子宮灌注中藥消囊散治療奶牛卵泡囊腫的效果及相關(guān)影像學(xué)研究

程波，李云章

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，呼和浩特 010018）

子宮灌注中藥消囊散治療奶牛卵泡囊腫的效果及相關(guān)影像學(xué)研究

程波，李云章

（內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，呼和浩特 010018）

本試驗(yàn)研究子宮灌注中藥消囊散對(duì)奶牛卵泡囊腫的治療效果及對(duì)子宮形態(tài)變化的影響。結(jié)果顯示，35頭囊腫奶牛子宮灌注消囊散后，有效頭數(shù)為30頭，無效頭數(shù)為5頭，有效率為85.7%，無效率為14.2%。囊腫卵泡直徑從用藥開始就持續(xù)降低，用藥結(jié)束后第6天的卵泡直徑與用藥前相比，差異顯著（P＜0.05）。子宮角在停藥后第10～16天與灌藥前比較，差異顯著（P＜0.05），第18、20天與灌藥前比較，差異極顯著（P＜0.01）。結(jié)果表明，通過子宮灌注中藥消囊散，可使卵巢子宮形態(tài)恢復(fù)正常，對(duì)治療奶牛卵泡囊腫有明顯療效。

奶牛；卵泡囊腫；消囊散；影像學(xué)

卵泡囊腫發(fā)現(xiàn)于1831年，至今科研工作者已經(jīng)從內(nèi)分泌、組織形態(tài)、細(xì)胞與基因水平等方面對(duì)其進(jìn)行了大量研究。卵泡囊腫是指卵巢里的卵泡直徑大于25mm，并且持續(xù)時(shí)間超過10d，結(jié)構(gòu)上與卵泡相似，同時(shí)卵巢上無正常黃體結(jié)構(gòu)的一種病理狀態(tài)[1]，臨床上，多發(fā)生于4～6胎產(chǎn)奶高峰期的奶牛。目前，卵泡囊腫已成為制約奶牛業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要影響因素。奶牛卵泡囊腫發(fā)病率占卵巢囊腫發(fā)病的75%左右，同時(shí)，導(dǎo)致胎間距延長13～33d，平均配次增加0.8次[2～4]。據(jù)祁生旺等對(duì)內(nèi)蒙古地區(qū)2 980頭泌乳牛進(jìn)行的不孕癥調(diào)查表明，卵泡囊腫發(fā)病率為17.2%[5]。據(jù)肖銀霞等[6]報(bào)道，卵巢囊腫的治療方法有激素及手術(shù)療法、中藥及中西醫(yī)結(jié)合療法等。臨床上該病多用激素治療。激素治療具有周期短、用量小、見效快等優(yōu)勢，但由于計(jì)量操作等臨床實(shí)際問題，易導(dǎo)致激素殘留，危害人類健康。同時(shí)激素治療也會(huì)導(dǎo)致奶牛內(nèi)分泌紊亂。而中藥治療有殘留小、副作用小等特點(diǎn)，現(xiàn)代研究也證明，中藥對(duì)卵巢性不孕有較好的治療效果。中獸醫(yī)學(xué)認(rèn)為卵巢疾病性不孕多為氣滯血瘀或腎氣虛、腎陽虛癥。而卵巢囊腫多為沖任不調(diào)之氣血瘀滯所致[7]，所以常選用具有活血化瘀、補(bǔ)腎壯陽、促進(jìn)母牛發(fā)情和調(diào)節(jié)卵巢功能作用的中藥進(jìn)行治療。麻延峰等[8]用仙靈脾、陽起石、當(dāng)歸、赤芍、白芍、川芎、三菱、莪術(shù)、香附、青皮等10味中藥組成的“復(fù)方藿陽促孕湯”為基礎(chǔ)方進(jìn)行加減治療卵巢囊腫，患牛發(fā)情排卵有效率為75.0%，配種受胎率為42.9%。梁光華、鄧敏等[9]用口服理囊散治療奶牛卵泡囊腫，結(jié)果顯示，對(duì)患牛的E2、FSH、LH、P4激素分泌具有顯著調(diào)節(jié)作用和誘導(dǎo)發(fā)情的作用。高樹等[10]用女貞子、熟地黃、附子等17味中藥復(fù)方治療卵巢囊腫，并且B超影像學(xué)檢測結(jié)果顯示，對(duì)卵泡囊腫奶牛的卵巢和子宮形態(tài)變化具有一定作用，治療效果明顯，其中有效率為87.5%。以上均是通過口服中藥進(jìn)行治療。由于口服中藥需通過腸胃，吸收有限，并且有人員操作不方便、計(jì)量大的問題。因此，筆者選取具有活血化瘀、補(bǔ)腎壯陽的15味中藥，運(yùn)用子宮灌注的方法進(jìn)行治療。此方法具有的優(yōu)勢是直達(dá)病灶，用量小，方便操作，有效成分高，并且運(yùn)用B超影像學(xué)進(jìn)行確診和動(dòng)態(tài)監(jiān)控，可為今后中藥子宮灌注治療卵泡囊腫疾病提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器

