stem cells（the end of experiment）, TNF-α level of the model control group（453.23±15.63）pg/ml and the hUC-MSCs group（276.84±17.91）pg/ml were higher than that of the normal group[（134.32±12.31）pg/ml, F = 642.41, P = 0.000]; IL-8 level of the model control group（75.23±6.72）pg/ml and the hUC-MSCs group（39.12±4.42）pg/ml were higher than that of the normal group[（27.12±5.91）pg/ml, F = 113.90, P = 0.000], but TNF-α and IL-8 levels of the hUC-MSCs group were lower than that of the model group（P ＜ 0.05）.Conclusion hUC-MSCs may alleviate UC in DSS-treated mice via decreasing production of TNF-α and IL-8.

Colitis, ulcerative; Umbilical cord; Mesenchymal stem cells; Tumor necrosis factor-alpha; Interleukin-8

2016-10-05）

（本文編輯：蔡曉珍）

10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2017.02.005

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100091 北京，解放軍第309醫(yī)院消化科

李楠，Email：fmmuzjs@163.com

翟俊山，李方，孫亞梅，等.人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎的療效[J/CD].中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志（電子版），2017，7（2）：87-92.