Tringa Linear VET型獸用便攜式B超掃描儀，配備6.0/8.0MHz線陣雙頻探頭，Ni-MHz12V充電電池，產(chǎn)地荷蘭，由北京東方聯(lián)鳴科技發(fā)展有限公司經(jīng)銷。鼎歷YJ20/3+1型煎藥機(jī)，購于溫州頂歷醫(yī)療器械有限公司。法蘭特TRQ型超聲波清洗機(jī)，購于杭州法蘭特超聲波科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)藥物及藥物制作

消囊散子宮灌注液：由黃芪、黨參、赤芍等10味復(fù)方中藥組成。中藥材料均購于呼和浩特市國藥控股有限公司國大藥房金宇文苑店。

藥材首先在35～38℃、75%乙醇中回流萃取2h得到醇提液，再將過濾得到的藥渣在108℃水煎1h得到水提液，然后把醇提液和水提液混合，濃縮到每毫升溶液含生藥5～8g，旋轉(zhuǎn)離心去上清液，高壓滅菌得到成品藥液。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)?zāi)膛碜詢?nèi)蒙古呼和浩特市和林縣內(nèi)蒙古內(nèi)大圣牧高科牧業(yè)有限公司的第六牧場、第七牧場。品種為荷斯坦牛，共35頭。飼養(yǎng)方式為散欄飼養(yǎng)。試驗(yàn)牛場無結(jié)核、布氏桿菌病等傳染病，采用全混合日糧飼養(yǎng)。

1.4 子宮灌注方法

每日上午8～9點(diǎn)，運(yùn)用輸精搶把子宮灌注液注入子宮角給藥。每天灌注一次，連用5d，每次30mL。

1.5 卵泡囊腫的診斷方法

1.5.1 外部表現(xiàn)觀察

病牛大多數(shù)表現(xiàn)為肥胖，膘情好，表皮毛有光澤。站立時(shí)，有明顯尾根抬高的表現(xiàn)，臥地時(shí)陰門略漲偶有排氣。常從陰道流出透明樣分泌物，但相比正常發(fā)情牛量少，黏稠性低，常常表現(xiàn)為無規(guī)律的持續(xù)性發(fā)情[11]。1.5.2 直腸檢查

患病牛卵巢一側(cè)有突出的類似“乒乓球”樣的卵泡，直徑大于25mm，并且持續(xù)超過10d不排卵。卵泡表現(xiàn)為，表面光滑壁薄易破，指壓有液體波動(dòng)感，觸之有微彈性，卵巢質(zhì)地變硬，子宮相對(duì)松馳肥厚且下垂[12,13]。

1.5.3 B超影像學(xué)探查

卵巢上呈現(xiàn)圓形或橢圓形的無回聲液性暗區(qū)，邊界整齊。暗區(qū)卵泡直徑明顯大于成熟卵泡，存在一個(gè)或數(shù)個(gè)直徑大于25mm的病理性卵泡，卵泡壁厚度不超過3mm[14～16]（圖1）。

圖1 卵泡囊腫的B超圖像A圖，T55140號(hào)牛，直徑為30.8mm的囊腫卵泡B超圖像；B圖：81444號(hào)牛，直徑為32.5mm的囊腫卵泡B超圖像；C圖：12183號(hào)牛，直徑為31.8mm的囊腫卵泡B超圖像；D圖：74532號(hào)牛，直徑為29.7mm的囊腫卵泡B超圖像。

1.6 B超影像學(xué)檢查

1.6.1 檢測方法

在灌注前3d、灌注第3次及灌注結(jié)束后每隔2d運(yùn)用B超對(duì)卵巢和子宮各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測量。當(dāng)卵泡、卵巢、子宮角、子宮頸的圖像清晰地顯示后，凍結(jié)畫面進(jìn)行圖像分析。

1.6.2 形態(tài)學(xué)檢測指標(biāo)

囊腫卵泡：以切面圖像顯示卵泡最大直徑時(shí)測量開始。子宮頸縱徑：B超探頭放到子宮頸中間位置圖像顯示縱向直徑時(shí)測量開始。子宮角縱徑：在子宮角的中心位置時(shí)探頭開始測量縱向直徑。卵巢長度：以卵巢的最長切面來測量卵巢長度直徑最大值。卵巢寬度：以卵巢的最長橫切面來測量卵巢寬度最大直徑[10]。

1.7 療效判定

子宮灌注停藥后，直腸檢查囊腫奶牛的卵巢，B超檢查卵泡是否恢復(fù)到正常直徑。若病牛出現(xiàn)發(fā)情并排卵，通過人工輸精受孕，則判定為有效。若病牛出現(xiàn)發(fā)情持續(xù)期和排卵期都延長，則判定為無效。

1.8 統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 消囊散灌注治療卵泡囊腫奶牛的有效率

表1 子宮灌注消囊散治療卵泡囊腫的有效率

子宮灌注消囊散治療卵泡囊腫的有效率見表1。由表1可知，通過子宮灌注的治療方法，有效數(shù)為30頭，有效率為85.7%，無效數(shù)為5頭，無效率為14.3%。

2.2 消囊散治療卵泡囊腫奶牛其卵巢和子宮形態(tài)學(xué)變化情況

通過表2可知，囊腫卵泡直徑第2天、第4天與灌藥前相比，差異不顯著（P＞0.05）；第6～20天與灌注藥前相比，差異顯著（P＜0.05）；卵巢長度只有第14天與灌藥前相比差異顯著（P＜0.05）；卵巢寬度與灌藥前相比差異不顯著（P＞0.05）。

由圖2可知，囊腫卵泡直徑從用藥開始就持續(xù)降低，在用藥結(jié)束后第6天卵泡直徑恢復(fù)到正常水平，并且開始大幅降低，從第14天后降低緩慢。卵巢長度沒有明顯下降，趨勢趨于平衡。卵巢寬度在用藥結(jié)束后第4天開始平穩(wěn)降低，下降到第18天后有回升。

通過表3可知，子宮頸縱徑與灌藥前相比差異不顯著（P＞0.05）。子宮角縱徑第10、12及16天與灌藥前相比，差異顯著（P＜0.05），第14、19及20天與灌藥前相比差異極顯著（P＜0.01）。

由圖3可知，子宮頸縱徑在停藥后第6天開始降低，到第12天開始升高，之后變化幅度不大。子宮角縱徑在第2天開始降低，到第16天上升，第18天子宮角最小，之后回升。

圖2 子宮灌注消囊散前后卵巢測量指標(biāo)變化曲線

圖3 子宮灌注消囊散前后子宮測量指標(biāo)變化曲線

表2 子宮灌注消囊散前后卵巢測量結(jié)果 單位：mm

表3 子宮灌注消囊散前后子宮測量結(jié)果 單位：mm

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)“*”表示灌藥前后差異顯著（P＜0.05），同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)“**”表示灌藥前后差異極顯著（P＜0.01）。

2.3 子宮灌注消囊散后B超圖像

圖4 T55140號(hào)奶牛子宮灌注消囊散后B超圖像A1～A10：停藥后第2、4、6、8、10、12、14、16、18、20天的卵泡B超圖像。

圖5 81444號(hào)奶牛子宮灌注消囊散后B超圖像B1～B10：停藥后第2、4、6、8、10、12、14、16、18、20天的卵泡B超圖像。

圖4A1～A10為T55140號(hào)奶牛停藥后B超圖像，由圖像可知，囊腫卵泡于停藥后第2天直徑開始降低，A7圖顯示停藥后第14天形成有腔黃體，該牛于2016 年7月14日發(fā)情配種，28d后孕檢顯示受孕，日產(chǎn)奶量為30.66kg，產(chǎn)1胎，配種次數(shù)為3次。圖5B1～B10為81444號(hào)奶牛停藥后的B超圖像，該牛產(chǎn)胎兩次，體況評(píng)分3.5分，配種次數(shù)為3次。2016年6月22日開始子宮灌注消囊散，2016年6月30號(hào)卵泡直徑開始恢復(fù)正常，停藥后的第14天開始形成有腔黃體，于7月11日發(fā)情配種。

3 討論

3.1 卵泡囊腫奶牛的B超影像學(xué)診斷

囊腫卵泡是存在于卵巢上超過10d含有一個(gè)或多個(gè)并且不排卵的病理性卵泡，該病患牛常常表現(xiàn)為頻繁發(fā)情、發(fā)情時(shí)間長或者長期不發(fā)情。在奶牛臨床上，一般采用直腸檢查診斷是否患病?；悸雅菽夷[奶牛直腸檢查表現(xiàn)為子宮頸游離性大，子宮緊張，卵泡壁堅(jiān)硬且光滑，彈性弱。但由于直腸檢查受人為因素影響大，存在誤診率高的問題，很難區(qū)分病理性卵泡和正常卵泡，因此利用B超進(jìn)行檢查可提高確診率。對(duì)同側(cè)患有卵泡囊腫的卵泡進(jìn)行連續(xù)多次的B超探查，囊腫卵泡呈圓形或橢圓形的無回聲液性暗區(qū)，囊壁整齊且光滑，反射強(qiáng)。當(dāng)卵泡直徑大于正常卵泡，一般超過25mm，卵泡壁厚度不超過3mm，就可以判定為卵泡囊腫。

3.2 子宮灌注中藥消囊散對(duì)子宮及卵巢形態(tài)學(xué)的影響

子宮灌注中藥后，運(yùn)用B超對(duì)卵巢和子宮進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)控，發(fā)現(xiàn)用藥后第3天卵泡直徑就開始下降，B超圖像為圓形規(guī)則的無回聲液性暗區(qū)，且暗區(qū)逐漸縮小。在用藥后第6天，囊腫卵泡直徑就恢復(fù)到正常水平。試驗(yàn)中的T55140號(hào)奶牛在停藥后第14天形成有腔黃體，該牛于2016年7月14日發(fā)情配種，配后第7、10天用B超進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測，黃體直徑為33.9mm和34.6mm，28d后孕檢顯示懷孕。此過程結(jié)果與趙興緒報(bào)道的相符。表明消囊散可以有效治療卵泡囊腫疾病。消囊散對(duì)于子宮頸作用效果不是很明顯，用藥前后無明顯變化。作用于子宮角效果顯著，用藥后一直到用藥停止后20d，子宮角縱徑一直在降低，停藥后第18天達(dá)到最低點(diǎn)，為16.51±1.96mm。說明消囊散作用于卵巢具有促進(jìn)卵泡發(fā)育和排卵，促進(jìn)血液循環(huán)，改善子宮環(huán)境的作用。

3.3 中藥消囊散的中獸醫(yī)辯證理論

中獸醫(yī)認(rèn)為卵巢疾病性不孕，大多數(shù)屬于氣滯血瘀或腎氣虛，腎陽虛癥，卵巢囊腫則多為氣血瘀滯所致。同時(shí)，卵泡囊腫多發(fā)生于產(chǎn)后，奶牛產(chǎn)犢時(shí)消耗元?dú)?，腎氣虛衰，導(dǎo)致氣血瘀滯，中藥治療時(shí)常選用具有活血化瘀、補(bǔ)腎壯陽的中藥。消囊散中的川芎、桃仁、赤芍、三棱、莪術(shù)均為活血祛瘀藥，具有活血化瘀、活血行氣、清熱涼血及散淤止痛等功效。茯苓、薏苡仁具有滲濕利水、排膿等功能。青皮、香附具有舒膽肝破滯氣、散結(jié)消痰、消積化滯等功效。黨參、黃芪、當(dāng)歸均為補(bǔ)氣升陽、意衛(wèi)固表、補(bǔ)中益氣藥[7,17]。故中藥消囊散具有活血化瘀、調(diào)理氣血之療效，對(duì)卵泡囊腫有明顯的治療效果。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)運(yùn)用直腸檢查和B超影像學(xué)檢查，診斷出卵泡囊腫奶牛，通過子宮灌注中藥消囊散來治療卵泡囊腫奶牛，并對(duì)用藥前后卵巢及子宮實(shí)施動(dòng)態(tài)監(jiān)測。結(jié)果表明，子宮灌注中藥消囊散后囊腫卵泡直徑降低，恢復(fù)到正常水平，有發(fā)情表現(xiàn)并且受孕。說明通過子宮灌注中藥這種方式來治療奶牛卵泡囊腫有效。

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Imaging Studies of Traditional Chinese Medicine Follicular Cusy
conditioning Powder Perfusion of Uterus in Treating Cows Follicular Cyst

CHENG Bo, LI Yun-zhang ( College of Veterinary Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018)

The purposes of this paper are to investigate the effects of traditional Chinese medicine follicular cusyconditioning powder perfusion of uterus on treating follicular cyst of cow ovaries and morphological changes in uterus, and to preliminarily investigate the mechanism of drug action of traditional Chinese medicine follicular cusyconditioning powder in treating follicular cyst of cows. Scientific diagnosis was made through observation, rectal examination and imaging. Follicular cusy-conditioning powder perfusion was performed on diagnosed cow uterus. B-mode was utilized to measure follicles, ovary and uterus every two days, and were compared to pre-perfusion. As the result showed totally, 35 cows with follicular cyst were undergone follicular cusy-conditioning powder perfusion of the uterus, and 30 of them were valid, with a valid rate of 85.7%. The invalid number was 5, and invalid rate 14.3%. Diameters of follicular cyst kept decreasing since the beginning of administration, and the differences of follicular diameters between at 6d and pre-administration were significant after treatment (P＜0.05). Differences of ovary and cervix before and after treatment were not significant (P＞0.05), but the actual diameters were all lower than pre-perfusion. Differences of uterine horn were significant from 10d to 16d after withdrawal(P＜0.05), and the differences were extremely significant by comparing 18d and 20d to pre-perfusion(P＜0.01). As the results illustrated, the administration route of traditional Chinese medicine follicular cusy-conditioning powder perfusion of the uterus has a certain effect on the ovary and uterus morphological changes, and has obvious efficacy in treating cows with follicular cyst.

Dairy cattle; Follicular cyst; Follicular cyst-conditioning powder; Iconography

S858.23

A

1004-4264（2017）04-0029-05

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.04.008

2016-09-29

內(nèi)蒙古科技計(jì)劃項(xiàng)目；奶牛不孕癥的病因調(diào)查及中西醫(yī)綜合治療集成（20130224）。

程波（1992-），男，蒙古族，碩士研究生，研究方向?yàn)槟膛２辉邪Y研究。

李云章（1956-），男，蒙古族，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向?yàn)橘愸R肢蹄病與奶牛不孕癥疾病。